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同工酶的定義同種生物體內催化相同反應的有關酶類稱為同工酶同工酶分析一、同工酶產生的機理(一)由不同基因位點編碼(二)由等位基因編碼(三)由多肽鏈化學修飾產生二、同工酶的測定方法(一)按照理化性質不同進行分離鑒定
1.電泳法同工酶氨基酸組成不同,等電點不同,電泳遷移率也就不同,據此可用電泳法分離鑒定2.層析法
根據同工酶分子荷電量不同,可用離子交換層析法加以分離(二)按照底物專一性不同進行鑒定
同工酶底物專一性不同,Km值也不同。如果同工酶之間的Km值差別足夠大,可以通過測定其Km值加以鑒定(三)按照最適pH不同進行鑒定同工酶分子氨基酸組成不同,最適pH也不同。如果同工酶最適pH之間的差別足夠大,可以通過調節緩沖溶液的pH值加以鑒定(四)按照免疫學特性不同進行分離鑒定(五)按照耐熱程度不同進行鑒定(六)選擇性抑制法由于同工酶的一級結構不同,因而免疫化學性質也不同。利用純化的同工酶免疫動物制備特異性的抗血清,此抗體只與該同工酶產生特異性免疫反應。因此,抗原決定簇不同的同工酶可用特異的免疫反應來識別。應用較多的免疫分析法有免疫抑制法、免疫沉淀法等。熱失活分析法同工酶各亞型對抑制
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