1、淋巴細(xì)胞亞群免疫表型與臨床淋巴細(xì)胞亞群免疫表型與臨床 主要內(nèi)容 概念 各類淋巴細(xì)胞的基礎(chǔ)知識 淋巴細(xì)胞亞群檢測的臨床意義 一、概念 淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 屬白細(xì)胞的一種，由淋巴器官產(chǎn)生，是機(jī)體免 疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分。 淋巴細(xì)胞的免疫表型淋巴細(xì)胞的免疫表型 淋巴細(xì)胞的膜表面分子膜表面分子（分化群抗分化群抗 原原 CD）可用于鑒定和區(qū)分其亞群和亞類，是研究淋巴細(xì)胞 的重要工具。 淋巴細(xì)胞亞群淋巴細(xì)胞亞群 按其發(fā)生遷移、表面分子和功能的不同， 可分為T細(xì)胞、B細(xì)胞和自然殺傷(NK)細(xì)胞。淋巴細(xì)胞的免淋巴細(xì)胞的免 疫表型疫表型 淋巴細(xì)胞的膜表面分子膜表面分子（分化群抗原分化群抗原 CD）可用 于鑒定

2、和區(qū)分其亞群和亞類，是研究淋巴細(xì)胞的重要工具。 淋巴亞群在外周血中的比例（%淋巴細(xì)胞） T淋巴細(xì)胞 50-84% NK細(xì)胞 7-40% B淋巴細(xì)胞 5-18% 各類淋巴細(xì)胞的基礎(chǔ)知識 T淋巴細(xì)胞 概念概念 來源于骨髓的淋巴樣干細(xì)胞，在胸腺中成熟的淋巴 細(xì)胞，故稱胸腺依賴性淋巴細(xì)胞（thymus- dependentlymphocyte），簡稱T細(xì)胞。 功能功能 負(fù)責(zé)細(xì)胞免疫功能，參與抗腫瘤、抗細(xì)胞內(nèi)感染微生 物、移植排斥、遲發(fā)型超敏反應(yīng)；對部分體液免疫發(fā)揮輔助 功能。 免疫表型免疫表型：CD3，與TCR形成復(fù)合體，是T細(xì)胞識別抗原和 轉(zhuǎn)導(dǎo)信號的主要單位。 CD3+/CD4+：輔助性T細(xì)胞 CD

3、3+/CD8+：殺傷性T細(xì)胞 T淋巴細(xì)胞的分化發(fā)育 T細(xì)胞在胸腺中的發(fā)育細(xì)胞在胸腺中的發(fā)育 T細(xì)胞在外周淋巴器官中的分化發(fā)育細(xì)胞在外周淋巴器官中的分化發(fā)育 T細(xì)胞在胸腺中的發(fā)育細(xì)胞在胸腺中的發(fā)育 三個階段三個階段 u雙陰性階段雙陰性階段 (DN) u雙陽性階段雙陽性階段 (DP) u單陽性階段單陽性階段 (SP) 三個重要事件三個重要事件 uTCR基因重排基因重排 u陽性選擇陽性選擇 u陰性選擇陰性選擇 三個重要結(jié)果三個重要結(jié)果 u獲得功能性獲得功能性TCR u獲得獲得MHC限制性限制性 u獲得自身耐受獲得自身耐受 T T細(xì)胞在外周淋巴器官中的分化發(fā)育細(xì)胞在外周淋巴器官中的分化發(fā)育 初始初始T

4、細(xì)胞細(xì)胞主要定居于外周淋巴器官的胸腺依 賴區(qū) T細(xì)胞在外周淋巴器官與抗原接觸后，最終分 化為具有不同效應(yīng)功能的T細(xì)胞亞群，效應(yīng)效應(yīng)T 細(xì)胞細(xì)胞和記憶記憶T細(xì)胞細(xì)胞。 T淋巴細(xì)胞亞群淋巴細(xì)胞亞群 n 按按T細(xì)胞細(xì)胞所處的活化階段所處的活化階段 初始初始T細(xì)胞（細(xì)胞（naive T cell） 效應(yīng)效應(yīng)T細(xì)胞（細(xì)胞（effector T cell） 記憶性記憶性T細(xì)胞（細(xì)胞（memory T cell） n 按按TCR的表型分類的表型分類 TCR + T細(xì)胞細(xì)胞 TCR + T細(xì)胞細(xì)胞 n 按按T細(xì)胞的細(xì)胞的CD4和和CD8分子表型分子表型 CD4+ T細(xì)胞細(xì)胞 輔助輔助T細(xì)胞細(xì)胞 CD8+ T細(xì)

5、胞細(xì)胞 殺傷殺傷T細(xì)胞細(xì)胞 按按T細(xì)胞的功能分類細(xì)胞的功能分類 Th（help T cell） Tc/C TL（cytotoxic T cell） Tr（regulatory T cell） 初始初始T T細(xì)胞、效應(yīng)細(xì)胞、效應(yīng)T T細(xì)胞和記憶細(xì)胞和記憶T T細(xì)胞細(xì)胞 初始初始T細(xì)胞細(xì)胞 表型：CD45RA+、 CD62L+、CD25-（IL-2R） 特點(diǎn)：未接觸抗原的成熟T細(xì)胞，有分化潛能 效應(yīng)效應(yīng)T細(xì)胞細(xì)胞 表型： CD4+、CD8+ 遷往炎癥部位，執(zhí)行細(xì)胞免疫效應(yīng) 記憶性記憶性T細(xì)胞細(xì)胞 表型：CD45RO+、CD25+（IL-2R） 特點(diǎn)：存活期長，再次接受抗原刺激后可迅速活 化 Th、

6、CTL、Ts和和Treg細(xì)胞細(xì)胞 n 輔助性輔助性T細(xì)胞（細(xì)胞（Th） CD4CD8- TH1，TH2 功能：具有輔助其他免疫細(xì)胞分化和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答（促進(jìn)和 抑制）的作用 n 細(xì)胞毒性細(xì)胞毒性T細(xì)胞（細(xì)胞（CTL） 主要表面標(biāo)記：CD4-CD8+CD28+ 功能：特異性直接殺傷靶細(xì)胞 殺傷機(jī)制： 釋放穿孔素，顆粒酶殺傷靶細(xì)胞 通過Fasl介導(dǎo)靶細(xì)胞的凋亡 n 抑制性抑制性T細(xì)胞（細(xì)胞（Ts） 主要表面標(biāo)志：CD4-CD8+CD28- 功能：對免疫應(yīng)答有重要的負(fù)調(diào)節(jié)功能，抑制性T細(xì)胞功能 的異常，常與T自身免疫性疾病、第I型超敏反應(yīng)等疾病發(fā)生 有關(guān)。 n 調(diào)節(jié)性調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（細(xì)胞（Treg） 主

7、要表面標(biāo)記：CD4+CD25+ 功能：抑制免疫應(yīng)答 小結(jié) ThCTLTsTreg 表面標(biāo)志 CD3+CD4+C D8- CD3+CD4- CD8+CD28+ CD3+CD4- CD8+CD28- CD3+CD4+C D25+ 主要功能 NK淋巴細(xì)胞 NK細(xì)胞：一種大顆粒淋巴細(xì)胞。英文全稱為“natural killer cell”，也稱作“自然殺傷細(xì)胞”。 它是一種能直接殺傷靶細(xì)胞效應(yīng)的特殊的淋巴細(xì)胞系，具 有抗腫瘤抗感染免疫調(diào)節(jié)的功能，且表現(xiàn)為速發(fā)效應(yīng)。在醫(yī) 學(xué)上被稱作是“人體抵抗癌細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞的第一道防人體抵抗癌細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞的第一道防 線線”。 NK細(xì)胞的表型 nNK細(xì)胞表面標(biāo)

8、志物：CD3-/CD16+CD56+ n與T細(xì)胞、B細(xì)胞相比，NK細(xì)胞表面標(biāo)志的特 異性是相對的。人NK細(xì)胞mIg-，部分NK細(xì) 胞CD2、CD3和CD8陽性，表達(dá)IL-2受體鏈 （P75，CD122），CD11b/CD18陽性。 細(xì)胞因子細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞（殺傷細(xì)胞（CIK） CIK（cytokine-induced Killer）細(xì)胞是由r-IFN、CD3-Ab、 IL-1、IL-2等細(xì)胞因子在體外誘導(dǎo)并大量擴(kuò)增的具有殺傷腫 瘤活性的細(xì)胞，是一種新型、高效、廣譜的免疫細(xì)胞，是目 前最新的腫瘤免疫治療手段。 CIK細(xì)胞：CD3+T細(xì)胞為主的異質(zhì)性細(xì)胞群體，同時表達(dá)CD3、 CD56，兼CT

9、L強(qiáng)大的抗瘤活性，和NK細(xì)胞非MHC限制性殺瘤特 點(diǎn)，目前所知?dú)钚宰顝?qiáng)的免疫效應(yīng)細(xì)胞。 CIK的表型及起源的表型及起源： 表型：表型： CD3+CD56+和CD3CD56兩個亞群，主要效應(yīng)細(xì)胞 CD3+CD56+。 分布：分布：優(yōu)先分布肝臟，CD3+CD56+占肝臟CD3細(xì)胞的1/3，其次外 周血，占-5%。 來源：來源：主要是CD3+CD56的T細(xì)胞，多數(shù)是CD4-CD8 + 及CD4-CD8-。 B淋巴細(xì)胞 nB淋巴細(xì)胞是免疫系統(tǒng)中的抗體產(chǎn)生細(xì)胞。 u產(chǎn)生的抗體可與抗原起特異性的結(jié)合，如中和細(xì)菌的外毒素 使其失去毒性作用； u抗體與抗原結(jié)合后形成的復(fù)合物易被吞噬細(xì)胞清除； u抗體與抗原

10、結(jié)合后再結(jié)合補(bǔ)體清除病原體。 nB細(xì)胞特異性標(biāo)志物：CD19、CD20等 uB淋巴細(xì)胞檢測時，多用CD3-CD19+來作為檢測標(biāo)志。 B細(xì)胞的亞群 周圍淋巴器官中的B細(xì)胞具有異質(zhì)性 可依據(jù)CD5是否表達(dá)分為B1和B2兩亞群 性質(zhì)B1B2 初次產(chǎn)生時間胎兒期出生后 更新方式自我更新骨髓產(chǎn)生 特異性多反應(yīng)性單特異性 是否有CD5表達(dá)有無 淋淋 巴巴 細(xì)細(xì) 胞胞 亞亞 群群 與與 臨臨 床床 淋巴細(xì)胞亞群的檢測內(nèi)容 目前常做以下項(xiàng)目的檢測目前常做以下項(xiàng)目的檢測 n淋巴細(xì)胞亞群分析 T細(xì)胞亞群分析 uT淋巴細(xì)胞（CD3+） u輔助T細(xì)胞(CD3+CD4+) u殺傷/抑制T細(xì)胞（CD3+CD8+) uC

11、D4+/CD8+的比值 B細(xì)胞(CD3+CD19+) NK細(xì)胞(CD3-CD16+56+) n活化淋巴細(xì)胞的檢測 TBNK檢測的適用人群 腫瘤病人化療過程中，抗癌藥物對同樣處于增殖狀 態(tài)的、對腫瘤敏感的活化淋巴細(xì)胞也有殺傷作用， 甚至免疫功能嚴(yán)重?fù)p毀。 活動期的自身免疫病患者，必然表現(xiàn)為淋巴細(xì)胞亞 群絕對值和活化淋巴細(xì)胞百分比的明顯異常。 懷疑有免疫缺陷的病人 器官移植患者術(shù)后監(jiān)測中更具有不可或缺的作 用 淋巴細(xì)胞亞群的正常參考值（%淋巴細(xì)胞群） 項(xiàng) 目百分率（%） 總T淋巴細(xì)胞（CD3+CD19-) 50-84 輔助/T淋巴細(xì)胞（CD3+CD4+) 27-51 抑制/細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞（CD3

12、+CD8+) 15-44 輔助/抑制T淋巴細(xì)胞比值0.71-2.78 NK細(xì)胞（CD3-/CD16+56+) 7-40 總B淋巴細(xì)胞（CD3-CD19+) 5-18 T淋巴細(xì)胞+NK淋巴細(xì)胞+B淋巴細(xì)胞 95-105 NK細(xì)胞 CIK細(xì)胞 B細(xì)胞 淋巴細(xì)胞亞群的臨床意義 n 淋巴細(xì)胞亞群分析是檢測細(xì)胞免疫和體液免疫功能 的重要指標(biāo)，它總體反映機(jī)體當(dāng)前的免疫功能、狀 態(tài)和平衡水平，并可以輔助診斷某些疾病（如自身 免疫病、免疫缺陷病、惡性腫瘤、血液病、變態(tài)反 應(yīng)性疾病等），分析發(fā)病機(jī)制，觀察療效及檢測預(yù) 后有重要意義 。 n 當(dāng)某種細(xì)胞亞群所占百分比過高或過低，都提示存 在免疫功能紊亂，但一般情況

13、下對疾病的診斷和鑒 別無特異性。 淋巴細(xì)胞亞群測定的結(jié)果解釋淋巴細(xì)胞亞群測定的結(jié)果解釋 T細(xì)胞異常 CD4細(xì)胞異常 CD8細(xì)胞異常 CD4/CD8比值異常 B細(xì)胞異常 NK細(xì)胞異常 總T、總B、NK細(xì)胞可以用來判斷某些免疫缺 陷和自身免疫性疾病，也可以用于監(jiān)測移植 后得免疫重建。 T細(xì)胞減少細(xì)胞減少 見于先天性免疫缺陷病（例如DiGeorge綜合 癥，胸腺發(fā)不發(fā)育） 以及腎臟和心臟移植后接受預(yù)防排斥的免疫 調(diào)節(jié)藥物OKT-3的患者 也常見于惡性腫瘤、自身免疫性疾病（SLE 和RA等）、先天性免疫缺陷病、艾滋病、接 受放療、化療或者使用腎上腺皮質(zhì)激素等免 疫抑制劑資料的患者。 T細(xì)胞增多細(xì)胞增多

14、 見于慢性活動性肝炎、重癥肌無力等自身免 疫病活動期 CD4淋巴細(xì)胞減少：見于惡性腫瘤、遺傳性免疫缺 陷病、艾滋病、應(yīng)用免疫抑制劑患者。 CD4淋巴細(xì)胞增加：可能有過強(qiáng)的細(xì)胞免疫反應(yīng)； 或某些免疫增強(qiáng)藥物的有效結(jié)果。 CD8淋巴細(xì)胞增多：見于自身免疫性疾病，如SLE、 艾滋病初期、慢性活動性肝炎、腫瘤及病毒感染等。 CD8淋巴細(xì)胞減少：見于機(jī)體對各種病毒感染的免 疫反應(yīng)；腫瘤患者具有抗腫瘤免疫反應(yīng)時 。 CD8細(xì)胞與CD4細(xì)胞同時減少：見于各種嚴(yán)重的免 疫缺陷以及腫瘤患者晚期或免疫系統(tǒng)嚴(yán)重?fù)p傷后。 CD4/CD8比值異常比值異常 CD4/CD82.5表明細(xì)胞免疫功能處于“過度活躍”狀態(tài)， 容易

15、出現(xiàn)自體免疫反應(yīng)，見于類風(fēng)濕類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)炎、I型糖尿病 等。 CD4CD810稱為“免疫抑制”狀態(tài)，常見于（1）免 疫缺陷病，如艾滋病時的比值常顯著小于0.5；（2）惡性腫 瘤，當(dāng)發(fā)生癌轉(zhuǎn)移時,CD3 、CD4 細(xì)胞數(shù)明顯減少的同時 CD8 細(xì)胞數(shù)明顯增多,CD4/ CD8 比值明顯降低,提示惡性腫 瘤患者晚期細(xì)胞免疫功能更低,預(yù)后更差 ；（3）再生障礙性 貧血、白血病；（4）某些病毒感染；CD4/CD8降到1.0以下 為“倒置”,是較為明顯的異常；（5）用于器官移植后監(jiān)測 機(jī)體的免疫狀態(tài)、用藥劑量的調(diào)整、抑制排斥反應(yīng)的發(fā)生。 若移植后CD4/CD8較移植前明顯增加，則可能發(fā)生排斥反應(yīng)。 比值持續(xù)減低表明移植后感染，若比值0.2時應(yīng)停用免疫抑 制劑，以免繼發(fā)嚴(yán)重感染而導(dǎo)致移植失敗。 注意分清主要是注意分清主要是CD8細(xì)胞增多還是細(xì)胞增多還是CD4減少減少 B細(xì)胞的異常 B細(xì)胞明顯增加：細(xì)胞明顯增加：見于淋巴組織增生失調(diào)（例 如慢性淋巴細(xì)胞白血病），也見于病毒感染 早期。 B細(xì)胞缺如：細(xì)胞缺如：見于原發(fā)性B細(xì)胞缺陷病（如性 聯(lián)無丙種球蛋白血癥）和重癥聯(lián)合免疫缺陷 （T細(xì)胞同時缺如）；體液免疫功能不良者則 減少；在生命垂危時可呈現(xiàn)極度減少 NK細(xì)胞異常細(xì)胞異常 NK細(xì)胞增多：見于病毒感染，腫瘤早期患者 （尚有抗腫瘤免疫反應(yīng)時） NK