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實驗微專題一DNA的粗提取與鑒定一、實驗原理1.提取DNA的原理利用DNA、RNA、蛋白質和脂質等在物理和化學性質方面的差異，提取DNA，去除其他成分。如：(1)DNA在酒精溶液中的溶解性：DNA不溶于酒精，但某些蛋白質溶于酒精。(2)DNA在NaCl溶液中的溶解性：DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同，它能溶于2__mol/L的NaCl溶液。2.鑒定DNA的原理在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會呈現藍色。二、方法步驟1.稱取約30g洋蔥，切碎，然后放入研缽中，倒入10mL研磨液，充分研磨。2.去除濾液中的雜質3.DNA的析出4.DNA的鑒定取兩支20mL的試管，各加入2mol/L的NaCl溶液5mL。將絲狀物或沉淀物溶于其中一支試管的NaCl溶液中，再向兩支試管中各加入4mL的二苯胺試劑。混合均勻后，將試管置于沸水中加熱5min。待試管冷卻后，比較兩支試管中溶液顏色的變化。★沸水浴下DNA與二苯胺試劑反應，溶液呈現藍色三、操作提示1.以血液為實驗材料時，每100mL血液中需要加入3g檸檬酸鈉，防止血液凝固。2.加入酒精和用玻璃棒攪拌時，動作要輕緩，以免加劇DNA分子的斷裂，導致DNA分子不能形成絮狀沉淀。(1)充分研磨的目的是裂解細胞，釋放DNA。(2)在研磨液過濾獲得的上清液中加入體積分數為95%的酒精溶液的目的是使DNA析出(填“溶解”或“析出”)，依據的原理是DNA不溶于酒精溶液，但是細胞中的某些蛋白質溶于酒精。(3)用玻璃棒攪拌時沿一個方向攪拌的目的是防止DNA斷裂。例1下表關于“DNA粗提取與鑒定”實驗的表述，錯誤的是()選項試劑操作作用A研磨液與生物材料混合提取溶解DNAB2(mol·L－1)NaCl溶液與提取出的DNA混合溶解DNAC預冷的酒精加入離心后的上清液中溶解DNAD二苯胺試劑加入溶解有DNA的NaCl溶液中鑒定DNA答案C解析DNA不溶于酒精，但是細胞中的某些蛋白質溶于酒精，利用這一原理可以將蛋白質和DNA進一步分離，C錯誤。例2下列有關“DNA的粗提取與鑒定”實驗的敘述，正確的是()A.新鮮豬血、菜花等動植物材料均可用于DNA的粗提取B.植物材料需先研磨破碎細胞C.DNA只能溶于2mol/L的NaCl溶液D.溶有DNA的NaCl溶液中加入二苯胺試劑后顏色呈紫色答案B解析豬是哺乳動物，其成熟紅細胞內沒有細胞核，所以豬血不能用于DNA的粗提取，A錯誤；植物細胞有細胞壁，因此選用植物細胞提取DNA時，需先研磨破碎細胞，B正確；DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，在2mol/L的NaCl溶液中溶解度高，C錯誤；溶有DNA的NaCl溶液中加入二苯胺試劑，沸水浴加熱后冷卻，顏色應呈現藍色，D錯誤。DNA的粗提取與鑒定實驗成功關鍵點(1)本實驗不能用哺乳動物成熟的紅細胞作實驗材料，原因是哺乳動物成熟的紅細胞無細胞核(無DNA)，可選用雞血細胞作材料。(2)二苯胺試劑要現配現用，否則會影響鑒定的效果。(3)提取植物細胞的DNA，在研

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