無機磷的測定磷鉬藍分光光度法測定海水中的活性磷酸鹽 09海環1班張姣2011 11 6 無機磷 活性磷酸鹽 天然水和廢水中含有的磷絕大多數以各種形式的磷酸鹽存在 也有有機磷的化合物 從化學形式上看 水中的磷化合物可分以下幾類 1 正磷酸鹽 即PO43 HPO42 H2PO4 2 縮合磷酸鹽 包括焦磷酸鹽 偏磷酸鹽 聚合磷酸鹽等 如P2O74 P3O105 HP3O92 PO3 63 等 3 有機磷化合物 海水中磷以兩種化學形式存在 即有機磷和無機磷 每一種化學形式又分為溶解和顆粒的兩種形態 無機磷形態 在各種無機磷形態中 僅正磷酸鹽可通過標準的磷鉬藍方法定量地測定 而焦磷酸鹽和無機磷聚合物均需要首先將其水解為活性磷酸鹽后才能測定 一般情況下 活性磷酸鹽絕大部分是溶解態無機磷 DIP 通常指能被植物直接吸收的 無機磷污染的來源 生活污水洗滌廢水 含磷洗衣粉 洗滌劑 食物廢渣人體排泄 工廠和畜牧業廢水化工行業 造紙業 磷肥工業 生化制藥 生物制藥企業 金屬表面處理食品工業 降雪降雨 影響 水體的富營養化緩慢流動的湖泊 水庫 內海等水域的生物營養成分 如氮 磷等 因長期不斷補給而過多積累 導致水草 藻類等大量繁殖 引起水質惡化 魚群死亡的現象 磷含量增加 導致紅色浮游生物爆發性繁殖而引發的近海海水出現的 赤潮 和城市水系 湖泊 水庫 中出現水生植物瘋長的 水華 現象 采樣和樣品貯存 含磷酸鹽的水樣 在貯存時由于生物 酶和吸附作用 使磷酸鹽的濃度在采樣后1小時內就會發生變化 所以樣品采集后應盡快分析 最好在半小時之內進行 不要超過兩小時 若不能立即分析 采取措施固定 關于樣品的貯存和固定問題 目前無定論 主要有快速冷凍法和化學保存法兩種 若只放幾個小時 可冷藏 冷凍法 水樣采集后迅速冷凍到 20 C以下 測溶解無機磷則要過濾 這種方法目前大多數人認為可保存幾個月 基本用此法 化學法 加入HgCl2 100ml水樣中加入約3滴HgCl2飽和溶液 樣品貯存 樣品采集后可存于玻璃瓶中 待分樣及過濾結束后 一般用塑料瓶貯存樣品 聚丙烯或聚四氟乙烯 不可用聚乙烯 原因 吸附有機物質 磷酸鹽 油類 由于觀察到磷為玻璃所吸收 長期貯存不應采用玻璃瓶 測定方法 測定水中無機磷的方法是磷鉬藍分光光度法 海洋監測規范GB17378 4 2007 磷鉬藍分光光度法 磷鉬藍分光光度法 適用范圍和應用領域 本法適用于海水中活性磷酸鹽的測定 本方法為仲裁方法 方法原理在酸性介質中 活性磷酸鹽與鉬酸銨反應生成磷鉬黃 用抗壞血酸還原為磷鉬藍后 于882nm波長測定吸光值 活性磷酸鹽與鉬酸銨形成磷鉬黃7PO43 21NH4 12Mo7O246 72H 7 NH4 3 PMo12O40 淡黃色 36H2O 在酒石酸銻鉀存在下 磷鉬黃被抗壞血酸還原為磷鉬藍 即在酒石酸銻鉀存在下 加入抗壞血酸 使磷鉬酸中的一部分Mo6 離子被還原為Mo5 生成一種叫做 鉬藍 的物質 磷鉬黃被還原為磷鉬藍 NH4 3 PMo12O40 H3PO4 2Mo2O5H3PO4 10MoO3 2Mo2O5 所需試劑 硫酸溶液 鉬酸銨溶液 酒石酸銻鉀溶液 混合溶液 抗壞血酸溶液 硫酸鹽標準儲備溶液 磷酸鹽標準使用溶液 儀器 分光光度計 配5cm測定池 量筒 容量10 50 100 250 500ml 量瓶 容量100 1000ml 帶刻度具塞比色管 容量50ml 刻度吸管 容量1 5 10ml 自動加液器 容量1ml 一般實驗室常備儀器和設備 分析步驟 繪制標準曲線按以下步驟繪制標準曲線 量取0ml 0 50ml 1 00ml 2 00ml 3 00ml 4 00ml磷酸鹽標準使用溶液于50ml帶刻度具塞比色管中 加水至50ml標線 混勻 各加1 0ml混合溶液 1 0ml抗壞血酸溶液 混勻 顯色5min后 注入5cm測定池中 以蒸餾水作參比 于882nm波長處測定其吸光值Ai 其中零濃度為標準空白吸光值A0 以吸光值 Ai A0 為縱坐標 相應的磷酸鹽濃度 mg L 為橫坐標 繪制標準曲線 水樣測定按以下步驟測定樣品 量取50ml經0 45 m微孔濾膜過濾的水樣至帶刻度具塞比色管中 按上一步驟 測定吸光值Aw 同時量取50ml水按相同步驟測定分析空白吸光值Ab 記錄與計算據 Aw Ab 值在標準曲線上查得水樣的磷酸鹽濃度 mg L 或用標準曲線性回歸方程計算 將所得數據記入 海洋監測規范 的附錄A中表A3及表A16中 注意事項 除非另作說明 本方法所用試劑均為分析純 水為二次水或等效純水 水樣采集后應馬上過濾 立即測定 若不能立即測定 應置于冰箱中保存 但也應在48h內測定完畢 過