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1肉?？焖贁U繁技術規程4同期發情和人工授精24.1.1二次前列腺素（PG）法適配母牛任選一天肌肉注射PG，9d～134.1.2黃體酮緩釋陰道栓法4.2人工授精冷凍精液應符合GB/T4143的要求。人工授精操作按照NY/T15.1供體牛選擇與飼養管理15月齡至8周歲。青年牛應為15月齡～18月齡，體況中上等且至少有兩次正常發情記錄；經產牛應為產保持飼養環境良好，避免應激反應。提供合理的配合日糧和清潔飲水。超數排卵前3周加強飼養管5.2供體牛超數排卵及人工授精5.2.1.1同期發情方法5.2.1.2超數排卵方法5.2.1.3供體牛發情鑒定最后一次注射FSH后，每隔6h觀察是否發情，每次觀察不少于30mi精液劑量加倍，按照4.1.2規定操作，間隔12h重5.3非手術沖胚及胚胎質量鑒定35.3.1.2將供體牛保定，清除糞便，在薦椎和第一尾椎結合處或第一尾椎和第二尾椎結合處注射普魯卡因實行硬膜外麻醉，直至尾巴松弛柔軟無張力。普魯卡因用量依5.3.1.3麻醉后將牛尾固定，清潔會陰部及外陰，酒精棉球或噴霧消毒外陰，用滅菌衛生紙擦干。5.3.1.4用擴張棒擴張子宮頸，再用黏液棒抽出黏液。5.3.1.5此時直腸易進空氣形成空洞，使用抽氣筒排出空氣，利于直腸把握。5.3.1.6沖胚管裝配內芯，并用沖胚液潤滑，慢慢插入一側子宮角，當沖胚管到達子宮角大彎處，旋5.3.1.7給沖胚管氣囊充氣約8mL～14mL，抽出內芯，把三通管與沖胚管5.3.1.8夾住三通管的回流端，將20mL～30mL沖胚液5.3.1.9完成后排出氣囊空氣，另一側子宮進行相同操作。抽出沖胚管，使前端位于子宮體，灌注抗5.3.2.1搜集胚胎油的培養液中35℃~37℃暫存，撿胚完成后進行等級鑒定。培養液可用10%牛血清M199或其它商用5.3.2.2胚胎發育期此時胚胎處于以下發育期：桑椹胚(M)、致密桑椹胚(CM)、囊胚(B)、擴張囊胚(EXB)。胚胎發育形5.3.2.3胚胎質量等級鑒定5.4胚胎冷凍保存及解凍5.4.1.1胚胎清洗45.4.1.2胚胎平衡5.4.1.3胚胎裝管衡5min，以0.6℃/min的速率下降至-35℃,平衡5min后投入液氮，記錄冷凍情況（見表A.2）。取出裝有胚胎的細管，空氣中停留5s～10s后，迅速放入35℃~35.5受體牛選擇及飼養管理犢性能良好，無連續兩次人工授精未孕記錄。牛體健康，子宮彈性、厚薄正常，卵巢發5.6胚胎移植55.6.3受體牛胚胎移植方法5.6.3.1以發情當天定為0d5.6.3.3清洗消毒外陰部并擦干。對照胚胎記錄表和受體牛發情記錄，胚胎發育期與受體牛生理時間5.6.3.4裝好胚胎的移植槍套上硬外套管，再套上無菌外套膜。于子宮頸口撕破外套膜，使移植槍前5.6.

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