A61K47/69(2017.01)A61K47/54(2017.01)A61K31/44(2006.01)A61P35/00(2006.01)A61K31/198(2006.01)一種甘露糖修飾的納米顆粒在制備治療骨本發明涉及一種甘露糖修飾的納米顆粒在的納米顆粒含有瑞戈非尼和α-二氟甲基鳥氨鳥氨酸的甘露糖修飾的納米顆粒可以促進巨噬化(如增加CD8+T細胞浸潤和減少Treg細胞)，有22.一種甘露糖修飾的納米顆粒的制備方法，所述甘露糖S1-2、用冷乙醚以及甲醇沉淀甘露糖修飾的PLGA-P7.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述第一聚乙烯醇水溶液的濃度為1.0w/v。8.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述第二聚乙烯醇水溶液的濃度為0.3w/v。9.一種如權利要求2-8任一項所述制備方法制3一種甘露糖修飾的納米顆粒在制備治療骨肉瘤藥年。免疫治療在癌癥治療中的成功依賴于腫瘤細胞與宿主免疫反應之間的有益相互作用。[0004]使用多激酶抑制劑和抗血管內皮生長因子單克隆抗體阻斷VEGF/VEGFR信號通路激酶抑制劑，通過靶向參與調節細胞信號轉導和腫瘤血管生成的致癌激酶來抑制腫瘤進到多靶點治療方法的轉變對于觸發宿主免疫系統和提4[0009]本發明的第一方面是提供一種甘露糖修飾的納米顆粒在制備治療骨肉瘤藥物中[0011]S1、將α-二氟甲基鳥氨酸的水溶液加至甘露糖修飾的PLGA-PEG的二氯甲烷溶液[0024]本發明制備的含有瑞戈非尼和α-二氟甲基鳥氨酸的甘露糖修飾的納米顆粒可以[0025]圖1為所制得的甘露聚糖修飾的PLGA-PEG的納米顆粒用透射電子顯微鏡(TEM)和5[0041]瑞戈非尼、α-二氟甲基鳥氨酸鹽酸鹽(DFMO)和香豆素-6購自MedChemExpress(MonmouthJunction,NJ,USA)。PEG5K-PLGA10K-NH2從中國山東省藥科院獲得。聚乙烯醇苯基-A-D-甘露糖苷購自中國上海畢得藥業有限公司。磺基-n-羥基琥珀酰亞胺(NHS)購自中國北京阿拉丁控股集團有限公司。小鼠重組小鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)和重組有限公司。6[0046]S1、將α-二氟甲基鳥氨酸(5mg)的水溶液(100μL)加至甘露糖修飾的PLGA-PEG[0047]S2、將步驟S1所得到的所述w/o乳液加至1.0％(w/v)的第一聚乙烯醇水溶液[0048]S3、將步驟S2所得到的所述w/o/w乳液加至0.3％(w/v)的第二聚乙烯醇水溶液[0049]所制得甘露糖修飾的納米顆粒的化學結構通過核磁共振氫譜(1H-NMR)在CDCl3中飾的納米顆粒的形態。采用高效液相色譜法測定甘露糖修飾的納米顆粒的包封率和載藥100%;(HUVEC)購自于美國模式培養物保藏中心(ATCC；美國弗吉尼亞州馬納薩斯)。K7細胞和RAW264.7在補充有10％FBS和1％青霉素/鏈霉素的DMEM中培養。人臍靜脈內皮細胞在含有[0057]骨髓源性巨噬細胞(BMDM)的收集和極化：骨髓細胞收集自C57BL/6小鼠的股骨和性巨噬細胞(BMDM)。分化后，通過100ng/mLLPS刺激BMDM分化為M1表型，或通過20ng/mL[0058]體外細胞攝取研究：K7細胞和極化的巨噬細胞在6孔板和35mm共聚焦培養皿中培7甘露糖修飾的納米顆粒添加到細胞中并分別培養4小時。香豆素-6通過熒光分光光度計8向每只小鼠的尾靜脈注射等量的IR780負載的納米顆粒或甘露糖修飾的納米顆粒。使用和安全性。使用以下公式計算腫瘤體積：V2000cm3時，對小鼠實施安樂死。收集腫瘤組織和主要器官進一步分析。腫瘤生長抑制率(TGI％)根據以下公式計算：TGI(％)＝(1-Wtreat/Wcontrol)×100％(Wtre表明其分子量分布較窄。甘露糖修飾的納米顆粒對瑞戈非尼和DFMO的包封率分別為74.6%極化成TAM1或TAM2，然后將其與香豆素-6負載的甘露糖修飾的納米顆粒和納米顆粒孵育49這些數據表明甘露糖受體作為靶點在介導藥物傳遞中起著關鍵[0070]K7細胞對甘露糖修飾的納米顆粒的攝取增加應能提高治療效果。為了驗證這一飾的納米顆粒相比，甘露糖修飾的納米顆粒的治療顯著抑制K7細胞的增殖(圖3)，IC50最信號通路的失活介導的。DFMO通過抑制MAPK/ERK和AKT/mTOR/p70S6k信號通路來阻止食管納米顆粒在K7細胞中產生更高的凋亡率。血管內皮生長因子A(VEGFA)是TME中重要的細胞組相比，甘露糖修飾的納米顆粒也增加了凋亡相關蛋白的表達，并引起更高的凋亡率，[0074]腫瘤血管生成為快速擴張的惡性腫瘤提供必要的營養和氧氣。多項研究表明，究IR780負載的納米顆粒的組織生物分布。納米顆粒和甘露糖修飾的納米顆粒均成功分布位以評估腫瘤內滲透。免疫熒光成像顯示甘露糖修飾的納米顆粒在腫瘤內的分布與CD206[0078]使用小鼠K7骨肉瘤皮下腫瘤模型評估甘露糖修飾的納米顆粒對體內腫瘤生長的[0080]通過測量M1/M2表型的比例、細胞因子分泌和生物標志物蛋白的表達譜來評估米顆粒治療顯著提高了腫瘤中細胞毒性CD8+顆粒酶B+T淋巴細胞的數量至29.4而腫瘤內M1/M2巨噬細胞的比率和細胞因子分泌外，還通過westernblot和免疫組織化學染色測定了巨噬細胞表面蛋白(M2標記物CD206，M1標記物的CD86)和血管生成標記蛋白(VEGFR2，[0082]以上所述僅為本發明較佳的實施例，并非因此限制本發明的實施方式