2025屆遼寧省阜蒙縣第二高級中學高三畢業班聯考（二）生物試題試卷請考生注意：1．請用2B鉛筆將選擇題答案涂填在答題紙相應位置上，請用0．5毫米及以上黑色字跡的鋼筆或簽字筆將主觀題的答案寫在答題紙相應的答題區內。寫在試題卷、草稿紙上均無效。2．答題前，認真閱讀答題紙上的《注意事項》，按規定答題。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．某生態系統中，除分解者外，僅有甲、乙、丙、丁、戊5個種群。調查得知，該生態系統有4個營養級，相鄰營養級之間的能量傳遞效率為3%~24%，且每個種群只處于一個營養級。一年內輸入各種群的能量數值如表所示，表中能量數值的單位相同。下列敘述正確的是（）種群甲乙丙丁戊能量1．562．843．34．485．54A．表中所示的能量總和是流經該生態系統的總能量B．若土壤中含有一定濃度的重金屬鉻，則甲生物比乙生物體內污染物濃度鉻含量低C．該生態系統中第二營養級與第三營養級之間的能量傳遞效率約為6．4%D．該生態系統內實現了物質循環，碳元素在各種群間循環的主要存在形式是CO22．儲存在真核細胞囊泡中的某些分泌蛋白只有在受到特定信號（催分泌劑）剌激時才被分泌到細胞外。下列表示細胞中某種消化酶的“濃縮”和運輸過程，相關推測不合理的是（）A．“濃縮”過程有利于集中釋放分泌蛋白B．催分泌劑作用后，囊泡會與細胞膜融合C．膜的再循環途徑保證了細胞器膜含量的相對穩定D．消化酶分泌到細胞外是依靠細胞膜上的載體的幫助來完成的3．已知Y受體的致效劑S可以顯著降低血液中三酸甘油酯的濃度，從而降低心臟病的危險。現用小鼠作為材料來證明“S的作用是專一性地通過Y受體達成”，下列哪個設計方案是正確的（）A．可以通過活化Y受體的基因使小鼠大量表達Y受體B．可以通過剔除Y受體基因使小鼠不表達Y受體C．在小鼠體內注射大量的S從而增強Y受體的作用D．在小鼠體內注射針對S的抗體從而把血液中的S清除4．研究發現，鷹對不同種群數量的鴿群發起攻擊的成功率是不同的（見下圖），下列說法正確的是（）A．此圖說明捕食者數量會隨著被捕食者數量的增加而增加B．二者為捕食關系，如果鷹的數量下降，鴿的種群數量將持續上升C．此圖說明鷹的捕食量與鴿的種群數量是一種負相關的關系D．鷹的攻擊成功率降低可能是由于鴿群的種內互助及時發現天敵所致5．下列有關“用高倍鏡觀察線粒體和葉綠體”實驗的敘述，正確的是（）A．可用菠菜葉稍帶些葉肉的下表皮觀察葉綠體B．健那綠染液可將活細胞的細胞質染成藍綠色C．可觀察到葉綠體和線粒體都具有雙層膜結構D．可以使用同種材料同時觀察線粒體和葉綠體6．海帶中含有植物生長素（IAA）和脫落酸（ABA）等激素，為研究激素對海帶生長的影響，某研究組開展了系列實驗，實驗結果如圖所示。下列敘述正確的是（）A．海帶增長率與IAA含量呈負相關B．海帶寬度的增長率與ABA含量呈正相關C．兩種激素的變化對海帶長度的影響大于對寬度的影響D．海帶在后期生長緩慢，原因是IAA降低而ABA增高二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）研究小組探究不同濃度的IAA、乙烯利及二者的混合溶液對大豆下胚軸不定根形成的影響，結果如下。組別A組B組C組A0A1A2A3B0B1B2B3C0C1C2C3IAA010501000105010001050100乙烯利00001010101050505050不定根平均數量（條）12213228101928357161936請回答：（1）對大豆的下胚軸進行激素處理時常用浸泡法，這種處理方法對激素濃度和處理時間的要求是____________。（2）A組實驗中IAA對大豆下胚軸生根的作用____________（表現/未表現）出兩重性，判斷的理由是__________。（3）本實驗表明不同濃度的IAA和乙烯利混合溶液共同作用時乙烯對植物不定根形成過程中有促進和抑制兩種相反的調控作用。①支持乙烯對不定根形成有抑制作用的證據是___________；②支持乙烯對不定根形成有促進作用的證據是_____________。（4）進一步研究發現生長素能調控不定根發育的相關基因的表達，說明激素在植物體內起作用的方式是_______________________。8．（10分）已知某種動物灰身（A）對黑身（a）為顯性，有眼（B）對無眼（b）為顯性。控制有眼、無眼的基因位于常染色體上。為了研究A、a與B、b的位置關系，選取一對表現型為灰身有眼的雄性個體和黑身無眼的雌性個體進行雜交實驗，所得F1雌、雄個體中均出現四種表現型：灰身有眼、黑身有眼、灰身無眼、黑身無眼。分析回答問題。（1）如果F1中四種表現型的比例為1：1：1：1，則基因A、a和B、b的遺傳符合________定律；且控制灰身、黑身的基因位于______（填常或x”）染色體上，依據是________________________。若要證明上述推測，可選取F1中______________交配，統計子代雌雄個體的表現型及比例。若只考慮題干中的兩對等位基因，預測其子代所有灰身個體中純合子所占的比例為_____________________________。（2）如果F1的四種表現型中，親本類型偏多，重組類型偏少，則F1同時出現上述四種表現型的原因最可能是________________________________________。9．（10分）下圖1為某地區蘋果種植戶發展生態果園模式圖，圖2是該生態系統內能量流動的示意圖。據圖回答下列問題：（1）該生態果園中的所有生物構成______________，食用菌屬于生態系統成分中的______________，圖1中屬于第二營養級的有______________。（2）果園中花天牛以果樹的花和葉為食，腫腿蜂可以將卵產在花天牛幼蟲的體表，吸取幼蟲的營養，腫腿蜂和花天牛的種間關系是______________。（3）從物質循環角度分析，碳元素在該生物群落內部以______________形式傳遞。（4）圖2中的A代表______________，能量從生產者傳遞到植食動物的效率為______________。（5）與森林生態系統相比較，農業生態系統的抵抗力穩定性較低，主要原因是______________。10．（10分）新型冠狀病毒（2019-nCoV）肺炎疫情，對我國民生健康和經濟造成極大影響。新型冠狀病毒相關的實驗室檢測技術，對新型冠狀病毒的診斷與防控尤為重要。新型冠狀病毒的檢測最常見方法的是熒光定量RT-PCR（逆轉錄聚合酶鏈式反應），RT-PCR的具體過程如圖。回答下列向題：（1）過程Ⅰ和Ⅱ都需要加入緩沖液、原料、酶和引物等，其中加入的酶分別是_______________，________________。（2）RT-PCR過程通過對_____________的控制影響確的活性和DNA分子結構，從而使得整個反應過程有序地進行。（3）過程Ⅱ擬對單鏈cDNA進行n次循環的擴增，理論上需要_______個引物B。（4）新型冠狀病毒的檢測方法還可采用病毒抗原檢測、病毒抗體檢測，這些檢測方法的原理是_____________。檢測到新冠病毒感染者抗體滯后于病毒核酸和抗原的理由是____________________________________，因此__________檢測對傳染性極高的新型冠狀病毒（2019-nCoV）疑似患者早期確診意義不大。11．（15分）蘿卜的蛋白A具有廣泛的抗植物病菌作用，而且對人體沒有影響。我國科學家欲獲得高效表達蛋白A的轉基因大腸桿菌作為微生物農藥，做了相關研究。（1）研究者用相同的_________酶處理蛋白A基因和pET質粒，得到重組質粒，再將重組質粒置于經_________處理的大腸桿菌細胞懸液中，獲得轉基因大腸桿菌。（2）檢測發現，轉入的蛋白A基因在大腸桿菌細胞中表達效率很低，研究者推測不同生物對密碼子具有不同的偏好，因而設計了與蛋白A基因結合的兩對引物（引物B和C中都替換了一個堿基），并按圖2方式依次進行4次PCR擴增，以得到新的蛋白A基因。①這是一種定點的_________技術。②圖2所示的4次PCR應該分別如何選擇圖1中所示的引物？請填寫以下表格（若選用該引物劃“√”，若不選用該引物則劃“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者進一步將含有新蛋白A基因的重組質粒和_________分別導入大腸桿菌，提取培養液中的蛋白質，用_________方法檢測并比較三組受體菌蛋白A的表達產物，判斷新蛋白A基因表達效率是否提高。為檢測表達產物的生物活性，研究者將上述各組表達產物加入到長滿了植物病菌的培養基上，培養一段時間后，比較_________的大小，以確定表達產物的生物活性大小。（4）作為微生物農藥，使用時常噴灑蛋白A基因的發酵產物而不是轉蛋白A基因的大腸桿菌，其優點是_________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、C【解析】

根據相鄰兩個營養級之間能量的傳遞效率為3%～24%以及表格中的數據，可寫出相應的食物網：。【詳解】A、表中生產者固定的太陽能總量，表示流經該生態系統的總能量，A錯誤；B、根據生物富集的特點，有害物質在食物鏈中隨著營養級別的升高含量逐漸升高，若土壤中含有一定濃度的重金屬鉻，則甲生物比乙生物體內污染物濃度鉻含量高，B錯誤；C、該生態系統中第二營養級同化總量是2.8+3.1=21.1，第三營養級同化總量是1.56，故第二營養級與第三營養級之間的能量傳遞效率為1.56÷21.1×34%=6．4%，C正確；D、該生態系統內實現了物質循環，碳元素在各種群間循環的主要存在形式是含碳有機物，D錯誤。故選C。2、D【解析】

分析題圖：圖示表示細胞中某種消化酶的“濃縮”和運輸過程，首先由內質網進行粗步加工，其次由高爾基體進行再加工和分泌，最后由細胞膜胞吐出細胞。【詳解】A、由圖可知，“濃縮"過程有利于集中釋放分泌蛋白，A正確；B、根據題干信息“儲存在真核細胞囊泡中的某些分泌蛋白只有在受到特定信號（催分泌劑）刺激時才被分泌到細胞外”可推知催分泌劑作用后，分泌小泡會與細胞膜融合，B正確；C、膜的再循環途徑保證了細胞器膜的含量相對穩定，C正確；D、消化酶分泌到細胞外的方式是胞吐，不需要載體協助，D錯誤。故選D。3、B【解析】

題意分析：為了證明“專一性”，應該徹底敲除Y受體基因，達到有和無的對照。【詳解】A、活化Y受體的基因來使小鼠大量表達Y受體，增加了Y受體的含量，只是多少的對照不是有無的對照，A錯誤；B、可以通過敲除Y受體基因來使小鼠不表達Y受體，起到了有和無的對照，B正確；C、Y受體的作用是有一定限度的，注射大量的致效劑S只是多少的對照不是有無的對照，C錯誤；D、向老鼠體內注射針對S的抗體從而把血液中的S移除，不能確定S的專一性，D錯誤。故選B。4、D【解析】

據圖分析：（1）當鴿的種群數量為2～10只時，鷹攻擊的成功率為大約75%；（2）當鴿的種群數量為11～50只時，鷹攻擊的成功率為大約40%；（3）當鴿的種群數量為750只時，鷹攻擊的成功率為大約15%。柱狀圖表明隨著鴿的種群數量增加，鷹的攻擊成功率下降，說明種內互助有利于種群的繁衍。【詳解】A、此圖說明鴿的捕食者鷹的數量會隨著被捕食者鴿的增加而減少，A錯誤；B、鷹和鴿的種間關系是捕食，如果鷹的數量下降，鴿的種群數量先增加后減少，之后會趨于相對穩定，B錯誤；C、鴿的種群數量增加，鷹的攻擊成功率下降，說明鷹的攻擊成功率與鴿的種群數量是一種負相關的關系，C錯誤；D、柱狀圖表明隨著鴿的種群數量增加，鷹的攻擊成功率下降，說明鴿群內部存在種內互助，便于及時發現天敵，D正確。故選D。本題考查種間關系和種內關系、食物鏈的組成、特別考查柱狀圖的解讀，要根據圖形的信息提取圖形的含義，分析捕食和種內互助對種群數量變化的影響。5、A【解析】

健那綠染液是專一性染線粒體的活細胞染料，可以使活細胞中的線粒體呈現藍綠色，而細胞質接近無色。葉肉細胞中的葉綠體，散布于細胞質中，呈綠色、扁平的橢球形。可以在高倍顯微鏡下觀察它的形態和分布。【詳解】A、菠菜葉稍帶些葉肉的下表皮部位葉綠體大而稀疏，適合作為實驗對象觀察，A正確；B、健那綠染液可將活細胞的線粒體染成藍綠色，B錯誤；C、葉綠體和線粒體都具有雙層膜結構屬于亞顯微結構，在光學顯微鏡下觀察不到，C錯誤；D、葉肉細胞可用于觀察葉綠體而不能用于觀察線粒體，因為葉綠體的綠色會掩蓋健那綠的染色效果，影響實驗觀察，D錯誤。故選A。本題考查觀察線粒體和葉綠體實驗，對于此類試題，需要考生注意的細節較多，如實驗的原理、實驗選擇的材料是否合理、實驗采用的試劑及試劑的作用、實驗現象等，需要考生在平時的學習過程中注意積累。6、D【解析】

植物激素亦稱植物天然激素或植物內源激素，是指植物體內產生的一些微量而能調節（促進、抑制）自身生理過程的有機化合物。已知植物體內產生的激素有五大類，即生長素、赤霉素、細胞分裂素、脫落酸、乙烯。它們都是些簡單的小分子有機化合物，但它們的生理效應卻非常復雜、多樣。從影響細胞的分裂、伸長、分化到影響植物發芽、生根、開花、結實、性別決定、休眠和脫落等。所以，植物激素對植物的生長發育有重要的調控作用。生長素、赤霉素、細胞分裂素能促進植物生長和發育過程，而脫落酸和乙烯的作用則是抑制植物生長，促進成熟和衰老。【詳解】A、從圖中可知，生長素含量越高，海帶月增長率大，說明海帶增長率與IAA含量呈正相關，A錯誤；B、從圖中可知，生長素含量越高，海帶寬度的增長率越小，說明海帶增長率與ABA含量呈負相關，B錯誤；C、從增長率的幅度來看，兩種激素的變化對海帶長度的影響小于對寬度的影響，C錯誤；D、IAA促進生長，ABA抑制生長，結合圖可知，海帶在后期生長緩慢，原因是IAA降低而ABA增高，D正確。故選D。二、綜合題：本大題共4小題7、配制較低濃度的激素溶液，處理時間需幾小時至一天未表現A1、A2、A3組的不定根均數量大于A0組，說明實驗組的IAA對大豆下胚軸的生根都有促進作用，沒有體現抑制作用B1、C1組的不定根平均數量小于A1組（或：B2、C2組的不定根平均數量小于A2組或：當IAA濃度為10或50時，隨著乙烯利濃度的增加，不定根平均數量減少）B3、C3組的不定根平均數量大于A3組（或：當IAA濃度為100時，隨著乙烯利濃度的增加，不定根平均數增加）為信息分子，調節植物的生長發育（或：給細胞傳達一種調節代謝的信息）【解析】

激素調節與植物生命活動的關系：激素調節在植物的生長發育和對環境的適應過程中發揮著重要作用，但是，激素調節只是植物生命活動調節的一部分。植物的生長發育過程，在根本上是基因組在一定時間和空間上程序性表達的結果。光照、溫度等環境因子的變化，會引起植物體內產生包括植物激素合成在內的多種變化，進而對基因組的表達進行調節。【詳解】（1）用激素處理大豆下胚軸可以用沾蘸法或浸泡法，前者通常使用高濃度的激素處理很短的時間，如3~5s；后者需要的激素濃度低，通常是處理幾小時至一天，本實驗中用浸泡法處理，具體做法是配制較低濃度的激素溶液，對大豆的下胚軸處理幾小時至一天。（2）A組實驗中A1、A2、A3組的不定根數量均大于A0組，說明實驗組的IAA對大豆下胚軸的生根都有促進作用，沒有體現抑制作用，故此可知實驗中IAA對大豆下胚軸生根的作用未表現出兩重性。（3）①實驗中B1、C1組的不定根平均數量小于A1組（或：B2、C2組的不定根平均數量小于A2組或：當IAA濃度為10或50時，隨著乙烯利濃度的增加，不定根平均數量減少），由此實驗結果可得出乙烯對不定根形成有抑制作用的結論；②根據實驗結果中B3、C3組的不定根半均數量大于A3組，可以得出乙烯對不定根形成有促進作用的的結論。（4）進一步研究發現生長素能調控不定根發育的相關基因的表達，據此可知激素作為信息分子，傳遞了一種調節植物的生長發育的信息。運用單一變量原則對題目中的實驗結果進行合理的分析、比較是正確解題的關鍵！8、自由組合常黑身雌性個體與灰身雄性個體雜交，F1未出現交叉遺傳現象灰身有眼雌雄個體1/6兩對等位基因位于一對常染色體上，灰身有眼個體減數分裂時，同源染色體的非姐妹染色單體之間發生交叉互換【解析】

基因的自由組合定律是指控制不同性狀的遺傳因子的分離和組合是互不干擾的，在形成配子時，決定同一性狀的成對的遺傳因子彼此分離，決定不同性狀的遺傳因子自由組合。該題主要考察了基因的自由組合定律、伴性遺傳和連鎖定律的遺傳特點。【詳解】（1）實驗中選取一對表現型為灰身有眼的雄性個體和黑身無眼的雌性個體進行雜交實驗，所得F1雌、雄個體中均出現四種表現型：灰身有眼、黑身有眼、灰身無眼、黑身無眼，且四種表現型的比例為1:1:1:1，符合兩對基因自由組合定律中的測交實驗的比例，因此說明基因A、a和B、b位于兩對同源染色體上，遵循基因的自由組合定律；雌雄個體中表現型的比例相等，沒有表現出性別上的差異，更沒有表現出交叉遺傳的特點，因此位于常染色體上；若要驗證其位于常染色體且遵循自由組合定律，可選擇讓雜合子自交來進行驗證，子代中的灰身有眼的雌雄個體基因型為AaBb，觀察其雜交后代的比例是否為9:3:3:1即可；AaBb個體自由交配，子代中灰身個體的基因型為A_B_和A_bb，因此純合子占其中的比例為（1+1）/（9+3）=1/6；（2）灰身有眼的雄性個體和黑身無眼的個體雜交，所得的四種表現型中親本類型偏多，重組類型偏少，證明其并不遵循自由組合定律，兩對基因應該位于同一對同源染色體上，之所以出現四種表現型，應該是灰身有眼個體減數分裂時，同源染色體的非姐妹染色單體之間發生交叉互換產生了少量的重組配子。該題的難點在于自由組合定律的判定，識記各雜交、自交和測交實驗的比例是本題的突破點，需要學生從灰身有眼個體與黑身無眼個體的雜交后代分離比，聯想到測交分離比，以此為突破分析兩對基因的位置關系。9、群落分解者害蟲、雞、鴨寄生（含碳）有機物呼吸作用散失的熱能1．7%物種數量較少，營養結構簡單，自我調節能力差【解析】

生態系統的結構包括兩方面的內容：生態系統的成分，食物鏈和食物網。生態系統的成分包含生物成分（生產者、消費者、分解者）和非生物成分（氣候、能源、無機物、有機物）。生態系統各生物之間通過一系列的取食與被取食關系，不斷傳遞著生產者所固定的能量，這種單方向的營養關系，叫做食物鏈。在一個生態系統中，許多食物鏈彼此相互交錯，連接的復雜營養關系叫做食物網，食物網越復雜，生態系統抵抗外界干擾的能力就越強。【詳解】（1）群落是指在一定空間內所有生物種群的集合體，該生態果園中的所有生物構成群落。食用菌屬于真菌，屬于生態系統成分中的分解者。圖1中果樹、雜草屬于第一營養級，屬于第二營養級的有害蟲、雞、鴨。（2）腫腿蜂可以將卵產在天牛幼蟲的體表，吸取幼蟲的營養，則可推知腫腿蜂和花天牛的種間關系是寄生關系。（3）從物質循環角度分析，碳元素在該生物群落內部以有機物形式（取食和被取食）傳遞。（4）各營養級（頂級除外）的能量有4個去向：①該生物呼吸作用散失；②流入下一營養級；③流入分解者；④暫未被利用。圖2中的A代表呼吸作用散失的熱能。植食動物流向肉食動物的能量為：5.1+2.1+0.25+0.05-5=2.5，生產者流向植食動物的能量為：2.5+0.5+9+4-2=14，生產者的同化量為：14+3+70+23=110，能量從生產者傳遞到植食動物的效率,14÷110=1.7%。（5）與森林生態系統相比較，農業生態系統物種數量較少，營養結構簡單，自我調節能力差，因此抵抗力穩定性較低。熟悉生態系統的結構、功能、能量流動的計算是解答本題的關鍵。10、逆（反）轉錄酶熱穩定性高的DNA聚合酶（Taq酶）溫度（或溫度、pH）2n-1抗原和抗體發生特異性結合病毒進入人體后，刺激人體免疫系統產生相應的抗體需要一段時間病毒抗體【解析】

1、分析圖示，過程I是由mRNA形成cDNA的過程，表示逆轉錄。過程Ⅱ先使mRNA-cDNA雜合雙鏈解開，再以單鏈的DNA合成雙鏈的DNA，最后利用RCR技術進行DNA復制。2、PCR技術的原理是模擬生物體內DNA分子復制的過程，利用DNA分子熱變形原理，通過控制溫度控制控制DNA分子的解聚和結合，DNA分子體內復制過程DNA的解旋是在解旋酶的作用下實現的；PCR擴增DNA片段過程最高經過n次擴增，形成的DNA分子數是2n個，其中只有2條單鏈不含有引物。【詳解】（1）過程I是由mRNA形成cDNA的過程，表示逆轉錄過程，需要加入逆轉錄酶，過程Ⅱ是PCR過程，需要加入熱穩定性高的DNA聚合酶（Taq酶）。（2）RT-PCR過程通過對溫度的控制影響確的活性和DNA分子結構，從而使得整個反應過程有序地進行。（3）過程Ⅱ擬對單鏈cDNA進行n次循環的擴增，根據DNA分子半保留復制特點可知，該過程理論上至少需要2n-1個引物B。（4）新型冠狀病毒的檢測方法還可采用病毒抗原-抗體檢測，其原理是抗原和抗體發生特異性結合。病毒進入人體后，刺激人體免疫系統產生相應的抗體需要一段時間，故檢測到新冠病毒感染者抗體滯后于病毒核酸和抗原，因此病毒抗體檢測對傳染性極高的新型冠狀病毒疑似患者早期確診意義不大。本題考查了基因工程和PCR技術及其應用過程，對于RNA的逆轉錄、DNA分子復制、多聚酶鏈式反應擴增DNA片的理解把握知識點間的內在聯系及堿基互補配對原則的應用是解題的關鍵。11、限制酶和DNA連接CaCl2基因突變引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重組質粒、空質粒（pET質粒）抗原-抗體雜交抑菌圈對人、畜、農作物和自然環境安全；不會造成基因污染；有效成分純度較高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手術刀”——限制性核酸內切酶（限制酶）（1）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。（2）功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。（3）結果：經限制酶切割產生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。2、“分子縫合針”——DNA連接酶（1）兩種DNA連接酶（E?coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：①相同點：都縫合磷酸二酯鍵。②區別：E?coliDNA連接酶來源于大腸桿菌，只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶來源于T4噬菌體，可用于連接粘性末端和平末端，但連接效率較低。（2）與DNA聚合酶作用的異同：DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵．DNA連接酶是連接兩個DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵。3、“分子運輸車”——載體（1）載體具備的條件：①能在受體細胞中復制并穩定保存。②具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入。③具有標記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。（2）最常用的載體是質粒，它是一種裸露的、結構簡單的、獨立于細菌擬核DNA之外，并具有自我復制能力的雙鏈環狀DNA分子。（3）其它載體：噬菌體的衍生物、動植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲取1、目的基因是指：編碼蛋白質的結構基因。2、原核基因采取直接分離獲得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反轉錄法和化學合成法。3、PCR技術擴增目的基因（1）原理：DNA雙鏈復制（2）過程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃，引物結合到互補DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩定DNA聚合酶從引物起始互補鏈的合成。第二步：基因表達載體的構建1、目的：使目的基因在受體細胞中穩定存在，并且可以遺傳至下一代，使目的基因能夠表達和發揮作用。2、組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因（1）啟動子：是一段有特殊結構的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結合的部位，能驅動基因轉錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質。（2）終止子：也是一段有特殊結構的DNA片段，位于基因的尾端。（3）標記基因的作用：是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來．常用的標記基因是抗生素抗性基因。第三步：將目的基因導入受體細胞1、轉化的概念：是目的基因進入受體細胞內，并且在受體細胞內維持穩定和表達的過程。2、常用的轉化方法：將目的基因導入植物細胞：采用最多的方法是農