ICSFORMTEXT?????FORMTEXT點擊此處添加中國標準文獻分類號FORMTEXT?????DBFORMTEXT36DBFORMTEXT36/FORMTEXTXXXXX—FORMTEXTXXXXFORMTEXT?????FORMTEXT淡水魚苗種產地臨床檢疫技術規范FORMTEXTThetechnicalspecificationsforfreshwaterfishlarvaequarantineinoriginmanufacturingareasFORMTEXT點擊此處添加與國際標準一致性程度的標識FORMDROPDOWNFORMTEXT?????FORMTEXTXXXX-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX發布FORMTEXTXXXX-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX實施FORMTEXT江西省市場監督管理局???發布DB36/XXXXX—XXXX目??次前言 Ⅱ1范圍 12規范性引用文件 13術語和定義 14檢疫對象 25檢疫程序和內容 26檢疫合格標準 67檢疫文書的出具 6附錄A 8附錄B 9附錄C 10附錄D 12附錄E 13附錄F 14附錄G 15附錄H 16附錄I 17前??言本文件按照GB/T1.1-2020給出的規則起草。本文件由江西省農業農村廳提出并歸口，本文件的某些內容可能涉及專利，本文件的發布機構不承擔識別專利的責任。本文件起草單位：江西省農業技術推廣中心（江西省水生動物疫病監控中心）。本文件主要起草人:田飛焱、李小勇、劉文珍、徐節華、孟霞、黃海莉、張錦波、顧瑤、萬華敏、范明、林一舟、裴建明。淡水魚苗種產地臨床檢疫技術規范范圍本文件規定了淡水魚苗種產地檢疫的檢疫對象、臨床檢查、采樣送檢、實驗室檢測、臨床檢疫合格標準等技術規范。本文件適用于江西省行政區域內的淡水魚的苗種產地臨床檢疫。規范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T10585.2傳染性造血器官壞死病診斷規程GB/T15805.5鯉春病毒血癥診斷規程GB/T34734淡水魚類小瓜蟲病診斷規程GB/T36190草魚出血病診斷規程GB/T36194金魚造血器官壞死病毒檢測方法SC/T7103水生動物產地檢疫采樣技術規范SC/T7211傳染性脾腎壞死病毒檢測方法SC/T7212.1鯉皰疹病毒檢測方法第1部分：錦鯉皰疹病毒SC/T7229鯉浮腫病診斷規程SN/T1152鯉春病毒血癥檢疫技術規范SN/T1474傳染性造血器官壞死病檢疫技術規范SN/T1674錦鯉皰疹病毒檢疫技術規范SN/T3584草魚出血病檢疫技術規范SN/T4290多子小瓜蟲檢疫技術規范SN/T5363鯉浮腫病檢疫技術規范術語和定義下列術語和定義適用于本文件。3.1淡水魚苗種Freshwaterfishlarvae是指用于繁育、增養殖生產、科研試驗以及觀賞的淡水魚的親本（包括后備親本）、幼體、受精卵及其遺傳育種材料。3.2產地檢疫Quarantineinoriginmanufacturingareas在魚類及魚類產品生產及養殖地區（例如水產養殖場）進行的檢疫。3.3批次Batch同一水產養殖場內或自然水體，以同一水域、同一品種、環境及養殖條件相同的水生動物為一個采樣批次。4檢疫對象表1淡水魚苗種檢疫對象表檢疫范圍檢疫對象草魚、青魚草魚出血病、小瓜蟲病鯉、錦鯉鯉春病毒血癥、錦鯉皰疹病毒病、鯉浮腫病、小瓜蟲病鯽鯽造血器官壞死病、小瓜蟲病金魚鯽造血器官壞死病、鯉春病毒血癥、小瓜蟲病鱖、鱸傳染性脾腎壞死病、小瓜蟲病虹鱒（包括金鱒）傳染性造血器官壞死病、小瓜蟲病其它淡水魚類小瓜蟲病注：檢疫范圍和檢疫對象依據于農業農村部相關文件，其調整依據農業農村部最新文件而定。5臨床檢疫程序和內容5.1查驗養殖場防疫狀況接到檢疫申報并受理后，受委派的漁業官方獸醫應當查驗養殖場防疫狀況，包括進出場、飼料、用水、疾病防治、消毒用藥、養殖生產記錄和衛生管理等情況，核實養殖場過去12個月內未發生相關水生動物疫情。5.2臨床檢查臨床檢查需開展群體檢查和個體檢查。5.2.1群體檢查5.2.2個體檢查個體檢查通過外觀檢查、解剖檢查或顯微鏡檢查等方法進行。5.2.2.1外觀檢查觀察鰓黏液及顏色變化，眼球有無突出、凹陷或渾濁充血等變化，體表黏液的多少，有無癤瘡、囊腫、潰瘍、豎鱗、充血、出血等癥狀，鰭條、鱗片等損傷情況，肛門有無紅腫、拖便等現象，有無胞囊或寄生蟲寄生等情況。5.2.2.2解剖檢查觀察有無腹水，脾、腎、肝、膽、脂肪、腸道、鰾、性腺、腦、心臟、脊髓、肌肉等是否正常，有無胞囊或寄生蟲及其他病理變化等。5.2.2.3顯微鏡檢通過水浸片法、壓片法、涂片法、濃縮法等方法觀察體表、鰓、腸道等部位中寄生蟲感染狀況，檢查魚類器官、組織病變情況。5.2.4臨床檢查健康判定在群體和個體檢查中均正常，臨床檢查健康；出現疑似附錄B～G等疫病的臨床癥狀，懷疑患有相應疫病，及臨床檢查發現其他異常情況的，臨床檢查不合格。5.3采樣送檢5.3.1需采樣送實驗室檢測的情況（1）臨床檢查不合格的淡水魚類，應采樣進行實驗室檢測。（2）跨省、自治區、直轄市運輸的魚類，應采樣送實驗室檢測。但以下情況除外：已納入國家或省級水生動物疫病監測計劃的，過去2年內無相應疫病陽性結果的；群體和個體檢查均正常，現場采用經農業農村部批準的快速檢測試劑盒進行檢測，結果為陰性的。5.3.2采樣方法和數量對有臨床癥狀的淡水魚，須挑選臨床癥狀明顯的活體，每一采樣批次，一般根據樣品大小取10～20尾即可。對無癥狀的，指導貨主按照SC/T7103的采樣方法，按表2要求隨機取樣。表2根據假定病原感染率確定的采樣數量表群體大小（尾）25050010001500～1000010000或以上2%感染率時采樣數（尾）1101301401451505.3.3樣品封存漁業官方獸醫和貨主共同確認樣品的真實性、代表性和有效性。封樣包裝材料應清潔、干燥，不會對樣品造成污染和傷害；包裝容器應完整、結實、有一定抗壓、抗震性。每份樣品應分別加貼采樣標簽，注明采樣編號、品種、日期。5.3.4采樣記錄現場采樣人員應嚴格按照采樣要求進行現場采集，并填寫《現場采樣記錄表》（見附錄A）。5.3.5樣品的運送采樣完成后，根據檢測對象和送檢要求確定送樣方式，樣品應按按規定時間及時就近送至省級農業農村主管部門指定的具有資質的水生動物疫病診斷實驗室。5.3.5.1活體送樣按魚和水1:10的比例將魚和水（魚和水體積約占塑料袋體積的的2/3）放入塑料袋中，充氧、降溫運輸，活體送至水生動物疫病實驗室處理。樣品的包裝和運輸以不泄漏、不交叉污染，保證樣品存活為基本原則。5.3.5.2組織樣品送樣有條件的可按相關疫病的檢驗方法取采樣魚的相應組織，研磨后，按1:5的比例加入運送液（含5%～10%胎牛血清、1000g/mL慶大霉素、800g/mL青霉素、400IU/mL的制菌酶素或兩性霉素B的平衡鹽溶液），在0～4℃下24小時內送至檢測實驗室。5.4實驗室檢測5.4.1樣品登記水生動物疫病檢驗實驗室接到樣品和采樣記錄單時，應立即登記，對樣品狀態及外觀進行詳細描述，對各個檢疫項目以及具體要求進行確認，標注樣品名稱和實驗室編號，及時將樣品進入實驗室流轉。5.4.2樣品檢測水生動物疫病實驗室根據檢測項目，按照國家或行業標準進行相關檢疫對象的病原微生物檢測，并在接到樣品后20日內出具相應的檢驗報告，并及時向漁業官方獸醫反饋結果。表3淡水魚苗檢疫對象及檢驗方法檢疫對象檢驗方法鯉春病毒血癥GB/T15805.5鯉春病毒血癥診斷規程SN/T1152鯉春病毒血癥檢疫技術規范草魚出血病GB/T36190草魚出血病診斷規程SN/T3584草魚出血病檢疫技術規范錦鯉皰疹病毒病SCT7212.1鯉皰疹病毒檢測方法第1部分：錦鯉皰疹病毒SN/T1674錦鯉皰疹病毒檢疫技術規范鯉浮腫病SC/T7229鯉浮腫病診斷規程SN/T5363鯉浮腫病檢疫技術規范鯽造血器官壞死病GB/T36194金魚造血器官壞死病毒檢測方法傳染性脾腎壞死病SC/T7211傳染性脾腎壞死病毒檢測方法傳染性造血器官壞死病GB/T10585.2傳染性造血器官壞死病診斷規程SN/T1474傳染性造血器官壞死病檢疫技術規范小瓜蟲病GB/T34734淡水魚類小瓜蟲病診斷規程SN/T4290多子小瓜蟲檢疫技術規范5.4.3樣品保存水生動物產地樣品，自發出檢疫報告后陽性樣品需保存6個月方可作廢棄處理。病毒組織樣品必須在-20℃以下條件保存，寄生蟲用固定液固定后常溫保存。6臨床檢疫合格標準6.1該養殖場近12個月未發生相關水生動物疫情。6.2臨床檢查健康。6.3需要經實驗室檢測的，檢測結果合格。漁業官方獸醫根據上述臨床檢疫合格標準，結合臨床檢查情況，進行臨床檢疫結果判定；對于需要經實驗室監測的，還應在實驗室結果反饋后進行綜合判定。_________________________________附錄A(資料性)表A.1現場采樣記錄表養殖場信息名稱通訊地址聯系人電話漁業官方獸醫信息姓名電話所在單位通訊地址郵編樣品信息樣品名稱采樣編號樣品數量樣品規格樣品狀態□無病癥；□有病癥；□瀕死；□死亡保存方式□酒精；□冰凍；□活魚；□其他采樣時環境條件水溫℃pH檢測項目貨主簽署本次采樣始終在本人陪同下完成，上述記錄經核實無誤，承認以上各項記錄的合法性。簽字：年月日漁業官方獸醫簽章本次采樣已按要求及采樣標準執行完畢，樣品經雙方人員共同封樣，并做記錄如上。簽字：年月日備注：該表一份三份，一份隨同樣品轉運至檢測單位，一份貨主保存，一份由漁業官方獸醫保存。附錄B(資料性)鯉春病毒血癥簡介及典型臨床癥狀B.1鯉感染鯉春病毒血癥簡介鯉春病毒血癥（springviremiaofcarp，SVC），是一種由彈狀病毒科水泡性病毒屬的鯉春病毒血癥病毒（SVCV）引起的急性、出血性并伴有高度傳染的流行病。流行于鯉科魚類中，特別是鯉和錦鯉。該病通常與春季暴發，并引起幼魚和成魚死亡，以全身出血、腹水、鰾充血、肛門突出等，發病急、死亡率高為特征。B.2鯉感染鯉春病毒血癥典型臨床癥狀注1：鯉感染鯉春病毒血癥病毒后，可見其體表鱗片松散、干澀，腦部、頭背部、大側肌、肛門、尾鰭等部位紅腫充血。有的病魚身體發黑，腹部腫大，皮膚和鰓出血。解剖后可見體腔腹水嚴重且帶血，腸、心、腎、鰾有時連同肌肉也出血，內臟水腫。注2：圖來源：歐陽敏、田飛焱等圖B.1附錄C(資料性)草魚出血病簡介及典型臨床癥狀B.1草魚出血病簡介草魚出血病（HemorrhageDiseaseofGrassCarp）是由草魚呼腸孤病毒（GCRV）引起，該病毒直徑70mm，球形顆粒，含有11個片段的雙鏈RNA，不同地區存在不同的毒株，主要感染當年草魚、青魚等（圖11），該病主要在我國中部及南方各省流行，死亡率可高達80%以上，二齡以上的成魚則較少發病，癥狀也較輕。水溫在20～33℃時發生流行，25～28℃為流行高峰。B.2草魚出血病典型臨床癥狀注1：草魚感染草魚呼腸孤病毒后，解剖見肌肉點狀或塊狀出血。注2：圖來源：歐陽敏、田飛焱等圖C.1注1：草魚感染草魚呼腸孤病毒后，鰭、鰓蓋充血明顯。注2：圖來源：歐陽敏、田飛焱等圖C.2注1：草魚感染草魚呼腸孤病毒后，腸壁充血、肝脾充血或因失血而發白。注2：圖來源：歐陽敏、田飛焱等圖C.3附錄D(資料性)錦鯉皰疹病毒病簡介及典型臨床癥狀D.1錦鯉皰疹病毒病簡介錦鯉皰疹病毒病（koiherpesvirusdisease，KHVD），是由錦鯉皰疹病毒（KHV）引起的一種高傳染性、高發病率、高死亡率疫病。KHV感染譜較小，目前僅發生于錦鯉和鯉，魚苗、幼魚、成魚均可感染。魚發病并出現癥狀24～48小時后開始死亡，死亡率可達80%～100%，對鯉和錦鯉的養殖危害性極大。D.2錦鯉皰疹病毒病典型臨床癥狀注1：錦鯉感染錦鯉皰疹病毒后，錦鯉、鯉皮膚上出現白色塊斑、水泡、潰瘍，鰓出血并產生大量黏液或組織壞死，病魚鰓、腹部、鰭條、口腔充血和出血，鱗片有血絲，魚眼凹陷，一般在出現癥狀后1～2天內死亡。注2：圖來源：江育林圖D.1附錄E(資料性)鯽造血器官壞死病簡介及典型臨床癥狀E.1鯽造血器官壞死病簡介鯽造血器官壞死病（haematopoieticnecrosisvirusdisease,HNVD）是由鯉皰疹病毒II（Cyprinidherpesvirus2,CyHV-2）的，導致金魚、鯽等魚類死亡的一種病毒性傳染病。在全球多個國家和地區均有流行，流行水溫為22～28℃。E.2鯽造血器官壞死病典型臨床癥狀注1：鯽、金魚感染鯉皰疹病毒II后，表現為體色發黑，體表廣泛性充血或出血，鰓絲腫脹或鰓血管易破裂出血，解剖后可見內臟腫大充血，鰾壁出現點狀或斑塊狀充血等癥狀。注2：圖來源：歐陽敏、田飛焱等圖E.1附錄F(資料性)傳染性脾腎壞死病簡介及典型臨床癥狀F.1傳染性脾腎壞死病簡介傳染性脾腎壞死病（InfectiousspleenandkidneynecrosisvirusDisease，ISKNVD）是由傳染性脾腎壞死病毒（Infectiousspleenandkidneynecrosisvirus）引起的，導致鱖、鱸等魚類死亡的傳染性病毒病。流行時間為5-10月，以7-9月為高峰期，流行水溫為25～34℃。F.2傳染性脾腎壞死病典型臨床癥狀注1：鱖、鱸感染傳染性脾腎壞死病毒后，表現為體色發黑，貧血癥狀明顯，頭、鰓蓋、下頜、眼眶、胸鰭和腹鰭基部、腹部肝區和尾鰭有出血點，肝腫大、灰白或土灰色、或白灰相間呈花斑狀、有小出血點，腎腫大、充血、糜爛、暗紅色，脾腫大、糜爛、紫黑色。注2：圖來源：歐陽敏、田飛焱等圖F.1附錄G(資料性)鯉浮腫病簡介及典型臨床癥狀G.1鯉浮腫病簡介鯉浮腫病（Carpedemavirusdiease,CEVD）是由一種痘病毒感染鯉、錦鯉引起的高度傳染性流行病。我國在2016年首次報道發生CEVD，現已擴散到我國約一半的省份，該病屬于新發疫病，