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文檔簡介
④植物激素:生長素、細胞分裂素、赤霉素等;(3)各種養分物質的作用:微量元素和大量元素供應植物細胞生活所必需的無機鹽;蔗糖供應碳源,同時能夠維持細胞的滲透壓;甘氨酸、維生素等物質主要是為了滿意離體植物細胞對特別養分的需求。(4)同微生物培育基的配方相比,MS培育基的配方有哪些明顯的不同?【答】微生物培育基以有機養分為主,MS培育基則需供應大量無機養分。3、植物激素:(1)植物組織培育的關鍵性激素是。(2)在生長素存在的狀況下,細胞分裂素的作用呈現加強趨勢。(3)生長素和細胞分裂素的運用的先后依次、用量的比例等都影響結果。運用依次試驗結果先運用生長素,后運用細胞分裂素有利于細胞分裂,但細胞不分化先運用細胞分裂素,后運用生長素細胞既分裂也分化同時運用分化頻率提高生長素/細胞分裂素比值與結果比值高時促根分化,抑芽形成比值低時促芽分化,抑根形成比值適中促進愈傷組織生長(4)植物組織培育至少運用三種培育基:脫分化培育基、生芽培育基、生根培育基。4、PH、溫度、光等環境條件:不同的植物對各種條件的要求往往不同。進行菊花的組織培育,一般將pH限制在5~8左右,溫度限制在18~22℃,并且每日用日光燈照耀12h.四、試驗操作⑴配制MS固體培育基:①配制各種母液:大量元素濃縮10倍、微量元素濃縮100倍、用量較小的有機物一般按1mg/ml的質量濃度單獨配置成母液。運用時依據母液的濃縮倍數,計算用量,并加蒸餾水稀釋。②配制培育基:在菊花組織培育中,可以不添加植物激素,因菊花莖段組織培育比較簡單。③滅菌:實行的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌。⑵外植體的消毒:流水沖洗——少許洗衣粉——軟刷刷洗——流水沖洗20分鐘——無菌紙吸干—70%酒精搖動2~3次——無菌水沖洗——無菌紙吸干——0.1%氯化汞1~2分鐘——無菌水沖洗至少三次,漂凈消毒液⑶接種:接種過程中插入外植體時形態學上端朝上,不要倒插。每個錐形瓶接種6~8個外植體。外植體接種與細菌接種相像,操作步驟相同,而且都要求無菌操作。⑷培育:應當放在無菌箱中進行,并定期進行消毒,保持相宜的溫度(18~22℃)和光照(12h)⑸移栽:栽前應先打開培育瓶的封口膜,讓其在培育間生長幾日,然后用流水清洗根部培育基。然后將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍寶巖等環境中生活一段時間,進行壯苗。最終進行露天栽培。⑹栽培五:外植體在培育過程中被污染的可能緣由:(1)外植體消毒不徹底;⑵培育基滅菌不徹底;⑶接種中被雜菌污染;⑷錐形瓶密封性差等。專題2
月季的花藥培育1、被子植物的花粉發育
:被子植物的雄蕊含花藥,內含有很多花粉。花粉植物的生殖細胞。
2、
產生花粉植株的兩種途徑:
①花藥中的花粉—(脫分化)—胚狀體—(分化)—叢芽
(誘導)--生根移栽
②花藥中的花粉--(脫分化)—愈傷組織—(再分化)--叢芽
3、影響花藥培育的因素:
材料的選擇與培育基的組成是主要的影響因素
·親本的生理狀況:早期的花藥比后期的更簡單產生花粉植株,選擇月季的初花期。
·花蕾:選擇完全未開放的花蕾
4、試驗操作
(1)材料的選取:選擇花藥時,一般要通過鏡檢來確定其中的花粉是否處于相宜的發育期。最常用的方法是醋酸洋紅法。(2)材料的消毒:70%酒精浸泡30s無菌水清洗0.1%氯化汞浸泡2-4min無菌水沖洗
(3)接種和培育
留意:①植物組織培育技術與花藥培育技術的相同之處是:培育基配制方法、無菌技術及接種等基本相同。
②
兩者的不同之處在于:花藥培育的選材特別重要,需事先摸索時期相宜的花蕾;花藥裂開后釋放出的愈傷組織或胚狀體也要剛好更換培育基;花藥培育對培育基配方的要求更為嚴格。這都使花藥培育的難度大為增加。
5、菊花組織培育和月季的花藥培育的區分:
(1)材料的選取:菊花的組織培育試驗中,應選擇未開花植株的莖上部新萌生的側枝;月季的花藥培育試驗中,應選擇花粉發育過程中的單核期的花粉進行培育。
(2)外植體消毒:所用消毒
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