DB12T 841-2018 轉基因植物及其產(chǎn)品成分定量檢測技術規(guī)范微流滴數(shù)字PCR法　　_第1頁
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范微流滴數(shù)字PCR法Technicalguidelinesforquantitativedetectionofgeneticallymodifiedplantsandderivedproducts—Dropletdigi2018-11-07發(fā)布2018-12-01實施I本標準按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本標準由天津市農(nóng)村工作委員會提出并歸口。本標準起草單位：天津市農(nóng)業(yè)質量標準與檢測技術研究所、中國農(nóng)業(yè)科學院生物技術研究所、天津市東麗區(qū)產(chǎn)品質量監(jiān)督檢驗所。本標準主要起草人：蘭青闊、蘭璞、李亮、趙新、沈曉玲、王成、宛煜嵩、陳銳、黃鳳軍、李文、李益歌。1轉基因植物及其產(chǎn)品成分定量檢測技術規(guī)范微流滴數(shù)字PCR法1范圍2術語和定義3實驗室資質——轉基因植物數(shù)字PCR檢測方法研制人員應具備轉基因生物安全檢測工作相關業(yè)務24技術要求4.1方法的建立4.1.2PCR反應體系和反應程序優(yōu)化通過試驗確定適合的反應體系(模板量、引物、探針濃度等)及反應程序(退火溫度、循環(huán)數(shù)等),4.1.4方法靈敏度測試4.1.5方法適用性測試4.2.1線性度4.2.2精密度線性動態(tài)范圍內的精密度用重復性相對標準偏差RSDr表示，應≤25%。4.2.5再現(xiàn)性3由兩個不同操作人員，在兩個不同時間段，對包含不同質量分數(shù)的同批樣品(至少包括陽性樣品、陰性樣品和定量限樣品)進行測試。測試結果與預期偏差RSD應≤25%,表明方法再現(xiàn)性符合要求。否4.3.1經(jīng)實驗室內方法確認符合要求后，組織多家實驗室對檢測方法的特異性、靈敏度和再現(xiàn)性進行4.3.2實驗室間方法確認樣品應包括陽性對照樣品、陰性對照樣品、特異性測試樣品和靈敏度測試樣4.3.3特異性測試樣品應包括：4.3.4靈敏度測試樣品應包括定量限樣品。4.3.5至少重復3次試驗，每次試驗至少設置3個平行。4.3.6實驗室間方法確認不少于6個實驗室提供有效數(shù)據(jù)。且至少重復3次試驗，每次試驗至少設置3個平行。4.3.7線性度、精密度、正確度按照5.2要求。4.3.8依據(jù)驗證單位出具的驗證報告

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