基因工程的基本操作程序第三章第二節(jié)本節(jié)聚焦基因工程的基本操作程序主要包括哪幾個步驟？01基因工程操作的每一步設(shè)計的技術(shù)和方法有哪些？02從社會中來1997年，我國政府首次批準商業(yè)化種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉。到2015年，我國已育成轉(zhuǎn)基因抗蟲棉新品種100多個，減少農(nóng)藥用量40萬噸，增收節(jié)支社會經(jīng)濟效益450億元。轉(zhuǎn)基因抗蟲棉抗蟲的機制是什么？培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉一般需要哪些步驟?從社會中來Bt抗蟲蛋白Bt基因取出？轉(zhuǎn)移？從社會中來

普通棉花（無抗蟲特性）棉花細胞抗蟲棉

（有抗蟲特性）導(dǎo)入Bt基因重組DNA分子目的基因的篩選與獲取基因表達載體的構(gòu)建將目的基因?qū)胧荏w細胞目的基因的檢測與鑒定與載體拼接第一步：目的基因的篩選與獲取篩選合適的目的基因目的基因：在基因工程的設(shè)計和操作中，用于改變受體細胞性狀或獲得預(yù)期表達產(chǎn)物等的基因。主要是編碼特定蛋白質(zhì)的基因，也可以是具有調(diào)控作用的因子。如：與生物抗逆性、優(yōu)良品質(zhì)、生產(chǎn)藥物、毒物降解和工業(yè)用酶等相關(guān)基因。第一步：目的基因的篩選與獲取篩選合適的目的基因從相關(guān)的已知結(jié)構(gòu)和功能清晰的基因中篩選目的基因明確Bt基因的序列信息，對Bt抗蟲蛋白有深入了解利用序列數(shù)據(jù)庫（如GenBank）、序列對比工具（如BLAST）等，找到合適的目的基因第一步：目的基因的篩選與獲取篩選合適的目的基因獲取目的基因的方法人工合成目的基因通過構(gòu)建基因文庫來獲取目的基因基因比較小、核苷酸序列已知的序列，通過DNA合成儀用化學(xué)方法直接合成。第一步：目的基因的篩選與獲取利用PCR獲取和擴增目的基因PCR-聚合酶鏈式反應(yīng)：根據(jù)DNA半保留復(fù)制的原理，通過在體外提供參與DNA復(fù)制的各種組分與反應(yīng)條件，對目的基因核苷酸序列進行大量復(fù)制的技術(shù)。第一步：目的基因的篩選與獲取利用PCR獲取和擴增目的基因各種組分耐高溫的DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）DNA模板引物（2種）穩(wěn)定的緩沖溶液四種脫氧核苷酸(dNTP)引物是一小段能與DNA母鏈的一段堿基序列互補配對的短單鏈核酸一般添加Mg2+（激活真核細胞和細菌的DNA聚合酶）第一步：目的基因的篩選與獲取利用PCR獲取和擴增目的基因dATP與ATP在結(jié)構(gòu)上有什么區(qū)別？dATP為什么能用作DNA復(fù)制的底物？ATP結(jié)構(gòu)中的五碳糖為核糖，而dATP結(jié)構(gòu)中的五碳糖為脫氧核糖。ATP轉(zhuǎn)移掉兩個磷酸基團后剩下的結(jié)構(gòu)就是腺嘌呤核糖核苷酸，第一步：目的基因的篩選與獲取利用PCR獲取和擴增目的基因PCR反應(yīng)過程3’5’3’5’3’5’3’5’A.變性溫度上升到90℃以上，雙鏈DNA解聚為單鏈。B.復(fù)性溫度下降到50℃左右，兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合。C.延伸溫度上升到72℃左右，溶液中的4種脫氧核苷酸在耐高溫的DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補配對原則合成新的DNA鏈。3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’第一步：目的基因的篩選與獲取利用PCR獲取和擴增目的基因PCR反應(yīng)過程第一輪循環(huán)的產(chǎn)物作為第二輪反應(yīng)的模板，經(jīng)過變性、復(fù)性和延伸產(chǎn)生第二輪循環(huán)的產(chǎn)物；第二輪循環(huán)的產(chǎn)物作為第三輪反應(yīng)的模板，經(jīng)過變性、復(fù)性和延伸產(chǎn)生第三輪的產(chǎn)物；第二輪循環(huán)的產(chǎn)物第三輪循環(huán)的產(chǎn)物第一步：目的基因的篩選與獲取利用PCR獲取和擴增目的基因PCR結(jié)果：PCR產(chǎn)物檢測：由于一個循環(huán)得到的產(chǎn)物又可以作為下一個循環(huán)的模板，因而每一次循環(huán)后目的基因的量可以增加一倍。即成

形式擴增約為

，其中n為擴增循環(huán)的次數(shù)。指數(shù)2n變性90℃以上延伸72℃左右復(fù)性50℃左右常采用瓊脂糖凝膠電泳來鑒定PCR的產(chǎn)物。第一步：目的基因的篩選與獲取利用PCR獲取和擴增目的基因下圖是某同學(xué)設(shè)計的兩組引物(只標注了部分堿基序列)，都不合理，請分別說明理由。第1組：引物Ⅰ和Ⅱ會因局部發(fā)生堿基互補配對而失效第2組：引物Ⅰ′自身折疊后會因出現(xiàn)局部堿基互補配對而失效要保證目的基因能與載體相連接，還要對引物進行什么操作？要在兩種引物的5′端分別添加上限制酶的識別序列。如果循環(huán)n次，則共需消耗多少對引物？共需消耗2n－1對引物。第一步：目的基因的篩選與獲取利用PCR獲取和擴增目的基因利用PCR技術(shù)擴增目的基因，在第幾輪循環(huán)產(chǎn)物中開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段？比例是多少？5’3’5’5’第一次循環(huán)第二次循環(huán)3’5’第三次循環(huán)3’3’第3輪；1/4。PCR中的數(shù)量關(guān)系復(fù)制次數(shù)123nDNA分子數(shù)含引物的DNA分子數(shù)含其中一種引物的DNA分子數(shù)同時含兩種引物的DNA分子數(shù)共消耗引物的對數(shù)含脫氧核苷酸鏈等長的DNA分子數(shù)2482n2482n1＝21－13＝22－17＝23－12n－10＝21－22＝22－26＝23－22n－21＝21－13＝22－17＝23－12n－10＝21－20＝22－42＝23－62n－2nPCR擴增技術(shù)和體內(nèi)DNA復(fù)制的異同項目體內(nèi)DNA復(fù)制PCR擴增技術(shù)解旋方式場所酶溫度條件結(jié)果相同點解旋酶催化DNA在高溫作用下變性解旋細胞內(nèi)(主要在細胞核內(nèi))PCR擴增儀內(nèi)解旋酶、DNA聚合酶耐高溫的DNA聚合酶細胞內(nèi)溫和條件需控制溫度，在較高溫度下進行DNA分子DNA片段或目的基因模板：均需要DNA的兩條單鏈作為模板；原料：均為4種脫氧核苷酸；酶：均需DNA聚合酶第二步：基因表達載體的構(gòu)建獲得了足量的Bt基因后，是否能直接將Bt基因?qū)朊藁毎兀坎荒堋Ｓ坞x的DNA進入受體細胞，一般會直接被分解。即使可以轉(zhuǎn)錄翻譯成蛋白質(zhì)，游離的DNA片段也無法隨著細胞分裂而進行復(fù)制，導(dǎo)致子代細胞中不再含有目的基因。因此，獲取Bt基因后，還需要借助載體將其導(dǎo)入棉花細胞，才能使棉花植株獲得抗蟲特性。構(gòu)建基因表達載體的目的：使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，且可以遺傳給下一代；使目的基因能在受體細胞中表達和發(fā)揮作用。終止轉(zhuǎn)錄起始轉(zhuǎn)錄第二步：基因表達載體的構(gòu)建啟動子：一段有特殊序列的DNA片段。位于基因的上游，緊挨轉(zhuǎn)錄的起始位點，它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終表達出人類需要的蛋白質(zhì)。類別：誘導(dǎo)型啟動子組成型啟動子組織特異性啟動子誘導(dǎo)物作用誘導(dǎo)型啟動子激活或抑制目的基因表達如：光誘導(dǎo)、熱誘導(dǎo)、創(chuàng)傷誘導(dǎo)、真菌誘導(dǎo)、共生細菌誘導(dǎo)表達基因啟動子等。終止子：一段有特殊序列的DNA片段。位于基因的下游，相當于一盞紅色信號燈，使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停下來。第二步：基因表達載體的構(gòu)建基因表達載體構(gòu)建過程：載體（質(zhì)粒）DNA分子（含目的基因）限制酶處理帶有黏性末端或平末端的切口有相同黏性末端或平末端的目的基因片段DNA連接酶重組DNA分子（重組質(zhì)粒）同一種第二步：基因表達載體的構(gòu)建啟動子終止子構(gòu)建基因表達載體時目的基因插入的位置應(yīng)該在哪里？為什么？應(yīng)該插入啟動子下游和終止子上游。因為只有插入在啟動子和終止子之間，目的基因才可以正常表達。構(gòu)建基因表達載體時，能否用SmaⅠ限制酶切割質(zhì)粒？為什么？不能，因為SmaⅠ并不位于啟動子終止子之間，基因無法表達，并且切割會破壞質(zhì)粒的抗生素抗性基因，影響進一步的篩選。第二步：基因表達載體的構(gòu)建啟動子終止子基于質(zhì)粒和外源DNA的情況，可以如何選擇限制酶進行酶切？與只使用EcoRⅠ相比較，使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點是什么？只使用EcoRⅠ處理質(zhì)粒和外源DNA，或者同時使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶。可以防止質(zhì)粒、目的基因的自身環(huán)化連接；還可以防止目的基因與載體的反向連接。第二步：基因表達載體的構(gòu)建使用一種DNA限制酶進行切割，共有幾種連接情況？載體目的基因自連片段間連接目的基因自連質(zhì)粒自連目的基因與質(zhì)粒連接目的基因與目的基因連接質(zhì)粒與質(zhì)粒連接正向連接反向連接11’22’122’1’22’1’1第二步：基因表達載體的構(gòu)建限制酶的選擇原則圖甲可選擇PstⅠ，不選擇SamⅠ。圖乙中不選擇SmaⅠ。不破壞目的基因保留標記基因、啟動子、終止子、復(fù)制原點通常選擇相同的限制酶切割質(zhì)粒和目的基因，如圖中PstⅠ；為避免目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化和隨意連接，為了保證目的基因和質(zhì)粒定向連接，可選擇PstⅠ和EcoRⅠ兩種限制酶同時切割目的基因和質(zhì)粒。確保出現(xiàn)相同黏性末端第三步：將目的基因?qū)胧荏w細胞目的基因(基因表達載體)導(dǎo)入受體細胞的方法導(dǎo)入植物細胞導(dǎo)入動物細胞導(dǎo)入微生物細胞農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（常用）花粉管通道法（我國科學(xué)家獨創(chuàng)）顯微注射法Ca2+處理法第三步：將目的基因?qū)胧荏w細胞導(dǎo)入植物細胞：花粉管通道法（我國科學(xué)家獨創(chuàng)的將Bt基因?qū)朊藁毎姆椒ǎ┰谥参锸诜酆笠欢〞r間內(nèi)，剪去柱頭，將DNA溶液滴在花柱切面，使目的基因借助花粉管通道進入胚囊。用微量注射器將含目的基因的DNA溶液直接注入子房中；操作方式：第三步：將目的基因?qū)胧荏w細胞導(dǎo)入植物細胞：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化：目的基因進入受體細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程。農(nóng)桿菌：一種在土壤中生活的微生物，能在自然條件下侵染雙子葉植物和裸子植物，對大多數(shù)單子葉植物沒有侵染能力。(隨著轉(zhuǎn)化方法的突破，用農(nóng)桿菌侵染水稻、玉米等多種單子葉植物也取得了成功。)第三步：將目的基因?qū)胧荏w細胞導(dǎo)入植物細胞：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法第三步：將目的基因?qū)胧荏w細胞導(dǎo)入植物細胞：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化原理：農(nóng)桿菌細胞內(nèi)含有

，當它侵染植物細胞時，Ti質(zhì)粒的________可轉(zhuǎn)移至被侵染的細胞，并且將其整合到該細胞的

。T-DNA染色體DNA上Ti質(zhì)粒第三步：將目的基因?qū)胧荏w細胞導(dǎo)入植物細胞：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化過程：構(gòu)建導(dǎo)入目的基因插入植物細胞染色體DNA上表達新性狀轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒目的基因表達載體植物細胞第一次拼接第二次拼接第一次導(dǎo)入第二次導(dǎo)入第三步：將目的基因?qū)胧荏w細胞導(dǎo)入植物細胞：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法操作方式：方法一：可以將新鮮的從葉片上取下的圓形小片與農(nóng)桿菌共培養(yǎng)，然后篩選轉(zhuǎn)化細胞，并再生成植株；方法二：將花序直接浸沒在含有農(nóng)桿菌的溶液中一段時間，然后培養(yǎng)植株并獲得種子，再進行篩選、鑒定等。第三步：將目的基因?qū)胧荏w細胞導(dǎo)入微生物細胞：Ca2+處理法轉(zhuǎn)化原理：Ca2+

處理大腸桿菌細胞，可使細胞處于一種

的生理狀態(tài)。能吸收周圍環(huán)境中DNA分子轉(zhuǎn)化過程：Ca2+處理細胞感受態(tài)細胞表達載體與感受態(tài)細胞混合感受態(tài)細胞吸收DNA分子真核生物蛋白質(zhì)編碼基因?qū)朐思毎墚a(chǎn)生目標蛋白質(zhì)嗎？要如何處理？不能，應(yīng)取目標蛋白質(zhì)的mRNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA后，構(gòu)建表達載體并導(dǎo)入原核細胞內(nèi)才能正確表達蛋白質(zhì)。第三步：將目的基因?qū)胧荏w細胞導(dǎo)入動物細胞：顯微注射法目的基因表達載體提純?nèi)÷眩ㄊ芫眩╋@微注射受精卵發(fā)育具有新性狀的動物操作過程：為什么選擇受精卵細胞作為受體細胞？受精卵個體大，易操作；受精卵全能性高，易培養(yǎng)成完整個體。第四步：目的基因的檢測與鑒定目的基因插入位點為得到能產(chǎn)生人胰島素的大腸桿菌，現(xiàn)設(shè)計獲得基因表達載體如圖。如何獲得能在大腸桿菌內(nèi)正常表達的人胰島素基因。從人體胰島B細胞獲得胰島素mRNA，逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA，RCR擴增得到大量目的基因。使用什么樣的限制酶處理目的基因和質(zhì)粒，能得到更多能正確連接的表達載體。使用MunI和SalI兩種限制酶同時處理目的基因和質(zhì)粒，再用連接酶連接。第四步：目的基因的檢測與鑒定設(shè)計一個合適的選擇培養(yǎng)基，篩選得到成功轉(zhuǎn)入了基因表達載體的大腸桿菌細胞。目的基因插入位點已知，β半乳糖苷酶可分解無色的X-gal并產(chǎn)生藍色的產(chǎn)物，使菌落呈現(xiàn)藍色，反之呈白色。將受體細胞與基因表達載體混合培養(yǎng)一段時間后，置于添加了氨芐青霉素和X-gal的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，待長出菌落后選擇白色的菌落，作為工程菌生產(chǎn)人胰島素。第四步：目的基因的檢測與鑒定導(dǎo)入重組質(zhì)粒導(dǎo)入原質(zhì)粒導(dǎo)入目的基因未導(dǎo)入成功白色活菌藍色活菌死亡死亡載體表型選擇第四步：目的基因的檢測與鑒定分子水平檢測個體水平檢測抗原-抗體雜交技術(shù)抗蟲或抗病接種實驗?zāi)康幕蚴欠駥?dǎo)入（DNA）目的基因是否轉(zhuǎn)錄（mRNA）目的基因是否翻譯（蛋白質(zhì)）性狀是否體現(xiàn)PCR等技術(shù)標記基因可以輔助對受體細胞進行了篩選，為什么基因工程的第四步還要對目的基因進行檢測和鑒定？對于細菌而言，含抗生素的選擇培養(yǎng)基上能生長的細菌可能導(dǎo)入了基因表達載體，也可能是導(dǎo)入了未插入目的基因的空載體。即便導(dǎo)入了基因表達載體，但是不清楚目的基因插入位置、方向等是否正確，能否正確表達，因此也需要在轉(zhuǎn)錄和翻譯以及個體水平上進行檢測和鑒定。目的基因檢測鑒定方法第四步：目的基因的檢測與鑒定分子水平檢測：目的基因是否導(dǎo)入轉(zhuǎn)基因棉花提取DNAPCR如：檢測棉花染色體DNA上是否存在Bt基因瓊脂糖凝膠電泳分子水平檢測：目的基因是否轉(zhuǎn)錄如：檢測棉花Bt基因是否翻譯出mRNA轉(zhuǎn)基因棉花提取mRNA逆轉(zhuǎn)錄cDNA瓊脂糖凝膠電泳對應(yīng)引物PCR擴增第四步：目的基因的檢測與鑒定分子水平檢測：目的基因是否導(dǎo)入如：檢測棉花染色體DNA上是否存在Bt基因分子水平檢測：目的基因是否轉(zhuǎn)錄如：檢測棉花Bt基因是否翻譯出mRNA轉(zhuǎn)基因棉花目的基因DNA（單鏈）探針DNA-DNA雜交帶/DNA-RNA雜交帶堿基互補配對第四步：目的基因的檢測與鑒定注射小鼠體內(nèi)第四步：目的基因的檢測與鑒定分子水平檢測：目的基因是否翻譯如：檢測棉花檢測Bt基因是否翻譯成Bt抗蟲蛋白蘇云金芽孢桿菌提取Bt毒蛋白抗體標記抗體抗原抗體雜交提取蛋白電泳分離脫分化抗原抗體特異性結(jié)合第四步：目的基因的檢測與鑒定個體水平檢測：性狀是否體現(xiàn)轉(zhuǎn)基因生物鑒定方法成功標志抗蟲植物抗病毒（菌）植物抗鹽植物抗除草劑植物獲取目的基因產(chǎn)物的轉(zhuǎn)基因生物飼喂害蟲（抗蟲接種實驗）害蟲死亡病毒（菌）接種實驗未染病鹽水澆灌正常生長噴灑除草劑正常生長提取細胞產(chǎn)物與天然產(chǎn)品進行功能活性比較功能、活性正常基因工程的基本操作程序目的基因的篩選和獲取-前提利用PCR獲取和擴增人工合成構(gòu)建基因表達載體-核心目的基因、啟動子、終止子、標記基因?qū)⒛康幕驅(qū)胧荏w細胞-關(guān)鍵農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(植物)顯微注射法(動物)感受態(tài)細胞轉(zhuǎn)化法(微生物);目的基因的檢測與鑒定-保證分子檢測：是否插入、轉(zhuǎn)錄、翻譯個體水平：是否具有抗性以及抗性強度等。到社會中去面臨棉鈴蟲的危害，有抗蟲棉是否一勞永逸、高枕無憂？如何減緩棉鈴蟲抗性產(chǎn)生？并不是，在抗蟲棉持續(xù)的篩選環(huán)境下，一旦出現(xiàn)了有抗性的棉鈴蟲個體，其抗性會快速在種群中擴展開，抗蟲棉失去實際的抗蟲特性。基因策略：分子水平提高抗蟲棉的抗蟲性和抗蟲持久性。如轉(zhuǎn)入多個殺蟲基因、構(gòu)建組織特異性表達結(jié)構(gòu)、提高殺蟲基因表達量等。田間策略：種植過程設(shè)計專用的庇護所，即為少部分害蟲提供正常的取食環(huán)境，始終保持一定的敏感目標害蟲群體。宏觀調(diào)控策略：分區(qū)種植，加強抗性監(jiān)測，進行嚴格的安全性評價等。探究·實踐DNA片段的擴增和電泳鑒定實驗原理：利用PCR在體外進行DNA片段擴增①

PCR利用了DNA的________原理，通過___________來控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合，PCR儀實質(zhì)上就是一臺能夠_______________的儀器，一次PCR一般要經(jīng)歷_____次循環(huán)；②

PCR擴增DNA片段還利用了______________的原理；熱變性調(diào)節(jié)溫度自動調(diào)控溫度30DNA半保留復(fù)制探究·實踐DNA片段的擴增和電泳鑒定實驗原理：DNA片段電泳鑒定①

DNA分子具有______________，在一定的_____下，這些基團可以帶上正電荷或負電荷，在______的作用下，這些__________會向著__________________的電極移動，這個過程就是_______；可解離的基團pH電場帶電分子電泳與它所帶電荷相反堿性條件下帶負電荷從電泳槽負極向正極移動探究·實踐DNA片段的擴增和電泳鑒定實驗原理：DNA片段電泳鑒定②

凝膠中DNA分子遷移速率與___________、_______________和_____等有關(guān)③

凝膠中的DNA分子通過______，可以在波長為_________的________下被檢測出來。凝膠的濃度染色300nm紫外燈DNA分子的大小構(gòu)象大分子小分子探究·實踐DNA片段的擴增和電泳鑒定實驗?zāi)康模翰牧嫌镁撸孩?/p>

了解PCR和電泳鑒定的基本原理。②

嘗試進行PCR的基本操作，并用電泳鑒定PCR的產(chǎn)物。儀器用具：PCR儀、微量離心管、微量移液器、一次性吸液槍頭、電泳裝置（包括電泳儀電泳槽等）材料：4種脫氧核苷酸的等量混合液、2種引物、DNA聚合酶、模板DNA、擴增緩沖液、無菌水、電泳緩沖液、凝膠載樣緩沖液、瓊脂糖和核酸染料等。探究·實踐DNA片段的擴增和電泳鑒定實驗步驟：利用PCR在體外進行DNA片段擴增移液離心反應(yīng)微量移液器PCR反應(yīng)體系配方或PCR試劑盒的說明書微量離心管離心10s，使反應(yīng)液集中在離心管的底部（提高反應(yīng)速率）設(shè)置PCR儀循環(huán)程序放入微量離心管反應(yīng)探究·實踐DNA片段的擴增和電泳鑒定實驗步驟：DNA片段電泳鑒定配制瓊脂糖溶液根據(jù)待分離DNA片段的大小,使用電泳緩沖液配制質(zhì)量體積比0.8%～1.2%瓊脂糖溶液沸水浴或微波爐內(nèi)加熱至瓊脂糖熔化稍冷卻加入核酸染料探究·實踐DNA片段的擴增和電泳鑒定實驗步驟：DNA片段電泳鑒定制備凝膠溫?zé)岬沫傊侨芤旱谷肽＞卟迦胧嶙有纬杉訕涌啄z溶液完全凝固拔出梳子取出凝膠放入電泳槽內(nèi)電泳緩沖液加入電泳槽沒過凝膠1mm探究·實踐DNA片段的擴增和電泳鑒定實驗步驟：DNA片段電泳鑒定加樣混合PCR產(chǎn)物與凝膠載樣緩沖液（含指示劑）微量移液器混合液注入凝膠加樣孔內(nèi)一個加樣孔加入標準參照物(分子大小)據(jù)陰陽極距離設(shè)定1～5V/cm電壓指示劑前沿近凝膠邊緣停止電泳電泳探究·實踐DNA片段的擴增和電泳鑒定實驗步驟：DNA片段電泳鑒