15I本文件起草單位：內蒙古自治區農牧業科學院、托克1甜菜單胚雄性不育系及保持系表型鑒定規程本文件適用于二倍體甜菜單胚雄性不育系及保持系花期育性、胚數性、表型的鑒雄性不育系malesterileline能接受正常花粉而授精結實，并能將雄性不育性2TTC:2,3,5-三苯基氯化四氮唑，一種脂溶性光敏感復合物，可作為一種氧化還原用來檢測花粉、種子等活力(2,3,5-TriphenylTetrazoliumChlor甜菜母根栽植適宜條件是土壤表土解凍25cm或5cm土層處平均地溫達4℃~5℃為宜。在內蒙古36.1鑒定人員從事作物遺傳育種、分子育種、種子管理、種子檢驗等專業人員3名以上。6.2鑒定時期6.2.1花期在甜菜種株生長60d左右，甜菜種株剛要開花前進行育性、胚數性觀察鑒定，盛花期進行花粉量和種株株型鑒定。6.2.2種子成熟期進行不育率、可育率、單胚率、發芽率鑒定。種子質量滿足GB19176要求。7鑒定方法與評價指標7.1種株表型一致性鑒定7.1.1現場鑒定以鑒定種株群體為觀測對象，鑒定性狀包括株高、株型、葉色、結實密度等，根據主枝和側枝的多少確定種株株型。單莖型：種株僅有一個明顯的主枝，側枝不發達，在主枝上生有第一次分枝，第一次分枝再生第二次分枝。且要求單莖型種株占總抽薹種株70%以上。多莖型：種株具有多數健壯的側枝，主枝不明顯或沒有主枝，總分枝數量多。且要求多莖型種株占總抽薹種株70%以上。混合型：種株具有發育健壯的主枝和相當數量的側枝，并有密集的第一次和第二次分枝。且要求單莖型種株占總抽薹種株70%以下或多莖型種株占總抽薹種株70%以下。7.1.2公式結果計算表型一致性計算按公式(1)。C——表型一致性，單位為百分比(%);Zr——觀察樣本總數，單位為株；Z——雜株數，單位為株。計算結果精確到小數點后一位7.1.3評價指標種株表型一致性≥90.0%。7.2花粉活力鑒定7.2.1田間取樣在花期的晴天8:00～10:00進行花粉取樣。47.2.2鏡檢7.2.3評價指標7.3.1鑒定內容7.3.2評價指標無1級少中3級多7.4.1育性表型鑒定甜菜花粉育性鑒定一般按完全不育型(W)、半不育Ⅰ型(G)、半不育II型(Ys)、可育型（Yn)等四種半不育Ⅰ型(G)：花藥色澤為淡黃色；花藥不開裂；花粉半不育II型(Ys)：花藥色澤為橙色；花藥基本不開裂；花粉粒有花粉膜，可以看見花粉孔，雖然花7.4.2公式結果計算5B——不育率，單位為百分比(%);Kr——鑒定樣本總數，單位為株；K——可育株數，單位為株。計算結果精確到小數點后一位7.4.3評價指標雄性不育系的不育率≥90.0%。同型保持系的不育率=0。7.5胚數性鑒定7.5.1鑒定內容以種株成熟收獲的所有種子為鑒定對象，種子不應經過任何機械或藥物處理，鑒定種子量要控制在500g以上，觀測甜菜種球內種胚的數量。單胚種：種球內只含有1個種胚的種子。雙胚種：種球內含有2個種胚的種子。多胚種：種球內含有3個或3個以上種胚的種子。7.5.2公式結果計算在檢測的樣品中隨機取樣，4次重復，每個重復200粒種子，觀測鑒定單胚型種子的數量。單胚率計算按公式(3)。M——單胚率，單位為百分比(%);N——單胚種數