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文檔簡介

香菇多糖的復合酶法提取

香菇多糖是香菇中分離出的一種重要的具有生理活性的物質。香菇多糖的作用：

香菇多糖具有抗病毒、抗腫瘤，調節免疫力、降血糖、抗氧化等功能。有關香菇多糖的研究，特別是結構方面的研究已引起國內外學者的高度關注，并有望成為多糖領域的研究熱點。香菇多糖的提取方法：熱水浸提法超聲波提取法稀酸(堿)浸提法微波法提取香菇多糖深層發酵培養提取法酶解法

酶解法：

酶解法就是指在浸提的過程中加入相應的酶來水解纖維素、果膠、蛋白質分子等，以使多糖從細胞中分離出來。酶法提取較其他方法的優點1.其作用條件溫和。2.通過酶法破壁去除雜質可以明顯提高提取率，縮短提取時間。3.可減少能源消耗。4.有效的保存多糖的生物活性。復合酶提取香菇多糖：復合酶纖維素酶+木瓜蛋白酶纖維素酶+中性蛋白酶木瓜蛋白酶+纖維素酶中性蛋白酶+纖維素酶多糖得率（%）12.907.029.466.34香菇多糖的制備工藝

一.原料準備二.提取三.分離純化香菇的復合酶法提取

原料的準備和處理香菇→烘干(50℃)→粉碎→過篩→多糖提取原材料。香菇的復合酶法提取主要實驗試劑及儀器

真空干燥箱，離心機，恒溫振蕩器，紫外可見分光光度計，傅里葉變換紅外光譜儀，纖維素酶，木瓜蛋白酶實驗方法與步驟反應結束，將三角瓶放到沸水鍋中，10min沸水浴滅酶。稱取木瓜蛋白酶和纖維素酶按一定比例混合，加入5mL蒸餾水溶解。香菇溶液放在水浴中預熱至酶解溫度，將酶液加入到香菇溶液中，在恒溫振蕩器上提取。稱取80目的香菇粉2g，放入到250mL的三角瓶中，加蒸餾水35mL混合均勻后置于40℃水浴鍋中，水浴30min，調節pH值。345滅酶結束，冷卻至室溫，將酶提取液放入到離心管中，調至4000r/min離心，取上清液，即得到酶提取多糖清液。21香菇的復合酶法提取香菇的復合酶法提取分離純化1.分離提取用0.5%NaOH初步提取，之后取清液，用透析袋透去除雜離子，透析后去除雜蛋白，用活性炭脫色1h，加入95%乙醇，使溶液中乙醇的濃度達到75%進行醇沉．醇沉過程中要將其保存在4℃冰箱中，保持24h，離心15min，取沉淀，置于真空干燥箱中干燥，即可得到香菇粗多糖。2.純化

將香菇粗多糖水溶解后用色譜儀分離，干燥獲得純香菇多糖。

影響香菇多糖得率的因素：

隨著復合酶濃度的增加，多糖提取率也逐漸增加，酶濃度大于0.4%后提取增加率趨于平緩，因此，最佳復合酶的濃度為0.4%。1.復合酶的濃度對多糖得率的影響2.料液比對多糖得率的影響當料液比在1∶15～l∶25之間多糖提取率增長較快，繼續提高料液比多糖提取率仍有升高，但提高速率減小．因此最佳料液比為1∶20．3.酶解時間對多糖得率的影響由圖可知,香菇多糖的提取率隨酶促反應時間的延長增加。酶法提取的應用前景：

酶法提取由于反應特異性強、條件溫和易獲得、提取時間短、提取率高、綠色節能等已引起

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