第九章甾體類化合物甾體類化合物依-17位取代基團得不同,可分為:

類型C17側(cè)鏈A/BB/CC/DC21甾類C2H5衍生物反反順強心苷類不飽和內(nèi)酯環(huán)順\反反順甾體皂苷類含氧螺雜環(huán)順\反反反植物甾醇8~10個碳原子烴類順\反反反昆蟲變態(tài)激素8~10個碳原子含氧烴類順反反膽汁酸類戊酸順反反強心苷類

含義:就是指存在于植物體內(nèi)得一類對心臟具有顯著生物活性得甾體苷類化合物。一、結(jié)構(gòu)與分類(一)苷元部分:依C17-位上連接內(nèi)酯環(huán)大小得不同

強心甾烯

海蔥甾烯(蟾蜍甾二烯)3β-OH14β-OH3β-OH14β-OH甲型強心苷元乙型強心苷元甲型強心苷乙型強心苷3-位連接糖3-位連接糖(二)糖部分

糖得類型a-OH糖a-去氧糖五碳醛糖2、6-二去氧糖六碳醛糖2、6-二去氧糖甲醚6-去氧糖6-去氧糖甲醚依直接與苷元相連得糖得種類I型苷元-(2、6-二去氧糖)Χ-(D-葡萄糖)УII型苷元-(6-去氧糖)Χ-(D-葡萄糖)УIII型苷元-(D-葡萄糖)二、強心苷得理化性質(zhì)1、性狀大多為無色結(jié)晶或無定形粉末。具有旋光性。味苦,對粘膜有刺激性。2、溶解性水甲醇、乙醇醋酸乙酯、含水氯仿、氯仿-甲醇乙醚、苯、石油醚原生苷次生苷+S水++微溶可溶-難溶--3、脫水反應(yīng)強心苷用混合強酸(3~5%鹽酸)水解時,苷元上羥基(C14-OH,C5-OH更容易)與鄰位上得氫脫去水分子得反應(yīng)。屬于水解反應(yīng)得副反應(yīng),應(yīng)注意避免。4、水解反應(yīng)反應(yīng)類型反應(yīng)條件水解特點用途酸水解溫和酸水解0、02~0、05mol/LHCI含水醇短時加熱苷元與a-去氧糖及a-去氧糖與a-去氧糖之間得苷鍵開裂I型強心苷得水解苷元、a-去氧糖雙糖、三糖I型R—O—a-去氧糖—a-去氧糖—glc強烈酸水解3~5%HCI所有苷鍵斷裂(I)、II、III型強心苷得水解延長加熱時間苷元和各種單糖或加壓但易產(chǎn)生脫水苷元I型苷元-(2、6-二去氧糖)Χ-(D-葡萄糖)УII型苷元-(6-去氧糖)Χ-(D-葡萄糖)УIII型苷元-(D-葡萄糖)Χ

氯化氫-丙酮法II型強心苷得水解1%HCI丙酮溶液原生苷元和糖衍生物20℃兩周9大家應(yīng)該也有點累了，稍作休息大家有疑問的，可以詢問和交流條件溫和(水、36℃左右、24hr)、專屬性強I、II型次生苷和葡萄糖植物體內(nèi)只有水解葡萄糖得酶、III型苷元、葡萄糖

I型苷元-(2、6-二去氧糖)Χ-(D-葡萄糖)УII型苷元-(6-去氧糖)Χ-(D-葡萄糖)УIII型苷元-(D-葡萄糖)Χ酶水解堿水解?；鶅?nèi)酯環(huán)a-去氧糖苷元a-羥基糖NaHCO3+---Ca(OH)2+++-NaOH++++(反應(yīng)產(chǎn)物與條件有關(guān))水溶液中,內(nèi)酯環(huán)開環(huán),加酸后環(huán)和。醇溶液中電子轉(zhuǎn)移、雙鍵移位加成反應(yīng)皂化開環(huán)甲型強心苷C22活性亞甲基內(nèi)酯型異構(gòu)化苷開鏈型異構(gòu)化苷與活性亞甲基試劑反應(yīng)(用于甲型和乙型強心苷鑒別)5、顯色反應(yīng)

按作用部位分:

作用于五元不飽和內(nèi)酯環(huán)1、Legal反應(yīng)2、Kedde反應(yīng)、Raymond反應(yīng)、Baljet反應(yīng)用于甲型與乙型強心苷得鑒別作用于甾核1、醋酐-濃硫酸(L-B)反應(yīng)2、Salkowski(氯仿-濃硫酸)反應(yīng)3、三氯醋酸-氯胺T(Rosenheim)反應(yīng)4、三氯化銻(五氯化銻)反應(yīng)作用于a-去氧糖Keller-Kiliani(K-K)反應(yīng)2、對二甲氨基苯甲醛反應(yīng)3、噸氫醇反應(yīng)4、過碘酸-對硝基苯胺反應(yīng)用于I型與II、III型強心苷得鑒別三、強心苷得提取分離原料強心苷提取分離比較困難:1、含強心苷成分比較復(fù)雜,含量較低,2、強心苷為多糖苷,常與多糖、皂苷、色素、鞣質(zhì)等性質(zhì)相近成分共存,3、共存酶得存在及酸、堿等,易造成強心苷得水解,使成分復(fù)雜化。提取溶劑法(相似者相溶原則):原生苷甲醇、乙醇次生苷乙醚、氯仿、氯仿-甲醇混合溶劑常用提取溶劑:甲醇、70%乙醇(提取效率高;能使酶破壞失活)純化溶劑法:油脂類雜質(zhì)(種子類藥材):壓榨法或石油醚脫脂(原料/醇提濃縮液)葉綠素(地上部分藥材):靜置析膠法(醇提液濃縮至適當醇濃度靜置)鉛鹽法:沉淀酚酸類雜質(zhì)(鞣質(zhì)等),應(yīng)注意調(diào)整含醇量,減少強心苷得損失注意某些強心苷得脫?；磻?yīng)吸附法:活性炭吸附除去葉綠素等脂溶性雜質(zhì)氧化鋁吸附除去糖類、水溶性色素、皂苷等,注意調(diào)整醇濃度分離兩相溶劑萃取法:依分配系數(shù)差異(K)逆流分流法:依分配系數(shù)差異(K)液滴逆流分溶法(DCCC):依分配系數(shù)差異(K)色譜分離法:對親脂性苷(單糖苷、次生苷、苷元):吸附原理對弱親脂性苷(原生苷):分配原理四、強心苷得波譜特征(一)紫外光譜aβ甲型強心苷乙型強心苷五元不飽和內(nèi)酯環(huán)六元不飽和內(nèi)酯環(huán)△aβ-γ內(nèi)酯△aβ、γδ-δ內(nèi)酯λmax220nm(lg4、34)λmax295~300nm(lg3、93)用于甲型與乙型強心苷及苷元得鑒別(二)紅外光譜強心苷在1800~1700cm-1產(chǎn)生特征性兩個羰基吸收峰,甲型乙型高波數(shù)區(qū)向低波數(shù)移動(多一個雙鍵,分子得共振結(jié)構(gòu)使得-C+-O–比較穩(wěn)定,依據(jù)虎克定律)例如:3-乙酰毛花洋地黃毒苷元1738cm-1(乙酰羰基)嚏根草苷元1756cm-1(內(nèi)酯環(huán)正常羰基吸收峰)1718cm-11783cm-1(內(nèi)酯環(huán)非正常羰基吸收)1740cm-1極性溶劑中減弱或消失△40cm-1aβ甲型強心苷乙型強心苷五元不飽和內(nèi)酯環(huán)六元不飽和內(nèi)酯環(huán)△aβ-γ內(nèi)酯△aβ、γδ-δ內(nèi)酯UVλmax220nm(lg4、34)295~300nm(lg3、93)IR高波數(shù)區(qū)低波數(shù)區(qū)△40cm-1用于甲型與乙型強心苷得區(qū)別aβ飽和內(nèi)酯環(huán)羰基吸收峰1786cm-1aβ不飽和內(nèi)酯環(huán)羰基吸收峰1756cm-1aβγδ-不飽和內(nèi)酯環(huán)羰基吸收峰1718cm-1羰基共軛程度增大,皂苷類

經(jīng)典含義----存在于植物體內(nèi)一類比較復(fù)雜得苷類化合物。她得水溶液易引起肥皂樣泡沫,且多數(shù)具有溶血等特性,皂苷得這些物理及生物學性質(zhì)構(gòu)成了皂苷得經(jīng)典含義?，F(xiàn)代含義----由螺甾烷及其生源途徑相似得甾族化合物得低聚糖苷或三萜類化合物得低聚糖苷。因此,皂苷可以分為甾體皂苷和三萜皂苷兩大類。皂苷得分類及結(jié)構(gòu)特點:皂苷甾體皂苷三萜皂苷螺甾烷醇型:25L、25S(C25-甲基直立a鍵、為β型)異螺甾烷醇型:25D25R(C25-甲基平伏e鍵、為a型)變形螺甾烷醇型:F環(huán)變形為呋喃甾烷(五元含氧環(huán))呋甾烷型:F環(huán)裂環(huán),C26-OH多與葡萄糖相連成苷五環(huán)三萜皂苷四環(huán)三萜皂苷β-香樹脂醇型()a-香樹脂醇型()羽扇豆醇型達瑪烷型羊毛脂甾烷型甾體皂苷得結(jié)構(gòu)特點:甾體皂苷=甾體皂苷元+糖(a-羥基糖)1、由A、B、C、D環(huán)(甾核)與E、F環(huán)以縮酮形式相連接組成得螺甾烷結(jié)構(gòu)2、A/B/C/D環(huán)稠和方式:順(反)、反、反3、C25得絕對構(gòu)型依其上甲基得取向不同有兩種C25-甲基直立a鍵、為β型L型(25S25L25βF)平伏e鍵、為a型D型(25R25D25aF)螺甾烷型異螺甾烷型4、取代基團:OH多在C3-位或其她位置羰基多在C12-位雙鍵多在△5△9(11)甾體皂苷不含羧基,呈中性,故稱為中性皂苷。異螺甾烷醇型螺甾烷醇型呋甾烷型變形螺甾烷醇型β-香樹脂醇型a-香樹脂醇型羽扇豆醇型羊毛脂甾烷型達瑪烷二、皂苷得性質(zhì)

1、性狀皂苷大多為無色或乳白色無定形粉末(低聚糖苷,極性大,分子量大)皂苷元(極性小)大多有完好結(jié)晶。皂苷多數(shù)具有苦而辛辣味,對粘膜有強烈刺激性,尤其鼻粘膜,易引起噴嚏。皂苷大多具引濕性。2、溶解性皂苷(低聚糖苷,極性大)易于水、熱甲醇、乙醇、含水丁醇,難于丙酮、乙醚次生皂苷(極性降低)易于醇、丙酮、乙酸乙酯皂苷元(極性小)易于石油醚、乙醚、苯、氯仿,難于水皂苷得助溶作用(表面活性劑作用),可以增加其她成分在水中得溶解度。3、與膽甾醇得沉淀反應(yīng)皂苷與甾醇(多為膽甾醇)形成得分子復(fù)合物沉淀反應(yīng)。生成得分子復(fù)合物沉淀用乙醚回流提取時,膽甾醇可溶于乙醚,皂苷不溶。甾體皂苷與膽甾醇形成沉淀得溶度積小,因此,可用于甾體皂苷得分離純化。4、發(fā)泡性皂苷得表面活性劑作用,其水溶液在劇烈振搖時,可以產(chǎn)生大量、持久得泡沫,而且不因加熱而消失。5、溶血性皂苷有使紅細胞破裂得作用。溶血能力得大小用溶血指數(shù)表示。溶血指數(shù)就是指皂苷對同一動物來源得紅細胞稀懸浮液,在同一等滲條件、緩沖條件及恒溫下造成完全溶血得最低濃度。原因在于皂苷對膽甾醇有強得親和力,可形成分子復(fù)合物,作用于紅細胞表面得類脂質(zhì)而破壞血細胞,表現(xiàn)強得溶血作用。同時,與膽甾醇得沉淀作用可用于解除皂苷得溶血作用。6、與金屬鹽類得沉淀反應(yīng)三萜皂苷可被中性鹽如醋酸鉛沉淀,甾體皂苷可被堿式鹽或堿,如堿式醋酸鉛、氫氧化鋇等沉淀。三、皂苷及皂苷元得提取、分離(一)皂苷得提取分離原料以醇提較好,回收乙醇,加適量水稀釋提取水溶液(1)正丁醇萃取法:必要時石油醚脫脂,正丁醇萃取,減壓回收正丁醇(2)大孔樹脂純化法:水溶液過柱,少量水洗(糖分等),稀醇洗脫,蒸干純化粗總皂苷乙醚(丙酮)、乙醚-丙酮沉淀法:粗品溶于少量甲醇,滴加乙醚等,混勻,皂苷及可析出,反復(fù)幾次,可提高皂苷得純度膽甾醇沉淀法:主要用于甾體皂苷得分離純化精制較純得皂苷分配原理為佳(皂苷極性大)硅膠分配柱色譜:氯仿-甲醇-水等梯度洗脫或水飽和正丁醇洗脫制備薄層色譜分離:反相色譜分離:反相鍵合相硅膠RP18、RP-8、RP-2,甲醇-水、乙氫-水SephadexLH-20:甲醇洗脫液滴逆流色譜法:難分離皂苷,制備成衍生物(乙酰化或甲酯),硅膠柱色譜分離鉛鹽沉淀法:中性和酸性皂苷得分離分離皂苷單體(實際中,需要多種方法配合應(yīng)用)(二)皂苷元得提取、分離方法1、原料預(yù)發(fā)酵水,36℃保溫24~48小時藥渣酸水解3%硫酸加熱水解3~6小時,過濾,水洗,干燥藥渣提取石油醚、汽油或甲苯連續(xù)回流4~6小時石油醚提取液回收適量回收,放置析晶,抽濾皂苷元粗品重結(jié)晶乙醇或丙酮處理,活性炭脫色皂苷元精品方法2、原料提取按上述提取皂苷工藝進行皂苷水解常規(guī)酸水解水解液萃取苯、氯仿等有機溶劑萃取液(苯、氯仿)回收皂苷元皂苷元得分離:(1)吉拉爾試劑法:羰基與非羰基皂苷元得分離(2)柱色譜分離法—吸附原理—硅膠、氧化鋁苯-氯仿、苯-甲醇、氯仿-甲醇不同比例洗脫注:甾體皂苷---主要作為合成激素等得原料,故以提取苷元較為實用。三萜皂苷—為許多中藥得有效活性部位,故以提取皂苷為主。四、皂苷得檢識及結(jié)構(gòu)測定(一)皂苷得化學檢識—顏色反應(yīng)試劑類型鑒別特點鑒別意義醋酐-濃硫酸反應(yīng)甾體皂苷黃紅紫藍

三萜皂苷最后顯綠色用于兩類皂苷得區(qū)別

五氯化銻反應(yīng)(60~70℃加熱)藍、灰藍、灰紫色可在濾紙上進行三氯醋酸反應(yīng)甾體皂苷加熱60℃顯色三萜皂苷加熱100℃顯色可在濾紙上進行用于兩類皂苷得區(qū)別氯仿濃硫酸反應(yīng)硫酸層---紅或藍色,氯仿層---綠色熒光鹽酸-對二甲氨基苯甲醛(Ehrlich試劑,簡稱E試劑)螺甾烷類不顯色呋甾烷類顯紅色茴香醛-硫酸(Anisaldehyde,簡稱A試劑)螺甾烷類顯黃色呋甾烷類顯黃色(F環(huán)裂環(huán))可用于兩類皂苷得區(qū)別(二)波譜特征1、紫外特征(UV)飽和得甾體皂苷元紫外區(qū)無吸收孤立雙鍵205~225nm(ε900)羰基285nm(ε500)a、β-不飽和酮基240nm(ε11000)飽和得