原子吸收光譜儀校準工作規程文件編號：SOP-QC-004.01名稱：原子吸收光譜儀的校準生效日期：頁碼：起草人：審核人：批準人：日期：日期：日期：目的建立原子吸收光譜儀的校準規程，確保其得以正確校準。適用范圍適用于本QC實驗室原子吸收光譜儀的校準。職責指導教師負責和監督本規程的有效實施；操作人員嚴格按照該規程進行操作。程序校準準備4.1.1外觀校準前，原子吸收光譜儀儀器上應有：儀器名稱、型號、出廠編號、制造廠名、制造日期、額定工作電源電壓及頻率，國產儀器應有制造計量器具許可證標志及編號。所有緊固件均應安裝牢固，連接件應連接良好，各調節旋鈕、按鍵和開關均能正常工作，無松動現象，電纜線的接插件應接觸良好氣路連接正確，不得有漏氣現象，氣源壓力應符合出廠說明規定的指標。外觀不應有影響儀器正常工作的損傷。儀表的所有刻線應清晰、粗細均勻。指針的寬度不應大于刻線的寬度，并應于刻線平行。數顯部位顯示清晰、完整。4.1.2校準環境溫度環境：10~30℃濕度范圍：≤85%RH儀器應平穩地放在工作臺上，操作時不得有搖動，周圍無強磁場、電場或振動源干擾，無強氣流影響。4.1.3校準設備及標準物質空心陰極燈標準物質秒表最小分度值不大于0.1s波長示值誤差與重復性光譜帶寬偏差基線穩定性測量重復性特征濃度檢出限4.2.1泵流量設定值誤差Ss和流量穩定性SR泵流量設定值（mL/min）0.2~0.50.6~1.0大于1.0測定次數333流動相收集時間/min20~1010~55注：最大流量的設定值可根據用戶使用情況而定；對特殊的、流量小的儀器，流量的設定可根據用戶使用情況選大、中、小三個流量；流動相的收集時間則根據情況適當縮減或延長。按上表的要求設定流量，啟動儀器，壓力穩定后，在流動相出口處用事先稱重過的潔凈容量瓶收集流動相，同時用秒表計時，收集表5-2規定時間流出的流動相，在分析天平上稱重，按公式(3)計算流量實測值Fm按公式(1)、公式(2)計算Ss和SR。每一設定流量，重復測量3次。Ss=Fm式中：Fm—同一設定流量3次測量值的算數平均值，mL/minFs—流量設定值，mL/minSR=F式中：Fmax—同一設定流量3次測量值的最大值，mL/minFmin—同一設定流量3次測量值的最小值，mL/minF式中：Fm—流量實測值，mL/minW2—容量瓶+流動相的質量，gW1—容量瓶的質量，gρt—實驗溫度下流動相的密度，g/cm3，(不同溫度下流動相的密度參見JJG705-2014附錄C)t—收集流動相的時間，min。4.2.2梯度誤差色譜條件：色譜柱阻尼管（4m*0.1mmD）或等效柱溫40℃流動相A泵：純水B泵：0.1%（V/V）丙酮水溶液梯度程序時間（min）A泵%B泵%Initial10005.0010005.01802010.00802010.01604015.00604015.01406020.00406020.01208025.00208025.01010030.00010030.01100035.00100035.00Stop流速2.0mL/min檢測波長254nm測量次數2按照上述色譜方法運行，完成譜圖采集后，畫出B溶劑經由5段階梯從0%變到100%的梯度變化曲線，如圖5-1所示。求出由B溶劑變化所產生的每一段階梯對應的響應信號值的變化值Li。重復測量2次，按公式(4)計算每一段階梯對應的響應信號值的變化平均值Li；按公式(5)計算五段階梯響應信號值的總平均值Li；按公式(6)計算每一段的梯度誤差Gi，取GiL式中：Li—第iL1i—第i段階梯第1L1i-1—第（i-1）段階梯第L2i—第i段階梯第2L2i-1—第（i-1）段階梯第Li=i=1式中：Li—5n—梯度的階梯數，n=5。式中：Gi—第i注：當i為1（i-1=0）時，第（i-1）階梯響應信號值為B溶劑為0%時的響應信號值。圖5-1梯度誤差檢定示意圖溫箱溫度設定值誤差ΔTs和柱箱溫度穩定性Tc 將數字溫度計探頭固定在柱溫箱內與色譜杜相同的部位，選擇35℃和45℃(也可根據用戶使用溫度設定)進行檢定。按議器明書操作，通電升溫，待溫度穩定后，記下溫度計讀數并開始計時，以后每隔10min記錄1次，共計7次，求出平均值。平均值與設定值之差為柱溫箱溫度設定值誤差ΔTs，7次讀數中最大值與最小值之差為柱溫箱溫度穩定性Tc。紫外-可見光檢測器和二極管陣列檢測器的性能4.4.1波長示值誤差和重復性將檢測器和數據處理系統連接好，通電預熱穩定后，用注射器將純水注入檢測池內進行沖洗后，充滿檢測池。待檢測器示值穩定后，在(235±5)nm、(257±5)nm、(313±5)nm和(350±5)nm的波長下將示值回零，然后再用注射器將紫外分光光度計溶液標準物質(參考波長為235nm，257nm，313nm和350nm)從檢測器人口注入樣品池中沖洗，并將樣品池充滿至示值穩定。將檢測器波長調到低于參考波長5nm處(例如檢定257nm時，檢測器波長先調到252nm)，改變檢測器波長，每(5~10)s改變1nm，記錄每個波長下的吸收值(吸收值變化的示意圖見圖5-2)，最大或最小吸收值對應的波長與參考波長之差為波長示值誤差。每個波長重復測量3次，其中最大值與最小值之差為波長重復性。圖5-2波長示值誤差檢定中吸收值變化示意圖 有吸光值顯示的檢測器，改變波長時可直接讀出吸光值，其最大(或最小)吸光值對應的波長與參考波長之差為波長示值誤差。有波長掃描功能的儀器可畫出標準溶液的光譜曲線，其波峰(或波谷)對應的波長與參考波長之差為波長示值誤差。對于有內置標準濾光片可進行自檢的儀器可直接采用其測量數據。 對改變波長有自動回零功能的紫外-可見光檢測器，可采用連續進樣的方法檢定波長示值誤差，具體做法是：用一節空管代替色譜柱將液路連通，以水做流動相，流量為(0.5~1.0)mL/min，采用步進進樣方法，例如檢定257nm時，從252nm開始到262nm，每2min改變1nm，用注射器注人相同體積的紫外分光光度計溶液標準物質，得到一組不同波長的色譜峰，最高(或最低)色譜峰對應的波長與參考波長之差，即為波長示值誤差。4.4.2基線噪聲和基線漂移選用C18色譜柱，以100%甲醇為流動相，流量為1.0mL/min，紫外檢測器的波長設定為254nm，檢測靈敏度調到最靈敏擋。開機預熱，待儀器穩定后記錄基線30min，選取基線中噪聲最大峰-峰高對應的信號值，按公式(7)計算基線噪聲，用檢測器自身的物理量（AU）作單位表示。基線漂移用30min內基線偏離起始點最大信號值（AU/30min）表示。Nd=KB式中：Nd—K—衰減倍數；B—測得基線峰-峰高對應的信號值，AU4.4.3最小檢測濃度在4.4.2的色譜條件下，由進樣系統注入（10~20）L的1.00×10-7g/mL萘-甲醇溶液，記錄色譜圖，由色譜峰高和基線噪聲峰高，按公式（8）計算最小檢測濃度CL(按20L進樣量計算)C式中：CL—最小檢測濃度，g/mLNd—C—標準溶液濃度，g/mL；V—進樣體積，μL；H—標準物質的峰高。注：Nd和H的單位應保證一致；式中分母的“20”表示標準的進樣體積，其單位為微升（μL4.4.4線性范圍色譜條件：色譜柱阻尼管（4m*0.1mmD）或等效柱溫40℃流動相不同濃度的丙酮—2%（V/V）異丙醇水溶液（先用0.1%濃度的丙酮—2%（V/V）異丙醇水溶液作為流動相，等待基線穩定后開始測試度數，每更換一個濃度流動相需要等儀器示值穩定之后，再記錄信號響應值）不同濃度分別指的是0.1%濃度，0.2%濃度，0.3%濃度，0.4%濃度，0.5%濃度，0.6%濃度，0.7%濃度，0.8%濃度，0.9%濃度，1.0%濃度的丙酮—2%（V/V）異丙醇水溶液以5個丙酮溶液濃度（0.1%，0.2%，0.3%，0.4%，0.5%和對應的響應值作標準曲線，在曲線上找出丙酮溶液濃度大于0.5%各點的讀數，與相應各濃度點的測量值做比較，量值相差5%的濃度作為檢測上線CH,按照4.4.3得到的最小檢測濃度為檢測下限CL值，CH/CL比值為線性范圍）整機性能（定性、定量重復性）將儀器各部分聯接好，選用C18色譜柱，用100%甲醇為流動相，流量為1.0mL/min，根據儀器配置的檢測器，選擇測量參數:紫外可見光檢測器和二極管陣列檢測器波長設定為254nm，靈敏度選擇適中，基線穩定后由進樣系統注入一定體積的1.0×10-4g/mL萘-甲醇溶液標準物質；熒光檢測器激發波長和發射波長分別設定為290nm和330nm，靈敏度選在中間擋，基線穩定后注人一定體積的1x10-5g/mL萘-甲醇標準溶液；示差折光率檢測器和蒸發光散射檢測器靈敏度選在中間擋，注人一定體積的200ug/mL(2.0×10-4g/mL)的甲醇中膽固醇溶液標準物質。連續測量6次，記錄色譜峰的保留時間和峰面積，按公式(9)計算相對標準偏差RSD6。RSD式中：RSD6定性（定量）Xi—第iX—6次測量結果的算數平均值；i—測量序號；n—測量次數；可接受校準泵流量設定值誤差Ss和流量穩定性SR泵流量設定值（mL/min）0.2~0.50.6~1.0大于1.0測定次數333流動相收集時間/min20~1010~55泵流量設定值最大允許誤差Ss±5%±3%±2%泵流量穩定性SR3%2%2%柱溫箱溫度設定值最大允許誤差：±2℃柱溫箱溫度穩定性：不大于1℃/h。紫外可見光檢測器二極管陣列檢測器基線噪聲≤5×10-4AU基線漂移≤5×10-3AU/30min最小檢測濃度≤5×10-8g/mL萘-甲醇溶液波長示值最大允許誤差±2nm波長重復性≤2nm線性范圍優于103定性定量重復性：紫外可見光檢測器二極管陣列檢測器定性重復性：≤1.0%定量重復性：≤3.0%？插入原子吸收光譜儀介紹視頻文檔作為二維碼學習鏈接

原子吸收光譜儀校準記錄實訓的方法條件色譜柱型號流動相流速柱箱溫度檢測器類型其他：實訓數據記錄-流量設定誤差，流量穩定性Fs泵流量設定值（mL/min）：t收集時間（min）：ρ水密度g/mL*Fm第1次第2次第3次FmFmax（mL/min）Fmin（mL/min）SSSRSS標準要求SR標準要求結論滿足不滿足結論滿足不滿足具體計算過程：*參見具體計算過程：梯度誤差Gc參考本規程4.2.2色譜參數要求設置方法，由梯度控制儀器設置階梯式的梯度洗脫程序（具體參數填寫至下表中），A溶劑為純水，B溶劑為含0.1%丙酮的水溶液。將輸液泵和檢測器連接，開機后以A溶劑沖洗系統，基線平穩后開始執行梯度程序。方法參數：色譜柱______________________________________________________柱溫_________℃流動相A泵：________________________________________________B泵：________________________________________________梯度程序時間（min）A泵%B泵%Initial流速______mL/min檢測波長_____nm測量次數2響應值數據記錄項目階段（B%）0%20%40%60%80%100%LiL1i-L1(i-1)L2iL2i-L2(i-1)LLLGi實訓數據記錄-柱箱溫度設定值誤差ΔTs，柱箱溫度穩定性Tc第1次第2次第3次第4次第5次第6次第7次溫度（℃）平均值ΔTs溫度設定值誤差Tc溫度穩定性ΔTs標準要求Tc標準要求結論結論實訓數據記錄-基線噪聲按照檢定條件進行設置，記錄基線30min，選取基線中噪聲最大峰-峰高對應的信號值為儀器的基線噪聲；實訓數據記錄-基線漂移按照檢定條件進行設置，記錄基線30min，選取基線偏離起始點最大的相應信號值為儀器的基線漂移。實訓數據記錄-最小檢測濃度（_____檢測器）按照_________測器的檢定條件進行設置，待基線穩定后，用20μL進樣針注入20μL濃度為______________的_________________。CL=2NdCV===線性范圍試劑信息丙酮：_____________________________________________________異丙醇：_____________________________________