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DB2305雙 鴨 山 市 地 方 標 準DB2305/T033—2024玉米莖基腐病抗性篩選及鑒定技術規程2024-08-302024-08-302024-09-30雙鴨山市市場監督管理局發布DB2305/T033DB2305/T033—2024前 言本文件按照GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定起草。請注意本文件的某些內容可能涉及專利。本文件的發布機構不承擔識別專利的責任。本文件由雙鴨山市農業農村局提出并歸口。本文件起草單位：寶清縣小城子鎮鄉村振興發展服務中心、黑龍江省農業科學院佳木斯分院、蕪湖職業技術學院、寶清縣朝陽鎮鄉村振興發展服務中心。本文件主要起草人：邱磊、楊曉賀、顧鑫、于昌紅、丁俊杰、畢永彬、蔣佰福、牛忠林、吳麗麗、IIDB2305/T033DB2305/T033—2024DB2305/T033—DB2305/T033—20244接種圃設計玉米莖基腐病抗性篩選及鑒定技術規程范圍本文件適用于玉米莖基腐病的田間篩選及鑒定。規范性引用文件GB4404.1糧食作物種子第1部分:禾谷類NY/T1248.7玉米抗病蟲性鑒定技術規范第7部分:鐮孢莖腐病DB23/T017玉米生產技術規程術語和定義NY/T1248.7界定的及下列術語和定義適用于本文件。3.1玉米莖基腐病3.2病原菌形態特征玉米莖基腐病是由多種病原菌引起的土傳病害，其中包括真菌和細菌。351病圃選擇田間設計501319478NY/T1248.7玉米材料采用雙行區種植，小區行長4m，行距0.68m，植株密度為5000株/667m2。田間播種5cm～10cm7℃～825～30DB23/T0171GB4404.14.4間苗定苗31GB4404.14.4間苗定苗354.4中耕管理產過程符合DB23/T017-2008標準。5接種方法5.1病菌采集5.1.1采樣地點選擇在雙鴨山市玉米莖基腐病高發區域進行采樣，獲取具有代表性的病害樣本。5.1.2樣本采集在發病部位采集玉米莖稈及維管束組織。25.1.3樣本處理使用流動的清水輕輕沖洗樣本，以去除泥土和表面的雜質。使用無菌的剪刀或手術刀，將玉米莖部從健康區域和病害區域仔細切割開來,病害區域的樣本應該包括可見的病斑及其周圍的健康組織，以便于后續的顯微觀察和病原檢測。病菌制備微生物分離752s～3s12min～3minPDA25℃～27℃環境中，黑暗培3d菌株鑒定依據柯赫氏法則進行致病力測定，確定其為玉米莖基腐病病原菌的菌株,對分離出的菌株進行形態學、生理生化特征和分子生物學鑒定進行屬種鑒定,從比例占絕對優勢的病原菌中選取致病力較強的菌株作為接種的目標菌株。菌株培養PDA7d7mm（高梁粒用開水煮20min12145min）5～7261～23min～5min，待菌絲長滿每個高粱粒的表面，常溫陰干，以留備用。接種時期接種時期為抽雄初期至吐絲初期，可全天進行田間人工接種。接種步驟5c～10cm，303DB2305/T033—2024接種管理在病圃中鋪設噴帶的灌溉設施，每天噴水10min～20min，試驗地保持土壤中含充足水分。接種圃土壤濕度不低于30%。結果調查玉米乳熟后期進行田間調查。逐株檢査植株基部莖節，凡莖節變軟、變褐色者，記為莖基腐病株。1。發病率（%）=發病株數/總株數表１玉米莖基腐抗性評價標準病級病級劃分標準抗性評價0級病株率0%～5.0%高抗（HR）1級病株率5.1%～10.0%抗病（R）3級病株率10.1%～20.0%中抗（MR）5級病株率20.1%～30.0%中感（MS）7級病株率30.1%～40.0%感病（S）9級病株率40.1%～100%高感（HS）6抗性評價6抗性評價6.1鑒定有效性判定406.2非一致性抗性判定6.2.1226.2.226.2.322照品種發病率超過40%時，該批次鑒定有效。6.3玉米篩選并注意田間大斑病的綜合防治；慎重使用或者不建議推廣感病及高感玉米品種。如果所鑒定的玉米自交系發病株不超過10%，即病級為高抗及抗病，則視為該自交系適用于抗玉米莖基腐病的育種材料，結合田間其他農藝性狀進行重點利用。如果所鑒定的玉米自交系發病株在4DB2305/T033DB2305/T033—202410%～30%