PAGEPAGE9專題綜合評估(五)本試卷分第Ⅰ卷(選擇題)和第Ⅱ卷(非選擇題)兩部分。滿分100分，考試時間60分鐘。第Ⅰ卷(選擇題，共50分)一、選擇題(本大題共25個小題，每小題2分，共50分)1．在分別蛋白質過程中，運用緩沖液的作用是(B)A．維持溶液濃度不變B．維持溶液酸堿度不變C．催化蛋白質分別過程順當完成D．無實際意義解析：分別蛋白質要用緩沖液，緣由是緩沖液在肯定范圍內能抵制外界酸堿對溶液pH的影響，維持pH基本不變。2．洗滌紅細胞時，離心所采納的方法是(B)A．低速長時間離心B．低速短時間離心C．高速長時間離心D．高速短時間離心解析：高速或長時間離心，會導致白細胞和淋巴細胞一同沉淀，得不到純凈的紅細胞，既而影響后面血紅蛋白的提取純度。3．在裝填凝膠柱時，不得有氣泡存在的緣由是(A)A．氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質的洗脫次序，降低分別效果B．氣泡阻礙蛋白質的運動C．氣泡能與蛋白質發生化學反應D．氣泡會在裝填凝膠的時候，使凝膠不緊密解析：在裝填凝膠柱時，不得有氣泡存在的緣由是氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質的洗脫次序，降低分別效果。4．下列各項中，不是電泳使樣品中各種分子分別的緣由的是(D)A．帶電性質差異 B．分子的大小C．分子的形態 D．分子的變性溫度解析：電泳是指帶電粒子在電場的作用下發生遷移的過程。帶電性質不同、分子的大小和形態不同都會影響帶電粒子在電場中的遷移速度，而遷移速度與分子變性溫度無關。5．在SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳過程中，不同蛋白質的遷移率完全取決于(B)A．電荷的多少B．分子的大小C．肽鏈的多少D．分子形態的差異解析：SDS能與蛋白質形成蛋白質—SDS復合物，SDS所帶負電荷的量大大超過了蛋白質分子原有的電荷量，因而掩蓋了不同種蛋白質間的電荷差別，使電泳遷移率完全取決于分子的大小。6．關于DNA聚合酶催化合成DNA子鏈的說法中，正確的是(A)A．以DNA為模板，使DNA子鏈從5′端延長到3′端的一種酶B．TaqDNA聚合酶必需在每次高溫變性處理后再添加C．DNA聚合酶能特異性地復制整個DNA的全部序列D．TaqDNA聚合酶是從深海生態系統中發覺的解析：在PCR擴增DNA分子的過程中，各種組分要一次性加入；DNA聚合酶只能特異性地催化DNA特異片段的復制；TaqDNA聚合酶是從美國黃石國家公園的一個熱泉中發覺的。7．PCR一般要經過三十多次循環，從其次輪循環起先，上一次循環的產物也作為模板參加反應，由引物Ⅰ延長而成的DNA單鏈做模板時將(D)A．仍與引物Ⅰ結合進行DNA子鏈的延長B．無需與引物結合，在酶的作用下從頭合成子鏈C．同時與引物Ⅰ和引物Ⅱ結合進行子鏈延長D．與引物Ⅱ結合進行DNA子鏈的延長解析：PCR擴增中，從其次輪循環起先由引物Ⅰ延長而成的DNA單鏈做模板時將與引物Ⅱ結合進行DNA子鏈的延長；由引物Ⅱ延長而成的DNA單鏈做模板時將與引物Ⅰ結合進行DNA子鏈的延長。8．在DNA粗提取與鑒定試驗中，有兩次DNA的沉淀析出：①DNA在0.14mol/L氯化鈉溶液中的溶解度最低；②DNA在冷卻的體積分數為95%的酒精中能沉淀析出。其依據的原理是(C)A．兩次都是①B．兩次都是②C．第一次是①，其次次是②D．第一次是②，其次次是①解析：第一次沉淀析出，利用的是原理①，因為在這種濃度的NaCl溶液中，DNA的溶解度最低，而蛋白質的溶解度增加，所以通過過濾能將DNA分別開，以除去蛋白質。后一次沉淀析出，利用的是原理②，即DNA不溶于冷酒精，而蛋白質能溶于冷酒精。9．PCR反應的最大特點是具有較大擴增實力與極高的靈敏性，但令人頭痛的問題是易污染，極其微量的污染即可造成假陽性的產生。防止污染的方法不包括(C)A．將樣品的處理、配制PCR反應液、PCR循環擴增及PCR產物的鑒定等步驟分區或分室進行B．吸樣槍吸樣要慢，吸樣時盡量一次性完成，槍頭小套、小離心管應一次性運用，以免交叉污染C．全部的PCR試劑都應放置于大瓶分裝，以削減重復加樣次數，避開污染機會D．PCR試劑、PCR反應液應與樣品及PCR產物分開保存，不應放于同一冰盒或同一冰箱解析：全部的PCR試劑都應放置于小瓶分裝，一次性用完，避開因多次運用造成污染。10．DNA的粗提取和鑒定試驗中，提取雞血細胞的核物質和析出含DNA的黏稠物這兩步中都用到了蒸餾水，其作用分別是(C)A．防止雞血細胞失水皺縮和稀釋NaCl溶液至0.14mol/LB．防止雞血細胞失水皺縮和溶解DNAC．使雞血細胞吸水漲破和稀釋NaCl溶液至0.14mol/LD．使雞血細胞吸水漲破和溶解DNA解析：雞血細胞在清水中會吸水漲破，從而釋放出核物質。DNA在NaCl溶液中的溶解度，是隨著NaCl溶液濃度的變更而變更的，在NaCl溶液濃度為0.14mol/L時，其溶解度最小，有利于DNA的析出。11．下列關于凝膠色譜法的說法正確的是(D)A．是依據蛋白質對其他分子的親和力來分別蛋白質的B．凝膠是一些微小的無孔的球體，小球體都是由多糖類化合物構成的C．相對分子質量較小的蛋白質的路程較長，但移動速度較快D．相對分子質量較大的蛋白質只能在凝膠外部移動，路程較短，移動速度較快解析：凝膠色譜法是依據相對分子質量的大小分別蛋白質的有效方法。所用的凝膠事實上是一些微小的多孔球體，這些小球體大多數是由多糖類化合物構成的，在小球體內部有很多貫穿的通道，當相對分子質量不同的蛋白質通過凝膠時，相對分子質量較小的蛋白質簡單進入凝膠內部的通道，路程較長，移動速度較慢；而相對分子質量較大的蛋白質無法進入凝膠內部的通道，只能在凝膠外部移動，路程較短，移動速度較快。相對分子質量不同的蛋白質分子因此得以分別。12．在血紅蛋白的整個提取過程中，不斷用磷酸緩沖液處理的目的是(D)A．防止血紅蛋白被O2氧化B．血紅蛋白是一種兩性物質，須要酸中和C．磷酸緩沖液會加速血紅蛋白的提取過程D．讓血紅蛋白處在穩定的pH范圍內，維持其結構和功能解析：利用磷酸緩沖液模擬細胞內的pH環境，保證血紅蛋白的正常結構和功能，便于分別視察(紅色)和科學探討(活性)。13．下列有關PCR技術的敘述，正確的是(B)A．每一輪回的模板DNA都來自反應前加入的組分B．每一輪回的引物都來自反應前加入的組分C．DNA聚合酶在反應中不斷損耗，加入的組分中應含有大量的DNA聚合酶D．反應中須要肯定量的DNA連接酶和限制性核酸內切酶解析：在進行PCR時，作為模板的DNA只需加入少量，因為每一輪回的產物可作為下一輪回的模板，A錯誤；PCR一般要經驗30多次循環，引物的須要量較大，這些引物都是在反應前加入的，B正確；PCR反應中所用DNA聚合酶為耐高溫的DNA聚合酶，此酶可反復運用，故加入的組分中只需含肯定量的DNA聚合酶即可，C錯誤；PCR反應中不須要DNA連接酶和限制性核酸內切酶，D錯誤。14．利用PCR技術將某DNA分子擴增n代，則須要(A)A．測定DNA分子兩端的脫氧核苷酸序列，以便設計引物對B．2n對引物參加子代DNA分子的合成C．向反應體系中加入解旋酶、DNA聚合酶等D．保持反應體系溫度恒定，確保擴增的正常進行解析：利用PCR技術擴增DNA時須要引物的參加，因此須要測定DNA分子兩端的脫氧核苷酸序列，以便設計引物對，A正確；DNA分子的復制方式為半保留復制，因此2n－1對引物參加子代DNA分子的合成，B錯誤；PCR過程中雙鏈DNA解開不須要解旋酶，且PCR擴增DNA分子是在較高溫度下進行的，因此須要耐高溫的DNA聚合酶，C錯誤；PCR擴增的過程為高溫變性、低溫復性、中溫延長，可見反應體系溫度并不恒定，D錯誤。15．在PCR試驗操作過程中，下列說法不正確的是(A)A．在微量離心管中添加各種試劑時，只需一個槍頭B．離心管的蓋子肯定要蓋嚴，防止液體外溢C．用手輕彈離心管側壁的目的是使反應液充分混合D．離心的目的是使反應液集中在離心管底部，提高反應效果解析：在微量離心管中添加各種試劑時，每吸取一種試劑后，移液器上的槍頭必需更換，以確保試驗的精確性。16．對在凝膠柱上加入樣品和洗脫的操作不正確的是(C)A．加樣前要使柱內凝膠面上的緩沖液下降到與凝膠面平齊B．讓吸管管口沿管壁環繞移動貼壁加樣至色譜柱頂端，不要破壞凝膠面C．打開下端出口，待樣品完全進入凝膠層后，干脆連接緩沖液洗脫瓶起先洗脫D．待紅色的蛋白質接近色譜柱底端時，每5mL收集一管，連續收集流出液解析：樣品完全進入凝膠層后，加入磷酸緩沖液到適當高度，再連接緩沖液洗脫瓶起先洗脫。17．凝膠色譜法洗脫時加入磷酸緩沖液，下列說法不正確的是(A)A．在肯定范圍內，能對抗外來大量強酸、強堿對pH的影響，維持pH基本不變B．選用磷酸緩沖液(pH＝7.0)可用Na2HPO4和NaH2PO4按相應配比配制C．緩沖溶液通常是由1～2種化合物(緩沖劑)溶解于水中制得，調整緩沖劑的配比就可制得不同pH范圍的緩沖液D．緩沖溶液廣泛應用于生化試驗、微生物培育、組織切片和細菌的染色等的探討解析：緩沖液的調整實力是有限的。18．下列關于“DNA的粗提取與鑒定”試驗敘述，錯誤的是(C)A．酵母和菜花均可作為提取DNA的材料B．DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸餾水C．向雞血細胞液中加蒸餾水攪拌，可見玻璃棒上有白色絮狀物D．DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱，冷卻后變藍解析：本題考查DNA的粗提取和鑒定試驗，意在考查考生對試驗原理的理解和對試驗操作要求的駕馭狀況。原則上含DNA的生物材料都可用來提取DNA，只是選用DNA含量高的生物組織，勝利的可能性更大；DNA在2mol/LNaCl溶液和蒸餾水中溶解度都較大；向雞血細胞液中加蒸餾水攪拌，雞血細胞會吸水裂開，但在蒸餾水中不會析出DNA；DNA溶液加入二苯胺試劑后需沸水浴加熱，待冷卻后溶液變藍。19．下列有關緩沖溶液的說法，不正確的是(A)A．緩沖溶液能夠抵制外界任何酸和堿對溶液pH的影響，維持pH基本不變B．緩沖溶液通常由1～2種緩沖劑溶解于水中配制而成C．調整緩沖劑的運用比例就可以制得在不同pH范圍內運用的緩沖溶液D．生物體內進行的各種生物化學反應都是在肯定的pH下進行的解析：緩沖溶液通常由1～2種緩沖劑溶解于水中配制而成。調整緩沖劑的運用比例就可以制得在不同pH范圍內運用的緩沖溶液。在肯定范圍內，緩沖溶液能夠抵制外界的酸和堿對溶液pH的影響，維持pH基本不變，超過肯定范圍，緩沖溶液就起不到這樣的作用了。20．下列敘述錯誤的是(C)A．在肯定范圍內，緩沖溶液能夠抵制外界的酸和堿對溶液pH的影響，維持pH基本不變B．電泳是指帶電粒子在電場的作用下發生遷移的過程C．洗滌紅細胞時，用五倍體積的蒸餾水充分沖洗D．緩沖溶液通常由1～2種緩沖劑溶解于水中配制而成解析：明確緩沖液的作用是做該類題目的關鍵。洗滌紅細胞時，應是加入五倍體積的生理鹽水，以維持紅細胞的正常形態和結構。21．如凝膠色譜柱取長為40cm，內徑為1.6cm的玻璃管。下列有關說法不正確的是(B)A．凝膠色譜柱直徑的大小不影響分別的效果，但直徑過大造成洗脫液體積增大，樣品的稀釋度過大B．凝膠色譜柱過超群過1m，不影響分別的效果，但耗用洗脫液過多，樣品的稀釋度過大C．凝膠色譜柱過短，則影響混合物的分別度D．以上說法有兩種正確解析：凝膠色譜柱直徑大小不影響分別的效果，但是直徑過大會造成洗脫液體積增大，樣品的稀釋度過大，因此應選擇直徑不超過2cm的色譜柱。凝膠色譜柱的高度與分別度有關，一般不超過1m，過短也會影響混合物的分別。22．下列有關提取和分別血紅蛋白的試驗敘述錯誤的是(A)A．該試驗的材料必需選用雞血B．通過透析法可以去除樣品中相對分子質量較小的雜質，此為樣品的粗提取C．凝膠色譜法是利用蛋白質的相對分子質量的大小分別蛋白質D．電泳法是利用各種分子帶電性質的差異及分子的大小和形態不同進行分別解析：該試驗的材料不能選用雞血，而應用哺乳動物成熟的紅細胞，因為后者沒有細胞核和各種細胞器，有利于得到較純凈的血紅蛋白；透析袋可允許小分子自由進出，而大分子則保留在袋內，因此通過透析法可以去除樣品中相對分子質量較小的雜質，此為樣品的粗提取；凝膠色譜法是利用蛋白質的相對分子質量的大小分別蛋白質；電泳法是利用各種分子帶電性質的差異及分子的大小和形態不同進行分別的。23．關于電泳的說法不正確的是(C)A．電泳是指帶電粒子在電場的作用下發生遷移的過程B．帶電分子會向著與其所帶電荷相反的電極移動C．蛋白質在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于它所帶凈電荷的多少D．用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳，蛋白質的電泳遷移率完全取決于分子的大小解析：蛋白質在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于它所帶凈電荷的多少以及分子的大小等因素。SDS能與各種蛋白質形成蛋白質—SDS復合物，SDS所帶負電荷的量大大超過了蛋白質分子原有的電荷量，因而掩蓋了不同種蛋白質間的電荷差異，使電泳遷移率完全取決于分子的大小。24．關于DNA的粗提取與鑒定的試驗中，依據的原理不包括(C)A．DNA在NaCl溶液中的溶解度，隨NaCl濃度的不同而不同B．利用DNA不溶于酒精的性質，可除去細胞中溶于酒精的物質而得到較純的DNAC．DNA是大分子有機物，不溶于水而溶于某些有機溶劑D．在沸水中，DNA遇二苯胺會出現藍色反應解析：DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，利用這一特點選擇適當的鹽濃度就能使DNA充分溶解，而使雜質沉淀，或者相反，以達到分別目的；DNA不溶于酒精溶液，但是某些蛋白質則可溶于其中；在沸水浴的條件下，DNA被二苯胺染成藍色。25．下列關于凝膠色譜法的原理及操作不正確的是(C)A．是利用凝膠把分子大小不同的物質分別開的一種方法B．在洗脫過程中，大分子不能進入凝膠內部而最先流出，而小分子可以進入凝膠內部而流速緩慢，以致最終流出C．凝膠內部有很微細的多孔網狀結構，其孔隙大小與被分別的物質分子的大小無相應關系D．一般狀況下，凝膠對要分別的物質沒有吸附作用，因此全部要分別的物質都應當被洗脫出來解析：凝膠色譜法是依據相對分子質量大小分別蛋白質的有效方法，凝膠是由多糖類化合物構成的，其內部有很微細的多孔網狀結構，小分子蛋白質可以進入凝膠內部，路程較長，移動速度慢；而相對分子質量較大的蛋白質無法進入凝膠內部，路程較短，移動速度快，因此在洗脫過程中分別。選用不同種凝膠，其網狀結構不同，孔隙大小不同，可分別的分子大小不同，二者是相關的，故C項不正確。第Ⅱ卷(非選擇題，共50分)二、非選擇題(本大題共5個題，共50分)26．(10分)“DNA的粗提取和物理性狀視察”試驗裝置如下圖，分析回答：(1)試驗材料選用雞血細胞液，而不用雞全血，主要緣由是雞血細胞液中含有較高含量的DNA。(2)在圖A所示的試驗步驟中加蒸餾水的目的是加速細胞膜裂開，通過圖B所示的步驟取得濾液，再在濾液中加入2mol/LNaCl溶液的目的是使濾液中的DNA溶于濃鹽溶液；圖中C所示試驗步驟中加蒸餾水的目的是使DNA析出。(3)為鑒定試驗所得絲狀物的主要成分是DNA，可滴加甲基綠溶液，結果絲狀物被染成綠色。解析：解答本題，主要區分兩次蒸餾水的作用：第一次運用是使雞血細胞吸水漲破，DNA從細胞中出來進入濾液；其次次運用是使溶解于2mol/L的NaCl溶液中的DNA析出與雜質分別。本題還涉及DNA的鑒定，鑒定結果是絲狀物被染成綠色，則運用的指示劑為甲基綠，且無水浴加熱這一條件。27．(10分)有4瓶失去標簽的無色透亮液體。已知各裝有：大腸桿菌超標的自來水，丙種球蛋白溶液(一種抗體)，溶解有DNA分子的2mol/L的NaCl溶液，葡萄糖溶液。(1)請依據供應的鑒定方法的第一步，簡要寫出用相應物質進行鑒定的其余步驟和結果。第一步：各取4種液體少許分別倒入4個試管中，緩慢加入蒸餾水并用玻璃棒攪拌，則出現絲狀物的溶液，為溶解有DNA分子的2_mol/L的NaCl溶液。其次步：向其余3支試管中加入伊紅—美藍試劑，呈現深紫色的為大腸桿菌超標的自來水。第三步：將其余2種溶液各取少許分別倒入2支試管中，加入雙縮脲試劑，呈現紫色反應的為丙種球蛋白溶液。最終一瓶為葡萄糖溶液。(2)除上述鑒定DNA的方法外，還可以用哪些方法進行鑒定？加入二苯胺試劑并在沸水浴的條件下變為藍色或加入冷卻的酒精溶液，攪拌出現絲狀物。28．(10分)PCR技術成為分子生物學試驗的一種常規手段，在很短的時間內，可以將DNA擴增幾百萬倍甚至幾十億倍，使分子生物學試驗所需的遺傳物質不再受限于活的生物體。(1)加熱至94°C的目的是使DNA樣品的氫鍵斷裂，這一過程在生物體細胞內是通過解旋酶的作用來完成的。(2)新合成的DNA分子與模板DNA分子完全相同的緣由是DNA分子中獨特的雙螺旋結構和復制過程中嚴格遵循堿基互補配對原則。(3)若要檢測一個人是否感染了艾滋病病毒，你認為可以用PCR擴增血液中的D。A．白細胞DNA B．病毒蛋白質C．血漿抗體 D．病毒核酸29．(10分)下圖表示以雞血為試驗材料進行DNA的粗提取與鑒定的操作程序，請分析回答問題。(1)步驟一中，向雞血細胞液中加入蒸餾水并攪拌，可使雞血細胞裂開。(2)步驟二：過濾后收集含有DNA的濾液。(3)步驟三、四的操作原理是DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，通過限制NaCl溶液的濃度去除雜質，步驟四通過向溶液中加入蒸餾水調整NaCl溶液物質的量濃度為0.14mol/L時，DNA將會析出，過濾去除溶液中的雜質。(4)步驟七：向步驟六過濾后的濾液中，加入等體積的冷卻的體積分數為95%的酒精，靜置2～3min，溶液中會出現白色絲狀物，這就是粗提取的DNA。(5)步驟八：DNA遇二苯胺試劑，沸水浴5min，冷卻后，溶液呈藍色。解析：本題考查DNA的粗提取與鑒定的相關學問。第一步加入蒸餾水的目的是使紅細胞漲破，釋放出核物質；其次步收集含有核物質的濾液；由于DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同，所以通過限制NaCl溶液的濃度可以分別溶解DNA和析出DNA，并且對DNA進行提純；第四步加入蒸餾水的目的是漸漸稀釋NaCl溶液，使其物質的量濃度達到0.14mol/L，這時DNA在NaCl溶液中溶解度最低，可以析出DNA。DN