微生物學實驗

華僑大學化工學院華僑大學化工學院實驗1微生物實驗室規則實驗2培養基配制及滅菌實驗1微生物實驗室規則、工作環境要求、實驗記錄、常用器皿材料和儀器設備實驗1微生物實驗室規則實驗2培養基配制及滅菌微生物實驗的意義、研究進展

和實驗內容

一、研究內容研究微生物的形態、結構、生理生化、遺傳變異、微生物與其他生物、與自然界之間的關系1.機理研究：微生物適應環境的機制，鞭毛運動的機理等（是生化和分子生物學研究的重要研究內容和研究材料。）實驗1微生物實驗室規則實驗2培養基配制及滅菌2.微生物與實際應用微生物與發酵工程微生物與環境工程微生物與農業微生物與醫學領域微生物與食品工業實驗1微生物實驗室規則實驗2培養基配制及滅菌二、微生物學研究進展

微生物基因組學研究（MicrobialGenomics）不可培養微生物（UnculturedMicroorganisms）DNA芯片（DNAChip）三域學說（Bacteria,Archae,Eucaryote）實驗1微生物實驗室規則實驗2培養基配制及滅菌三、微生物學與Nobel獎

到目前為止，幾十項Nobel生理學和醫學獎，化學獎都與微生物學有關參考：沈萍教授《微生物學》緒論部分Nobel獲獎者。實驗1微生物實驗室規則實驗2培養基配制及滅菌四、如何進行微生物學實驗嚴肅認真科學態度分析問題搞清原理實驗1微生物實驗室規則實驗2培養基配制及滅菌五、微生物實驗安排與考核平時表現、基礎實驗：10+30%，一次考試考試：60%實驗1微生物實驗室規則實驗2培養基配制及滅菌課堂紀律嚴格遵守實驗室規章制度嚴肅課堂紀律不允許無故曠課、早退遲到（3次）實驗1微生物實驗室規則實驗2培養基配制及滅菌實驗室安全和衛生

安全實驗室嚴禁吸煙。注意用水、用電和防火正確使用化學試劑和儀器正確清洗器具

禁止在實驗室吃東西及飲水實驗廢棄物分類處理，勿污染環境衛生每次實驗需留下4位同學值日，協助保持實驗室清潔（班長及生活委員安排）實驗1微生物實驗室規則實驗2培養基配制及滅菌實驗預習報告及實驗結果目的原理步驟結果及分析

學習委員（報告批改后返給同學修改，再收回留檔，統計分數）實驗1微生物實驗室規則實驗2培養基配制及滅菌周次教學內容、作業及考試安排周次教學內容、作業及考試安排3實驗1微生物實驗室規則、工作環境要求、實驗記錄、常用器皿材料和儀器設備實驗2微生物營養成分配制和消毒滅菌技術8實驗7放線菌的形態觀察霉菌的形態觀察4實驗3實驗室環境及人體表面微生物的檢查分離實驗4顯微鏡的使用及細菌的簡單染色法9實驗8酵母菌的形態觀察微生物大小的測定和計數5國慶放假10實驗9水中細菌總數的測定實驗10濾膜法測定水中大腸菌群6實驗3實驗室環境及人體表面微生物的檢查分離（結果觀察及描述）實驗5革蘭氏染色法、細菌莢膜染色法11實驗11環境因素對微生物生長的影響7實驗6細菌芽孢染色法和鞭毛染色法12-14考試實驗1微生物實驗室規則實驗2培養基配制及滅菌分組及各組器皿清單每組器皿清單酒精燈

1個/人鑷子

1把/人培養皿

5套/組三角瓶（250ml）2套/組燒杯（250ml）

1個/組載波片

10片/組廢液缸

1個/組接種針/環

1把/組（或人）玻棒

2根/組試管

6個/組試管架

1個/組繩子

2段/組蒸餾水瓶帶滴管

1套/組2人一組（最后一組3人）（按學號）用后各自清理保管。損毀或丟失，找實驗室管理老師登記賠償并補領實驗1微生物實驗室規則實驗2培養基配制及滅菌實驗2微生物營養成分配制和消毒滅菌技術實驗1微生物實驗室規則實驗2培養基配制及滅菌一、目的要求1、了解培養基制備原理，掌握培養基制備方法。2、掌握干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌的原理和方法。3、學會培養皿、瓶口的包扎。實驗1微生物實驗室規則實驗2培養基配制及滅菌（二）滅菌原理1干熱滅菌原理（蛋白質凝固變性）一般繁殖體——80－100℃，1h芽孢——160－170℃，2h＜180℃實驗1微生物實驗室規則實驗2培養基配制及滅菌2濕熱滅菌原理－高壓蒸汽滅菌

在密閉的蒸鍋內，鍋內溫度達121℃，15min－30min，可以很快殺死各種細菌及其高度耐熱的芽孢（蛋白凝固變性）。

優點？實驗1微生物實驗室規則實驗2培養基配制及滅菌實驗1微生物實驗室規則實驗2培養基配制及滅菌實驗1微生物實驗室規則實驗2培養基配制及滅菌三、實驗器材1、材料瓊脂粉、酵母膏（粉）、蛋白胨、NaCl等。2、設備天平（6臺）、稱量紙、量筒、玻璃注射器（3-5把）、燒杯、玻璃棒、pH試紙、標簽，紗布（8層紗布，包扎瓶口用，每組1份）、報紙、三角瓶、繩子、試管及試管塞、酒精燈、火柴、藥勺（4把）、高壓蒸汽滅菌鍋（1臺）、烘箱（1臺）、電熱板（6臺）等。實驗1微生物實驗室規則實驗2培養基配制及滅菌四、操作步驟（一）培養基的制備LB培養基(Luria-Bertanimedium)為例實驗1微生物實驗室規則實驗2培養基配制及滅菌

LB酵母粉5g蛋白胨10gNaCl5g瓊脂粉或瓊脂條12-15g蒸餾水1000mlpH7.2-7.8依上述配方配制150ml，請換算好相應的質量數。（稱量紙，藥勺，天平，燒杯，量筒，三角瓶，試管）（試管4-5ml；剩余裝入三角瓶）倒平板（5個）擱置斜面（4個）干熱或濕熱實驗1微生物實驗室規則實驗2培養基配制及滅菌制備LB平板待培養基冷卻至45-60℃（不燙手）時，于酒精燈火焰無菌區均勻倒入培養皿中（每個約20ml），冷卻后凝固成固體膠狀平板（LB平板）。擱置斜面：適當冷卻后便可將試管口端擱在玻璃棒或其他合適高度的器具上，斜面長度不超過試管總長的1/2為宜。實驗1微生物實驗室規則實驗2培養基配制及滅菌每人攜帶2個平板，自己設計實驗，分離培養微生物。倒扣培養，盡可能密封。注意觀察，將實驗結果簡單描述。（采集的樣品、生長的狀況[時間，快慢]、種類和數量是否可區分，各多少），交給學習委員，下次課分享。實驗1微生物實驗室規則實驗2培養基配制及滅菌（二）滅菌

干熱滅菌操作步驟：（1）用報紙條包好干燥的培養皿。（2）將待滅菌物品均勻放入烘箱內。（3）開啟電源，設定溫度和時間（160－170℃，2小時）。（4）切斷電源，待溫度降至70℃以下時，打開箱門，取出滅菌物品。實驗1微生物實驗室規則實驗2培養基配制及滅菌濕熱滅菌操作步驟：1、滅菌物準備2、高壓蒸汽滅菌（1）加水（2）裝鍋（3）接通熱源，設置參數（121℃，15min－30min）（4）升壓、升溫（5）切斷電源（6）取出滅菌物（7）待培養基冷卻后置于37℃恒溫箱內培養24h，若無菌生長則放入冰箱或陰涼處保存備用。實驗1微生物實驗室規則實驗2培養基配制及滅菌五思考題1、培養微生物的培養基應具備哪些條件？2、為什么培養基配制好后必須立即滅菌？采用那種滅菌方式？3、為什么高壓蒸汽滅菌時要先將冷空氣排盡？4、還有哪種滅菌方式屬于