ICS11.120.10

CCSC23

團體標準

T/CACM****－20**

代

動物藥中甲基汞和無機砷的檢測方法及限量

Detectionmethodsandlimitsformethylmercuryandinorganicarsenicinanimal

medicines

（文件類型：公示稿）（文件類型：公示稿）

（完成時間：2023年3月）

20**-**-**發布20**-**-**實施

中華中醫藥學會發布

T/CACM****－20**T/CACM

動物藥中甲基汞和無機砷的檢測方法及限量

1范圍

本文件規定了動物藥中甲基汞、無機砷的限量指標和檢測方法。本文件規定了動物藥中甲基汞、無機砷的限量指標和檢測方法。

本文件適用于蘄蛇、地龍、烏梢蛇等14種動物藥中汞、砷限量檢測。本文件適用于蘄蛇、地龍、烏梢蛇等14種動物藥中汞、砷限量檢測。

2規范性引用文件

下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期

的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括

所有的修改單）適用于本文件。

GB5009.11食品安全國家標準食品中總砷及無機砷的測定

GB5009.17食品安全國家標準食品中總汞及有機汞的測定

GB/T6682分析實驗室用水規格和試驗方法

《中華人民共和國藥典》通則2321鉛、鎘、砷、汞、銅測定法

《中華人民共和國藥典》通則2322汞和砷元素形態及其價態測定法

3術語和定義

下列術語和定義適用于本文件。

3.1動物藥animalmedicine

來源于動物的藥物，可以是動物的全體、器官、組織、生理或病例產物、提取物或加工

品等。品等。

3.2限量limit

允許在動物藥表面或內部殘留的內源或外源性化學物質的最高含量（或濃度），以mg/kg

計。

44殘留限量

動物藥中汞、砷殘留限量指標：應符合表1的要求。

表1動物藥中汞、砷殘留限量指標

動物藥（名稱）汞限量砷限量

mg/kgmg/kg

總汞甲基汞a總砷無機砷b

（以Hg計）（以As計）

珍珠0.2-2-

阿膠0.2-2-

1

T/CACM****－20**T/CACM

牡蠣0.2-2-

水蛭1-5-

海螵蛸0.2-10-

蛤殼0.2-2-

冬蟲夏草0.2---

鹿角膠--2-

土鱉蟲---1

地龍---1

蜈蚣-0.2--

烏梢蛇-0.2-0.5

蘄蛇-0.2-0.5

金錢白花蛇-0.2-0.5

a：動物藥可先測定總汞，當總汞水平不超過甲基汞限量值時，不必測定甲基汞；否則，需再

測定甲基汞。

b：無機砷指As(III)和As(V)的總和。對于制定無機砷限量的動物藥可先測定其總砷，當總砷

水平不超過無機砷限量值時，不必測定無機砷；否則，需再測定無機砷。

-：無相應限量要求。

55檢測方法

5.1方法一汞、砷總量測定法

參照《中華人民共和國藥典》四部232鉛、鎘、砷、汞、銅測定法。1

5.2方法二液相色譜-原子熒光光譜（LC-AFS）法

5.2.1液相色譜-原子熒光光譜（LC-AFS）法測定動物藥中的甲基汞，參照GB5009.17，

見附錄A。

5.2.2液相色譜-原子熒光光譜（LC-AFS）法測定動物藥中的無機砷，參照GB5009.11，

見附錄A。

5.3方法三高效液相色譜法-電感耦合等離子體質譜（HPLC-ICP-MS）法（仲裁法）

5.3.1高效液相色譜法-電感耦合等離子體質譜測定法測定動物藥中的甲基汞，參考《中

華人民共和國藥典》四部2322汞、砷元素形態及價態測定法，見附錄B。

5.3.2高效液相色譜法-電感耦合等離子體質譜測定法測定動物藥中的無機砷，參考《中

華人民共和國藥典》四部2322汞、砷元素形態及價態測定法，見附錄B。

注：在汞、砷形態測定時，可根據待測樣品特點及檢測精度需求選擇檢測方法，方法三適用于方法二

2

T/CACM****－20**T/CACM

檢測結果存疑樣品的復核。

3

T/CACM****－20**T/CACM

附錄A

（規范性）

甲基汞和無機砷形態LC-AFS測定法

A.1概述

本法系采用液相色譜-原子熒光光譜（LC-AFS）法測定待測樣品中甲基汞、無機砷元素

形態。

A.2甲基汞元素形態測定法

A.2.1色譜條件與系統適用性試驗使用C18反相色譜柱或等效柱，柱長為15cm；以甲醇-

0.04mol/L乙酸銨溶液（含0.1%L-半胱氨酸)（3:97）為流動相；由原子熒光光譜儀進行檢

測。3種不同形態汞的分離度應不小于1.5（圖A.1）。

A.2.2對照品貯備溶液的制備分別準確稱取氯化甲基汞、氯化乙基汞對照品適量，加入少量

甲醇溶解，再準確稱取氯化汞對照品適量，用重鉻酸鉀的硝酸溶液（0.5g/L）溶解，加流動

相制成每1mL各含1μg（均以汞計）的溶液，即得。

A.2.3標準曲線溶液的制備準確吸取甲基汞標準貯備溶液適量，加流動相分別制成每lL各

含0μg、1μg、5μg、10μg、30μg、50μg（均以汞計）系列濃度的溶液，即得。

A.2.4待測樣品溶液的制備稱取待測樣品粉末（過三號篩）0.2g~1.0g，置于15mL塑料離

心管中，加入10mL鹽酸溶液（5mol/L）。室溫下超聲水浴提取60min,期間振搖數次。4℃

下以8000r/min離心15min。準確吸取2.0mL上清液至5mL容量瓶或刻度試管中，逐滴加

入氫氧化鈉溶液（6mol/L），至樣液pH3~7。加入0.1mL的L-半胱氨酸溶液（1%），用水

稀釋定容至刻度。經0.45μm有機系濾膜過濾，即得。

本制備方法系通用性的推薦方法，實踐中可根據樣品基質的不同而進行參數的適當調整，并

在各品種項下另作詳細規定，同時進行必要的方法學驗證。

A.2.5檢測依次將系列標準曲線溶液和試樣溶液注入液相色譜-原子熒光光譜聯用儀，測定。

以系列標準溶液中目標化合物的濃度為橫坐標,以色譜峰面積為縱坐標，制作標準曲線，根

據標準曲線得到待測樣品溶液中甲基汞的濃度，即得。

圖A.1汞元素形態測定圖譜

A.3無機砷形態測定法

4

T/CACM****－20**T/CACM

A.3.1色譜條件與系統適用性試驗使用陰離子交換色譜柱或等效柱；以1mmol/L磷酸二氫

銨溶液（pH9.0）為流動相A，20mmol/L磷酸二氫銨溶液（pH8.0）為流動相B，按表A.1進

行梯度洗脫，流速1.0mL/min；由原子熒光光譜儀進行測定。不同形態砷的分離度應不小于

1.5（圖A.2）。

A.3.2對照品貯備溶液的制備準確稱取三氧化二砷、砷酸二氫鉀標準品適量，加超純水制

成每lL各含1mg（均以砷計）的As(III)、As(V)對照品溶液，即得。

A.3.3標準曲線溶液的制備精密吸取對照品貯備溶液適量，加超純水制成每lmL各含0ng、

5ng、10ng、20ng、30ng、50ng、100ng（均以砷計）系列濃度的溶液，搖勻，即得。

A.3.4待測樣品溶液的制備稱取約1.0g待測樣品（過三號篩，準確至0.001g），置于50mL

塑料離心管中，加入20mL0.15mol/L硝酸溶液，放置過夜。于90℃恒溫箱中熱浸提25h，

每0.5h振搖1min。提取完畢，取出冷卻至室溫，8000r/min離心15min。取5mL上清液置于

離心管中加入5mL正己烷，振搖1min后，8000r/min離心15min，棄去上層正已烷。按此過

程重復一次。吸取下層清液，經0.45μm有機系濾膜過濾及C18小柱凈化后進樣。

本制備方法系通用性的推薦方法，實踐中可根據樣品基質的不同而進行參數的適當調整，并

在各品種項下另作詳細規定，同時進行必要的方法學驗證。

A.3.5檢測分別吸取系列標準曲線溶液和待測樣品溶液各100μL，注入液相色譜-原子熒光

光譜儀，測定。以系列標準曲線溶液中色譜峰面積為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線，

計算待測樣品溶液中As(III)、As(V)的含量，即得。

表A.1流動相梯度洗脫程序

組成時間/min

0810202232

流動相A/%10010000100100

流動相B/%0010010000

As(III)—亞砷酸；DMA—二甲基砷；MMA—一甲基砷；As(V)—砷酸

圖A.2砷元素形態測定圖譜

5

T/CACM****－20**T/CACM

附錄B

（規范性）

甲基汞和無機砷形態HPLC-ICP-MS測定法

B.1概述

本法系采用髙效液相色譜-電感耦合等離子體質譜（HPLC-ICP-MS）法測定待測樣品中

甲基汞、無機砷形態。

B.2汞元素形態測定法

B.2.1色譜、質譜條件與系統適用性試驗使用C18反相色譜柱或等效柱，柱長為15cm；以

甲醇-0.01mol/L乙酸銨溶液（含0.12%L-半胱氨酸，氨水調節pH值至7.5）（8:92）為流

動相，流速0.8mL/min。以同軸霧化器和碰撞反應池的電感耦合等離子體質譜進行檢測；測

定時選取的同位素為202Hg，根據干擾情況選擇正常模式或碰撞池反應模式。3種不同形態

汞的分離度應不小于1.5（圖B.1）。

1.氯化汞（二價汞）；2.甲基汞；3.乙基汞

圖B.1汞元素形態測定圖譜

B.2.2對照品貯備溶液的制備分別取氯化汞、甲基汞、乙基汞對照品適量，精密稱定，加8%

甲醇制成每lmL各含l00ng（均以汞計）的溶液，即得。

B.2.3標準曲線溶液的制備精密吸取對照品貯備溶液適量，加8%甲醇分別制成每lmL各

含0.0ng、0.2ng、0.5ng、lng、5ng、10ng、20ng（均以汞計）系列濃度的溶液，即得。

B.2.4待測樣品溶液的制備取待測樣品粉末（過三號篩）0.2~0.5g，精密稱定，加0.1mol/L

硝酸銀溶液200~600μL，精密加入硝酸人工胃液適量，置37~45℃水浴中加熱約20~24h，取

出，搖勻，室溫放置2h，取上清液，用0.22μm濾膜濾過，取續濾液，即得。同法制備空白

溶液。

本制備方法系通用性的推薦方法，實踐中可根據樣品基質的不同而進行參數的適當調整，并

在各品種項下另作詳細規定，同時進行必要的方法學驗證。

B.2.5檢測分別吸取系列標準曲線溶液和待測樣品溶液各10~20μL，注入液相色譜儀，測

定。以系列標準曲線溶液中不同形態汞的峰面積為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線，

計算待測樣品溶液中不同形態汞的含量，即得。

B.3砷元素形態測定法

6

T/CACM****－20**T/CACM

B.3.1色譜、質譜條件與系統適用性試驗以聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物載體鍵合三甲基銨

陰離子交換材料或相當的材料為填充劑，柱長為25cm，以2mmol/L碳酸銨溶液為流動相

A，以100mmol/L碳酸銨溶液為流動相B，按表B.1進行梯度洗脫，流速1.0mL/min。以

同軸霧化器和碰撞反應池的電感耦合等離子體質譜進行檢測；測定時選取的同位素為

75As，選擇碰撞池反應模式或根據不同儀器的要求選用適宜校正方程進行校正。6種形態砷

的分離度應不小于1.5（圖B.2）。

表B.1流動相梯度洗脫程序

時間/min流動相A/%流動相B/%

01000

21000

50100

70100

101000

1.砷甜菜堿；2.亞砷酸（三價砷）；3.二甲基砷；

4.砷膽堿；5.一甲基砷；6.砷酸（五價砷）

圖B.2砷元素形態測定圖譜

B.3.2對照品貯備溶液的制備分別取亞砷酸、砷酸、一甲基砷、二甲基砷、砷膽堿、砷甜菜

堿對照品適量，精密稱定，加超純水制成每lmL各含2μg（均以砷計）的對照品溶液，即

得。

B.3.3標準曲線溶液的制備精密吸取對照品貯備溶液適量，加超純水制成每lmL各含0.0

ng、0.5ng、1