ICS73.080

CCSQ69

團體標準

T/CSTMXXXXX—202X

止血材料用高嶺土

Kaolinclayforhemostaticmaterials

（征求意見稿）

、

202X-XX-XX發布202X-XX-XX實施

中關村材料試驗技術聯盟發布

T/CSTMXXXXX—202X

止血材料用高嶺土

1范圍

本文件規定了止血材料用高嶺土的要求、試驗方法、檢驗規則、標志、包裝、運輸與貯存。

本文件適用于止血材料生產用高嶺土，其它用途高嶺土可參照使用。

2規范性引用文件

下列文件中的內容通過文件中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文

件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用

于本文件。

GB/T191包裝儲運圖示標志

GB/T8170數值修約規則與極限數值的表示和判定

GB/T16399黏土化學分析方法

GB/T16886.4醫療器械生物學評價第4部分：與血液相互作用試驗選擇

GB/T16886.5醫療器械生物學評價第5部分：體外細胞毒性試驗

GB/T19077粒度分析激光衍射法

GB/T19587氣體吸附BET法測定固態物質比表面積

JC/T2573高嶺土中游離石英含量的測定方法

3術語和定義

下列術語和定義適用于本文件。

3.1

止血材料用高嶺土kaolinclayforhemostaticmaterials

以天然高嶺土為原材料，經破碎篩分、分級提純、研磨加工而成的粉體材料。

4要求

4.1外觀質量

止血材料用高嶺土為粉末狀，無可見雜質，無結塊。

4.2特性要求

止血材料用高嶺土特性要求應符合表1規定。

表1止血材料用高嶺土特性要求

項目要求

中位徑D50/μm≤10.0

三氧化二鋁/%≥98.0

二氧化硅/%≤0.5

比表面積/(m2/g)≥10.0

細胞存活率（濃度低于0.5mg/mL）/%≥75.0

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T/CSTMXXXXX—202X

表1止血材料用高嶺土特性要求（續）

項目要求

溶血率（濃度低于0.01mg/mL）/%≤5.0

5試驗方法

5.1外觀質量

正常光照下，目測法檢查。

5.2中位徑D50

按GB/T19077的規定執行。

5.3三氧化二鋁、二氧化硅

按GB/T16399的規定執行。

5.4比表面積

按GB/T19587的規定執行。

5.5細胞存活率

5.5.1試劑與材料

5.5.1.1細胞增置-毒性檢測試劑盒（代號CCK-8）。

5.5.1.2青霉素-鏈霉素溶液（100X）：BL505A。

5.5.1.3胎牛血清。

5.5.1.4人永生成纖維細胞（代號BJ細胞）。

5.5.1.5胰酶細胞消化液（含酚紅）。

5.5.1.6RPMI1640培養基：BL303A。

5.5.2儀器與設備

5.5.2.1離心機：轉速（0～5000）rpm/min。

5.5.2.2水浴鍋：調溫范圍為室溫～100℃，控溫精度±2℃。

5.5.2.3酶標儀：波長范圍200nm～1000nm。

5.5.2.4二氧化碳培養箱：調溫范圍為（0～70）℃，控溫精度±0.5℃；CO2控制范圍為（0～20）%。

5.5.2.5生物安全柜：級別類型II級A2。

5.5.2.6細胞計數儀：精度0.01個/mL。

5.5.3試驗步驟

5.5.3.1取RPMI1640培養基89%、青霉素-鏈霉素溶液（100X）1%、胎牛血清10%于滅菌處理的藍蓋

瓶，混勻，得到完全培養基。

5.5.3.2用5.5.3.1得到的完全培養基和高嶺土樣品配制成不同樣品濃度的系列溶液（濃度依據實驗

需求確定）。

5.5.3.3取正常凍存的BJ細胞在37℃水浴環境下不時搖晃直至解凍為細胞懸液，用移液槍吸出細胞

懸液，加到離心管并滴加10倍以上完全培養基，搖晃混勻，在1000rpm下離心5min，去掉上清液后

加入適量的完全培養基，并用移液槍吹打細胞制成細胞懸液，轉移細胞懸液到細胞培養皿，在37℃、

5%CO2的二氧化碳培養箱培養。

5.5.3.4待細胞貼壁且細胞密度達到80%以上后，用胰酶細胞消化液進行消化處理，至細胞脫離貼壁

狀態，加入適量完全培養基，吹打重懸細胞。

5.5.3.5用細胞計數儀計算細胞的密度，然后取100μL接種于96孔板中（1×104個細胞/孔），空

白孔則加入100μL不含細胞懸液的完全培養基，將96孔板在37℃、5%CO2的細胞培養箱中孵育24h。

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5.5.3.6棄原培養液，對照孔和空白孔加入100μL新鮮的完全培養基，試驗孔則加入100μL含不同

濃度高嶺土系列溶液。

5.5.3.7將5.5.3.5的96孔板放入二氧化碳培養箱繼續培養24h，再向每孔加入10μLCCK-8試劑，

繼續培養1h～4h。

5.5.3.8通過酶標儀測定5.5.3.7處理得到的96孔板在450nm處的吸光度值,計算細胞存活率。

5.5.4結果計算

細胞存活率C按公式（1）計算：

ODOD

Csk100……（1）

ODdODk

式中：

C——細胞存活率，%；

實驗孔的吸光度值；

ODs——

對照孔的吸光度值；

ODd——

空白孔的吸光度值。

ODk——

以三次平行測定結果的算術平均值為最終測定結果，三次平行測定結果的相對誤差應小于20%，否

則應重新取樣測定。測定結果按GB/T8170修約至小數點后一位有效數字。

5.6溶血率

5.6.1試劑和材料

5.6.1.1兔抗凝全血。

5.6.1.21×PBS緩沖液。

5.6.1.3去離子水：符合GB/T6682中規定的一級水要求。

5.6.2儀器與設備

5.6.2.1酶標儀：測量范圍（0～5.0）ABS，分辨率0.001ABS。

5.6.2.2離心機：轉速（0～5000）rpm/min；

5.6.2.3水浴鍋：調溫范圍為室溫～100℃，控溫精度±2℃。

5.6.3試驗步驟

5.6.3.1取兔抗凝全血，在2500rpm轉速下離心5min，沉淀分離出血紅細胞，用1×PBS緩沖液配

成2%紅細胞懸液。

5.6.3.2用1×PBS緩沖液和高嶺土樣品配制成不同樣品濃度的系列溶液（濃度依據實驗需求確定），

取每種濃度的溶液900μL，與配制好的2%紅細胞懸液100μL混勻，作為實驗組，然后置于37℃恒

溫水浴鍋中孵育60min。

5.6.3.3取1×PBS緩沖液900μL，與配制好的2%紅細胞懸液100μL混合均勻，作為陰性對照組，

然后置于37℃恒溫水浴鍋中孵育60min。

5.6.3.4取去離子水900μL，與配制好的2%紅細胞懸液100μL混勻，作為陽性對照組，然后置于

37℃恒溫水浴鍋中孵育60min。

5.6.3.5將恒溫孵育后的實驗組、陰性對照組、陽性對照組在2500rpm離心10min，收集上清液，

將恒溫孵育后的混合體系在2500rpm轉速下離心10min，收集上清液。

5.6.3.6用酶標儀測定在波長為540nm下，測定每組上清液的吸光度OD值，實驗組的吸光度OD值記

為ODS，陰性對照組的吸光度OD值記為ODn，陽性對照組的吸光度OD值ODp。

5.6.4結果計算

溶血率H按公式（2）計算：

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ODOD

Hsn100……（2）

ODpODn

式中：

H——溶血率，%；

實驗組的吸光度OD值；

ODs——

陰性對照組的吸光度OD值；

ODn——

陽性對照組的吸光度OD值。

ODp——

以三次平行測定結果的算術平均值為最終測定結果，三次平行測定結果的相對誤差應小于20%，否

則應重新取樣測定。測定結果按GB/T8170修約至小數點后一位有效數字。

6檢驗規則

6.1檢驗分類

6.1.1出廠檢驗

產品出廠檢驗項目為外觀質量、中位徑D50、三氧化二鋁、二氧化硅、比表面積。

6.1.2型式檢驗

型式檢驗項目包括第4章中全部檢驗項目。有下列情況之一時，應進行型式檢驗：

a）新產品投產或產品定型鑒定時；

b）正常生產時，每一年進行一次；

c）原材料、生產工藝、設備等發生較大變化，可能影響產品質量時；

d）停產一年以上，重新恢復生產時；

e）出廠檢驗結果與上次型式檢驗結果有較大差異時。

6.2組批和抽樣規則

6.2.1組批

同一批原料、同一生產工藝穩定連續生產的止血材料用高嶺土產品以100t為一批，不足100t

仍按一批計。

6.2.2抽樣

6.2.2.1袋裝產品采取等距抽樣，即在同一批量中每隔n-1袋，在該袋中至少抽50g。n按公式（1）

計算：

N

n……………………（1）

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式中：

N——每批產品的總袋數；

n——取樣間隔數。

當計數的n值為帶有小數值時，結果按GB/T8170修約至整數位。當N≤10時，分別在批中每袋抽取。

取樣時，用取樣釬從袋口垂直插入袋中1/2處取樣，所取總樣量不少于500g。

6.2.2.2散裝止血材料用高嶺土產品抽樣分別從堆積的上、中、下多部位取，所取總樣量不少于500g。

6.3判定規則

產品各項指標符合第4章的要求時，判定該批產品合格。當產品的某項指標不符合第4章要求時，

應加倍抽樣復驗不合格項，若復驗結果符合第4章的要求時，則仍判定該批產品合格；若復驗結果至少

有一項不符合第