…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年冀少新版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、在制果酒、果醋、泡菜、腐乳時，發酵過程中對氧氣的需求分別是（）A.無氧、有氧、無氧、有氧B.有氧、無氧、無氧、有氧C.無氧、有氧、有氧、無氧D.兼氧、無氧、有氧、無氧2、下列有關基因工程中載體的說法正確的是()A.在進行基因工程操作中，被用作載體的質粒都是天然質粒B.所有的質粒都可以作為基因工程中的載體C.質粒是一種獨立于細菌染色體外的鏈狀DNA分子D.作為載體的質粒DNA分子上應有對重組DNA進行鑒定和選擇的標記基因3、下列關于生物技術的安全性與倫理性問題的敘述，正確的是（）A.中國不反對治療性克隆B.過多食用轉基因植物會導致人體出現外源性基因C.可以通過基因工程等手段進行人類嬰兒的改造，制造“完美人類”D.可以通過胚胎工程等相關技術進行代孕等輔助生殖手段，解決人類不孕問題4、下列關于轉基因生物與環境安全問題的敘述，錯誤的是（）A.重組的微生物在降解污染物的過程中可能產生二次污染B.雜草化的轉基因農作物，可能會影響植物基因庫的遺傳結構C.若轉基因植物的外源基因來源于自然界，則不存在安全性問題D.重視轉基因技術研發的同時，應重視轉基因農作物的安全性評價和管理5、下列關于生物技術的操作過程、原理或應用的說法錯誤的是（）A.基因工程的核心環節是構建基因表達載體B.胚胎分割可以看作動物有性生殖方法的之一C.細胞膜具有流動性是植物體細胞雜交的基礎D.稀釋涂布平板法可用于微生物的分離與純化評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)6、下列關于生物技術與倫理問題的觀點，不正確的是（）A.利用體外受精技術篩選早期胚胎性別，設計試管嬰兒B.基于科學和理性討論轉基因作物的安全性問題C.通過基因篩查禁止重大疾病基因攜帶者就業D.大量引入國外轉基因作物與本地近緣作物品種雜交7、關于胚胎工程的敘述，不正確的是（）A.胚胎工程的理論基礎是體內受精和早期胚胎發育B.胚胎收集中沖卵指的是從母體輸卵管中沖取卵子C.受精的標志為雌原核和雄原核融合D.胚胎移植時對所有供體牛和受體牛都要進行同期發情處理8、“莖尖脫毒”是少有的可以應用于大多數植物；清除體內病毒的最有效的生物技術，但其深層機理一直未被揭示。中國科學技術大學研究發現植物莖尖存在大量干細胞無法被病毒侵染，是因為植物干細胞免疫病毒關鍵因子——WUSCHEL（WUS）蛋白的作用，機制如圖。以下說法正確的是（）

A.“莖尖脫毒”誘導愈傷組織過程需要給予適宜光照B.WUS可能存在于多種植物細胞C.WUS蛋白抑制了病毒蛋白的合成D.植物莖尖干細胞具有自我更新和分化的潛能9、生物興趣小組的三位同學吃冰激凌后有兩人嚴重腹瀉，他們懷疑冰激凌中大腸桿菌超標。衛生部門規定1000mL自來水37℃培養48h后大桿菌菌落數不能超過3個，于是他們設計實驗對此冰激凌進行檢測。下列實驗操作，不合理的是（）A.再去小店買一個同樣品牌的同種冰激凌，然后配制伊紅美藍培養基（該培養基可用來鑒別大腸桿菌），滅菌、倒平板B.取10mL剛融化的冰激凌作為原液進行梯度稀釋、稀釋倍數為1×10～1×105C.取各個稀釋濃度的冰激凌液各0.lmL，用涂布平板法進行接種，每個濃度涂3個平板，共培養18個平板，在適宜溫度下培養48hD.統計菌落數目，以菌落數代表大腸桿菌數會導致統計結果比實際值偏小10、某實驗小組利用下圖所示質粒和目的基因來構建基因表達載體，將目的基因導入大腸桿菌細胞并表達。下列敘述正確的是（）

A.圖中的質粒用酶A切割后，會產生4個游離的磷酸基團B.在構建重組質粒時，可用酶A和酶C切割質粒和目的基因C.成功導入目的基因的大腸桿菌可在含四環素的培養基中生長D.若用酶B和酶C切割，可以避免質粒的自身環化11、甲流試劑盒中的抗血凝素單克隆抗體能與甲流病毒的血凝素蛋白（HA）特異性結合，發揮診斷作用。利用小鼠制備抗HA單克隆抗體的流程如圖，下列敘述正確的是（）

A.制備抗HA單克隆抗體使用的B淋巴細胞取自注射過HA的小鼠脾臟B.在特定的選擇培養基上，未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞都會死亡C.放入96孔板的細胞為多種雜交瘤細胞，均能產生所需抗體D.將圖中細胞群a在體外大規模培養，可以提取出大量的抗HA單克隆抗體12、研究人員用無機鹽、瓊脂和石油配制的培養基從被石油污染的土壤中篩選出了一種石油降解菌，下列相關表述正確的是（）A.培養基中的營養物質濃度越高，對微生物的生長越有利B.這種培養基是一種選擇培養基C.利用這種石油降解菌可以降解石油，修復土壤D.相對于未被污染的土壤，從被石油污染的土壤中更容易分離到石油降解菌13、某植物有甲、乙兩品種，科研人員在設計品種乙組織培養實驗時，參照品種甲的最佳激素配比（見下表）進行預實驗。為確定品種乙的II階段的最適細胞分裂素濃度，參照表中α2（α2>2．0μmol·L-1），以0．5μmol·L-1為梯度，設計5個濃度水平的實驗，其中細胞分裂素最高濃度設為M。下列有關敘述正確的是（）。品種甲組織培養階段細胞分裂素/（μmol·L-1）生長素/（μmol·L-1）I誘導形成愈傷組織α1b1II誘導形成幼芽α2b2Ⅲ誘導生根α3b3

A.表中發生基因選擇性表達的是II和Ⅲ階段B.實驗中共配制了2種不同的培養基，即生根培養基和生芽培養基C.確定品種乙II階段最適細胞分裂素濃度的實驗中，M為α2+2μmol·L-1D.生長素和細胞分裂素的配比是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵因素14、已知蘇云金芽孢桿菌中的毒蛋白基因B和豇豆中的胰蛋白酶抑制劑基因D均可導致棉鈴蟲死亡，棉花的短果枝由基因A控制，基因A所在的染色體有片段缺失，含片段缺失染色體的雄配子致死。科研人員將抗蟲基因B和D導入棉花的同一條染色體上獲得了基因型為AaBD的多個短果枝抗蟲棉植株，讓其自交得到F1（不考慮減數分裂時的染色體互換）。下列說法正確的是（）A.若抗蟲基因與控制果枝的基因位于兩對同源染色體上，則基因型為AaBD的短果枝抗蟲棉植株產生的配子基因型為AAaaDB.若基因D與a位于同一條染色體上，則F1中短果枝抗蟲:短果枝不抗蟲:長果枝抗蟲＝2:1:1C.若F1中短果枝抗蟲:長果枝不抗蟲＝1:1，則基因型為AaBD的短果枝抗蟲棉植株產生雌配子的基因型為ABD和aD.若F1中短果枝抗蟲:短果枝不抗蟲:長果枝抗蟲:長果枝不抗蟲＝3:1:3:1，則果枝基因和抗蟲基因可能位于兩對同源染色體上評卷人得分三、填空題(共8題，共16分)15、酶是細胞合成的生物催化劑。隨著生物科學技術的發展；酶已經走出實驗室，走進人們的生產和生活。請回答下面有關酶的問題：

（1）在腐乳制作的過程中；利用毛霉等微生物產生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質分解成________，____________將脂肪水解為甘油和脂肪酸。加酶洗衣粉里添加的酶制劑中，應用最廣泛；效果最明顯的是____________。

（2）果膠酶包括_____________________________；生產中如果要固定果膠酶；最好采用______________________________________法固定化。

（3）酶提取和分離原理：需要用__________法去除相對分子質量大的雜質蛋白，以純化酶；利用_________________________法對酶進行純度鑒定。16、第一步：______17、來源：主要是從______中分離純化出來的。18、純化DNA，去除雜質有________________個方案。19、利用DNA和蛋白質等其它成分在___________中的溶解度不同，選擇適當的鹽濃度就能使_______充分溶解，而使___________沉淀，或相反。20、蛋白質工程是指以______作為基礎，通過______，對現有蛋白質進行_____，或制造一種______，以滿足人類的生產和生活的需求。（基因工程在原則上只能生產______的蛋白質）

21、植物體細胞雜交的意義：_____。22、科學家采用定點誘變的方法構建T4溶菌酶的新蛋白質，發現其中一種新蛋白質的第9和第164位氨基酸殘基被轉換為半胱氨酸殘基，并形成一個二硫鍵。這種新蛋白質的熱穩定性會有什么變化？這項技術的要點是什么？_________評卷人得分四、判斷題(共3題，共9分)23、培養動物細胞一般使用液體培養基，培養基通常需要加入血清等一些天然成分。()A.正確B.錯誤24、要對蛋白質的結構進行設計改造，最終必須通過改造氨基酸序列來完成。（選擇性必修3P94）()A.正確B.錯誤25、治療性克隆是指利用克隆技術產生特定的細胞、組織和器官，用它們來修復或替代受損的細胞、組織和器官，從而達到治療疾病的目的。（選擇性必修3P106）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共3題，共21分)26、番茄果實在成熟的過程中；多聚半乳糖醛酸酶（PG）合成顯著增加，以降解果膠使細胞壁破損，從而使果實變紅變軟，但不利于保鮮。科學家利用基因工程得到轉基因番茄，大大延長果實保質期。操作流程如下，回答下列問題：

（1）利用RT—PCR技術即逆轉錄—多聚酶鏈式反應制備PG基因，最好從番茄的_____細胞中提取mRNA，此技術所需要的酶主要有_____。

（2）據圖可知，轉基因番茄主要通過抑制PG基因的_____過程；使PG合成量減少，從而延長果實保質期。

（3）圖中的農桿菌。能夠在含_____的培養基中生存，而在含_____的培養基中不能生存的即為已轉化的所需農桿菌。

（4）圖中將反向連接PC基因導入番茄細胞的方法稱為_____。要檢測感染農桿菌后的番茄細胞染色體DNA上是否插入了反向連接PC基因，_____（填“能”或“不能”）用標記的PG基因的單鏈作為探針進行檢測，理由是_____。

（5）在將轉化的番茄細胞通過植物組織培養技術形成番茄幼苗過程中，培養基_____（填“要”或“不要”）添加有機營養物質，原因是_____。27、廚余垃圾廢液中的淀粉；蛋白質、脂肪等微溶性物質可以被微生物分解并利用；但由于初期有益微生物數量相對較少，存在發酵周期長、效率低等缺點，極易對環境造成污染。

（1）為探究圓褐固氮菌和巨大芽孢桿菌處理某廚余垃圾廢液的最佳接種量比；用于制備微生物菌劑，研究者做了如下實驗：

①將兩種菌液進行不同配比分組處理；如下表所示：

。編號R0R1R2R3圓褐固氮菌∶巨大芽孢桿菌1∶00∶11∶12∶1將等量上表菌液分別接種于100mL_____中進行震蕩培養。本實驗中對照組的處理應為_____。

②培養3天后測定活菌數。取各組菌液采用_____法接種于基本培養基中，培養一段時間后選取菌落數在_____范圍內的平板進行計數；并依據菌落的形態特征對兩種菌進行區分，實驗結果見圖。

由實驗結果可知，兩種菌混合接種時有效菌落數均大于單獨接種，從代謝產物角度分析，原因可能是______________。接種量比例為_____________時；廢液中兩菌的有效活菌數最多。

（2）為進一步探究菌種比例對該廚余垃圾廢液中蛋白質；脂肪等有機物的降解效果；測得15天內廢液中蛋白質、脂肪的含量變化如下圖所示：

由實驗結果可知，對該廚余垃圾廢液中蛋白質、脂肪的降解效果最好的兩種菌接種比分別為_____、_____。

（3）固態廚余垃圾因富含粗纖維、蛋白質、淀粉等物質，可以通過蒸發、碾磨、干燥等方式進行加工，使加工后的產物在微生物的作用下形成有機復合肥等肥料；收集微生物處理后的廚余垃圾殘渣，經晾曬干后制成蛋白飼料；通過以上處理可實現_____（選填選項前的符號）。

A．物質循環再生B．能量多級利用C．提高能量傳遞效率28、四尾柵藻是一種淡水藻類；繁殖快；適應性強，可作為制備生物柴油的重要原料之一。為提高四尾柵藻油脂含量，研究人員將從含油量高的紫蘇中獲得的二酰甘油酰基轉移酶基因（DGAT1）與pBI121質粒構建表達載體，經轉化成功獲得高產油脂四尾柵藻，主要研究過程如下圖，其中DGAT1-F（5'-GCATCTAGAATGGCGATCTTGGACTC-3'）和DGAT1-R（5'-CGGATCCCTACCTTGCACTAGCTTTTC-3'）是以DGAT1基因為依據設計的一對引物，1acZ基因編碼產物在X-ga1和IPTG存在下，可以產生藍色沉淀，使菌落呈現藍色，否則菌落呈現白色。請回答下列問題。

(1)過程①中需要的酶有____________，過程②應選用的限制酶是____________和____________。

(2)研究中，在保存DGAT1基因時，將克隆載體導入大腸桿菌的優點有____________。

①穩定保存②準確復制③快速表達④方便取用。

(3)過程③經轉化的大腸桿菌通過____________（方法）接種到培養基上繼續培養。為篩選獲得目標菌株，培養基應加入的成分有____________。

(4)為檢測表達載體轉化四尾柵藻的情況及確定目的基因是否表達，研究人員進行了如下實驗，請完成下表。實驗步驟簡要操作過程初篩培養經轉化后的四尾柵藻接種于含①____________的BG11固體培養基并放置于人工氣候箱培養，一段時間后觀察其生長情況②____________在BG11固體培養基上分別挑取數個單藻落接種至BG11液體培養基中光照搖床培養，編號備用PCR驗證收集四尾柵藻藻體，提取基因組DNA，以DGAT1-F和DGAT1-R為引物，進行PCR驗證，未轉化的四尾柵藻作對照油脂含量測定利用索氏抽提法分別測定③____________的油脂含量結果處理統計并比較PCR驗證結果及藻體中油脂的含量評卷人得分六、綜合題(共3題，共15分)29、營養缺陷型菌株是指缺乏合成某些營養物質（如維生素或者氨基酸等）的能力；必須在基本培養基中加入特殊營養物質才能正常生長的菌株。用紫外線照射大腸桿菌并將其接種到甲培養基上一段時間，然后用絨布蓋在甲培養基上，用影印法將其菌落轉移到乙培養基上（如圖），經過一段時間的培養，篩選出抗青霉素的脯氨酸缺陷型大腸桿菌。回答下列問題：

（1）基本培養基需要保證大腸桿菌所需的____________________________等營養物質；培養基在使用之前需用__________法進行滅菌。

（2）甲培養基上通常使用的接種方法是______________________________；整個接種操作應該在酒精燈火焰附近進行，是因為____________。為了檢測培養基是否被污染，接種前，可以采取的解決方法是__________。

（3）從用途角度分析，乙培養基屬于__________培養基，乙培養基上獲得的菌落是____________________大腸桿菌。30、面對全球暴發的新型冠狀病毒肺炎疫情；中國政府付出了巨大的努力。科研人員在新冠病毒的免疫應答機制；快速檢測、免疫治療、預防等方面做了大量的工作，取得了顯著的成效，請回答下列問題：

(1)當新冠病毒侵入內環境和感染宿主細胞時，會激發人體的_______免疫過程。

(2)我國對新冠肺炎疫情的快速控制，與對新冠病毒的快速檢測能力分不開。除核酸檢測外，還可采用_______(寫出2種)檢測方法；其中核酸檢測采用的是實時熒光定量PCR技術，即在PCR反應體系中加入引物的同時加入熒光探針，探針完整時不發熒光。與目的基因結合的探針被耐高溫的DNA聚合酶水解，R與Q分離后，R發出的熒光可被熒光監測系統檢測(圖甲)，結果如圖乙。

新冠病毒為RNA病毒，PCR反應體系中除應加入TaqDNA聚合酶外，還應加入_______酶。疾控中心檢測5位新冠病毒感染者(圖乙)，載毒量最高的是_______，依據是_______。若出現陰性結果也不能排除新型冠狀病毒感集，可能產生似陰性的因素有_______。

A樣本中病毒量少；達不到實時熒光PCR檢測閾值。

B.樣本被污染；RNA酶將病毒RNA降解。

C.病毒發生變異。

(3)目前，新冠病毒滅活疫苗全程接種需要接種多次，首劑次與第2劑次的接種間隔要在3周及以上，第2劑在首劑接種后8周內盡早完成。二次接種同種疫苗的目的是_______；形成較好的免疫效果。

(4)我國科學工作者研發的重組腺病毒疫苗已獲批上審，腺病毒是常見病毒，人類感染腺病毒后僅產生輕微的自限性癥狀(疾病不會無限擴大，在人體免疫系統正常運作下，會逐漸改善)，且不整合進入染色體。與其他重組DNA疫苗相比，可減少多種臨床風險，請說明理由_____。31、復合型免疫缺乏癥患者由于缺少腺苷酸脫氨酶基因（ADA基因）而導致免疫功能缺損。科學家將患者的T細胞取出并轉入ADA基因；再將攜帶ADA基因的T細胞注人患者體內，可以改善患者的免疫功能。回答下列問題。

（1）從正常人的T細胞中獲取___________（填mRNA或DNA），在___________酶的作用下合成cDNA，在cDNA中還需要篩選才能獲得ADA基因，其原因是___________。

（2）根據ADA基因兩端的核苷酸序列合成_____________，并通過___________技術對目的基因進行篩選和擴增。在擴增過程中首先要進行90-95℃保溫，其目的是___________

（3）將人正常的ADA基因導人到患者的T細胞時，需要構建基因表達載體，其目的是______________。上述治病方法叫做___________。參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、A【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養兼性厭氧型。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養需氧型。

3；參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陳代謝類型是異養需氧型。

4；參與泡菜制作的微生物是乳酸菌；其其新陳代謝類型是異養厭氧型。

【詳解】

果酒制作利用了酵母菌的無氧呼吸并且產生酒精；果醋制作利用了醋酸菌的有氧呼吸；泡菜制作利用了乳酸菌的無氧呼吸；腐乳制作利用了毛霉等真菌的有氧呼吸。

故選A。

【點睛】2、D【分析】【分析】

基因工程是按人們的意愿去有目的地改造；創建生物遺傳性，因此其最基本的工程就是要得到目的基因或核酸序列的克隆。分離或改建的基因和核酸序列自身不能繁殖，需要載體攜帶它們到合適的細胞中復制和表現功能。常用的載體有質粒，噬菌體和病毒等。

【詳解】

在基因工程中；天然的質粒不能直接作為載體，需要進行人工改造，A選項錯誤；不是所有的質粒都可以作為基因工程中的載體，質粒用作載體的基本要求是具有一至多個限制性核酸內切酶的識別位點和具有標記基因，B選項錯誤；質粒是一種獨立于細菌染色體外的環狀DNA分子，C選項錯誤；作為載體的質粒DNA分子上應有對重組DNA進行鑒別和選擇的標記基因，D選項正確。

【點睛】

基因工程中的重組DNA是通過目的基因和載體獲得的，故載體上必須有能夠用限制性核酸內切酶識別的切割位點才能進行切割，用于獲得重組DNA分子，并不是所有的質粒都能符合載體要求。同樣，天然的質粒需要人工改造后才能用于基因工程。3、A【分析】【分析】

1；試管嬰兒技術是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過培養發育為早期胚胎后，再經移植后產生后代的技術。

2；治療性克隆：指利用克隆技術產生特定細胞和組織（皮膚、神經或肌肉等）用于治療性移植。生殖性克隆：指將克隆技術用于生育目的；即用于產生人類個體。

3；轉基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應、過敏源、營養成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環境安全（對生態系統穩定性的影響）。

【詳解】

A；中國政府的態度是禁止生殖性克隆人；堅持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗），不反對治療性克隆，A正確；

B；轉基因技術的安全問題需要驗證才能得到證實。轉基因食物中的基因會在消化道被消化；不會轉入到人體基因中，人體通常不會出現外源性基因，B錯誤；

C；不可以通過基因工程等手段進行人類嬰兒的改造；屬于違法行為，C錯誤；

D；不可以進行代孕等輔助生殖手段解決人類不孕問題；代孕為違法行為，D錯誤。

故選A。4、C【分析】【分析】

轉基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應；過敏源、營養成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環境安全（對生態系統穩定性的影響）。（1）有關食物安全問題；反對者的觀點是：不能對轉基因食物安全性掉以輕心．他們的理由是：①反對“實質性等同”；②擔心出現滯后效應；③擔心出現新的過敏源；④擔心營養成分改變；⑤擔心會侵犯宗教信仰者或素食者的權益。（2）有關生物安全問題，反對者的觀點是：轉基因植物可能會對生物多樣性構成潛在的風險和威脅。他們的理由：①轉基因植物擴散到種植區外變成野生種或雜草；②轉基因植物競爭能力強，可能成為“入侵的外來物種”；③轉基因植物的外源基因與細菌或病毒雜交，重組出有害的病原體；④可能使雜草成為有抗除草劑基因的“超級雜草”。（3）有關環境安全問題，反對者的觀點是：轉基因生物會對生態系統穩定性和人類生活環境造成破壞。他們的理由：①轉基因植物打破自然物種的原有界限，可能破壞生態系統穩定性；②重組微生物產生的中間產物可能造成二次污染；③重組DNA與微生物雜交是否會產生有害病原微生物；④轉基因植物花粉中的有毒蛋白可能通過食物鏈進入生物。

【詳解】

A；重組的微生物在降解污染物的過程中所產生的中間產物；可能會對人類生活環境產生二次污染，A正確；

B；轉基因作物作為外來品種進入自然生態系統；往往具有較強的“選擇優勢”,可能會影響植物基因庫的遺傳結構，淘汰原來棲息地上的物種及其它遺傳資源，致使物種呈單一化趨勢，造成生物數量劇減，甚至會使原有物種滅絕，導致生物多樣性的喪失，B正確；

C；即使轉基因植物的外源基因來源于自然界；也可能會產生安全性問題，如某些轉基因植物產生的蛋白質可能會成為某些人的新的過敏源，C錯誤；

D；對轉基因生物的管理的總原則是在保證人類健康和環境安全的前提下；促進生物技術的發展，需要重視轉基因農作物的安全性評價和管理，D正確。

故選C。5、B【分析】【分析】

胚胎分割：是指采用機械方法將早期胚胎切割成2等份；4等份或8等份等；經移植獲得同卵雙胚或多胚的技術。來自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質，胚胎分割可以看做動物無性繁殖或克隆的方法之一。

【詳解】

A；基因表達載體的構建是基因工程的核心；一個完整的基因表達載體至少包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等，A正確；

B；胚胎分割可以看作動物無性生殖方法的之一；B錯誤；

C；植物體細胞雜交涉及原生質體的融合；依賴于細胞膜的流動性，因此細胞膜具有流動性是植物體細胞雜交的基礎，C正確；

D；稀釋涂布平板法是將待分離的菌液經過大量稀釋后；均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落，可用于微生物的分離與純化，D正確。

故選B。二、多選題(共9題，共18分)6、A:C:D【分析】【分析】

1；設計試管嬰兒技術是通過體外受精獲得許多胚胎；然后從中選擇符合要求的胚胎，再經移植后產生后代的技術。

2；轉基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應、過敏源、營養成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環境安全（對生態系統穩定性的影響）。

【詳解】

A；我國不允許利用體外受精技術篩選早期胚胎性別；A錯誤；

B；基于科學和理性討論轉基因作物的安全性問題；B正確；

C；通過基因篩查禁止重大疾病基因攜帶者就業；不符合倫理道德，C錯誤；

D；大量引入國外轉基因作物與本地近緣作物品種雜交；可能造成基因污染，D錯誤。

故選ACD。7、B:C:D【分析】【分析】

1；胚胎工程--指對動物早期胚胎或配子所進行的多種顯微操作和處理技術；如體外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干細胞培養等技術。經過處理后獲得的胚胎，還需移植到雌性動物體內產生后代，以滿足人類的各種需求。理論基礎：哺乳動物的體內受精和早期胚胎發育規律。

2；精過程為：頂體反應→穿越放射冠→穿越透明帶（透明帶反應）→卵細胞膜反應（卵黃膜封閉作用）→卵子完成減數第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成、核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開始。

3；胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產性能優秀的供體；有健康的體質和正常繁殖能力的受體。用激素進行同期發情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數排卵處理）；②配種或人工授精；③對胚胎的收集、檢查、培養或保存（對胚胎進行質量檢查，此時的胚胎應發育到桑椹或胚囊胚階段）；④對胚胎進行移植；⑤移植后的檢查。

【詳解】

A；胚胎工程的理論基礎是哺乳動物的體內受精和早期胚胎發育規律；A正確；

B；胚胎收集中沖卵指的是從母體輸卵管中沖取早期胚胎；B錯誤；

C；受精的標志為在卵黃膜和透明帶之間觀察到兩個極體；C錯誤；

D；胚胎移植時對供體母牛和受體牛都要進行同期發情處理；對供體公牛不需要進行同期發情處理，D錯誤。

故選BCD。

【點睛】8、B:C:D【分析】【分析】

植物組織培養的原理是細胞的全能性。暗培養有助于愈傷組織的形成；再分化一定要有光照。

【詳解】

A；“莖尖脫毒”誘導愈傷組織過程屬于脫分化過程；脫分化需要避光處理，A錯誤；

B；據題干信息“植物莖尖存在大量干細胞無法被病毒侵染；是因為植物干細胞免疫病毒關鍵因子WUS蛋白的作用”可知，WUS可能存在于多種植物細胞，B正確；

C；據題圖可知；WUS因子可以抑制病毒蛋白質的合成，進而導致病毒顆粒不能組裝，C正確；

D；植物莖尖干細胞具有自我更新和分化的潛能；屬于全能性較高的細胞，故在植物組織培養過程中是較好的材料，D正確。

故選BCD。9、A:B:C【分析】【分析】

1；微生物常見的接種的方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法；稀釋涂布平板法可用于微生物的計數。

2；稀釋涂布平板法統計菌落數目的原理：①當樣品的稀釋度足夠高時；培養基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌；②通過統計平板上的菌落數來推測樣品中大約含有的活菌數。

【詳解】

A；若只對一個冰激凌進行檢測；樣品太少則不能確定是某個冰激凌的質量問題還是這個品牌冰激凌的質量問題，正確的做法是再去小店隨機買多個同樣品牌的同種冰激凌，A錯誤；

B、測定細菌的數量，一般選用104、105、106倍的稀釋液進行培養，應取10mL剛融化的冰激凌作為原液進行梯度稀釋、稀釋倍數為1×10～1×106；B錯誤；

C；實驗應該設置對照；取各個稀釋濃度的冰激凌液各0.lmL，用涂布平板法進行接種，每個濃度涂3個平板，再取一個平板接種等量無菌水（作為對照），共培養19個平板，在適宜溫度下培養48h，當對照組無菌落生長時，選擇菌落數在30-300的平板進行計數，C錯誤；

D；因為當兩個或多個細胞連在一起時；平板上觀察到的只是一個菌落，故統計菌落數目，以菌落數代表大腸桿菌數會導致統計結果比實際值偏小，該說法合理，D正確。

故選ABC。10、A:D【分析】【分析】

分析題圖：圖中質粒和外源DNA都含有限制酶A；B、C的識別序列和切割位點；若用酶A切割會同時破壞質粒上的兩個抗性基因。

【詳解】

A；質粒中含有2個酶A的酶切位點；所以切割后會產生4個游離的磷酸基團，A正確；

B；如果用酶A和酶C同時切割質粒；會破壞質粒的標記基因，B錯誤；

C；根據B項分析；需要用酶B和酶C切割質粒和目的基因，導致四環素抗性基因被破壞，所以不能在含四環素的培養基中生長，C錯誤；

D；若用酶B和酶C切割；產生不同的黏性末端，可避免質粒自身環化，D正確。

故選AD。11、A:B:D【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發生免疫反應；之后從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養，即用培養基培養和注入小鼠腹腔中培養；最后從培養液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；抗原與抗體的結合具有特異性；為制備抗HA單克隆抗體，則使用的B淋巴細胞應取自注射過HA的小鼠脾臟，A正確；

B；在特定的選擇培養基上；未融合的親本細胞（B淋巴細胞類型、骨髓瘤細胞類型）和融合的具有同種核的細胞（B淋巴細胞-B淋巴細胞型和骨髓瘤-骨髓瘤細胞型）都會死亡，B正確；

C；將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后；放入96孔板，不一定都能產生所需抗體，還需進行抗體陽性檢測，C錯誤；

D；據圖可知；圖中細胞群a在加入HA抗原后呈陽性，說明細胞群a產生了抗HA抗原的抗體，故將圖中細胞群a在體外大規模培養，可以提取出大量的抗HA單克隆抗體，D正確。

故選ABD。12、B:C:D【分析】【分析】

在微生物學中；將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養基，稱為選擇培養基。雖然各種培養基的具體配方不同，但一般都含有水；碳源（提供碳元素的物質）、氮源（提供氮元素的物質）和無機鹽。

【詳解】

A；培養基中的營養物質濃度過高會導致微生物不能從培養基中吸水；將出現失水過多而死亡的現象，對生長不利，A錯誤；

B；這種培養基以石油為唯一碳源；只有石油降解菌可在該培養基上正常存活，因此是一種選擇培養基，B正確；

C；被石油污染的土壤通氣性極差；利用這種石油降解菌可以降解石油，修復土壤，C正確；

D；根據生物與其生存環境相適應的特點；未被污染的土壤中幾乎不含石油分解菌，從被石油污染的土壤中更容易分離到石油降解菌，D正確。

故選BCD。13、A:B:D【分析】【分析】

植物組織培養中植物激素使用：物組織培養中關鍵性激素是生長素和細胞分裂素；同時使用生長素和細胞分裂素時；兩者用量的比例影響植物細胞的發育方向；先使用細胞分裂素，后使用生長素，細胞既分裂又分化。

【詳解】

A；Ⅰ階段為脫分化；II階段和Ⅲ階段為再分化，Ⅰ、II、Ⅲ階段中會發生基因的選擇性表達，A錯誤；

B；實驗至少配制了3種不同的培養基；即形成愈傷組織的培養基、生根培養基和生芽培養基，B錯誤；

C、由于參照品種B的激素配比（a2＞2.0），以0.5μmol/L為梯度，設計5個濃度水平的實驗，則細胞分裂素濃度依次為a2-1.0μmol/L、a2-0.5μmol/L、a2μmol/L、a2+0.5μmol/L、a2+1.0μmol/L，可見細胞分裂素的最高濃度M應設為a2+1.0μmol/L；C錯誤；

D；生長素和細胞分裂素的配比是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵因素；D正確。

故選ABD。14、C:D【分析】【分析】

由題意知；B；D位于一條染色體上，因此不遵循自由組合定律。基因A所在的染色體有片段缺失，含片段缺失染色體的雄配子致死，如果A（a）與BD分別位于兩對同源染色體上，則遵循自由組合定律，基因型為AaBD產生的配子的類型及比例是ABD：a：aBD：A=1：1：1：1；如果A（a）與BD位于一對同源染色體上，則A（a）與BD也不遵循自由組合定律，基因型為AaBD的個體產生的配子的類型是ABD：a=1：1或者是aBD：A=1：1。

【詳解】

A；由于抗蟲基因B和D位于棉花的同一條染色體上；若抗蟲基因與控制果枝的基因位于兩對同源染色體上，則基因型為AaBD的短果枝抗蟲棉植株產生的配子基因型為ABD、A、aBD、a，A錯誤；

B、若基因B、D與a位于同一條染色體上，則該植株產生的雌配子有A、aBD兩種，雄配子只有aBD一種，則F1中AaBD（短果枝抗蟲）：aaBD（長果枝抗蟲）＝1:1；B錯誤；

C、若F1中短果枝抗蟲（A_BD）:長果枝不抗蟲（aa）＝1:1；則可推測親本產生的雄配子為a，故親本產生雌配子的基因型為ABD和a，C正確；

D、若F1中短果枝抗蟲（A_BD）:短果枝不抗蟲（A_）:長果枝抗蟲（aaBD）:長果枝不抗蟲（aa）＝3:1:3:1；則可推測雄配子有a和aBD兩種，即A/a基因與BD基因沒有連鎖關系，故果枝基因和抗蟲基因可能位于兩對同源染色體上，D正確。

故選CD。三、填空題(共8題，共16分)15、略

【分析】【分析】

1；腐乳制作過程中多種微生物參與了發酵；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物產生蛋白酶能將豆腐中的蛋白質轉化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪轉化成甘油和脂肪酸。

2；果膠酶能夠分解果膠；瓦解植物的細胞壁及胞間層，使榨取果汁變得容易，而果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得渾濁的果汁變得澄清。果膠酶并不特指某一種酶，而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶。

【詳解】

（1）在腐乳制作的過程中；利用毛霉等微生物產生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質分解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪水解為甘油和脂肪酸；加酶洗衣粉里添加的酶制劑中，應用最廣泛；效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。

（2）果膠酶并不特指某一種酶；而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶；果膠分解酶和果膠酯酶；在果汁生產過程中如果要固定果膠酶，最好采用化學結合和物理吸附法固定化，這是因為酶分子小，體積小的酶容易從包埋材料中漏出。

（3）酶提取和分離原理：需要用凝膠色譜法去除相對分子質量大的雜質蛋白；以純化酶；利用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法對酶進行純度鑒定。

【點睛】

本題考查腐乳制作和酶提取等知識，對于此類試題，需要考生注意的細節較多，如實驗的原理、實驗步驟、實驗采用的試劑及試劑的作用等，需要考生在平時的學習過程中注意積累。【解析】小分子肽和氨基酸脂肪酶堿性蛋白酶和堿性脂肪酶半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠酯酶化學結合法和物理吸附凝膠色譜（分配色譜）聚丙烯酰胺凝膠電泳16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因的獲取17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】原核生物18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】319、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】不同濃度的NaCL溶液DNA雜質20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蛋白質分子的結構規律及其生物功能的關系基因修飾或基因合成改造新的蛋白質自然界已存在21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】克服了遠緣雜交不親和的障礙。22、略

【分析】【詳解】

蛋白質形成二硫鍵，使蛋白質的結構更加穩定，因此T4溶菌酶的熱穩定性會提高。這項技術屬于蛋白質工程技術，其步驟為從預期的蛋白質功能出發→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質。【解析】會提高T4溶菌酶的耐熱性。這項技術屬于蛋白質工程技術，該技術的要點是從預期的蛋白質功能出發→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質。四、判斷題(共3題，共9分)23、A【分析】【分析】

液體培養基主要是模擬動物體內環境；動物體細胞是生活在組織液當中，而且細胞要直接從組織液里獲得營養和排出廢物。所以液體培養基相當于組織液的液體環境。

【詳解】

為了保證細胞培養時營養物質和生長因子的供給，培養基中需添加一定量的動物血清等天然成分，可以補充合成培養基中缺乏的物質，故該表述正確。24、B【分析】【詳解】

要對蛋白質的結構進行設計改造，最終必須通過改造基因中的堿基序列來完成，因為基因能指導蛋白質的生物合成，故說法錯誤。25、A【分析】【詳解】

治療性克隆是指利用克隆技術產生特定的細胞、組織和器官，用它們來修復或替代受損的細胞、組織和器官，從而達到治療疾病的目的。本說法正確。五、實驗題(共3題，共21分)26、略

【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取；利用PCR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同；導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因??DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA??分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）利用RT—PCR技術即逆轉錄—多聚酶鏈式反應制備PG基因；由于多聚半乳糖醛酸酶（PG）可降解果膠使細胞壁破損，從而使果實變紅變軟，說明PG基因在果肉中表達量較高，所以最好從番茄的果肉細胞中提取mRNA，此技術所需要的酶主要有逆轉錄酶和Taq酶（或熱穩定DNA聚合酶）；

（2）據圖可知；轉基因番茄PG基因與反向連接PG基因的轉錄產物mRNA1和mRNA2相結合形成雙鏈，從而抑制PG基因的翻譯過程，使PG合成量減少，從而延長果實保質期；

（3）分析表達載體的構建過程圖可知；目的基因插入到圖中農桿菌的四環素抗性基因上，導致農桿菌失去了四環素的抗性，所以圖中農桿菌能夠在含卡那霉素的培養基中生存，而在含四環素的培養基中不能生存的即為已轉化的所需農桿菌；

（4）圖中是利用農桿菌將反向連接PC基因導入番茄細胞的；此方法稱為農桿菌轉化法。不能用標記的PG基因的單鏈作為探針進行檢測番茄細胞染色體DNA上是否插入了反向連接PC基因，理由是番茄細胞內原有的天然PG基因和插入的反向連接PG基因，均會與該探針形成雜交帶；

（5）將轉化的番茄細胞通過植物組織培養技術形成番茄幼苗過程中；需要在培養基中添加有機營養物質，原因是該培養過程中植物細胞不能進行光合作用（或光合作用很弱）。

【點睛】

本題結合圖解，考查基因工程和植物組織培養的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟；識記植物組織培養的過程及應用，能結合圖中信息準確答題。【解析】果肉逆轉錄酶和Taq酶（或熱穩定DNA聚合酶）翻譯卡那霉素四環素農桿菌轉化法不能番茄細胞內原有的天然PG基因和插入的反向連接PG基因，均會與該探針形成雜交帶要該培養過程中植物細胞不能進行光合作用（或光合作用很弱）27、略

【分析】【分析】

常用的接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。在統計菌落數目時；為了保證結果準確，一般選擇菌落數在30-300的平板進行計數。

【詳解】

（1）①要探究圓褐固氨菌和巨大芽孢桿菌處理某餐廚垃圾廢液的最佳接種量比；故需要將不同配比的菌液接種在100mL某餐廚垃圾廢液中，為了保證氧氣供應及目的菌與培養液充分接觸，需要進行振蕩培養。另外為了減小誤差，還需要設置對照組，接種等量無菌水，在相同的條件下培養。

②測定活菌數；需要利用稀釋涂布平板法，接種時故需要取一定量菌液進行梯度稀釋，然后分別取0.1mL的菌液采用涂布法接種于基本培養基中培養。可以根據菌落的形態區分兩種菌，為了保證結果準確，一般選擇菌落數在30-300的平板進行計數，根據實驗數據可知，兩種菌混合接種時有效菌落數均大于單獨接種，從代謝產物角度分析，原因可能是兩種菌可以相互利用對方的代謝產物作為營養物質。當兩菌種接種量比例為1：1時，廢液中兩種菌種的有效活菌數能夠實現同步最大化。

（2）由實驗數據可知，R3接種組隨著時間的延長，蛋白質的含量下降最明顯；R1接種組隨著處理時間的延長；脂肪的含量下降最明顯，即脂肪的降解效果最好。

（3）固態廚余垃圾因富含粗纖維；蛋白質、淀粉等物質；可加工形成有機復合肥、蛋白飼料等，利用了物質循環再生、能量多級利用的生態工程的原理，AB正確。故選AB。

【點睛】

本題結合圖形和表格，主要考查微生物的分離和培養的相關知識，要求考生掌握稀釋涂布平板法的操作流程，識記微生物計數的方法，能結合所學知識和圖形信息準確答題。【解析】某廚余垃圾廢液加入等量無菌水稀釋涂布平板法30~300兩種菌可以相互利用對方的代謝產物作為營養物質（一種菌的代謝產物是另一種菌的營養物質）1:1R3（或2:1）R1（或0:1）AB28、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本工具：限制性內切核酸酶；識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開。DNA連接酶，將兩個DNA片段連接起來，恢復被限制酶切開的磷酸二酯鍵。載體，將外源基因送入受體細胞。

2；基因工程的基本過程：目的基因的篩選與獲取；基因表達載體的構建，將目的基因導入受體細胞，目的基因的檢測和鑒定。

【詳解】

（1）過程①包括逆轉錄和PCR，逆轉錄需要反轉錄酶的參與，PCR過程需要耐高溫的DNA聚合酶。限制酶的作用是識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開，對比幾種限制酶的結合位點和DGAT1-F、DGAT1-R的堿基序列，可知過程②應選用的限制酶是BamHI和XbaI。

（2）將克隆載體導入大腸桿菌；可以與外界環境隔離，能夠穩定保存，準確復制，大腸桿菌比基因方便取用，故選①②④。

（3）根據培養基上菌落的分布可知所用接種方法是稀釋涂布平板法。克隆載體中含有氨芐青霉素抗性基因；1acZ基因；1acZ基因編碼產物在X-ga1和IPTG存在下，可以產生藍色沉淀，使菌落呈現藍色，否則菌落呈現白色，所以為篩選獲得目標菌株，培養基應加入的成分有氨芐青霉素、X-gal、IPTG。

（4）pBI121質粒中含有卡那霉素抗性基因，所以經轉化后的四尾柵藻接種于含卡那霉素的BG11固體培養基并放置于人工氣候箱培養，一段時間后觀察其生長情況。在BG11固體培養基上分別挑取數個單藻落接種至BG11液體培養基中光照搖床培養，液體培養基可以用于擴大培養，增加四尾柵藻種群密度。上一步驟中用未轉化的四尾柵藻作對照，所以利用索氏抽提法分別測定（等量的）轉化后和未轉化的四尾柵藻的油脂含量，從而檢測表達載體轉化四尾柵藻的情況及確定目的基因是否表達。【解析】(1)反轉錄酶、耐高溫的DNA聚合酶BamHIXbaI

(2)①②④

(3)稀釋涂布平板法氨芐青霉素；X-gal、IPTG

(4)卡那霉素擴大培養（等量的）轉化后和未轉化的四尾柵藻六、綜合題(共3題，共15分)29、略

【分析】【分析】

1；平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

2；稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過足夠稀釋后；均勻涂布在培養皿表面，經培養后，可形成單菌落。

3；影印培養試驗主要是一個為了在一系列培養皿的相同位置上能培養出相同的菌落的試驗。

4；基本培養基需要含有氮源、碳源、水和無機鹽。

【詳解】

（1）基本培養基需要保證大腸桿菌所需的氮源；碳源、水和無機鹽等營養物質；培養基在使用之前需用高壓汽滅菌法進行滅菌。

（2）