…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2024年滬教版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、在克隆哺乳動物過程中，通常作為核移植受體細胞的是去核的（）A.卵原細胞B.初級卵母細胞C.次級卵母細胞D.卵細胞2、下圖為單克隆抗體的制備流程示意圖。下列敘述錯誤的是（）

A.甲是從已免疫的小鼠脾臟細胞中獲得的致敏B淋巴細胞B.①可用滅活的病毒誘導甲與骨髓瘤細胞融合C.乙為融合細胞，同時具有細胞甲和骨髓瘤細胞的特性D.②表示篩選能產生特異性抗體的細胞3、由于乙肝病毒不能用動物細胞來培養，因此無法用細胞培養的方法生產疫苗，但可用基因工程的方法進行生產，現已知病毒的核心蛋白和表面抗原蛋白的氨基酸序列，乙肝疫苗的生產過程示意圖如下，下列相關說法不正確的是（）

A.生產乙肝疫苗的過程也達到了定向改造細菌的目的B.在②過程中需要限制性核酸內切酶和DNA連接酶C.DNA連接酶的作用是將兩個黏性末端的堿基連接起來D.用于生產疫苗的目的基因可編碼表面抗原蛋白4、“轉基因“已越來越多地進入我們的生活，但是人們對轉基因生物及其相關產品的安全性充滿了擔心，不需要對轉基因農作物進行安全評估的是（）A.轉基因作物的蛋白質含量B.轉基因作物對原來棲息地物種生存的影響C.轉入的基因擴散到其他植物中D.食用轉基因產品對人體健康的影響5、已知固體培養基會因碳酸鈣存在而呈乳白色，且乳酸菌能分解培養基中的碳酸鈣。某同學以新鮮的泡菜濾液為材料進行了分離純化乳酸菌的實驗。下列敘述錯誤的是（）A.分離純化所用的培養基都要進行嚴格的滅菌處理B.分離純化乳酸菌時，應挑選出具有透明圈的菌落作為候選菌C.分離純化乳酸菌時，需要用無菌水對泡菜濾液進行梯度稀釋D.加入碳酸鈣的培養基屬于選擇培養基，且碳酸鈣作為唯一碳源評卷人得分二、多選題(共8題，共16分)6、生物武器的傳播途徑主要包括（）A.直接傳播B.食物傳播C.生活必需品傳播D.施用者人體傳播7、良種試管牛的繁殖過程是用激素促進甲牛多排卵，然后把卵母細胞在體外與人工采集的乙牛的精子進行受精，在特定培養基上培育成胚胎，再把胚胎送入經過激素處理的丙牛的子宮內，孕育成試管牛。下列相關敘述正確的是（）A.“用激素促進甲牛多排卵”的激素是孕激素B.產生試管牛的生殖方式屬于有性生殖C.甲牛、乙牛對試管牛核基因的貢獻相同D.該技術可應用于加速優良種畜的繁殖8、谷氨酸棒狀桿菌發酵過程中會生成大量的谷氨酸，經加工后可制成味精。在其發酵過程中，發酵罐中碳氮比（碳元素與氮元素的比值）為4：1時，菌體大量繁殖而產生的谷氨酸少；當碳氮比為3：1時，菌體繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增。下列相關敘述正確的是（）A.谷氨酸棒狀桿菌可以從自然界中篩選，也可以通過誘變育種或基因工程育種獲得B.分離、提純產物是發酵工程的中心環節，有利于獲得更多的優質發酵產品C.由題干信息可推知發酵過程中需調整發酵罐內營養成分的比例D.在發酵罐內發酵無需嚴格控制溶解氧、溫度、pH等條件9、小鼠胚胎干細胞經定向誘導可獲得多種功能細胞、制備流程如圖所示。下列敘述錯誤的是（）

A.為獲得更多的囊胚，采用激素注射促進雄鼠產生更多的精子B.細胞a和細胞b內含有的核基因不同，所以全能性高低不同C.用胰蛋白酶將細胞a的膜蛋白消化后可獲得分散的胚胎干細胞D.胚胎干細胞和誘導出的各種細胞都需在CO2培養箱中進行培養10、圖甲為培育轉基因生物時選用的載體，圖乙是含有目的基因的一段DNA序列，圖中標注了相關限制酶的酶切位點。下列敘述錯誤的是（）

A.若通過PCR技術提取該目的基因，應該選用引物a和引物cB.構建表達載體時應選用BamHⅠ和HindⅡ這兩種限制酶C.圖乙中一個DNA分子在PCR儀中經過四輪復制得到所需目的基因的分子數為8個D.只利用含四環素的培養基就可以直接篩選出成功導入表達載體的受體細胞11、某植物有甲、乙兩品種，科研人員在設計品種乙組織培養實驗時，參照品種甲的最佳激素配比（見下表）進行預實驗。為確定品種乙的II階段的最適細胞分裂素濃度，參照表中α2（α2>2．0μmol·L-1），以0．5μmol·L-1為梯度，設計5個濃度水平的實驗，其中細胞分裂素最高濃度設為M。下列有關敘述正確的是（）。品種甲組織培養階段細胞分裂素/（μmol·L-1）生長素/（μmol·L-1）I誘導形成愈傷組織α1b1II誘導形成幼芽α2b2Ⅲ誘導生根α3b3

A.表中發生基因選擇性表達的是II和Ⅲ階段B.實驗中共配制了2種不同的培養基，即生根培養基和生芽培養基C.確定品種乙II階段最適細胞分裂素濃度的實驗中，M為α2+2μmol·L-1D.生長素和細胞分裂素的配比是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵因素12、在中國的傳說中，醋最早是由“酒圣”杜康之子發明。杜康的兒子墨塔在-．次釀酒時發酵過頭，直至第21天開缸時，發現酒液已變酸，但香氣撲鼻，且酸甜可口，于是墨塔便把“廿一日”加一“西”字，給這種酸水起名為“醋”。下列敘述正確的是（）A.酒發酵初期通入氧氣的目的是促進酵母菌進行有氧呼吸，大量增殖B.酒精是在酵母菌細胞的線粒體中產生，可用酸性重鉻酸鉀試劑檢測C.墨塔釀酒反成醋的原因可能是發酵裝置密封不嚴或發酵裝置沒有清洗干凈D.釀酒時糖類未耗盡，酵母菌的發酵也會停止，原因可能是pH降低和酒精含量增多13、我國科研人員在實驗室中通過構建多種酶催化體系的方法，首次實現了在細胞外從二氧化碳固定到合成淀粉的過程。下列有關敘述正確的是（）A.可從不同物種的基因中擴增得到多酶催化體系中的目標酶基因B.在多酶催化體系中，可能會因為酶的最適反應條件不同而使反應中斷C.該方法可在分子水平上直接改變氨基酸的序列，實現對酶特性的改造和優化D.若該科研成果成熟后推廣應用有助于擺脫耕地和自然環境限制，解決糧食危機評卷人得分三、填空題(共9題，共18分)14、酶是細胞合成的生物催化劑。隨著生物科學技術的發展；酶已經走出實驗室，走進人們的生產和生活。請回答下面有關酶的問題：

（1）在腐乳制作的過程中；利用毛霉等微生物產生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質分解成________，____________將脂肪水解為甘油和脂肪酸。加酶洗衣粉里添加的酶制劑中，應用最廣泛；效果最明顯的是____________。

（2）果膠酶包括_____________________________；生產中如果要固定果膠酶；最好采用______________________________________法固定化。

（3）酶提取和分離原理：需要用__________法去除相對分子質量大的雜質蛋白，以純化酶；利用_________________________法對酶進行純度鑒定。15、兩種DNA連接酶（E·coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：

①相同點：都縫合______鍵。

②區別：E·coliDNA連接酶來源于T4噬菌體，只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶能縫合兩種末端，但連接平末端的之間的效率較低。16、轉化的概念：是______進入受體細胞內，并且在受體細胞內維持______的過程。17、第一步：______18、加入酒精和用玻璃棒攪拌時，動作要輕緩，以免加劇___________，導致DNA分子不能形成__________。19、對于DNA的粗提取而言，就是利用DNA與RNA、蛋白質和脂質等在__________方面的差異，提取DNA，去除雜質。（人教P54）20、隨著現代生物技術的飛速發展；轉基因動物；克隆動物和試管動物相繼問世，請回答下列問題：

（1）轉基因動物、克隆動物和試管動物培育過程中都要用到的生物技術包括______。

（2）核移植是動物克隆的第一步，包括體細胞核移植和胚胎細胞核移植，其中后者更易成功，原因是______。核移植常用處于______（填時期）的______為受體細胞。

（3）在“試管動物”的培育過程中，常采用______（填激素名稱）處理可使雌性個體一次排出多枚卵母細胞。從雄性個體采集的精子需______后才能進行受精作用；防止多精入卵的兩道屏障依次為______；卵細胞膜反應。

（4）若考慮環境承載力，轉基因動物、克隆動物和試管動物不宜放置到自然環境中，這遵循了生態工程的______原理。21、科學家采用定點誘變的方法構建T4溶菌酶的新蛋白質，發現其中一種新蛋白質的第9和第164位氨基酸殘基被轉換為半胱氨酸殘基，并形成一個二硫鍵。這種新蛋白質的熱穩定性會有什么變化？這項技術的要點是什么？_________22、某種微生物合成的一種蛋白酶與人體消化液中某種蛋白酶的結構和功能很相似，只是前者熱穩定性較差，進入人體后容易失效。嘗試根據本節課所學知識提出改造該種微生物蛋白酶的思路_________。評卷人得分四、判斷題(共1題，共6分)23、生物武器包括致病菌類、病毒類和生化毒劑類等。()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題，共8分)24、某興趣小組就“泡菜腌制過程中亞硝酸鹽含量變化”開展了研究；操作如下：1月4日下午選取1；2、3號三只相同的泡菜壇，在每個壇中加入洗凈的新鮮蓮花菜0.6kg，再分別倒入等量煮沸并冷卻的10%的鹽水，將壇密封，置于同一環境中。封壇前進行第一次取樣測定亞硝酸鹽含量，后來定時測定，結果如下圖。

（1）測定亞硝酸鹽含量的方法是_______；其原理是：在鹽酸酸化的條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發生重氮化反應后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成_____，將顯色反應后的樣品與已知濃度的標準液進行目測比較，可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。

（2）實驗中；鹽水加熱煮沸是為了______；冷卻之后再使用是為了保證_______等微生物的生命活動不受影響。

（3）在腌制過程中；壇中溶液量會增加，原因是_____。

（4）圖中數據表明；泡菜在腌制的第_____天亞硝酸鹽含量達到最大值，腌制到第______天以后再食用可以較好地避免亞硝酸鹽對人體健康的危害。

（5）實驗中三只壇中產生的亞硝酸鹽含量存在差異；最可能的原因是__________。

（6）為了讓實驗數據更好地表明泡菜腌制過程中亞硝酸鹽含量變化，對該實驗所獲得的3組數據應進行怎樣的處理才更合理？_________________。25、氨基丁酸（GABA）是具有降血壓；抗焦慮等功能的水溶性氨基酸。科研人員通過實驗研究了白方腐乳在前發酵鹽腌和后發酵過程中GABA的含量變化；為尋找生產富含GABA腐乳的工藝奠定基礎。實驗步驟如下：

①豆腐白坯表面接種毛霉孢子后；在適宜的溫度和濕度下培養48h，獲得毛坯。

②將毛坯分層整齊地擺放在瓶中；鹽腌5天。

③腌制后加入鹵湯；置于28℃恒溫箱中后發酵90天。

④分別采集各時段的腐乳坯樣品；測定GABA含量，結果如圖。

請分析并回答問題：

（1）前發酵過程中，毛坯的GABA含量發生明顯變化的原因是毛霉產生的_______促進蛋白質水解產生GABA。

（2）步驟②中，加鹽腌制的正確操作是______________。此過程腐乳干重中的GABA含量下降，一方面與食鹽抑制毛霉生長，酶活性降低有關；另一方面，豆腐中的水分滲出，部分GABA會____________而導致測定值減小。

（3）后發酵所加的鹵湯中，具有抑菌防腐和調味的成分主要有_______。此過程中，發酵_______天后的白方腐乳出廠銷售比較適宜。26、黏多糖貯積癥是由IDUA基因突變導致的遺傳病。科研人員對此病的治療進行相關研究。

(1)黏多糖貯積癥患者細胞中IDUA基因由于堿基對___________造成突變，轉錄出的mRNA長度不變但提前出現終止密碼子，最終導致合成的IDUA酶分子量___________；與正常IDUA酶的空間結構差異顯著而失去活性，積累過多的黏多糖無法及時清除，造成人體多系統功能障礙。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結構、功能相同，但它的反密碼子可以與終止密碼子配對。在上述這一類突變基因的翻譯過程中，加入sup-tRNA可以發揮的作用是___________；從而誘導通讀獲得有功能的全長蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以攜帶不同氨基酸；為比較它們的通讀效果，科研人員進行了相關研究，實驗結果如圖。

注：“-”代表未加入。

據圖分析，實驗組將___________基因導入受體細胞，并采用___________技術檢測導入基因的表達情況。據結果分析，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人員利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠及IDUA基因敲除小鼠進行治療，檢測肝臟細胞IDUA酶活性和組織黏多糖的積累量，與不治療的小鼠相比較，實驗結果為_____________，表明攜帶酪氨酸的sup-tRNA可以治療黏多糖貯積癥。27、被稱為“水中小白鼠”的斑馬魚是一種體長4厘米左右的熱帶淡水魚；與人類基因同源性高達87%，并有相似的器官；生理功能和信號通路。由于發育周期短、費用低、體外受精、透明等優點，斑馬魚現在越來越廣泛地應用于毒性檢測、疾病模型創制、藥物篩選等領域中。

研究人員欲通過使胰島素基因表達受阻從而構建糖尿病模型斑馬魚。嗎啉反義寡核苷酸是一種RNA剪接抑制劑；通過將其注入斑馬魚受精卵可阻礙相關基因的表達。針對其作用原理，現有兩種假說：

假說1：嗎啉反義寡核苷酸導致RNA前體上內含子2的對應序列不能被剪切。

假說2：嗎啉反義寡核苷酸導致RNA前體上內含子2和外顯子3的對應序列同時被剪切。

為了驗證上述假說；研究人員進行了如下實驗：

(1)從受精卵發育了3天的實驗組和對照組的細胞中提取總RNA，再通過逆轉錄獲得cDNA。若假說1成立，選擇上圖所示引物2和引物3進行PCR后的結果為______（填字母）。A．實驗組有雜交帶B．實驗組無雜交帶C．對照組有雜交帶D．對照組無雜交帶(2)若要證明假說2成立，進行PCR時，需要選擇上圖所示引物有____________。

(3)采用PCR技術擴增DNA需要引物的原因是__________________。

(4)為了獲取大量斑馬魚胚胎干細胞用于藥物篩選，可加入__________________，用于分散斑馬魚囊胚中的__________________。再取分散細胞作為初始材料進行______培養，然后分瓶繼續培養。培養瓶中添加輸卵管上皮細胞作為______細胞，以提高斑馬魚胚胎干細胞的數量。評卷人得分六、綜合題(共2題，共16分)28、某二倍體植物是雜合子；圖為其花藥中未成熟花粉在適宜的培養基上培養產生完整植株的過程。據圖回答：

(1)圖中①表示的是該花粉培養過程中的_____________過程，②表示的是__________過程，X代表的是_______________，③表示的是_____________過程，④表示的是誘導_____________過程。

(2)圖中從愈傷組織形成完整植株的途徑有兩條，具體通過那一條途徑主要取決于培養基成分中______________的種類及其濃度配比，最后獲得的來源于為成熟花粉的完整植株都稱為___________________植株（甲）。未成熟花粉經培養能形成完整植株，說明為成熟花粉具有___________________。

(3)對植株進行_____________，才能使其結實產生后代（乙），否則植株甲只有通過___的方式才能產生后代（丙）。乙、丙兩種植株中，能產生可育花粉的是____植株，該植株群體中每一植株產生可育花粉的基因組成種類數為_____________種，該群體植株產生可育花粉的基因組成種類數為____________種。花藥培養在育種上的特殊意義是____________，從而開辟育種新途徑。29、異丁醇具有燃值高；能量密度高等優點；其開發和利用對優化我國能源結構和保護環境有非常重要的戰略意義。基于釀酒酵母的發酵途徑（圖甲）和圖乙的質粒，研究者構建了一種表達載體pUC18，用于過表達ILV2、ILV5、ILV3、AR010基因，以實現異丁醇的大規模生產。已知氨芐青霉素能抑制細菌細胞壁的形成。據此回答下列問題：

(1)圖乙質粒上有多個限制酶切位點，作用是____________。研究人員先用pUC18轉化經_________（處理方法）的大腸桿菌，以便篩選、鑒定擴增重組質粒。重組質粒上有_________；所以能在大腸桿菌中擴增。

(2)將環狀載體pUC18導入釀酒酵母時，一般會將其進行酶切得到線性化載體，隨后再將其導入受體細胞。根據所學的知識推測酶切得到線性化載體的目的是______________。

(3)提取成功構建的表達載體并導入不能合成組氨酸的釀酒酵母菌株，將菌株接種在培養基中以獲得單菌落，該過程稱為微生物的______培養。培養基中需要添加的物質有_____（用下列字母填寫：a．組氨酸、b．氨芐青霉素；c瓊脂）。

(4)異丁醇的大量積累會傷害細胞；研究人員給該工程菌導入一個經改造的光敏蛋白基因，使工程菌對特定的藍光敏感。進行不同的光照處理，使其在異丁酵產生階段和生長繁殖階段進行切換，結果如下圖丙所示。

注：5/10/20hpulse分別代表在黑暗條件下每隔5；10、20h發出15s和65s的藍光脈沖30min

①對照組的酵母菌需要導入________________。

②以葡萄糖為碳源，利用該轉基因釀酒酵母進行發酵時，若想進一步提高其異丁醇產量，綜合圖甲和圖乙信息，分別寫出進一步優化菌株和工藝的措施（各一點）___________。參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、C【分析】【分析】

體細胞核移植過程：

【詳解】

在克隆哺乳動物過程中；通常選擇減數第二次分裂中期的去核卵母細胞作為受體細胞，即次級卵母細胞。

故選C。2、C【分析】【分析】

1；單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原；從該動物的脾臟中獲取效應B細胞，將效應B細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出能產生單一抗體的雜交瘤細胞，克隆化培養雜交瘤細胞（體內培養和體外培養），最后獲取單克隆抗體。

2；題圖分析：①表示細胞融合過程；②表示篩選能產生特異性抗體的細胞。

【詳解】

A；將抗原注射到小鼠體內是為了激發小鼠的特異性免疫；甲是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的致敏B淋巴細胞，A正確；

B；①是骨髓瘤細胞與免疫的B淋巴細胞融合的過程；該過程可用滅活的病毒誘導處理，B正確；

C；融合細胞不一定同時具有細胞甲和骨髓瘤細胞的特性；也可能是瘤瘤細胞或B細胞，還需要進一步進行篩選，C錯誤；

D；②是經篩選獲得的能分泌特異性抗體的雜交瘤細胞；D正確。

故選C。3、C【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；生產乙肝疫苗的過程采用了基因工程技術；該技術可以定向改造生物，A正確；

B；在②過程中；需要先構建基因表達載體，該過程需要限制性核酸內切酶和DNA連接酶，B正確；

C；DNA連接酶的作用是將兩個黏性末端的磷酸二酯鍵連接起來；C錯誤；

D；可編碼表面抗原蛋白的基因才能用于生產疫苗；以便能激發特異性免疫，D正確。

故選C。

【點睛】4、A【分析】【分析】

轉基因農作物對于解決糧食；能源、環境等問題起了積極作用；但其也可能帶來一定的風險。轉基因食品的安全性要多環節、嚴謹地評價，確保轉基因食物的安全。轉基因農作物的安全評估主要指其遺傳穩定性、環境安全、食用安全等方面。

【詳解】

A、轉基因農作物的安全評估主要指其遺傳穩定性、環境安全、食用安全等方面，不需要評估其營養價值（例如蛋白質含量），A錯誤；

B、轉基因農作物的種植是否會對生物多樣性等產生生態影響，需要對原來棲息地物種生存情況進行評估，B正確；

C、轉基因植物可以通過花粉將外源基因擴散到其他植物，從而對生態環境造成潛在的危害，因此也要進行相應評估，C正確；

D、轉基因農作物產品對人體健康是否產生影響，需要對食用的轉基因產品進行安全評估，D正確。5、D【分析】【分析】

培養基的概念及營養構成。

（1）概念：人們按照微生物對營養物質的不同需求；配制出的供其生長繁殖的營養基質；

（2）營養構成：各種培養基一般都含有水；碳源、氮源、無機鹽；此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養物質以及氧氣的要求．例如，培養乳酸桿菌時需要在培養基中添加維生素，培養霉菌時需將培養基的pH調至酸性，培養細菌時需將pH調至中性或微堿性，培養厭氧微生物時則需要提供無氧的條件。

【詳解】

A；微生物實驗中使用的培養基必須要經過滅菌處理；以防止雜菌污染，確保實驗能夠順利進行，分離純化所用的培養基也要進行嚴格的滅菌處理，A正確；

B；由題意可知；乳酸能分解培養基中碳酸鈣形成透明圈，故分離純化乳酸菌時，應挑選出具有透明圈的菌落作為候選菌，B正確；

C；分離純化乳酸菌時；為了獲得單個菌落，需要用無菌水對泡菜濾液進行梯度稀釋，將稀釋液均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落，C正確；

D；題意顯示；乳酸能分解培養基中碳酸鈣，故分離純化所用的培養基中加入碳酸鈣的作用是中和乳酸菌代謝過程中產生的乳酸，形成透明圈，有利于乳酸菌的鑒別，該培養基屬于鑒別培養基，且乳酸菌不能利用碳酸鈣作為碳源，D錯誤。

故選D。二、多選題(共8題，共16分)6、A:B:C【分析】【分析】

生物武器種類：包括致病菌；病毒、生化毒劑；以及經過基因重組的致病菌等。把這些病原體直接或者通過食物、生活必需品等散布到敵方，可以對軍隊和平民造成大規模殺傷后果。

【詳解】

生物武器可以通過多種途徑使人感染發病，如經口食入、經呼吸道吸入、昆蟲叮咬、皮膚接觸等，因此生物武器的傳播途徑主要包括直接傳播、食物傳播和生活必需品傳播。故選ABC。7、B:C:D【分析】【分析】

良種試管牛的繁殖過程：對供體和受體的選擇和處理（同期發情處理；超數排卵處理）；配種或進行人工授精、對胚胎的收集檢查培養或保存、進行胚胎移植。

【詳解】

A；處理供體甲牛的激素可能是促性腺激素；使其超數排卵，A錯誤；

B；產生試管牛的過程中經過了兩性生殖細胞的融合過程；因此試管牛產生的生殖方式屬于有性生殖，B正確；

C；母本甲牛提供卵細胞、父本乙牛提供精子；試管牛細胞核中基因一半來源于父方，一半來源于母方，C正確；

D；體外受精和早期胚胎發育、胚胎移植等技術可以縮短繁殖周期；增加一生繁殖的后代數量，即該技術可充分發揮優良雌性個體的繁殖潛力，D正確。

故選BCD。

【點睛】8、A:C【分析】【分析】

微生物發酵指的是利用微生物；在適宜的條件下，將原料經過特定的代謝途徑轉化為人類所需要的產物的過程。谷氨酸棒狀桿菌為原核生物，為異養需氧型。

【詳解】

A；用于發酵的谷氨酸棒狀桿菌可以從自然界中篩選；也可以通過誘變育種或基因工程育種獲得，A正確；

B；發酵工程的中心環節是發酵過程；B錯誤；

C；由題意可知“在其發酵過程中；發酵罐中碳氮比（碳元素與氮元素的比值）為4∶1時，菌體大量繁殖而產生的谷氨酸少；當碳氮比為3∶1時，菌體繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增”，說明在發酵過程中需調整發酵罐內營養成分的比例以保證先獲得大量谷氨酸棒狀桿菌，在獲得大量發酵產物的目的，C正確；

D；谷氨酸棒狀桿菌為需氧菌；其發酵過程需要適宜的溫度和pH，所以在發酵罐內發酵需嚴格控制溶解氧、溫度、pH等條件，D錯誤。

故選AC。9、A:B:C【分析】【分析】

1；胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞；來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內細胞團）。

2；ES細胞在飼養層細胞上或在添加抑制因子的培養液中；能夠維持不分化的狀態．在培養液中加入分化誘導因子，如牛黃酸、丁酰環腺苷酸等化學物質時，就可以誘導ES細胞向不同類型的組織細胞分化，這為揭示細胞分化和細胞凋亡機理提供了有效的手段。

【詳解】

A；為了獲得更多的囊胚；可以采用激素促進成熟雌性個體超數排卵，然后將卵細胞從母體內取出，在試管內與人工采集的精子進行體外受精，培育成胚胎，A錯誤；

B、細胞a和細胞b是由同一個受精卵經過有絲分裂形成的；故核基因相同，B錯誤；

C；運用細胞培養技術可以從哺乳動物的早期胚胎中獲得胚胎干細胞；首先必須用胰蛋白酶處理內細胞團，分解細胞間的膠原蛋白等，使之分散成單個細胞，C錯誤；

D、動物細胞培養時需要在5%CO2的培養箱中進行培養；以維持培養液的pH，D正確。

故選ABC。10、B:D【分析】【分析】

分析題圖：構建表達載體時；不能選用限制酶BamHⅠ，否則會導致兩種抗性基因都被破壞，因此應該選擇Bc1I和HindⅢ這兩種限制酶，根據引物的延伸方向，所用的引物為圖乙中引物a和引物c。

【詳解】

A；PCR技術要求兩種引物分別和目的基因的兩條單鏈結合；根據引物的延伸方向，所用的引物為圖乙中引物a和引物c，A正確；

B；根據圖甲可知；BamHⅠ會導致兩種抗性基因都被破壞，同時為防止目的基因自身環化，因此只能選BclI和HindⅢ兩種限制酶切割，B錯誤；

C；圖乙中一個DNA分子在PCR儀中經過四輪復制可得到16個DNA片段；其中所需目的基因的分子數為8個，C正確；

D；由于選擇BclI和HindⅢ這兩種限制酶；破壞了氨芐青霉素抗性基因，但沒有破壞四環素抗性基因，因此應該先用含四環素的培養基篩選出含有基因表達載體和普通質粒的大腸桿菌，再用含氨芐青霉素的培養基篩選含重組質粒的大腸桿菌，培養基加氨芐青霉素含普通質粒的大腸桿菌能生存，而含重組質粒的不能生存，從而篩選出成功導入表達載體的受體細胞，D錯誤。

故選BD。11、A:B:D【分析】【分析】

植物組織培養中植物激素使用：物組織培養中關鍵性激素是生長素和細胞分裂素；同時使用生長素和細胞分裂素時；兩者用量的比例影響植物細胞的發育方向；先使用細胞分裂素，后使用生長素，細胞既分裂又分化。

【詳解】

A；Ⅰ階段為脫分化；II階段和Ⅲ階段為再分化，Ⅰ、II、Ⅲ階段中會發生基因的選擇性表達，A錯誤；

B；實驗至少配制了3種不同的培養基；即形成愈傷組織的培養基、生根培養基和生芽培養基，B錯誤；

C、由于參照品種B的激素配比（a2＞2.0），以0.5μmol/L為梯度，設計5個濃度水平的實驗，則細胞分裂素濃度依次為a2-1.0μmol/L、a2-0.5μmol/L、a2μmol/L、a2+0.5μmol/L、a2+1.0μmol/L，可見細胞分裂素的最高濃度M應設為a2+1.0μmol/L；C錯誤；

D；生長素和細胞分裂素的配比是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵因素；D正確。

故選ABD。12、A:C:D【分析】【分析】

參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養兼性厭氧型。參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養需氧型。果醋制作的原理:當氧氣；糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變為乙醛，再將乙醛變為醋酸。

【詳解】

A；酵母菌是兼性厭氧型微生物；所以發酵初期通入氧氣的目的是促進酵母菌進行有氧呼吸，大量增殖，A正確；

B；酒精是酵母菌無氧呼吸的產物；在酵母菌細胞的細胞質基質中產生，可以用酸性重鉻酸鉀試劑檢測酒精的產生，B錯誤；

C；酒變酸是醋酸桿菌發酵的結果；墨塔釀酒反成醋的原因可能是：發酵裝置密封不嚴，發酵裝置沒有清洗干凈，導致醋酸菌混入發酵液中，C正確；

D；在釀酒的過程中；糖類即使未耗盡，酵母菌的發酵過程也會停止，原因可能是pH降低和酒精含量增多，對發酵起抑制作用，導致酵母菌發酵停止，D正確；

故選ACD。13、A:B:D【分析】【分析】

蛋白質工程：是指以蛋白質分子的結構規律及與其生理功能的關系作為基礎；通過基因修飾或基因合成，對現有蛋白質進行改造，或制造一種新的蛋白質，以滿足人類的生產和生活的需求。

【詳解】

A；從不同物種的基因中擴增得到多酶催化體系中的目標酶基因后；可對獲得的目的基因利用PCR技術在體外反應體系中擴增，A正確；

B；酶的作用條件較溫和；不同的酶其適宜的溫度和pH不同，在多酶催化體系中，可能會因為酶的最適反應條件不同而使反應中斷，B正確；

C；該方法在分子水平上；通過改變基因的堿基序列，間接改變氨基酸的序列，從而改變蛋白質的結構，實現對酶特性的改造和優化，C錯誤；

D；該科研實現了在細胞外從二氧化碳固定到合成淀粉的過程；若成熟后推廣應用有助于擺脫耕地和自然環境限制，解決糧食危機，D正確。

故選ABD。三、填空題(共9題，共18分)14、略

【分析】【分析】

1；腐乳制作過程中多種微生物參與了發酵；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物產生蛋白酶能將豆腐中的蛋白質轉化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪轉化成甘油和脂肪酸。

2；果膠酶能夠分解果膠；瓦解植物的細胞壁及胞間層，使榨取果汁變得容易，而果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得渾濁的果汁變得澄清。果膠酶并不特指某一種酶，而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶。

【詳解】

（1）在腐乳制作的過程中；利用毛霉等微生物產生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質分解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪水解為甘油和脂肪酸；加酶洗衣粉里添加的酶制劑中，應用最廣泛；效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。

（2）果膠酶并不特指某一種酶；而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶；果膠分解酶和果膠酯酶；在果汁生產過程中如果要固定果膠酶，最好采用化學結合和物理吸附法固定化，這是因為酶分子小，體積小的酶容易從包埋材料中漏出。

（3）酶提取和分離原理：需要用凝膠色譜法去除相對分子質量大的雜質蛋白；以純化酶；利用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法對酶進行純度鑒定。

【點睛】

本題考查腐乳制作和酶提取等知識，對于此類試題，需要考生注意的細節較多，如實驗的原理、實驗步驟、實驗采用的試劑及試劑的作用等，需要考生在平時的學習過程中注意積累。【解析】小分子肽和氨基酸脂肪酶堿性蛋白酶和堿性脂肪酶半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠酯酶化學結合法和物理吸附凝膠色譜（分配色譜）聚丙烯酰胺凝膠電泳15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】磷酸二酯16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因穩定和表達17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因的獲取18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】DNA斷裂絮狀沉淀19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】物理和化學性20、略

【分析】【分析】

1；動物核移植的概念：將動物的一個細胞的細胞核移入一個去掉細胞核的卵母細胞中；使其重組并發育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發育為動物個體，核移植得到的動物稱克隆動物；

2；早期胚胎培養的培養液成分；除無機鹽和有機鹽外，還需要添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養成分，并需添加動物血清等天然成分。

【詳解】

（1）轉基因動物；試管動物和克隆動物分別在體外得到早期胚胎后；都要通過胚胎移植獲得新個體。

（2）核移植包括體細胞核移植和胚胎細胞核移植；其中后者更易成功，原因是胚胎細胞分化程度低，恢復全能性相對容易，而體細胞分化程度高，全能性不易表達；核移植常用的減數第二次分裂中期的去核卵母細胞作為受體細胞，其中去核的目的是避免原細胞核中遺傳物質對克隆動物的影響，保證克隆動物的核遺傳物質來自供體細胞。

（3）促性腺激素處理可促使雌性個體超數排卵；即使良種母牛一次排出多枚卵母細胞。精子需要經過獲能處理才能受精；防止多精入卵的兩道屏障依次為透明帶反應；卵細胞膜反應。

（4）要考慮環境承載力；處理好生物與環境的協調與平衡，這體現了生態工程的協調與平衡原理。

【點睛】

本題考查細胞工程、胚胎工程和生態工程的有關知識，意在考查考生理解能力、獲取信息的能力和綜合運用能力。【解析】胚胎移植（或胚胎的早期培養和胚胎移植）胚胎細胞分化程度低，恢復全能性相對容易MⅡ中期去核卵母細胞促性腺激素獲能透明帶反應協調與平衡21、略

【分析】【詳解】

蛋白質形成二硫鍵，使蛋白質的結構更加穩定，因此T4溶菌酶的熱穩定性會提高。這項技術屬于蛋白質工程技術，其步驟為從預期的蛋白質功能出發→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質。【解析】會提高T4溶菌酶的耐熱性。這項技術屬于蛋白質工程技術，該技術的要點是從預期的蛋白質功能出發→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質。22、略

【分析】【詳解】

要提高酶的熱穩定性，可采用蛋白質工程技術替換少數氨基酸，改善其功能，需要從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預期的蛋白質功能出發→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質。【解析】采用蛋白質工程技術替換少數氨基酸，提高該酶的熱穩定性，從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預期的蛋白質功能出發→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質。四、判斷題(共1題，共6分)23、A【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。生物武器種類包括致病菌、病毒、生化毒劑以及經過基因重組的致病菌等，故正確。五、實驗題(共4題，共8分)24、略

【分析】試題分析：本題考查泡菜的制作；考查對泡菜制作原理；亞硝酸鹽含量檢測原理的理解和識記。解答此題，可根據圖中曲線升降規律判斷泡菜制作過程中亞硝酸鹽含量變化趨勢，分析其升降原因，確定適合食用的發酵時間。

（1）測定亞硝酸鹽含量可用比色法；其原理是：在鹽酸酸化的條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發生重氮化反應后，與N—1—萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料，將顯色反應后的樣品與已知濃度的標準液進行目測比較，可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。

（2）高溫可使微生物中的蛋白質變性；殺死微生物，實驗中鹽水加熱煮沸可殺滅雜菌；冷卻之后再使用是為了避免高溫使乳酸菌死亡。

（3）在腌制過程中；由于鹽水溶液濃度過高，細胞滲透失水，使壇中溶液量會增加。

（4）據圖可知；1；2、3號泡菜壇中，在腌制的第7天亞硝酸鹽含量均達到最大值，腌制到第14天以后亞硝酸鹽含量降到較低水平，可以避免亞硝酸鹽對人體健康的危害。

（5）泡菜制作過程中亞硝酸鹽含量變化與微生物的數量和代謝強度有關；實驗中三只壇中產生的亞硝酸鹽含量存在差異，最可能的原因是各壇中微生物種類和數量可能存在差異。

（6）為讓實驗數據更好的表明泡菜腌制過程中亞硝酸鹽含量變化，避免偶然因素造成的數據誤差，應對該實驗所獲得的三組數據先求平均值，再繪制一條曲線(將三個壇中每次測定的亞硝酸鹽的含量分別記錄，求出平均值，然后以日期為橫坐標，亞硝酸鹽的平均含量為縱坐標畫出一條曲線)。【解析】比色法玫瑰紅色染料殺滅雜菌乳酸菌外界溶液濃度過高使細胞滲透失水814各壇中微生物種類和數量可能存在差異(或其他合理答案)先求平均值，再繪制一條曲線（將三個壇中每次測定的亞硝酸鹽的含量分別記錄，求出平均值，然后以日期為橫坐標，亞硝酸鹽的平均含量為縱坐標畫出一條曲線）25、略

【分析】【分析】

腐乳的制作過程主要是：讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。

1；讓豆腐上長出毛霉：將豆腐塊平放在籠屜內；將籠屜中的溫度控制在15～18℃，并保持在一定的濕度。約48h后，毛霉開始生長，3d之后菌絲生長旺盛，5d后豆腐塊表面布滿菌絲。豆腐塊上生長的毛霉來自空氣中的毛霉孢子。

2；加鹽腌制：將長滿毛霉的豆腐塊分層整齊地擺放在瓶中；同時逐層加鹽，隨著層數的加高而增高鹽量，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些。加鹽研制的時間約為8d左右．加鹽可以析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬，在后期的制作過程中不會過早酥爛。同時，鹽能抑制微生物的生長，避免豆腐塊腐敗變質。

3；加鹵湯裝瓶：鹵湯直接關系到腐乳的色、香、味。鹵湯是由酒及各種香辛料配制而成的。鹵湯中的酒可以選用料酒、黃酒、米酒、高粱酒等；含量一般控制在12%左右。加酒可以抑制微生物的生長，同時能使腐乳具有獨特的香味。香辛料種類很多，如胡椒、花椒、八角、桂皮、姜、辣椒等。香辛料可以調制腐乳的風味，也具有防腐殺菌的作用。可據個人口味配置鹵湯。

4；密封腌制。

【詳解】

（1）前發酵過程中，毛霉等微生物產生的蛋白酶促進豆腐中的蛋白質水解產生GABA，使得毛坯的GABA含量明顯升高。

（2）步驟②中；加鹽腌制的正確操作是將長滿毛霉的豆腐塊分層整齊地擺放在瓶中，同時逐層加鹽，隨著層數的加高而增高鹽量，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些。鹽能抑制微生物的生長，避免豆腐塊腐敗變質。此過程腐乳干重中的GABA含量下降的原因可能是：①食鹽會抑制毛霉生長，酶的活性降低；②豆腐中的水分滲出，部分GABA會溶解于水而導致測定值減小。

（3）鹵湯是由料酒及各種香辛料配制而成的；可以抑制微生物的生長，同時能使腐乳具有獨特的香味。后發酵過程中GABA的含量變化曲線圖顯示，在60天以后，GABA的含量達到最大值且保持相對穩定，所以此時出廠銷售白方腐乳比較適宜。

【點睛】

解答本題的關鍵是掌握腐乳的制作的相關流程和知識要點，主要依靠學生對課本知識的理解和掌握，并結合題目中所給的GABA為水溶性氨基酸這一關鍵信息回答問題，同時需要學生在做題時思考符合經濟效益的選擇。【解析】蛋白酶逐層加鹽隨著層數的加高增加鹽量，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些隨水流失（溶解于水中）香辛料和料酒6026、略

【分析】【分析】

基因突變是指DNA分子中發生堿基對的替換；增添和缺失；而引起的基因結構的改變。翻譯是指在核糖體上，以mRNA為模板、以氨基酸為原料合成蛋白質的過程，該過程還需要tRNA來運轉氨基酸。

密碼子由位于mRNA上決定一個氨基酸的三個相鄰的堿基組成。終止密碼子的作用是終止翻譯過程。

基因工程中檢測目的基因在受體細胞內是否成功表達可以用抗原-抗體雜交技術。

【詳解】

（1）由題干信息可知；黏多糖貯積癥患者細胞中IDUA基因突變后，轉錄出的mRNA長度不變，說明其沒有發生堿基對的增添和缺失，因為這兩者改變會導致轉錄出的mRNA長度改變，因此推測其基因突變是由于堿基對替換。由于終止密碼子提前出現，導致翻譯提前終止，肽鏈變短，IDUA酶分子量變小，空間結構改變而失活。

（2）由題干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最終誘導核糖體通讀mRNA上的遺傳信息合成具有功能的全長蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結構；功能相同，據此推測該抑制性tRNA可以攜帶氨基酸至核糖體并與終止密碼子堿基配對使翻譯過程繼續。

（3）本實驗目的是比較攜帶不同氨基酸的sup-tRNA的通讀效果；需要保證實驗組細胞含有突變IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶對實驗結果產生干擾），同時保證在不同的實驗組細胞中可以轉錄出攜帶不同中氨基酸的sup-tRNA，因此實驗組中受體細胞中應該含有導入攜帶不同氨基酸的sup-tRNA基因和突變IDUA基因。若要判斷各個實驗組細胞中攜帶不同氨基酸的sup-tRNA是否成功誘導了具有功能的IDUA酶，可以采用該酶的特異性抗體對其進行檢測，即進行抗原-抗體雜交。分析題圖可知，與對照組（含正常IDUA基因的組）相比，含攜帶酪氨酸的sup-tRNA的受體細胞中表達的全長IDUA蛋白量比其他實驗組都多，說明其能有效恢復細胞中全長IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上實驗可知，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能有效誘導核糖體對突變IDUA基因轉錄出的mRNA進行通讀，進而產生具有正常功能的IDUA酶，因此利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠進行治療，與不進行治療的IDUA突變基因純合小鼠相比，治療組小鼠的IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；同時，利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA基因敲除小鼠進行治療，與不進行治療的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，則其細胞內都沒有相應mRNA，因此攜帶酪氨酸的sup-tRNA無法發揮作用，最終導致治療組與不治療組的IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異。【解析】(1)替換減少。

(2)識別終止密碼子并攜帶氨基酸至核糖體使翻譯過程繼續。

(3)攜帶不同氨基酸的suptRNA基因和變IDUA抗原一抗體雜交恢復細胞中全長IDUA蛋白的合成；且效果最好。

(4)IDUA突變基因純合小鼠IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異27、略

【分析】【分析】

根據題干信息分析；糖尿病模型斑馬魚的構建的原理是使胰島素基因表達受阻，而使胰島素基因表達受阻是通過給斑馬魚受精卵注射嗎啉反義寡核苷酸實線的；嗎啉反義寡核苷酸是一種RNA剪接抑制劑，其作用的機理有兩種假說：可能是導致RNA前體上內含子2的對應序列不能被剪切，也可能是導致RNA前體上內含子2和外顯子3的對應序列同時被剪切。

(1)

根據引物2和引物3在胰島素基因片段上的位置；通過PCR擴增能得到內含子2的序列，若假說1成立，即嗎啉反義寡核苷酸導致RNA前體上內含子2的對應序列不能被剪切，