1、冰淇淋理化檢驗方法一、 蔗糖的測定第22頁二、 脂肪的測定第24頁三、總固形物的測定 第25頁四、酸度的測定 第26頁五、冰淇淋蛋白質的測定 第26頁六、水的硬度的檢測 第29頁七、鍋爐水堿度的測定 第32頁八、消毒工作液中過氧乙酸有效濃度的測定 第33頁九、水中亞硝酸及硝酸鹽含量檢測 第34頁一、 蔗糖的測定(依據國標gb/t5009.8-2003)（一）原理：試樣經除去蛋白質后，其中蔗糖經鹽酸水解轉化為還原糖，再按還原糖測定。水解前后還原糖的差值為蔗糖含量。反應原理：一定量的堿性酒石酸銅甲、乙液等體積混合后，生成天藍色的氫氧化銅沉淀，這種沉淀很快與酒石酸鈉反應，生成深藍色的酒石酸鈉銅的絡合

2、物。再加熱條件下，以次甲基蘭作指示劑，用樣液直接滴定經標定的堿性酒石酸銅溶液，還原糖將二價銅還原為氧化亞銅。待二價銅全部被還原后，稍過量的還原糖將次甲基蘭還原，溶液由蘭色變為無色，即為終點。 +2h次甲基蘭(藍色) 還原型次甲基蘭（無色）+hci +2o（二）試劑：1. hcl（1+1）：量取50ml鹽酸注入少量水中，用水稀釋至100ml；2. 乙酸鋅溶液：稱取21.9g乙酸鋅，加入3ml冰乙酸，加蒸餾水溶解并稀釋至100ml；3. 106g/l亞鐵氰化鉀溶液：稱取10.6g亞鐵氰化鉀，加水溶解并稀釋至100ml；4. 堿性酒石酸銅溶液：（1）甲液：稱取15g硫酸銅（cuso45h2o）和0.

3、05g次甲基蘭，加水溶解并稀釋至1000ml；（2）乙液：稱取50g酒石酸鉀鈉和75gnaoh溶于水中，加入4g亞鐵氰化鉀，加水溶解并稀釋至1000ml；5. 葡萄糖標準溶液：（1）配制：精確稱取1.0000g經過962干燥2小時的純葡萄糖，加水溶解后，再加入5ml鹽酸，并以水稀釋至1000ml，注入滴定管備用。（2）標定酒石酸銅溶液：a：預測：精確吸取甲液，乙液各5ml置于150ml三角瓶中，加水10ml，加入玻璃珠2-3粒，置于電爐上，控制在2分鐘內加熱至沸騰，在沸騰狀態下（沸騰15秒后），以先快后慢的速度從滴定管中滴加葡萄糖標準溶液，待溶液顏色變淺時，以每兩秒一滴的速度滴定直至溶液藍色消

4、失即為終點，記錄消耗葡萄糖標準溶液的體積數；b：標定：精確吸取堿性酒石酸銅甲液，乙液各5ml，置于150ml錐形瓶中，加水10ml，加玻璃珠2-3粒，從滴定管中加入比預測體積少1ml的葡萄糖標液，將此錐形瓶置于電爐上，控制在2min內加熱至沸騰（沸騰2分鐘后），趁沸以每兩秒一滴的速度繼續加溶液直至藍色消失即為終點，記錄消耗葡萄糖標準溶液的體積，同法平行操作三次，取其平均值，按下式計算a值 m1 v1 a = - 1000式中：a10ml酒石酸銅溶液（甲、乙各5ml）相當于葡萄糖溶液的質量，gm葡萄糖的質量，gv1消耗葡萄糖標準溶液的體積的平均值，ml1000配制標準溶液的體積，ml（三）蔗糖的

5、測定： 1. 沉淀：稱取固體試樣2.505.00g，液體試樣25.00-50.00ml（冰淇淋稱2.50-5.00 g；花色奶稱取10 g15 g），置于250ml容量瓶中，加入50ml蒸餾水，稀釋混勻，慢慢加入5ml乙酸鋅及5ml亞鐵氰化鉀溶液，加蒸餾水至刻度，搖勻靜置30min，用干燥濾紙過濾，棄去初濾液后備用；2. 轉化：吸取50ml 濾液于100ml容量瓶中，加入5ml鹽酸，在6870恒溫水浴中水浴15min，立刻取出冷卻至35，加兩滴1g/l（乙醇）甲基紅指示劑，用naoh（200 g/l）溶液中和置中性（即溶液由紅色變為橙色）加水置刻度，混勻，即為轉化液；3. 滴定：將試樣濾液及轉

6、化液分別置于滴定管中滴定，記錄消耗試樣的體積，滴定方法與標定堿性酒石酸銅溶液方法相同；4. 分析結果的計算式：a總糖（以葡萄糖計）%= - 100 m 50 v2 250 100a還原糖（以葡萄糖計）%= - 100 m v1 250蔗糖%=（總糖 還原糖）0.95式中：a10ml酒石酸銅溶液（甲、乙各5ml）相當于葡萄糖溶液的質量gv1消耗試樣糖液的體積，mlv2消耗試樣轉化液的體積，ml0.95還原糖（以葡萄糖計）換算成蔗糖的系數m樣品的質量，g允許誤差：同一樣品兩次測定結果之差不得超過平均值的5%。（四）注意示項：1. 加入乙酸鋅-亞鐵氰化鉀目的是為沉淀蛋白質，濾出；2. 轉化時，溫度不

7、易太高，同時，時間不易太長，原因在于，糖液的轉化屬于水解反應，蔗糖分解為果糖和葡萄糖，果糖不穩定，若溫度過高，或時間過長，果糖會分解為co2和水，影響滴定結果；3. 滴定時必須在沸騰狀態下進行：（1）滴定時，所發生的反應屬氧化一還原反應，反應速度慢且需要能量；（2）o2具有氧化性，若反應速度慢，會使酒石酸銅溶液與o2發生氧化一還原反應。當沸騰時，蒸氣將瓶口氣封隔絕空氣的進入，防止氧化；二、 脂肪的測定：依據國標gb/t5009.6-2003（酸水解法）（一）原理：試樣經酸水解后用乙醚提取，除去溶劑即得總脂肪含量。酸水解法測得的為游離及結合脂肪的總量，（二）試劑：1.鹽酸2.乙醇（95%）3.乙

8、醚4.石油醚（30-60沸程）（一） 儀器：100 ml具塞刻度量筒（四）分析步驟：1.樣品處理：將均勻的樣品稱取10.00克，置于50 ml燒杯中，加入10 ml 濃鹽酸，放于70-80水浴中，每隔5-10分鐘攪拌1次，至試樣消化完全為止，約40-50分鐘。2.取出加入10 ml 95%乙醇，混合，冷卻后移入100ml 具塞量筒中，以25 ml乙醚分次洗燒杯，一并倒入量筒中，待乙醚全部倒入量筒后，加塞振搖1分鐘，小心開賽，放出氣體，再塞好，靜置12min，小心開塞，并用石油醚乙醚等量混合液沖洗塞及筒口附著的脂肪，靜置1020min，待上部液體清晰，吸出上清液于已恒重的錐型瓶內，再加5ml乙醚

9、于具塞量筒內，振搖，靜置后，仍將上層乙醚吸出，放入原錐形瓶內，將錐形瓶置水浴中蒸干，置1005烘箱中干燥2小時，取出放干燥器內冷卻0.5小時后稱量，重復以上操作至恒重 m1-m0x= - 100 m2x試樣脂肪含量，g/100 gm1錐形瓶和脂肪的質量，gm0-錐形瓶的質量，gm2試樣的質量，g三、總固形物的測定（依據標準 sb/t10009-1999）精確稱取經融化均勻的試樣23克（精確至0.0001g），于已烘干至恒重的稱量皿中，置于水浴上蒸干，移入100105電烘箱（或水浴烘箱）中烘三個半小時，取出加蓋置于干燥器中冷卻（約2530分鐘后），稱量，重復干燥，冷卻稱量至恒重，計算式為： w2

10、-w1總固形物%= - 100w1-ww稱量皿的質量，gw1試樣和稱量皿的質量，gw2烘干后試樣和稱量皿的質量，g四、酸度的測定(一) 試劑：1%酚酞指示劑：稱取1g酚酞溶入100ml95%的乙醇中；0.1mol/l naoh：依據標準溶液的配制方法進行配制；（二）方法：精確稱取融化均勻的樣品4-5g于250ml三角瓶中，加入120ml煮沸冷卻后的蒸餾水，加入2-3滴1%的酚酞指示劑，用0.1 mol/l naoh滴定至溶液呈粉色，并保持30秒鐘不褪色，即為終點計算： vn0.09酸度%= - 100（以乳酸計） w式中：w樣品重（g）；vnaoh溶液滴定的體積數；0.09乳酸的系數；五、冰淇

11、淋蛋白質的測定：(依據國標gb/t5009.5-2003)1.原理：蛋白質是含氮的有機化合物。食品與硫酸和硫酸銅、硫酸鉀一同加熱消化，使蛋白質分解，分解的氨與硫酸結合生成硫酸銨。然后堿化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收后以硫酸或鹽酸標準滴定溶液滴定，根據酸的消耗量乘以換算系數，即為蛋白質的含量。測定步驟：消化 蒸餾滴定。2.試劑與儀器：1）硫酸銅(催化劑)、硫酸鉀（提高硫酸沸點由3300c升至4000c）、濃硫酸.2）硼酸溶液（20g/l）：20g硼酸（分析純）溶于1000ml熱蒸餾水中，混勻備用。3）混合指示液：1份甲基紅乙醇溶液（1 g/l）與5份溴甲酚綠乙醇溶液（1 g/l）臨用時混合。也可用2

12、份甲基紅乙醇溶液（1 g/l）與1份亞甲基藍乙醇溶液（1 g/l）臨用時混合。4）氫氧化鈉溶液（400g/l）：400g 氫氧化鈉溶于1000ml蒸餾水中。5）硫酸標準溶液c(1/2h2so4)=0.0500mol/l或鹽酸標準溶液c(hci)=0.0500mol/l。3.操作步驟：（1）樣品的制備：固體樣品0.202.00g（如乳粉），半固體樣品2.00-5.00g，液體樣品1025ml（如牛奶）。把樣品放入消化瓶中，同時加入6 g硫酸鉀，0.2g硫酸銅，20ml濃硫酸。（2）消化：先微火加熱到100。c左右，以防瓶內泡沫沖出而影響結果，當瓶內發泡停止，稍加大火力。當內溶物的顏色逐漸轉化成透

13、明的淡綠色時，繼續消化0.51h（若消化瓶內壁沾有碳粒時，進行搖動或待冷卻后，用過氧化氫溶液沖下，繼續消化至透明的蘭綠色為止）。然后從消化爐上取下放冷，小心加入20ml水。（3）蒸餾和吸收：方法一：(依據gb/t5009.5-2003)1）將澄清的消化液放冷后，小心移入100ml容量瓶中，以水沖洗數次消化瓶，洗滌液一起并入上述容量瓶中，冷卻后用蒸餾水定容至刻度，搖勻。2）在冷凝器的下端放置一個盛有10 ml硼酸溶液1-2滴甲基紅-溴甲酚綠混合指示劑的300ml的錐型瓶（接收瓶）中，使冷凝器下端的玻璃管，在液面以下。吸取10ml消化液于定氮蒸餾瓶中，將氫氧化鈉溶液慢慢地加入蒸餾瓶中，（溶液呈強堿

14、性，加入量約10毫升），然后通入蒸汽進行蒸餾，蒸餾5min。提出冷凝器下端的玻璃管，用少量蒸餾水沖洗冷凝管下端，將洗液一并聚集于硼酸溶液中，讓玻璃管靠在錐形瓶的瓶壁，再蒸餾1min。用少量蒸餾水沖洗冷凝管下端，取下錐型瓶（接收瓶）。注：蒸餾時要注意蒸餾情況，避免瓶中的液體發泡沖出，進入接收瓶。火力太弱，蒸餾瓶內壓力減低，則接受瓶內液體會倒流，造成實驗失敗。方法二： 1）將澄清的消化液小心移入100ml容量瓶中，以水沖洗數次消化瓶，洗滌液一起并入上述容量瓶中，冷卻后用蒸餾水定容至刻度，搖勻。2）在冷凝器的下端放置一個盛有50 ml 硼酸溶液3滴甲基紅-溴甲酚綠混合指示劑的300ml的錐型瓶中，使

15、冷凝器下端的玻璃管，在液面以下。吸取10ml消化液于定氮蒸餾器中，將氫氧化鈉溶液慢慢地加入蒸餾瓶中，（溶液呈強堿性,加入量約10毫升），然后通入蒸汽進行蒸餾，蒸至液面達到200ml時，提出冷凝器下端的玻璃管，用少量蒸餾水沖洗冷凝管下端，將洗液一并聚集于硼酸溶液中，讓玻璃管靠在錐形瓶的瓶壁，出液口在250ml刻度線以上，繼續蒸餾，蒸至液位達250ml。用少量蒸餾水沖洗冷凝管下端，取下錐型瓶（接收瓶）。備注：不管采用那種蒸餾方法，必須保證nh3全部被回收，必要時可以采用ph試紙驗證蒸餾物是否呈堿性。備注：使用foss kjeltec的定氮儀，使用方法二。（4）滴定：用硫酸或鹽酸標準溶液滴定接收液，

16、滴定至灰色或藍紫色為終點（使用kdn-08a定氮儀蒸餾：終點顏色由蘭綠色變為酒紅色）。記錄所用硫酸標準溶液的體積。同時進行空白試驗，并在結果中加以矯正。（5）計算： （v1v0）c0.0140f100 pro含量% = - m（v/100）式中：v1樣品消耗酸體積，mlv0空白消耗酸的體積，mlc酸標準溶液的濃度，mol/l；m稱取樣品的質量，g；v從容量瓶中吸取消化液的體積，ml0.0140氮原子的摩爾質量，kg/ molf氮換算成粗蛋白的系數（一般食品為6.25；乳制品6.38；面粉為5.70；玉米、高粱為6.24；花生為6.45；米為5.95；大豆及其制品為5.71；肉及肉制品為6.25

17、；大麥、小米、燕麥、裸麥為5.83；芝麻、向日葵為5.30；純谷類配方食品5.90，含乳嬰兒谷物配方食品6.25）4.注意事項：1）消化開始溫度不宜過高，以防泡沫沖出。2）消化時打開水閥，以利于廢氣導出。3）消化完畢不得用冷水冷卻，應自然冷卻。4）若需用h2o2水沖，必須在冷卻后。5）蒸餾時要打開水閥，作冷卻水用。6）吸收時必須伸入液面以下。5、備注： 加入硫酸鉀的作用：提高硫酸的沸點（338），增進反應速度。加入定量的硫酸鉀將硫酸沸點提高到400,但過多的硫酸鉀會造成沸點太高。生成的硫酸銨在513會分解，故此加入硫酸鉀量一定要準確。 加入硫酸銅的作用：催化劑，使氧化作用加速。六、水的硬度的檢

18、測:(依據國標gb 5750-1985)水的硬度原系指沉淀肥皂的程度。使肥皂沉淀的原因主要是由于水中的鈣、鎂離子，此外鐵、鋁、錳、鍶及鋅等金屬離子也有同樣的作用。多采用乙二胺四乙酸二鈉容量法測定鈣、鎂離子的總量，并經過換算，以每升水中碳酸鈣的毫克數表示。本法的干擾物質有以下兩類。1.懸浮性或膠體有機物可影響終點的觀察。此時可將水樣蒸干并于550灰化，干擾即可除去。2.金屬離子如cu2、ni2、co2、al3、fe3及高價錳等，由于封閉現象使指示劑褪色或終點延長。硫化鈉及氯化鉀可掩蔽重金屬的干擾，鹽酸羥胺可使高鐵離子及高價錳離子還原為低價離子而消除其干擾。若取50ml水樣，本法測定的最低檢測濃度

19、為10mg/l。（一）原理：乙二胺四乙酸二鈉（edta-2na）在ph值為10的條件下與水中的鈣、鎂離子生成無色可溶性絡合物，指示劑鉻黑t則與鈣、鎂離子生成紫紅色絡合物。用edta-2na滴定鈣、鎂離子至終點時，鈣、鎂離子全部與edta-2na絡合而使鉻黑t游離，溶液即由紫紅色變為藍色。（二）儀器：150ml三角瓶；10或25ml滴定管。（三）試劑：1001mol/l乙二胺四乙酸二鈉標準溶液：稱取372g乙二胺四乙酸二鈉（c10h14n2o8na22h2o，簡稱edta2na），溶于純水中，并稀釋至1000ml，按如下步驟標定其準確濃度。（1）鋅標準溶液：準確稱取0.60.8g的鋅粒，溶于11

20、鹽酸中，置于水浴上溫熱至完全溶解。移入容量瓶中，定容至1000ml。wm1= -m式中：m1鋅標準溶液的摩爾濃度，mol/l； w鋅的重量，g； m鋅的分子量是65.37，g。（2）吸取25.00ml鋅標準溶液于150ml三角瓶中，加入25ml純水，加氨水調至近中性，再加2ml緩沖溶液及5滴鉻黑t指示劑，用edta2na溶液滴定至溶液由紫紅變為藍色。按式（30）計算。 m1v1 m2= - v2式中：m2edta2na溶液的摩爾濃度，mol/l； m1鋅標準溶液的摩爾濃度，mol/l； v1鋅標準溶液體積，ml； v2edta2na溶液體積，ml。（3）校正edta2na溶液的摩爾濃度為0.0

21、100mol/l。注：0.0100mol/l edta2na溶液也可依據國標gb/t5009.1-2003中方法進行配制和標定。2緩沖溶液（ph10）（1）氯化銨氫氧化銨：稱取16.9g氯化銨（nh4cl），溶于143ml濃氫氧化銨中。（2）稱取0.780g硫酸鎂（mgso47h2o）及1.178g乙二胺四乙酸二鈉（c10h14n2o8na22h2o），溶于50ml純水中，加入2ml氯化銨氫氧化銨溶液和5滴鉻黑t指示劑（此時溶液應呈紫紅色，若為天藍色，應再加極少量硫酸鎂使呈紫紅色）。用edta2na溶液滴定至溶液由紫紅色變為天藍色，合并（1）及（2）兩種溶液，并用純水稀釋至250ml，合并后如

22、溶液又變為紫色，在計算結果時應扣除試劑空白。注：氫氧化銨氯化銨緩沖液應貯存于聚乙烯瓶或硬質玻璃瓶中。防止使用中因反復開蓋，使氨水濃度降低而影響ph值。配制緩沖溶液時，加入edtamg是為了使某些含鎂較低的水樣滴定終點更敏銳。如果備有市售edtamg試劑，則可直接取1.25gedtamg，配人250ml緩沖溶液中。edta2na滴定鈣、鎂離子時，以鉻黑t為指示劑其溶液在ph值9.711的范圍內，越偏堿終點越敏銳。但可使碳酸鈣及氫氧化鎂沉淀，從而造成滴定誤差。因此滴定選用ph值10為宜。3 固體指示劑：稱取0.5g鉻黑t，加100g氯化鈉，研磨均勻，貯于棕色瓶內，密塞備用，可較長期保存。注：鉻黑t

23、指示劑配成溶液后較易失效。如果在滴定時終點不敏銳，而且加入掩蔽劑后仍不能改善，則應重新配制指示劑。45硫化鈉溶液：稱取5.0g硫化鈉（na2s9h2o）溶于純水中，并稀釋至100ml。51.0鹽酸羥胺溶液：稱取1.0g鹽酸羥胺nh2ohhcl，溶于純水中，并稀釋至100ml。610氰化鉀溶液：稱取100g氰化鉀（kcn）溶于純水中，并稀釋至100ml。注意，此溶液劇毒！ （四）方法步驟：1.取水樣50ml（若硬度過大，可少取水樣用水稀釋至50ml。若硬度過小，改取100ml），置于150ml三角瓶中。注：為防止碳酸鈣及氫氧化鎂在堿性溶液中沉淀，滴定時水樣中的鈣、鎂離子含量不能過多，若取50ml

24、水樣，所消耗的001mol/l edta2na溶液體積應少于15ml。2.若水樣中含有金屬干擾離子使滴定終點延遲或顏色發暗，可另取水樣，加入05ml鹽酸羥胺溶液及1ml硫化鈉溶液或05ml氰化鉀溶液。3.加入12ml氫氧化銨氯化銨緩沖溶液及5滴鉻黑t指示劑（或一小勺固體指示劑），立即用edta2na標準溶液滴定，充分振搖，至溶液由紫紅色變為藍色，即表示到達終點。4.計算：v1c11000p(caco3)= - m mol/l v水樣式中：p水樣的硬度，m mol/l v1消耗edta-2na的體積數，ml c1edta-2na的摩爾濃度，mol/l注意：檢測自來水時取水樣25 ml，其它步驟同

25、上。p(caco3)=（v1c1100.091000）/v自來水樣 mg/l 總硬度除用碳酸鈣表示外，尚可用度及毫克當量/升表示。其相互換算方法見表：硬度單位的換算硬度單位毫克當量/升度碳酸鈣，mg/l毫克當量/升度碳酸鈣，mg/l10.356630.019982.80410.056050.04517.8471七、鍋爐水堿度的測定（依據國標gb 1576-2001）1.目 的：鍋爐水的堿度對鍋爐設備的結垢、腐蝕和蒸汽品質均有重大的影響，堿度過高則易引起鍋爐設備的堿性腐蝕和苛性脆化，并易使鍋爐水起泡及汽水共騰，惡化蒸汽品質。但是過低則鍋爐易結生水垢，不利于鍋爐的安全運行。因此，需要控制其堿度。2

26、.原 理：水的堿度是指水中含有能接受氫離子的物質的量，例如氫氧根、碳酸鹽、重碳酸鹽、磷酸鹽、磷酸氫鹽、硅酸鹽、硅酸氫鹽、亞硫酸鹽、腐植酸鹽和氨等，都是水中常見的堿性物質，它們都能與酸反應。因此,用標準酸溶液進行滴定，便可測出水中的堿度的含量。3.試 劑：1）1%的酚酞指示劑 2）0.1%甲基橙（水溶液） 3）0.1000mol/l(1/2h2so4)硫酸標準溶液4.測 定：取100ml水樣注入錐形瓶，加23滴1%酚酞，此時若溶液顯紅色，則用硫酸標準溶液滴定至恰好無色，記錄耗酸體積v1，然后再加入2滴甲基橙指示劑，繼續用硫酸標準溶液滴至呈橙紅色為止，記錄第二次耗酸體積v2（不包括v1）計算式：c

27、(v1+v2) 1000 m mol/l v 式中：c硫酸(1/2h2so4)標準溶液的濃度，mol/l;v1、v2耗酸的體積,ml;v 水樣的體積,ml.八、消毒工作液中過氧乙酸有效濃度的測定1.用滴管加入a液5滴，搖勻；2.用滴管加入b液5滴，搖勻；3.用滴管加入c液5滴，搖勻；3.用滴管吸取d液（硫代硫酸鈉溶液）一滴一滴的加入試管中，邊加邊搖，滴加至溶液藍色消失為終點，記錄所消耗滴數n。4.過氧乙酸濃度計算：過氧乙酸（ppm）=5ppmn因使用濃度控制在100300 ppm，所以，滴定液消耗滴數為1030滴。5.注意事項：（1）取樣前必須將試管用待測工作液清洗3次。（2）保證試管溶液的凹

28、面與刻度線平行。保持滴定液的液滴大小一致。（3）滴定試劑須在低溫條件下放置，并保持不被污染。（4）待測定的工作液測試前溫度應低于30，必要時應冷卻。備注： 快速滴定試劑的配制a 液 2mol/lh2so4 量取112ml的濃硫酸（分析純）加入50ml蒸餾水中，攪拌均勻后加蒸餾水至1000ml即可。b 液 10%ki 稱取10g ki (分析純)溶于100ml蒸餾水中，即可。c 液 0.5%淀粉指示劑 稱取0.5g可溶性淀粉（化學純）加5ml水，使成糊狀，加到90ml沸水中，煮沸1-2分鐘，稀釋至100ml。d 液 0.025nas2o3滴定液的配制：配制 稱取6.5g硫代硫酸鈉nas2o3.5

29、h2o（或4g無水硫代硫酸鈉）溶于1000ml水中，緩緩煮沸10分鐘，冷卻標定后備用。九、水中亞硝酸及硝酸鹽含量檢測：（依據國標gb 5750-1985）（一）亞硝酸鹽氮（重氮化偶合分光光度法）水中亞硝酸鹽氮是標志水體被有機物污染的指標之一。它是含氮化合物分解的中間產物，不穩定，易氧化成硝酸鹽，也可被還原成氨。它的含量與硝酸鹽和氨的含量結合考慮，可推測水體污染程度及凈化能力。1.應用范圍（1）本法適用于測定生活飲用水及其水源水中亞硝酸鹽氮。（2）水中三氯胺產生紅色干擾。三價鐵、鉛等離子可產生沉淀，引起干擾。二價銅離子起催化作用，可分解重氮鹽，因而使結果偏低。有色離子有干擾作用，也不應存在。注：

30、試劑加入的次序改為先加鹽酸n-（1萘基）-乙烯二胺，后加對氨基苯磺酰胺，可稍減低三氯胺產生的紅色干擾。但三氯胺濃度大時仍能產生橙色。（3）本法最低檢測量為0.05g亞硝酸鹽氮，若取50ml水樣測定，則最低檢測濃度為0.001mg/l。2.原理在ph1.7以下，水中亞硝酸鹽與對氨基苯磺酰胺起重氮作用，再與鹽酸n（1萘基）乙烯二胺產生偶合反應，生成紫紅色的偶氮染料，比色定量。3.儀器（1）50ml具塞比色管。（2）分光光度計。4.試劑（1）亞硝酸鹽氮標準貯備溶液：稱取0.2463g在干燥器內放置24h的亞硝酸鈉（nano2）。溶于純水中，并定容至1000ml。每升內加2ml氯仿保存。此溶液1.00

31、ml含50.0g亞硝酸鹽氮。（2）亞硝酸鹽氮標準溶液：取10.00ml亞硝酸鹽氮貯備溶液，用純水稀釋至500ml，再從中吸取出10.00ml，用純水定容100ml。1.00ml含0.10g亞硝酸鹽氮。（3）氫氧化鋁懸浮液：稱取125g硫酸鋁鉀kal（so4）212h2o或硫酸鋁銨nh4al（so4）212h2o，溶于1000ml純水中。加熱至60，慢慢加入55ml濃氨水，使成氫氧化鋁沉淀。充分攪拌后靜置，棄去上清液。反復用純水洗滌沉淀，至傾出液無氯離子（用硝酸銀檢定）為止。最后加入300ml純水成懸浮液。使用前振蕩均勻。（4）1對氨基苯磺酰胺溶液：稱取5g對氨基苯磺酰胺（nh2c6h4so3n

32、h2），溶于350ml 16鹽酸中。用純水稀釋至500ml。此試劑可穩定數月。（5）01鹽酸n（1萘基）乙烯二胺溶液：稱取0.5g鹽酸n（1萘基）乙烯二胺（c10h7nh2chch2nh22hcl，又名n甲萘基鹽酸二氨基乙烯，簡稱nedd），溶于500ml純水中。貯于棕色瓶內，于冰箱內保存，可穩定數周。如變為深棕色，則應重配。5.步驟（1）若水樣渾濁或色度較深，可先取100ml，加入2ml氫氧化鋁懸浮液，攪拌后靜置數分鐘，過濾。（2）先將水樣或經處理后的水樣，用酸或堿調節至中性，取50.0ml，置于比色管中。（3）另取50ml比色管8支，分別加入亞硝酸鹽氮標準溶液0、0.50、1.00、2.5

33、0、5.00、7.50、10.00及12.50ml，用純水稀釋至50ml。（4）向水樣及標準色列管中分別加入1ml對氨基苯磺酰胺溶液，搖勻后放置28min。加入1.0ml鹽酸n（1萘基）乙烯二胺溶液，立即混勻。（5）于540nm波長下，用1cm比色皿以純水作參比，在10min至2h內，于分光光度計上測定吸光度。如亞硝酸鹽氮濃度低于4g/l時，改用3cm比色皿。（6）繪制校準曲線，從曲線上查出水樣管中亞硝酸鹽氮含量。6.計算mc=-v式中：c水樣中亞硝酸鹽氮（n）濃度，mg/l；m從校準曲線上查得樣品管中亞硝酸鹽氮含量，g；v水樣體積，ml。(二)硝酸鹽氮（鎘柱還原法）1.應用范圍（1）本法適用

34、于測定生活飲用水及水源水中硝酸鹽氮的含量。（2）本法不經稀釋直接還原測定的適用范圍為0.0060.25mg/l的硝酸鹽氮加亞硝酸鹽氮。將水樣稀釋，可使測定范圍擴大。（3）本法最低檢測量為0.05g硝酸鹽氮，若取50ml水樣測定，則最低檢測濃度為0.001mg/l硝酸鹽氮。2.原理在一定條件下，鎘還原劑能將水中的硝酸鹽氮還原為亞硝酸鹽氮，還原生成的亞硝酸鹽氮（包括水樣中原有的亞硝酸鹽氮）與對氨基苯磺酰胺重氮化，再與鹽酸n（1萘基）乙烯二胺偶合，形成玫瑰紅色偶氮染料，用光度法測定，減去不經鎘柱還原，用重氮化偶合比色法測得的亞硝酸鹽氮含量，即可得出硝酸鹽氮含量。水樣渾濁或有懸浮固體時會堵塞柱子，可先

35、將水樣過濾。濁度高的水樣，在過濾之前可加硫酸鋅和氫氧化鈉預處理，以去除水樣中存在的大部分顆粒物質。注：鎘還原劑指汞鎘顆粒、銅鎘顆粒和海綿狀鎘，可選用其中一種。于水樣中加入乙二胺四乙酸二鈉，以消除鐵、銅或其他金屬的干擾。3.儀器（1）還原柱：見下圖。（2）250ml容量瓶。（3）100ml三角瓶。（4）分光光度計。4.試劑（1）苯酚：如苯酚不純或有顏色，將盛苯酚（c6h5oh）的容器隔水加熱，融化后傾出適量于具空氣冷凝管的蒸餾瓶中，加熱蒸餾，收集182184的餾分，置棕色瓶中，冷暗處保存。精制苯酚應為無色純凈的結晶。（2）二磺酸酚試劑：稱取15g苯酚，置于250ml三角瓶中，加入105ml濃硫酸

36、，瓶上放一小漏斗，置沸水浴內加熱6h。試劑應為淺棕色稠液，保存于棕色瓶內。（3）硝酸鹽氮標準貯備溶液：稱取7.218g在105110烘過1h的硝酸鉀（kno3），溶于純水中，并定容至1000ml。加2ml氯仿作保存劑，至少可穩定6個月。此貯備溶液1.00ml含100mg硝酸鹽氮。（4）硝酸鹽氮標準溶液：吸取5.00ml硝酸鹽氮標準貯備溶液，置于瓷蒸發皿內，在水浴上加熱蒸干，然后加入2ml二磺酸酚，迅速用玻璃棒摩擦蒸發皿內壁，使二磺酸酚與硝酸鹽充分接觸，靜置30min，加人少量純水，移入500ml容量瓶中，再用純水沖洗蒸發皿，合并于容量瓶中，最后用純水稀釋至刻度。此溶液1.00ml含10.0g硝

37、酸鹽氮。（5）1對氨基苯磺酰胺溶液：稱取5g對氨基苯磺酰胺（nh2c6h4so3nh2），溶于350ml 16鹽酸中。用純水稀釋至500ml。此試劑可穩定數月。（6）0.1鹽酸n（1萘基）乙烯二胺溶液：稱取0.5g鹽酸n（1萘基）乙烯二胺（c10h7nh2chch2nh22hcl，又名n甲萘基鹽酸二氨基乙烯，簡稱nedd），溶于500ml純水中。貯于棕色瓶內，于冰箱內保存，可穩定數周。如變為深棕色，則應重配。（7）氯化銨乙二胺四乙酸二鈉（edta2na）溶液：稱取100g氯化銨（nh4cl）和1gedta2na（c10h14n2o8na22h2o）；溶于純水中，并稀釋至500ml。（8）10硫

38、酸鋅溶液：稱取100g硫酸鋅（znso47h2o），溶于純水中，并稀釋至1000ml。（9）鎘還原劑1）海綿狀鎘：如無市售品，可用下法制備。投入足夠的鋅片（或鋅棒）于500ml 20硫酸鎘溶液中，34h后將置換出來的海綿狀鎘用玻棒輕輕刮下，搗碎至2040目，用純水沖洗后置05氯化銨溶液中保存。2）汞鎘顆粒：取4060目的金屬鎘粒（用過的也可重復使用）約50g，置于燒杯中，先用11鹽酸溶液洗滌，棄去溶液后用純水沖洗鎘粒數次，再加入1氯化汞溶液100ml，攪拌3min，傾去溶液，用純水沖洗汞鎘顆粒數遍，然后用199硝酸溶液很快沖洗一下，再用199鹽酸溶液洗數次，用純水洗至水中不含亞硝酸根為止。置0

39、.5氯化銨溶液中保存。3）銅鎘顆粒：取4060目的金屬鎘粒（用過的也可重復使用）約50g，置于燒杯中。先用11鹽酸洗滌，棄去溶液后用純水沖洗數次，再加入2硫酸銅溶液100ml，搖動5min或至溶液藍色變淺。傾去溶液，再加入新的硫酸銅溶液，重復處理，直到在鎘粒上出現褐色膠體沉淀為止。用純水洗滌銅鎘粒至少10次，以去除所有沉淀，置于0.5氯化銨溶液中保存。5.鎘還原柱的制備（1）填料的裝柱與老化：放入一小團玻璃棉于還原柱的底部，加滿純水，再分次加入鎘填料至30cm高度（加填料時應注意避免在填料中間引入空氣泡）。在200ml純水中加入2ml氯化銨edta溶液，用活塞控制流速為每分鐘710ml，讓其流

40、過新制備的鎘填料，再用每升含0.1硝酸鹽氮、8ml氯化銨edta溶液的水溶液200ml流過柱子，使鎘填料老化。注：新鎘填料還原能力較強，司將亞硝酸鹽氮進一步還原為氮，必須用硝酸鹽氮溶液處理，使鎘柱適當老化。（2）鎘柱還原率的檢查：為了檢查鎘柱的還原率，可在每天作樣品分析前，按步驟6（2），將0.10.2mg/l的硝酸鹽氮標準溶液經柱還原、顯色，用1cm比色皿測定吸光度，與相同濃度的亞硝酸鹽標準溶液顯色測得的吸光度相比較，可確定還原柱的還原率。為了計算方便，可用因數f來表征還原柱的還原效率：cslf=-asab式中：cs硝酸鹽氮標準溶液的濃度，mg/l；l比色皿厚度，cm；as硝酸鹽氮標準溶液經柱還原顯色后測得的吸光度；ab流經還原柱的試劑空白的吸光度。f值應用標準溶液三個平行測定結果的平均值求得。如果在一天中測定多批樣品，應在分析開始、中間、