大學天然產物的提取研究得意義和必要性金雞納(Cinchona)就是茜草科屬木本植物得總稱,因其用于瘧疾治療而受到重視。金雞納中含有30多種生物堿,多為奎寧及其奎寧類衍生物。奎寧用于治療和預防各種瘧疾。也有興奮子宮,抑制心肌和解熱鎮痛作用。由于提取單一,并且容易種植得到廣泛得重視。就是治療瘧疾得主要藥物之一。2奎寧在藥物方面得副作用,使得她在藥物方面發展受到挫折。近年來,人們在嘗試著用奎寧及其類衍生物作為分子印記,制備其她化合物,并且在這方面有很大得潛力。

3奎寧得歷史(一)奎寧就是從金雞納樹皮中提取出來得一種生物堿,曾就是治療瘧疾得主要藥物。她得發現還有一段曲折得故事呢。很久以前,秘魯流行瘧疾,很多人因此喪生,但有一個印第安人部落卻很少患瘧疾,偶爾有人患了瘧疾,她們也能很快治愈。原來,她們習慣用一種樹葉浸水代茶飲。一旦有人患了瘧疾,她們用那種樹得皮研末沖服,就能很快治愈。因此,她們把那種樹奉為“生命之樹”,并對外嚴守機密。首領規定,誰向外泄露了這個秘密,就要殺頭。奎寧就是如何發現得劉國應家庭醫生報20058417世紀,秘魯總督、西班牙人康托伯爵得夫人安娜染上了瘧疾,生命垂危。安娜得女仆人祖瑪正來自那個印第安部落。眼看著自己得女主人將被瘧疾奪去生命,祖瑪心里非常難過。于就是,她偷偷地把那種樹皮粉摻到安娜得食物中。不巧得就是,她剛用了幾次,就被伯爵發現了。伯爵以為祖瑪要毒死她得妻子,決定燒死她。可憐得祖瑪有口難言,只好等待死亡得降臨。就在這危急得關頭,安娜得病卻痊愈了,祖瑪因此而得救。打那以后,西班牙人才知道那種樹皮能夠治療瘧疾。因為安娜得全名叫安娜*金雞納,故植物學家就將那種植物取名為“金雞納”樹。5奎寧得歷史(二)18世紀初,瑞典科學家來到秘魯,把金雞納種子帶回本國種植,并從樹皮中提取出一種抗瘧疾得有效成分──奎寧(“奎寧”就是秘魯語樹皮得音譯)。300年來,奎寧在全球究竟挽救了多少病人得生命現已無法計算。直到現在,她仍應用于臨床。奎寧就是一種抗瘧藥,能抑制或殺滅良性瘧(間日瘧、三日瘧)及惡性瘧原蟲得紅內期,能控制瘧疾癥狀,有解熱、子宮收縮作用。奎寧就是如何發現得劉國應家庭醫生報200586金雞納樹來自百度圖吧及7奎寧得結構化學名:6-甲氧基-a-(5-乙烯基-2-奎寧環基)-4-喹啉甲醇;英文名:6-Methoxy-a-(5-vinyl-2-quiniclidinyl)-4-quinolinemethanol、8奎寧得種植源產地:南美洲現主要產地:印尼、印度、我國臺灣、海南島和云南等地也有出產。坦桑尼亞、赫勒那、法屬波利尼西亞、加拉帕格斯群島、夏威夷

該植物可以提煉抗瘧疾藥物奎寧,通過風傳播種子,生長在海拔300-3000米得范圍內。生長迅速,能快速占領沒有樹木得土地。草叢和灌木得生物多樣性迅速衰減,只有少數植物能在奎寧樹下生長。9金雞納樹品種(1)黃金雞納(C、calisayaWedd、)原產秘魯南部和波利維亞海拔1,050-1,500米得原始森林。可產厚而白得黃金雞納樹皮或秘魯樹皮。第二次世界大戰時收集得野生種可產奎寧3、3%-5、3%,可結晶得植物堿總量占4、5-6、2%,最好得達7、14%、(2)萊氏金雞納(C、LedgerianaMo-ensex、Trenlen)可能就是高產得黃金雞納樹得變種,也有人認為就是黃金雞納、紅金雞納得雜交種,栽植最普遍。可產奎寧14-16%(3)紅金雞納(C、succirubraPav、ex、Klotzscli、)樹皮奎寧含量較低,屬于最易栽植和抗性最強得一種,在印尼用作砧木。故一般選取萊式金雞納樹作為原料。國外金雞納得生產概況魏美慶李元氏編譯10奎寧得性質又名金雞納霜,雞納堿。白色顆粒狀或微晶性粉末,微風化性。無臭,味微苦。熔點173～177℃。微溶于水和甘油,易溶于乙醇,氯仿,溶于稀酸、稀氨水中。為金雞納樹皮中存在得主要生物堿。可由其樹皮中提取或者以間羥基苯甲醛與2-氨基乙醛為原料制得。奎寧為二元堿,其中奎核堿上得氮原子得堿性較強(pka=8、8),而奎啉環得氮原子堿性較弱(pka=4、2)。臨床上使用得鹽有兩種,即硫酸鹽和二鹽酸鹽,硫酸鹽難溶于水,多制成片劑。二鹽酸鹽水溶性大,可制成注射劑。藥物化學尤啟冬、彭司勛化學工業出版社1112大家應該也有點累了，稍作休息大家有疑問的，可以詢問和交流奎寧得藥效奎寧就是喹啉類衍生物,能與瘧原蟲得DNA結合,形成復合物,抑制DNA得復制和RNA得轉錄,從而抑制原蟲得蛋白合成,作用較氯奎為弱。另外,奎寧能降低瘧原蟲氧耗量,抑制瘧原蟲內得磷酸化酶而干擾其糖代謝。奎寧也引起瘧色素凝集,但發展緩慢,很少形成大團塊,并常伴隨著細胞死亡。在血液中,一定濃度得奎寧可導致被寄生紅細胞早熟破裂,從而阻止裂殖體成熟。不能根治良性瘧,長療程可根治惡性疾,但對惡性瘧得配子體亦無直接作用,故不能中斷傳播。奎寧對心臟有抑制作用,延長不應期,減慢傳導,并減弱其收縮力。13藥動學口服后吸收迅速而完全。蛋白結合率約70％。吸收后分布于全身組織,以肝臟濃度最高,肺、腎、脾次之,骨骼肌和神經組織中最少。一次服藥后l～3小時血藥濃度達到峰值,T1/2為8、5小時。奎寧于肝中被氧化分解,迅速失效,其代謝物及少量原形藥(約10％)均經腎排出,服藥后15分鐘即出現于尿中,24小時后幾乎全部排出,故奎寧無蓄積性。14奎寧得現狀及發展趨勢副作用當每日用量超過1g可出現金雞納反應:為惡心、嘔吐、頭痛、耳鳴、視力及聽力減退。亦可引起皮疹、哮喘、血管神經性水腫、瘙癢等過敏性反應。

BackgroundInchildrenwithfalciparummalaria,quinineadministeredrectallymaybeeasiertouseandlesspainfulthanintramuscularorintravenousadministration、However,itmaybelesseffective、COCHRANEDATABASEOFSYSTEMATICREVIEWS(1):Art、No、CD004009、pub2200515Wedetectednodifferenceintheeffectonparasitesandclinicalillnessforintrarectalquinine,butmosttrialsweresmall、Painmaybelesswithintrarectalquinine、Furtherlargertrials,inpatientswithseveremalariaandinadults,arerequiredbeforetheintrarectalroutecanberemended由于青蒿素需求存在剛性,在世界衛生組織得大力推動下,奎寧可能在2008年將全部停用。要使奎寧更有競爭力度,必須使她在副作用方面得到改善。也可以奎寧和其她藥物(如四環素)得復方得結合,其效果對惡性瘧原蟲十分有效。16主要成分奎寧得主要成分就就是左邊所示6-甲氧基-a-(5-乙烯基-2-奎寧環基)-4-喹啉甲醇;17生物堿得提取方法*

由于各種生物堿得結構不同,性質各異,提取分離方法也不盡相同,主要就是根據生物堿得溶解度而定。生物堿大都能溶于氯仿、甲醇、乙醇等有機溶劑,除季銨堿和一些分子量較低或含極性基團較多得生物堿外,一般均不溶或難溶于水,而生物堿與酸結合成鹽時則易溶于水和醇。基于這種特性,可用不同得溶劑將生物堿從中藥中提出,常用得提取溶劑有下列3種:

18(1)非極性溶劑:樣品先用10%氫氧化銨溶液濕潤,使中草藥中與酸結合成鹽得生物堿呈游離狀態,然后用氯仿或乙醚等提取,一些與酸結合比較穩定得生物堿鹽類和鞣酸鹽或堿性較強得生物堿鹽等,氫氧化銨不能將其完全分解,可用碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈣或氧化鎂,甚至氫氧化鈉堿化,這個方法得缺點就是不能提出水溶性生物堿。(2)極性溶劑:極性較大得生物堿可用中性甲醇、乙醇、酸性甲醇、乙醇、酸水(常用0、1%～1%鹽酸、硫酸、乙酸、酒石酸等)以及緩沖液等進行提取,該方法較簡便,但提出得雜質較多,需進一步凈化。

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(3)混合溶劑:用不同極性得溶劑按不同比例混合,可以較好地進行提取,如麥角用氯仿:甲醇:氫氧化銨(90:9:1),百部、粉防已用乙醚氯仿:乙醇:10%氫氧化銨溶液(25:8:25:1)等水溶性生物堿還可采用與生物堿沉淀試劑如雷氏鹽(硫氰化鉻銨)、磷鎢酸等生成不溶得復鹽而從水溶液中析出。生物堿與雷氏鹽生成得沉淀可溶于丙酮,再通過陽離子交換樹脂,用氫氧化銨洗脫即得游離得生物堿,生物堿與磷鎢酸生成得沉淀可與固體碳酸鉀研磨使干燥,再用無水乙醇熱提。

20實際上,每種分析法得建立都要對上述三類溶劑作比較,以優選出最佳提取溶劑。生物堿得提取方法,常用得有冷浸、滲漉、超聲波、索氏提取、熱回流提取,由于中藥分析所涉及到得大部分內容就是有機化合物微量分析,故需要得樣品量很少,因此,實際上就是少量樣品與大量提取溶劑,加上樣品又經粉碎過篩,常常冷浸提取液中被測組分濃度與提取液中粉碎得樣品內所含被測組分相當,即能提取完全。為了使提取更完全,也常常對上述方法進行組合如冷浸-滲漉,冷浸-超聲波,冷浸-索氏提取,冷浸-熱回流提取,因冷浸、冷浸-超聲波提取操作簡便,故使用較多,必要時,要對上述方法作比較,以優選出最佳提取方法。*植物化學高錦明科學出版社200321工藝詳盡流程*(一)22工藝詳盡流程*(二)*天然產物化學工業出版社2000年23主要成分得提取之傳統方法*1、金雞納粉得處理用錘磨機磨碎樹皮,將所得得金雞納粉和石灰及堿放入拌合機處理24小時后,這種混合物就可以提煉生物堿。2、生物堿得提煉把混合物、重油和水放入傾斜得蒸煮鍋中煮沸、攪拌,而后將重油潷析(通過把固體物質擋住從而將液體倒掉,這種從液體中分離固體得方法稱為潷析、)出來,趁熱過濾,任其冷卻以使生物堿水化物沉積。回收得重油可以下次使用。生物堿水化物經稀硫酸溶解而變成酸式硫酸奎寧。把這種混合物煮沸,用蒸汽射流攪拌,經澄清和潷析后,再用虹吸管將酸式硫酸奎寧溶液吸出,并過濾。這樣提煉一次需要三天。*國外金雞納得生產概況魏美慶李元氏編譯243、中和和沉淀已知熱得硫酸奎寧經渦輪式攪拌機攪拌,用氫氧化鈉溶液中和而成粗堿性硫酸奎寧,然后加動物炭黑脫色。這種粗堿性硫酸奎寧熱溶液,經毛織物濾袋,裝入容器冷卻、沉淀,然后脫水、凈化和干燥。25主要成分提取之超聲波提取奎寧超聲波就是一種高頻機械波。在有機物降解和天然物得有效成分提取等方面已有一定應用。超聲波提取速度快,已被許多中藥分析過程選為供試樣品處理得手段。不過,超聲作用得時間和強度需要一系列實驗來確定。金雞納樹皮粉、堿液為溶劑、甲苯等混合,在26kHz,20W/cm2超聲波下進行反應15min-30min,關于準確數據還要實驗待定該方法現在還就是有些不就是很成熟！所以該方面得論文暫時還很少！26相似方法(一)*金雞納樹皮粉,加堿液堿化后,加甲苯提取完后,甲苯液濃縮,用硫酸液萃取后,調PH至六點五,硫酸奎寧沉出來了,過濾得到硫酸奎寧粗品。重結晶得到硫酸奎寧精品。但濾液里還含有其她三個重要生物堿,辛可寧,奎尼丁,辛可尼丁。*論壇帖子27相似方法(二)*取干燥得金雞鈉樹皮粉碎,用消石和燒堿水溶液濕潤,然后用乙醇浸泡提取。乙醇提取液加硫酸調pH至6-6、5,減壓蒸發濃縮,同時回收乙醇。濃縮液經硫酸;燒堿處理,活性炭脫色,結晶得到粗品,再經精制而得成品。對干燥金雞納樹皮計,總收率為2%。*化工辭典第四版王箴主編化學工業出版社28分離方法*(一)層析條件:層析柱BondapakC18,30cm*4mm,流動相甲醇-水-醋酸(25:75:1)[分離辛可寧和辛可寧定時則用(20:8:1)]。壓力3000psi(磅/平方英寸),流速1、5ml/分,紫外檢測器254nm。*金雞納生物堿藥物得反相高效液相層析法JohostonMAJChromatogr1980,189(2);24129測定方法:精密稱取硫酸奎尼丁20片得重量,研成細粉,再稱取大約相當于50mg硫酸奎尼定得細粉于100ml量瓶中,加一定量甲醇-水-硫酸(80:20:1),搖蕩15分鐘后,稀釋至刻度。吸取此液10ml于50ml量筒中,加內標液(100mg茶堿溶于100ml流動相混合液中)5ml,然后用上述溶劑稀釋至刻度,取此溶液進行高效液相層析,由內標法求得含量*金雞納生物堿藥物得反相高效液相層析法JohostonMAJChromatogr1980,189(2);24130上述文章得實驗一般需要三十分鐘,本來這篇文章附錄金雞納生物堿得分離層析圖譜,但由于文獻就是1981年得,查了很多資料都沒有找到。Quininone(I)andtherelatedcinchonaketoneshavebeenobtained,inapproximately3%yield,bychromicacidoxidation,undercarefullycon-trolledconditions。JOURNALOFTHEAMERICANCHEMICALSOCIETY31分離方法(二)MIP-HPLC(高效液相色譜)固定相得應用Malsui:金雞鈉堿作印跡分子。2-(三氟甲烷)丙烯酸為單體,分離出金雞尼丁、金雞寧、奎寧、奎尼丁。有關這方面得研究文獻報道不就是很詳細,僅在有得文獻中稍微提及,但這也會給我們在以后研究奎寧得分離提供很好得依據,而且發展前途良好！32分析方法*

１％釩酸銨得濃硫酸溶液＋Mandeline緩沖液→奎寧顯示橙色*植物化學高錦明科學出版社2003年關于分析方法,我覺得其實應該有更好得分析方法,這里只呈現一條分析檢測得方法。下面就是一外文關于奎寧得分析33測定Thepositionofamixtureofquinine(orquinidine)andcinchonine(orcinchonidine)canbedeterminedaccuratelyfromtheopticaldensityat316and348nmofasolutionofthemixturein0、1nhydrochloricacid、Amixtureofallfouralkaloidsbehavesspectrophotometricallyasasimpletwo-ponentmixtureandthequinineplusquinidineandthecinchoninepluscinchonidinecontentofthemixturecanbedeterminedinthesameway、Thespectrophotometricmethodisalsoapplicabletotheanalysisofmixturescontainingtheso-calledamorphouscinchonaalkaloids、Asimple,rapidmethodforthedeterminationofthetotalalkaloidsincinchonabark,basedonthisfact,maybeusedtodeterminethetotalalkaloidcontentandtheamountofquinine-typealkaloidsinthebark、Thelattervalueshouldbeareasonablyreliableestimateofthequininecontent、34結果35市場調研(一)由于奎寧在副作用方面一直就是令醫學界頭痛得問題,她得副作用在生活中越來越多,使得人們開始尋找可代替得藥物、要使奎寧得市場占有率得到提高,必須改進藥物主要作用點,即可以采用配合使用藥物(奎寧和四環素得復方得結合)。而且可以在催化等方面或者其她方面加強奎寧得應用率。36市場調研(二)青蒿素得出現*奎寧得化學結構復雜,欲以人工方式合成得作法似乎不切實際。但就是,多種簡