緒論

1.分子生物學(xué)的概念:是分子水平上研究生命體及其功能單元的結(jié)構(gòu)，組成和功

能的科學(xué)

2.分子生物學(xué)核心內(nèi)容：通過對(duì)生命體的物質(zhì)基礎(chǔ)—核酸，蛋白質(zhì)，酶等生物

大分子的結(jié)構(gòu)，組成，功能及其相互作用等的研究來闡明生命的分子基礎(chǔ)，從而

探索生命的奧秘。

第一章基因與基因組

名詞解釋

1.啟動(dòng)子：DNA分子上能與RNA聚合酶結(jié)合并形成轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合體的區(qū)域以及促

進(jìn)這一過程的調(diào)節(jié)蛋白的結(jié)合位點(diǎn)。

2.增強(qiáng)子：增強(qiáng)基因啟動(dòng)子工作效率的順式作用序列，能夠在相對(duì)于啟動(dòng)子的任

何方向和位置上都發(fā)揮作用。！

3.基因突變：由于核酸序列發(fā)生變化，包括缺失突變，定點(diǎn)突變，移框突變等，

使之不再是原有基因的構(gòu)象！

4.轉(zhuǎn)錄圖：以基因的外顯子序列或者表達(dá)序列標(biāo)簽為標(biāo)記，精確地表明這些標(biāo)記

在基因組或染色體上位置的物理圖。

5.基因：是核酸分子上具有特定遺傳效應(yīng)的核昔酸序列的總稱。（化學(xué)本質(zhì)是

DNA）!

6.割裂基因：編碼序列在DNA中是不連續(xù)的，被非編碼序列分隔開的基因。

7.沉默子：對(duì)基因的轉(zhuǎn)錄起阻礙作用，使基因沉默。

8.終止子：在轉(zhuǎn)錄中提供終止信號(hào)，使轉(zhuǎn)錄作用終止。

9.基因組：細(xì)胞或生物體中，一套完整的單倍體遺傳物質(zhì)的總和成為基因組。

10.基因組學(xué)：是研究基因組的結(jié)構(gòu)，功能及表達(dá)產(chǎn)物的學(xué)科

11.結(jié)構(gòu)基因組學(xué)：是制作人類基因的遺傳圖和物理圖，最終完成人類和其他重

要模式生物全部基因組DNA序列測定的學(xué)科。

簡答題及論述題

1.簡述真核生物基因的分類，結(jié)構(gòu)及功能

（1）分類：編碼蛋白質(zhì)的基因和非編碼RNA的基因

（2）結(jié)構(gòu)：大對(duì)數(shù)是斷裂基因，斷裂基因的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

（3）功能：儲(chǔ)存遺傳信息，傳遞遺傳信息，基因表達(dá)與基因突變

2.原核生物基因組的特點(diǎn)

（1）基因組通常僅由一條環(huán)狀雙聯(lián)DNA分子組成

（2）結(jié)構(gòu)基因與調(diào)控序列以操縱子的形式組織在一起

（3）基因組中重復(fù)序列很少

（4）結(jié)構(gòu)基因多為單拷貝

（5）基因是連續(xù)的

（6）編碼序列一般不會(huì)重疊

（7）編碼區(qū)在基因組中所占的比例遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于真核基因組而小于病毒基因組

（8）細(xì)菌基因組中存在可移動(dòng)的DNA序列

3.真核生物基因組的特點(diǎn)

（1）DNA都是雙鏈線狀且往往不是一條

（2）大多數(shù)結(jié)構(gòu)基因因?yàn)楦盍鸦虿⑹芤幌盗许樖阶饔迷{(diào)控

（3）結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物是單順反子

（4）基因組內(nèi)非編碼的序列遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于編碼區(qū)

（5）基因組中含有大量重復(fù)序列和基因家族

（6）基因組DNA的末端都有端粒結(jié)構(gòu)

（7）基因組中也存在一些可移動(dòng)的遺傳因子

（8）基因組還包括細(xì)胞器基因組

4.結(jié)構(gòu)基因組學(xué)根據(jù)采用方法不同，將繪制的圖譜分為哪幾類？

（1）遺傳圖（2）物理圖（3）序列圖（4）轉(zhuǎn)錄圖

第二章DNA的復(fù)制，損傷與修復(fù)

名詞解釋

1.半保留復(fù)制：DNA復(fù)制時(shí)親代DNA的兩條鏈解開，每條鏈作為新鏈的模板，從

而形成兩個(gè)子代DNA分子，每一個(gè)子代DNA分子包含一條親代鏈和一條新合成的

鏈

2.復(fù)制起點(diǎn)：基因組中單一DNA復(fù)制時(shí)所需要的起始序列

3.復(fù)制子：作為含有一個(gè)復(fù)制起始點(diǎn)的獨(dú)立復(fù)制單元的一個(gè)完整DNA分子或DNA

分子上的某段區(qū)域

4.復(fù)制叉：正在進(jìn)行復(fù)制的雙鏈DNA分子所形成的Y形區(qū)域

5.單鏈結(jié)合蛋白：DNA復(fù)制中的蛋白分子，與單鏈DNA發(fā)生動(dòng)態(tài)結(jié)合，防止DNA

單鏈水解及重新結(jié)合成雙鏈

6.拓?fù)洚悩?gòu)酶：通過切斷或連接DNA雙鏈從而改變DNA分子超螺旋狀態(tài)的酶

7.引物酶:DNA復(fù)制時(shí)，參與復(fù)制時(shí)的起始階段，催化合成RNA引物的酶

8.DNA聚合酶:以DNA為指導(dǎo)的，催化DNA合成的酶

9.切除修復(fù)：切除DNA一條鏈上受損片段，以其互補(bǔ)鏈為模板合成正常DNA片段

修復(fù)DNA損傷

10.岡崎片段：是相對(duì)較短的DNA核昔酸序列

11.端粒：是存在于真核細(xì)胞線狀染色體末端的一小段DNA-蛋白質(zhì)復(fù)合體

簡答題以及論述題

1.DNA聚合酶催化作用的條件

（1）需要DNA作為模板，因此稱為依賴DNA的DNA聚合酶

（2）需要RNA作為引物，即不能直接連接兩個(gè)游離的dNTP,只能在一段RNA引

物的3'-0H連接dNTP

（3）DNA合成的方向是5'-3'

2.DNA的修復(fù)類型

DNA修復(fù)分為復(fù)制修復(fù)（復(fù)制修復(fù)分為尿喀咤糖基酶系統(tǒng)、錯(cuò)配修復(fù)、無瞟吟修

復(fù)）、損傷修復(fù)（損傷修復(fù)分為光復(fù)活修復(fù)、甲基轉(zhuǎn)移酶、切除修復(fù)（切除修復(fù)

分為堿基切除修復(fù)、核昔切除修復(fù)））、復(fù)制后修復(fù)（復(fù)制后修復(fù)分為大腸埃希菌

的重組修復(fù)系統(tǒng)、S0S修復(fù)）

3.DNA的復(fù)制大致分為（起始）、（延伸）、（終止）三個(gè)階段

第三章轉(zhuǎn)錄及其調(diào)控

名詞解釋

1.轉(zhuǎn)錄：生物體在遺傳信息傳遞過程中，以DNA為模板，在DNA依賴的RNA聚

合酶催化下，以4種三磷酸核昔為原料，合成RNA的過程稱為轉(zhuǎn)錄！

2.啟動(dòng)子:在調(diào)控序列中，供RNA聚合酶辨認(rèn)結(jié)合的模板DNA區(qū)段稱為啟動(dòng)子！

3.結(jié)構(gòu)基因：負(fù)責(zé)編碼細(xì)胞代謝途徑中組成蛋白質(zhì)的基因。

4.外顯子：基因組DNA中出現(xiàn)在成熟RNA分子上的序列

5.內(nèi)含子：真核生物細(xì)胞DNA中的間插序列

6.反式作用因子：起反式作用的調(diào)控元件

7.順式作用元件：起順式作用的DNA序列

8.操縱子：轉(zhuǎn)錄的功能單位

9.轉(zhuǎn)錄因子：直接結(jié)合或間接作用于基因啟動(dòng)子、形成具有RNA聚合酶活性的動(dòng)

態(tài)轉(zhuǎn)錄復(fù)合體的蛋白質(zhì)因子

簡答題及論述題

1.簡述轉(zhuǎn)錄與復(fù)制的異同

相同點(diǎn)：

(1)轉(zhuǎn)錄和復(fù)制都是酶促的核昔酸聚合過程，都以DNA為模板

(2)都需要依賴RNA的聚合酶

(3)據(jù)和過程都是核甘酸之間生成磷酸二酯鍵

(4)都從5'至3'方向延伸生成新鏈多聚核昔酸

(5)都遵從堿基配對(duì)規(guī)律

不同點(diǎn)：

(1)“模板：復(fù)制過程中(兩股鏈均復(fù)制，全部基因組被復(fù)制)，翻譯過程中(只

有模板鏈轉(zhuǎn)錄，任一種細(xì)胞內(nèi)僅部分基因轉(zhuǎn)錄)

(2)原料：復(fù)制：dNTP翻譯：NTP

(3)酶：復(fù)制：DNA聚合酶翻譯：RNA聚合酶

(4)產(chǎn)物：復(fù)制：子代雙鏈DNA轉(zhuǎn)錄：mRNAtRNArRNA等

(5)堿基配對(duì)：復(fù)制：A-TG-C轉(zhuǎn)錄：A-TG-CA-U

2.真核生物RNA轉(zhuǎn)錄后如何加工修飾

mRNA前體:51前端加m7GpppG帽,3,端加polyA尾，去掉內(nèi)含子，拼接外顯

子，RNA編輯

tRNA前體：中間剪切，修飾形成稀有堿基，在3'末端加上CCA-0H結(jié)構(gòu)

rRNA前體：剪切

3.簡述原核生物的轉(zhuǎn)錄過程

(1)轉(zhuǎn)錄起始：RNA聚合酶全酶與模板結(jié)合，DNA雙鏈解開，在RNA聚合酶作用

下發(fā)生第一次聚合反應(yīng)，形成轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物

(2)轉(zhuǎn)錄延長：。亞基脫落，RNA-pol核心酶變構(gòu)，于模板結(jié)合松弛，沿著DNA

模板前移，在核心酶作用下，NTP不斷聚合，RNA鏈不斷延長

(3)：轉(zhuǎn)錄終止：RNA聚合酶在DNA模板上停頓下來，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物RNA鏈從轉(zhuǎn)錄復(fù)

合物上脫落下來

4.轉(zhuǎn)錄的體系！

(1)：模板：DNA的一條鏈

(2)：原料：NTP

(3)：酶：RNA聚合酶

(4)：能量：ATP

(5)：產(chǎn)物：mRNAtRNArRNA

5.大腸埃希菌RNA聚合酶各亞基的功能！

(1)：a亞基決定哪些基因被轉(zhuǎn)錄

(2)：B亞基與轉(zhuǎn)錄全過程有關(guān)

⑶：B'亞基結(jié)合DNA模板

（4）：w亞基功能尚不清楚

（5）：6亞基辨認(rèn)起始位點(diǎn)

6.轉(zhuǎn)錄的起始過程

原核：首先是RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合啟動(dòng)子，形成閉合轉(zhuǎn)錄復(fù)合體，接著DNA

雙鏈局部接鏈，最后是磷酸二酯鍵的形成

真核：主要是RNA聚合酶、轉(zhuǎn)錄因子TF與DNA模板形成轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的過

程

7.增強(qiáng)子的特點(diǎn)

（1）增強(qiáng)子增強(qiáng)基因轉(zhuǎn)錄的效應(yīng)十分明顯

（2）增強(qiáng)子發(fā)揮作用的方式通常與其方向或所在部位與轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)的距離無關(guān)

（3）增強(qiáng)子大多數(shù)為重復(fù)序列

（4）增強(qiáng)子增強(qiáng)基因轉(zhuǎn)錄的效應(yīng)有嚴(yán)格的組織細(xì)胞特異性

（5）增強(qiáng)子沒有基因?qū)！?/p>

（6）5強(qiáng)子的活性與其在DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中的空間方向性有關(guān)

（7）許多增強(qiáng)子是否發(fā)揮作用受外部信號(hào)驅(qū)使

第四章翻譯及其調(diào)控

名詞解釋

1.分子伴侶：是細(xì)胞中一類可識(shí)別肽鏈的非天然構(gòu)象，促進(jìn)各功能域和整體蛋白

正確折疊的保守蛋白質(zhì)。！

2.翻譯：是以MRNA為模板指導(dǎo)蛋白質(zhì)生物合成的過程

3.蛋白質(zhì)生物合成的本質(zhì)：將MRNA分子中四種核昔酸序列編碼的遺傳信息轉(zhuǎn)換

成蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)中20種氨基酸的排列順序

簡答題及論述題

1.翻譯合成體系

模板：MRNA

合成場所：核糖體

搬運(yùn)工具：TRNA

2.蛋白質(zhì)合成過程

（1）.真核生物:

3.遺傳密碼的特點(diǎn)！

（1）方向性

（2）連續(xù)性

（3）簡并性

⑷簡并性

（5）通用性

4.蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制

5.翻譯的起始過程

（1）原核生物：

1.核糖體大小亞基分離

2.MRNA與核糖體小亞基定位結(jié)合

3.起始fMet-tRNAfMet就位

4.70S起始復(fù)合物的形成

（2）真核生物：

1.核糖體大小亞基的分離

2.起始Met-tRNAiMet

3.mRNA與核糖體小亞基的結(jié)合

4.80S起始復(fù)合物的形成

5,原核生物和真核生物的翻譯起始復(fù)合物的生成有何不同？

（1）翻譯的模板是MRNA

（2）翻譯前先應(yīng)形成起始復(fù)合物，即把MRNA和TRNA結(jié)合到核糖體上

第六章常用分子生物學(xué)技術(shù)

名詞解釋

1.Southern印記：通過核酸限制性內(nèi)切酶降解樣品中DNA,再經(jīng)凝膠電泳分離，

將分離后的DNA片段從凝膠轉(zhuǎn)移到吸附薄膜上并固定，隨后用標(biāo)記的探針進(jìn)行雜

交，以檢測目的的DNA

2.Northern印記：應(yīng)用RNA或DNA探針檢測特異MRNA的一種雜交技術(shù)，主要用

于分析基因的轉(zhuǎn)錄或MRNA分子

3.Western記：是常用語目的蛋白質(zhì)定位檢測的實(shí)驗(yàn)方法

4.生物芯片：是將核酸，多肽或蛋白質(zhì)分子、細(xì)胞和組織切片等大量的生物大分

子制成探針，以預(yù)先設(shè)計(jì)的方式有序地，高密度的排列在玻片或硅片等載體上，

構(gòu)成二維分子陣列，然后與待測生物樣品靶分子陣列，然后與待測生物樣品靶分

子雜交，通過檢測雜交信號(hào)實(shí)現(xiàn)快速，高效，高通量樣品檢測

5.cDNA文庫：指某一生物特定器官或特定發(fā)育階段的細(xì)胞內(nèi)總MRNA,應(yīng)用逆轉(zhuǎn)

錄酶逆轉(zhuǎn)錄成cDNA,以此構(gòu)建的重組DNA克隆群

6.基因敲除：是利用細(xì)胞染色體DNA可與外源性DNA同源序列發(fā)生同源重組的原

理，使特定靶基因失活，以研究該基因的功能

7.RNA干擾：是利用外源和內(nèi)源性雙鏈RNA在生物體內(nèi)誘導(dǎo)同源靶基因的MRNA

特異性降解，導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄后基因沉默的技術(shù)

簡答題及其論述題

1.簡述基因敲除的技術(shù)關(guān)鍵

（1）載體構(gòu)建（2）基因敲除載體導(dǎo)入ES細(xì)胞（3）鑒定與篩選（4）基因敲

除動(dòng)物產(chǎn)生

2.RNA干擾是如何發(fā)揮作用的

（1）起始階段：dsRNA在核酸內(nèi)切酶RNaseIII的作用下，被加工裂解為21-23nt

的由正義序列和反義序列組成的小干擾RNA

（2）效應(yīng)階段：siRNA與解旋酶、ATP及多個(gè)蛋白形成的核酸復(fù)合物結(jié)合形成

RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合體，最后呈現(xiàn)RNAi現(xiàn)象

3.RNAi作用機(jī)制及其特點(diǎn)

作用機(jī)制：上題答案T

特點(diǎn)：（1）具有高度特異性

（2）具有高效性（3）需要siRNA介導(dǎo)

（3）對(duì)靶基因位點(diǎn)的選擇性

4.論述PCR的基本原理、過程、基本成分、類型！！！！！

基本原理：以擴(kuò)增的DNA分子為模板，以一對(duì)分別與模板互補(bǔ)的寡核苦酸片段為

引物，在DNA聚合酶的作用下，以dNTPs為底物，按照半保留復(fù)制的原理，通過

變性，退火，延伸三步驟完成新的DNA合成，并反復(fù)重復(fù)這一過程，另一方面，

新合成的DNA片段也可以作為模板，因此PCR技術(shù)可使DNA的合成量呈指數(shù)增長

過程：由變性以及變性'退火、延伸三步級(jí)反復(fù)循環(huán)。

基本成分：（1）模板DNA（2）特異性引物（3）熱穩(wěn)定DNA聚合酶（4）脫氧核

昔三磷酸（5）二價(jià)陽離子（6）緩沖液（7）一價(jià)陽離子

類型：（1）巢式PCR

（2）反轉(zhuǎn)錄PCR

第七章藥物基因組學(xué)

名詞解釋

1.單核昔酸多態(tài)性：是人類基因組DNA序列中最常見和最普遍的一種多態(tài)性。

2.等位位點(diǎn)：是針對(duì)單核昔酸多態(tài)性而言

3.基因型：除性染色體外，每個(gè)人體內(nèi)的染色體都有兩份，一個(gè)人所擁有的一對(duì)

等位位點(diǎn)的類型被稱作基因型

4.單體型：指位于一條染色體上傾向于整體遺傳的一組緊密連鎖的遺傳標(biāo)志物

5.P糖蛋白：是一重要的藥體轉(zhuǎn)運(yùn)體，由多藥耐藥基因蛋白1編碼，定位于細(xì)胞

膜

6.尿昔二磷酸葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶：是進(jìn)行II相生物轉(zhuǎn)化時(shí)最重要的一種酶，

通過葡萄糖醛酸化反應(yīng)，將親脂性底物轉(zhuǎn)化為水溶性葡萄糖醛酸而隨尿，膽汁和

糞便排出體外

6.藥物基因組學(xué)：是在基因組水平上研究不同個(gè)體及人群對(duì)藥物反應(yīng)的差異，并

探討用藥個(gè)性化和以特殊人群為對(duì)象的新藥開發(fā)的學(xué)科

7.藥物不良反應(yīng)：

簡答題及論述題

1.簡述藥物基因組學(xué)與藥物遺傳學(xué)研究方法的異同

藥物作用的差異有些是由遺傳因素引起的，研究遺傳因素對(duì)藥物反應(yīng)影響的學(xué)科

稱為遺傳藥理學(xué)，它是研究臨床藥物治療中個(gè)體反應(yīng)差異的遺傳學(xué)因素的學(xué)科，

認(rèn)為遺傳多態(tài)性可引起不同個(gè)體在服用藥物時(shí)的藥理學(xué)及毒理學(xué)的不同效果，從

而引起藥物治療效果的差異，隨著人類基因組計(jì)劃的啟動(dòng)和完成，對(duì)單個(gè)基因的

研究，逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)閺幕蚪M層面對(duì)多基因變異與藥物應(yīng)答影響的研究，遺傳藥理

學(xué)演變?yōu)樗幬锘蚪M學(xué)，藥物基因組學(xué)從基因組整體出發(fā)研究基因序列的多態(tài)性

與藥物效應(yīng)多樣性之間的關(guān)系，研究基因本身及其突變體對(duì)不同個(gè)體藥物作用效

應(yīng)差異的影響，并以此為平臺(tái)發(fā)現(xiàn)新的藥物靶標(biāo)，開發(fā)新的個(gè)性化藥物。

2.作為第三代多態(tài)性標(biāo)志，單核甘酸多態(tài)性SNP的特點(diǎn)有哪些？！！！！！！！！！

（1）是人類可遺傳的變異最常見的一種

（2）數(shù)量多，分布廣泛

（3）具有遺產(chǎn)穩(wěn)定性

（4）具有二態(tài)性

（5）可以建立單體型區(qū)域

（6）部分位于基因內(nèi)部的SNPs可能會(huì)直接影響蛋白質(zhì)產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)或基因表達(dá)水

平

第八章藥物轉(zhuǎn)錄組學(xué)

名詞解釋

1.轉(zhuǎn)錄組：指生命單元中所有按基因信息單元轉(zhuǎn)錄和加工的RNA分子，或者是

一個(gè)特定細(xì)胞所有轉(zhuǎn)錄本的總和

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：廣義轉(zhuǎn)錄學(xué)主要研究從一種細(xì)胞或者組織的基因組所轉(zhuǎn)錄出來的

RNA的總和

3.反義技術(shù)：一種新的藥物開發(fā)方法，是根據(jù)核酸雜交原理設(shè)計(jì)針對(duì)特定靶序列

的反義核酸,通過阻抑從DNA至MRNA的轉(zhuǎn)錄過程或從MRNA到蛋白質(zhì)的翻譯過程,

從而阻斷細(xì)胞中的蛋白質(zhì)合成

4.反義藥物：通常指反義寡核昔酸藥物，指人工合成長度為15-25個(gè)堿基的DNA

分子及其類似物。

5.藥物靶標(biāo)：

6.核酶：是一類具有催化核酸水解和連接功能的核酸分子，是具有酶活性的RNA,

敘述題及簡答題

1.轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究方法

基因芯片技術(shù)，微陣列技術(shù)，表達(dá)序列標(biāo)記技術(shù)，基因表達(dá)系列分析，大規(guī)模平

行信號(hào)測序系統(tǒng)和RNA測序技術(shù)

2.反義寡核苦酸藥物優(yōu)點(diǎn)/反義藥物與傳統(tǒng)藥物的性質(zhì)和作用對(duì)象明顯不同，表

現(xiàn)在？

(1)特異性較強(qiáng)(2)信息量較大(3)反義藥物以核酸為靶點(diǎn)，與蛋白質(zhì)作

為靶點(diǎn)比較，更合理設(shè)計(jì)新藥物(4)與傳統(tǒng)藥物比較反義藥物更具有選擇性及

高效率，因此也更高效低毒

第九章藥物蛋白質(zhì)組學(xué)

名詞解釋

1.蛋白質(zhì)組：一個(gè)基因組，一個(gè)細(xì)胞，一個(gè)有機(jī)體或某一特定的組織類型所表達(dá)

的全部蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)組是一盒在時(shí)間和空間上動(dòng)態(tài)變化的整體

2.蛋白質(zhì)組學(xué):采用大規(guī)模、高通量、高效率的技術(shù)手段研究蛋白質(zhì)的特征。

3.雙向凝膠電泳：一種根據(jù)蛋白質(zhì)等電點(diǎn)和分子量的差異，連續(xù)進(jìn)行垂直方向的

兩次電泳而將待測蛋白質(zhì)分離的技術(shù)

4.藥物靶點(diǎn)：細(xì)胞內(nèi)與藥物相互作用，并賦予藥物效應(yīng)的特定分子

論述題及簡答題

1.蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法

(1)雙向電泳(2)多維色譜法(3)熒光差異凝膠電泳技術(shù)(4)定量蛋

白質(zhì)組學(xué)方法

2.藥物蛋白質(zhì)組學(xué)應(yīng)用！！！！！！

(1)構(gòu)建藥物篩選模型

(2)藥物靶點(diǎn)的發(fā)現(xiàn)、驗(yàn)證和優(yōu)化

(3)藥物作用機(jī)制研究

(4)藥物毒理機(jī)制研究

(5)耐藥機(jī)制研究

(6)中藥研究

3.蛋白質(zhì)組學(xué)的主要研究技術(shù)

(1)雙向凝膠電泳

(2)生物質(zhì)譜

(3)基于質(zhì)譜的定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)

(4)蛋白質(zhì)芯片

(5)酵母雙雜交

（6）生物信息學(xué)

第十章藥物代謝組學(xué)

名詞解釋

1.代謝組：指一生物或細(xì)胞在特定生理時(shí)期內(nèi)所有的低分子量代謝產(chǎn)物，是生物

體內(nèi)源性代謝物質(zhì)的動(dòng)態(tài)整體

2.代謝組學(xué)：研究關(guān)于生物被擾動(dòng)后其代謝產(chǎn)物種類、數(shù)量及其變化規(guī)律的科學(xué)

簡答題及其論述題

1、簡述代謝組學(xué)研究內(nèi)容及特點(diǎn)

（1）內(nèi)容：代謝組學(xué)著重研究生物整體、器官或者組織的內(nèi)源性代謝物質(zhì)的代

謝途徑及其所受內(nèi)外因素的影響及隨時(shí)間變化的規(guī)律，并揭示代謝物與生理病理

變化之間的關(guān)系，以組群指標(biāo)分析為基礎(chǔ)，以高通量，高精密的儀器檢測和數(shù)據(jù)

分析為手段，以信息建模與系統(tǒng)整合為目標(biāo)

（2）特點(diǎn)：關(guān)注內(nèi)源化合物，對(duì)生物體系中的小分子化合物進(jìn)行定性定量研究,

內(nèi)源性化合物的上調(diào)和下調(diào)指示了疾病、毒性、基因改變或環(huán)境因素的影響，內(nèi)

源性化合物的變化指標(biāo)可被用于疾病診斷和藥物篩選

2.闡述代謝組學(xué)、基因組學(xué)'轉(zhuǎn)錄組學(xué)'蛋白組學(xué)之間的關(guān)系

（1）聯(lián)系：關(guān)系十分密切，分別從DNA,MRNA,蛋白質(zhì)和代謝產(chǎn)物的不同層面研究

生命體

（2）區(qū)別：1.代謝組學(xué)更接近表型2.代謝組學(xué)可謂生命體提供更全面的信息

3.簡述代謝組學(xué)的優(yōu)點(diǎn)

（1）基因和蛋白質(zhì)表達(dá)的微小變化會(huì)在代謝物上得到放大，從而檢測更容易

（2）代謝組學(xué)的研究不需建立全基因組測序及大量表達(dá)序列標(biāo)簽數(shù)據(jù)庫

（3）代謝物的種類要選小于基因和蛋白質(zhì)數(shù)目

（4）研究中采用的技術(shù)更通用，這是因?yàn)榻o定的代謝物在每個(gè)組織中都是一樣

的緣故

4.代謝組學(xué)的分析技術(shù)

（1）.核磁共振技術(shù)

（2）色譜與質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)

（3）代謝組數(shù)據(jù)分析

第十一章外源基因表達(dá)與基因工程藥物

名詞解釋

1.外源基因表達(dá)：通過自身的轉(zhuǎn)錄，翻譯系統(tǒng)以及相應(yīng)的調(diào)控元件，調(diào)控因子

等協(xié)調(diào)作用，將基因的轉(zhuǎn)錄單位首先轉(zhuǎn)錄成MRNA,隨后以MRNA為模板，指

導(dǎo)所編碼多肽的生物合成

2.質(zhì)粒：細(xì)菌內(nèi)獨(dú)立于細(xì)菌“染色體”之外的能自主復(fù)制的共價(jià)閉合環(huán)狀雙鏈

DNA,隨著細(xì)菌分裂，能夠穩(wěn)定的靶自己的遺傳特性傳遞給子代細(xì)胞

3.宿主細(xì)胞：接納重組子并實(shí)現(xiàn)重組子的外源基因轉(zhuǎn)錄擴(kuò)增或及表達(dá)的受體細(xì)

月包

4.轉(zhuǎn)導(dǎo)：噬菌體顆粒感染宿主細(xì)胞，將噬菌體核酸注入宿主細(xì)胞內(nèi)，并使噬菌

體核酸在宿主細(xì)胞內(nèi)實(shí)現(xiàn)復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯或及子代噬菌體的繁殖的過程

5.轉(zhuǎn)化：感受態(tài)的細(xì)胞接納外源DNA分子，并使其在宿主細(xì)胞內(nèi)實(shí)現(xiàn)復(fù)制、轉(zhuǎn)

錄、翻譯等的方法

6.電轉(zhuǎn)化：將外源DNA或載體DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞，并使載體DNA在宿主細(xì)胞內(nèi)

實(shí)現(xiàn)復(fù)制，轉(zhuǎn)錄，翻譯等的方發(fā)

7.表達(dá)載體：將攜帶的外源基因在宿主細(xì)胞實(shí)現(xiàn)表達(dá)的載體

8.整合質(zhì)粒：在大腸埃希菌質(zhì)粒的基礎(chǔ)上增加了枯草芽泡桿菌的抗性標(biāo)記及同

源重組等相關(guān)序列的質(zhì)粒，使得重組質(zhì)粒完成了在大腸埃希菌中的克隆或亞

克隆后，導(dǎo)入枯草芽胞桿菌后能夠插入到宿主的染色體DNA上，隨著宿主細(xì)

胞的復(fù)制而復(fù)制

敘述題及簡答題

1.外源基因表達(dá)基本過程！！！！

(1)目的基因的獲得

(2)目的基因與表達(dá)載體的重組

(3)重組表達(dá)載體導(dǎo)入宿主細(xì)胞及其篩選與確認(rèn)

(4)目的基因表達(dá)

補(bǔ)充

1.基因的基本功能：

①儲(chǔ)存生物性狀的遺傳信息遺傳信息的儲(chǔ)存

②遺傳信息的傳遞基因的表達(dá)

③作為基因表達(dá)的模板基因的復(fù)制

2.按照遺傳信息的改變方式，點(diǎn)突變又分為同義、錯(cuò)義、無義突變?nèi)?/p>

⑴同義突變：指密碼子的一個(gè)堿基改變前后都都編碼同一種氨基酸，即不改變基因產(chǎn)物的突

變

⑵錯(cuò)義突變：一對(duì)堿基的改變而使某一氨基酸的密碼子變?yōu)榱硪话被岬拿艽a子的突變。

⑶無義突變：一對(duì)堿基的改變使某一氨基酸的密碼子變?yōu)橐粋€(gè)終止密碼子的突變。

3.易患性：在多基因病的發(fā)生中，遺傳因素和環(huán)境因素共同作用并決定一個(gè)個(gè)體是否易患某

種遺傳病的可能性。

4.閾值：代表在一定條件下患病所必需的、最低的易患基因的數(shù)量。

5.人類基因組中的重復(fù)序列：

⑴高度重復(fù)序列

⑵衛(wèi)星DNA：①大衛(wèi)星DNA②小衛(wèi)星DNA

⑶反向重復(fù)序列

⑷較復(fù)雜的重復(fù)單位組成的重復(fù)序列

⑸中度重復(fù)序列

6.DNA復(fù)制的一般特征：①半保留②半不連續(xù)③方向性和高保真性

7.DN復(fù)制可能有三種方式：①半保留復(fù)制②保留復(fù)制③分散復(fù)制

8.使DNA雙鏈解離的酶和蛋白：①DNA解鏈酶②單鏈DNA結(jié)合蛋白③拓?fù)洚悩?gòu)酶

9.DNA復(fù)制過程中的酶：①引物酶②DNA聚合酶（是生物催化合成脫氧核糖核酸的一類酶）

③DNA連接酶

10.原核生物的轉(zhuǎn)錄起始調(diào)控：①乳糖操縱子的誘導(dǎo)型調(diào)控②色氨酸操縱子阻遏型調(diào)控

11.終止密碼子:UAA、UAG、UGA

12.蛋白質(zhì)合成的過程：①翻譯的起始②肽鏈的延伸③翻譯的終止

1核糖體結(jié)合性分子伴侶

13.細(xì)胞內(nèi)的分子伴侶可分為兩大類:?

二.非核糖體結(jié)合性分子伴侶，至少包括兩大家族：熱

激蛋白70家族和熱激蛋白60家族

14.存在三種運(yùn)輸機(jī)制：①核孔轉(zhuǎn)運(yùn)②跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)③小泡轉(zhuǎn)運(yùn)

15.蛋白質(zhì)合成速率的調(diào)節(jié)：①翻譯起始的調(diào)控②mRNA穩(wěn)定性對(duì)翻譯水平的影響③小分

子RNA對(duì)翻譯水平的影響

16.翻譯起始的調(diào)控：①翻譯起始因子的調(diào)控作用②阻遏蛋白的調(diào)控作用③5'AUG的調(diào)

控作用

17.分子雜交技術(shù)：①Southern印跡②Northern印跡③Western印跡④原位雜交

⑤生物芯片

18.聚合酶鏈反應(yīng)：

①PCR技術(shù)的基本原理

②PCR體系的基本成分

③PCR的基本操作

④常用的PCR類型：巢式PCR、反轉(zhuǎn)錄PCR

19.CRISPR/Cas系統(tǒng)：是由CRISPR基因座與其串聯(lián)的Cas基因組成的，通過序列特意的RNA

介導(dǎo)，切割降解外源性DNA的原核免疫系統(tǒng)。

20.分子間的相互作用概述：①DNA和蛋白質(zhì)相互作用②蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)相互作用

21.DNA和蛋白質(zhì)相互作用：①DNA遷移率變動(dòng)分析②酵母單雜交技術(shù)③染色質(zhì)免疫沉

淀分析

22.藥物不良反應(yīng)：在正常治療藥物用量和正常用法下出現(xiàn)的有害的、與用藥目的無關(guān)的反

應(yīng)。

23.藥物基因組學(xué)研究方法：①候選基因分析②全基因組關(guān)聯(lián)分析③聯(lián)合方法

24細(xì)胞色素P450：是最重要的I相代謝酶

25.人體內(nèi)共發(fā)現(xiàn)有18個(gè)家族，43個(gè)亞族，57種酶，其重要性按照代謝藥物的百分比排

列有CYP3A4(40%)、CYP2D6(20%)、CYP2c9(15%)、CYP2cl9(5%)等。

26.RNA-Seq技術(shù)具有以下優(yōu)勢：①通量高②靈敏度高③分辨率高④不受限制性

27.反義藥物與傳統(tǒng)藥物的性質(zhì)作用對(duì)象明顯不同，表現(xiàn)為：①新的化學(xué)物質(zhì)：核酸

②新的藥物受體：mRNA或DNA③新的受體結(jié)合方式：Watson-Crick雜交④新的藥物受

體結(jié)合后反應(yīng)：如RNaseu介導(dǎo)的靶RNA的降解。

28.蛋白質(zhì)組學(xué)的分類：①表達(dá)蛋白質(zhì)組學(xué)②結(jié)構(gòu)蛋白組學(xué)③功能蛋白質(zhì)組學(xué)

29.

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證

30.代謝組學(xué)的特點(diǎn)：

①對(duì)生物體系中的小分子化合物進(jìn)行定量研究

②關(guān)注內(nèi)源化合物

③內(nèi)源化合物的上調(diào)和下調(diào)指示了疾病、毒性、基因改變或環(huán)境因素的影響

④上述內(nèi)源性化合物的變化指標(biāo)可以被用于疾病的診斷和藥物篩選

31.基因表達(dá)基本類型

外源基因表達(dá)宿主細(xì)胞：原核細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)、真核細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)

根據(jù)表達(dá)產(chǎn)物在宿主細(xì)胞的部位不同：胞內(nèi)表達(dá)、定位表達(dá)、分泌表達(dá)

根據(jù)表達(dá)產(chǎn)物的溶解情況：可溶性表達(dá)、包涵體表達(dá)

根據(jù)表達(dá)產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)情況：非融合表達(dá)、融合表達(dá)

32.目的基因的獲得：

①利用化學(xué)合成法

人工合成堿基序列或氨基酸序列已知的目的基因

②利用RT-PCR擴(kuò)增技術(shù)

從含有目的基因的生物材料的總RNA或mRNA樣本中擴(kuò)增目的基因

③利用PCR擴(kuò)增技術(shù)

從含有目的基因的生物材料的cDNA或染色體DNA樣本以及cDNA文庫或基因組文庫中擴(kuò)增

出目的基因

④利用各種雜交技術(shù)

從含有目的基因的生物材料的cDNA文庫或基因組文庫中篩選目的基因

⑤利用適宜的篩淘技術(shù)

從各種分子文庫中，篩淘獲得符合預(yù)期要求的目的基因

種類細(xì)胞內(nèi)定位轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生對(duì)鵝膏蕈堿的敏感性

RNA-pol1核仁rRNA的前體45SrRNA耐受

RNA-pol11核質(zhì)mRNA的前體hnRNA、IncRNA敏感

piRNAxmiRNA

RNA-pol111核質(zhì)tRNA、5srRNA、snRNA高濃度下敏感

33.

34.轉(zhuǎn)錄因子的DNA結(jié)合域：

①鋅指結(jié)構(gòu)結(jié)合物

②亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)與

③堿性螺旋-環(huán)-螺旋結(jié)構(gòu)域

④P-片層和環(huán)結(jié)構(gòu)域

35.轉(zhuǎn)錄因子的轉(zhuǎn)錄激活域：

①富含谷氨酰胺的結(jié)構(gòu)域

②富含脯氨酸的結(jié)構(gòu)域

③帶負(fù)電荷的a-螺旋結(jié)構(gòu)域

④B-片層和環(huán)結(jié)構(gòu)域

36.轉(zhuǎn)錄因子的轉(zhuǎn)錄激活域：

①富含谷氨酰胺的結(jié)構(gòu)域

②富含脯氨酸的結(jié)構(gòu)域

③帶負(fù)電荷的a-螺旋結(jié)構(gòu)域

④含有雙性a-螺旋和酸性氨基酸的結(jié)構(gòu)域

37.目的基因制備技術(shù)：①聚合酶鏈反應(yīng)②cDNA文庫③化學(xué)合成

38.CRISPR/Cas系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)和組成：①反式激活crRNA②CRISPR基因座③Cas基因

39.轉(zhuǎn)錄組與基因組的關(guān)系：

①與基因組相比，轉(zhuǎn)錄組最大的特點(diǎn)是受到內(nèi)部多種因素的調(diào)節(jié)，因而是動(dòng)態(tài)可變的

②對(duì)于一個(gè)特定的轉(zhuǎn)錄組而言，它可能包含的RNA分子種類和數(shù)量會(huì)根據(jù)特定的細(xì)胞類型、

時(shí)間和空間等差異而表現(xiàn)出數(shù)和量的不同

③轉(zhuǎn)錄組通常會(huì)表現(xiàn)出高度的可變性

40.轉(zhuǎn)錄組的意義：

①它能揭示能夠表達(dá)的基因組序列，向時(shí)向處表達(dá)以及轉(zhuǎn)錄活躍程度，是研究細(xì)胞表型和功

能的重要手段之一。

②轉(zhuǎn)錄組既是鏈接基因組遺傳信息與生物功能的蛋白質(zhì)組的必然紐帶，也是基因功能及結(jié)構(gòu)

研究的基礎(chǔ)和出發(fā)點(diǎn)。

③不僅可以解釋細(xì)胞或組織的基因組的功能元件，揭示分子成分，還可以用來認(rèn)識(shí)生物學(xué)進(jìn)

程和疾病發(fā)生機(jī)制。

41.宿主細(xì)胞內(nèi)重組子的篩選：

①初步甄別篩選：根據(jù)載體上選擇性表達(dá)基因的活性篩選，如藥物蛋白抗性基因

②交叉甄別篩選：1.PCR后，瓊脂糖凝膠電泳

2.酶切后，瓊脂糖凝膠電泳

3.堿基序列分析驗(yàn)證

③利用目的基因表達(dá)產(chǎn)物及其性質(zhì)進(jìn)行篩選確認(rèn)：原位雜交、SDSxWestenblotting

1.操縱子：在原核生物中，編碼功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因常成簇排列，幾個(gè)結(jié)構(gòu)基因共用一個(gè)啟動(dòng)子，轉(zhuǎn)錄

成為一個(gè)mRNA分子，然后翻譯成幾種Pro,操作元件與這幾個(gè)結(jié)構(gòu)基因相鄰并控制該mRNA分子的轉(zhuǎn)

錄，這樣的結(jié)構(gòu)和功能單位稱為操縱子

2.單順反子：真核細(xì)胞剪接后的每一種僅能翻譯出一種蛋白質(zhì)的mRNA

3.多順反子：操縱子結(jié)構(gòu)式原核基因組的一個(gè)突出的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，操縱子是指幾個(gè)功能上相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因

串聯(lián)在一起，構(gòu)成信息區(qū)，連同其上游的調(diào)控區(qū)以及下游的轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)所構(gòu)成的基因表達(dá)單位，所

轉(zhuǎn)錄的RNA為多順反子

4.SD序列：原核生物mRNA的起始密碼子AUG上游4-7個(gè)核甘酸以外有一段51

-UAAGGAGG-3'的保守核甘酸序列

5.第二信使：第一信使不能直接進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，它們通過靶細(xì)胞的膜受體結(jié)合，通過信號(hào)轉(zhuǎn)換機(jī)制，把胞

外信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)榧?xì)胞內(nèi)的第二信使

6.細(xì)胞通訊：細(xì)胞之間通過分泌信號(hào)分子或直接接觸而相互實(shí)施調(diào)控

7.細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)：細(xì)胞感受環(huán)境信號(hào)，把這種信號(hào)導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)，并做出反應(yīng)的過程

8.載體：來源于質(zhì)粒的DNA分子，可以供插入目的基因DNA并具有傳遞運(yùn)載外源DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞能力

的片段

9.質(zhì)粒：細(xì)菌染色體外的遺傳物質(zhì)，為閉合環(huán)狀雙鏈DNA

10.克隆載體：以擴(kuò)增DNA片段為目的的并不需要得到目的基因所編碼蛋白質(zhì)的載體

11.基因DNA文庫：由某一生物的全部DNA順序的不同DNA片段所構(gòu)成的群體

12.cDNA文庫：由某一生物特定器官細(xì)胞內(nèi)總mRNA應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄成互補(bǔ)cDNA外顯子，即具有表達(dá)

功能外顯子序列的總和

13.基因工程：將不同生物基因在體外剪切，組合并和載體DNA連接，在原來沒有這類基因的受體細(xì)胞內(nèi)

獷增，使轉(zhuǎn)入的基因在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，并合成該基因編碼的蛋白質(zhì)

14.擺動(dòng)配對(duì)：密碼子與反密碼子配對(duì)時(shí)，有時(shí)會(huì)出現(xiàn)不嚴(yán)格遵從常見堿基配對(duì)規(guī)律的情況

15.信號(hào)肽：各種新生分泌型蛋白的N端都有保守的aa序列

16.受體：一類存在于靶細(xì)胞或細(xì)胞內(nèi)的可特異識(shí)別并結(jié)合外界信號(hào)分子，進(jìn)而引起靶細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生相應(yīng)的

生物效應(yīng)的分子

17.膜受體：親水性化學(xué)信號(hào)分子的受體

18.分子雜交技術(shù)：利用單鏈核酸堿基互補(bǔ)配對(duì)，抗原與抗體、受體與配體、蛋白與其他分子的相互作用

進(jìn)行目的核酸、Pro檢測，廣泛應(yīng)用于基因重組、生物印跡示蹤、生物芯片等領(lǐng)域，具有高特異性、

高靈敏度、高通量等特點(diǎn)的技術(shù)

19.核酸雜交：序列互補(bǔ)的單鏈DNA和DNA、DNA和RNA、RNA和RNA,根據(jù)堿基配對(duì)原則，借助氫鍵相連

而形成雙鏈雜交分子的過程

20.核酸雜交的探針：能夠與靶分子核酸按堿基互補(bǔ)原則特異性相互作用的一段已知序列的寡核甘酸或核

酸

21.復(fù)制子：一個(gè)復(fù)制子是一個(gè)復(fù)制單位，包括復(fù)制所需的控制元件、起始點(diǎn)和終點(diǎn)

22.啟動(dòng)子：RNA聚合酶識(shí)別、結(jié)合并起始轉(zhuǎn)錄的一段具有高度保守性的DNA序列

23.終止子：轉(zhuǎn)錄過程中能夠終止RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄的DNA序列

24.復(fù)制起點(diǎn)：DNA復(fù)制時(shí)，總是從某一特定的點(diǎn)開始

25.順式作用元件：真核生物的不同細(xì)胞，在轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)的上游有不同的與轉(zhuǎn)錄有關(guān)的序列

26.反式作用因子：絕大多數(shù)真核轉(zhuǎn)錄因子由它的編碼基因表達(dá)后，通過與特異的順式作用元件識(shí)別、結(jié)

合，反式激活另一基因的轉(zhuǎn)錄

27.基因：染色體上具有遺傳效應(yīng)的DNA片段

28.轉(zhuǎn)錄：生物體在遺傳信息傳遞過程中，以DNA為模板，在DNA依賴的RNA聚合酶催化下，以4種三磷

酸核甘為原料，合成RNA的過程

29.轉(zhuǎn)錄因子：在真核細(xì)胞核中，能夠協(xié)助RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄RNA的蛋白質(zhì)

30.聚合前鏈?zhǔn)椒磻?yīng)：體外擴(kuò)增DNA序列的技術(shù)

31.反義技術(shù)：根據(jù)核酸雜交原理設(shè)計(jì)針對(duì)特定靶序列的反義核酸，通過阻抑從DNA至mRNA的轉(zhuǎn)錄過

程或從mRNA到Pro的翻譯過程，而阻斷細(xì)胞中的Pro合成

32.小干擾RNA：由短寡核甘酸序列組成的雙鏈結(jié)構(gòu)，可以阻斷異常蛋白的產(chǎn)生

33.外源基因表達(dá)/重組DNA技術(shù)：將--種生物體的基因育載體在外進(jìn)行拼接重組，然后轉(zhuǎn)入另一種生物體

內(nèi)，使之按照人們的意愿穩(wěn)定遺傳并表達(dá)出新產(chǎn)物或新性狀的DNA

34.基因的表達(dá)：將外源基因轉(zhuǎn)錄成mRNA,進(jìn)而翻譯成肽鏈或加工成活性Pro的過程

35.宿主細(xì)胞：接納重組子并實(shí)現(xiàn)重組子的外源基因轉(zhuǎn)錄、擴(kuò)增或表達(dá)的受體細(xì)胞

36.半保留復(fù)制：以原來的DNA作為模板，以堿基配對(duì)的形式合成一個(gè)與原來DNA完全相同的DNA分子，

然后在細(xì)胞分裂時(shí)將兩個(gè)DNA分子分配到兩個(gè)子代細(xì)胞中去，使兩個(gè)子代細(xì)胞攜帶與母代細(xì)胞完全相

同的遺傳信息

37.RNA干擾：外源和內(nèi)源性雙鏈DNA在生物體內(nèi)誘導(dǎo)同源靶基因的mRNA特異性講解，導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄后基因沉

默的技術(shù)

38.SRP受體：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上存在著一種識(shí)別SRP的受體蛋白

39.2-DE（雙向電泳）：分離Pro技術(shù)，原理是根據(jù)Pro的兩個(gè)一級(jí)屬性進(jìn)行Pro的分離

40.MS（生物質(zhì)譜）：是Pro組學(xué)中用于分析與鑒定肽和Pro的一種極其重要的技術(shù)

41.PMF（肽質(zhì)量指紋譜）：Pro被識(shí)別特異酶切位點(diǎn)的蛋白酶水解后得到的肽片段質(zhì)量圖譜

42.proteome（蛋白質(zhì)組）：被定義為一個(gè)基因組、一個(gè)細(xì)胞、一個(gè)有機(jī)體或某一特定的組織類型所表達(dá)的

全部Pro

43.transformation（轉(zhuǎn)化）：感受態(tài)細(xì)胞接納外源DNA分子的過程，并使其在宿主細(xì)胞內(nèi)實(shí)現(xiàn)基因的表達(dá)

44.transduction（轉(zhuǎn)導(dǎo)）：噬菌體顆粒感染宿主細(xì)胞，通過特定的途徑，將噬菌體核酸注入宿主細(xì)胞內(nèi)的

過程，并使噬菌體核酸在宿主細(xì)胞內(nèi)實(shí)現(xiàn)復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯或子代噬菌體的繁殖

45.transcriptome（轉(zhuǎn)錄組）：一個(gè)活細(xì)胞所能轉(zhuǎn)錄出來的所有mRNA

46.transcriptomics（轉(zhuǎn)錄組學(xué)）：?門在整體水平上研究細(xì)胞中基因轉(zhuǎn)錄的情況及轉(zhuǎn)錄調(diào)控規(guī)律的學(xué)科

47.genechip（基因芯片）：DNA芯片，原理是將大量寡核甘酸分子固定于支持物上，然后與標(biāo)記的樣品

進(jìn)行雜交，通過檢測雜交信號(hào)的強(qiáng)度進(jìn)而獲取樣品分子的數(shù)量和序列信息

48.serialanalysisofgeneexpression,SAGE（基因表達(dá)系列分析）：以測序?yàn)榛A(chǔ)，分析特定組織

或細(xì)胞類型中基因群體表達(dá)狀態(tài)的一項(xiàng)技術(shù)

49.massivelyparallelsignaturesequencing,MPSS（大規(guī)模平行信號(hào)測序系統(tǒng)）：利用限制性內(nèi)切酶

和熒光檢測知識(shí)，發(fā)展出的一種辨認(rèn)和測定細(xì)胞每一個(gè)cDNA克隆片段末端16~20bp序列的方法，從而

查明細(xì)胞內(nèi)所有基因的表達(dá)情況

50.RNAsequencing,RNA-seq（RNA測序技術(shù)）：目前成為基因表達(dá)分析和轉(zhuǎn)錄組分析的新的重要方法

1.簡述基因工程主要內(nèi)容

（-）目的基因獲得：化學(xué)合成法、RT-PCR擴(kuò)增技術(shù)、PCR擴(kuò)增技術(shù)、各種雜交技術(shù)、篩淘技術(shù)（二）

目的基因與表達(dá)載體重組：（1）載體：克隆質(zhì)粒載體、表達(dá)質(zhì)粒載體、噬菌體和病毒載體（2）重組：DNA

限制性內(nèi)切酶、DNA連接酶、基因與載體重組（三）重組表達(dá)載體導(dǎo)入宿主細(xì)胞及其篩選與確認(rèn)：宿主細(xì)

胞，重組子導(dǎo)入宿主細(xì)胞，宿主細(xì)胞內(nèi)重組子篩選與確認(rèn)（四）目的基因表達(dá)：外源基因誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄、外源

基因翻譯

1.簡述分泌型蛋白翻譯同步運(yùn)轉(zhuǎn)的主要過程

（1）細(xì)胞質(zhì)游離核糖體組裝，翻譯起始，合成出N端包括信號(hào)肽在內(nèi)約70個(gè)aa殘基（2）SRP與信號(hào)肽、

GTP及核糖體結(jié)合，暫時(shí)中止肽鏈延伸（3）SRP引導(dǎo)核糖體-多肽-SRP復(fù)合物，識(shí)別結(jié)合ER膜上的SRP

受體，并通過水解GTP使SRP解離再循環(huán)利用，多肽鏈開始繼續(xù)延長（4）核糖體大亞基與核糖體受體結(jié)

合，錨定ER膜上，水解GTP供能，誘導(dǎo)肽轉(zhuǎn)位復(fù)合物開放形成跨ER膜通道，新生肽鏈N端信號(hào)肽即插

入此孔道，肽鏈邊合成邊進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔（5）內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜內(nèi)側(cè)面存在信號(hào)肽酶，通常在多肽鏈合成約80%以上

時(shí)，將信號(hào)肽段切下，肽鏈本身繼續(xù)增長，直至合成終止（6）多肽鏈合成完畢，全部進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中（7）

Pro合成結(jié)束，核糖體等各成分分解聚并恢復(fù)到翻譯起始前狀態(tài)，再循環(huán)利用

2.簡述分泌型蛋白的運(yùn)輸機(jī)制

（1）信號(hào)肽識(shí)別顆粒：信號(hào)肽識(shí)別顆粒由6個(gè)多肽亞基和1個(gè)7sRNA組成的11S復(fù)合體（2）SRP受體：

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上存在一種識(shí)別SRP的受體蛋白（3）核糖體受體：可結(jié)合核糖體大亞基使其與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜穩(wěn)定結(jié)

合（4）肽轉(zhuǎn)位復(fù)合物：可形成新生肽鏈跨ER膜蛋白通道

3.簡述限制性核酸內(nèi)切酶的應(yīng)用

（1）DNA重組與構(gòu)建新基因組文庫（2）組建DNA物理圖譜（3）DNA分子雜交（4）制備DNA放射性探針（5）

DNA序列分析

4.簡述基因工程中的工具酶

（1）限制性內(nèi)切酶：特異性切割DNA分子（2）DNA甲基化酶：用于DNA的甲基化（3）核酸酶：非特異性

切割DNA和RNA（4）核酸聚合酶：合成DNA和RNA（5）核酸鏈接酶：連接DNA和RNA（6）核酸末端修飾

酶：修飾DNA和RNA末端（7）其他酶類：用于生物細(xì)胞的破壁、轉(zhuǎn)化、核酸純化和檢測等

5.簡述原核生物與真核生物多肽鏈合成的主要區(qū)別點(diǎn)

（I）原核生物核糖體更大（2）起始氨酰tRNA：真核mRNA識(shí)別是從5'端開始，無SD序列，起始因子

識(shí)別與mRNA5'端帽子有關(guān)（3）真核生物起始密碼子通常只有一個(gè)AUG（4）80s起始復(fù)合物：9種起始因

子-elF（5）蛋白激酶參與真核細(xì)胞蛋白合成的調(diào)節(jié)，蛋白激酶可以催化eIF-2磷酸化（6）釋放因子：真核

1種，原核3種（7）翻譯與轉(zhuǎn)錄：真核-不偶聯(lián)，原核-偶聯(lián)（8）合成速度：真核慢，原核快（9）順反子：

真核-單順反子，原核-多順反子

6.簡述原核生物和真核生物轉(zhuǎn)錄調(diào)控的特點(diǎn)

原核：（1）。因子特異性識(shí)別:原核生物細(xì)胞只含有一種RNA聚合酶，核心酶參與轉(zhuǎn)錄延長，全酶負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)錄

起始（2）操縱子學(xué)說普遍性：多個(gè)功能相關(guān)原核基因串聯(lián)，依賴同一轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)對(duì)基因轉(zhuǎn)錄進(jìn)行調(diào)節(jié)，構(gòu)

成1個(gè)轉(zhuǎn)錄單位，確保功能相關(guān)基因間表達(dá)協(xié)調(diào)（3）負(fù)性調(diào)節(jié)占主導(dǎo)：原核操縱子系統(tǒng)中，特異阻遏蛋白

對(duì)操縱子基因轉(zhuǎn)錄起始阻遏機(jī)制十分普遍。真核：（1）多種RNA聚合酶：每種RNA聚合酶由10個(gè)亞基組成，

有些亞基相同，有些特有（2）轉(zhuǎn)錄激活狀態(tài)染色質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化：對(duì)核酸酶敏感、DNA拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)、DNA堿

基甲基修飾和組蛋白變化（3）正性調(diào)節(jié)占主導(dǎo)：主要環(huán)節(jié)包括轉(zhuǎn)錄前、轉(zhuǎn)錄水平和轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)等過程

7.※簡述原核生物和真核生物基因組特點(diǎn)

原核生物：（1）基因組通常由一條環(huán)狀雙鏈DNA分子組成（2）結(jié)構(gòu)基因與調(diào)控序列以操縱子形式組織在-

起（3）基因組中重復(fù)序列很少（4）結(jié)構(gòu)基因多為單拷貝（5）基因連續(xù)（6）編碼序列一般不會(huì)重疊（7）

編碼區(qū)在基因組中所占比例大于真核基因組，小于病毒基因組（8）細(xì)菌基因組中存在可移動(dòng)DNA序列。真

核生物：（1）基因組DNA都是雙鏈線狀（2）大多數(shù)真核生物結(jié)構(gòu)基因?yàn)閿嗔鸦颍芤幌盗许樖阶饔迷?/p>

調(diào)控（3）結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子（4）基因組內(nèi)非編碼序列多于編碼區(qū)（5）基因組中含有大量重復(fù)

序列和基因家族（6）基因組DNA末端都有一種為端粒的特殊結(jié)構(gòu)（7）基因組中存在一些可移動(dòng)遺傳因子

（8）還包括細(xì)胞器基因組

8.簡述原核生物和真核生物DNA聚合酶作用

原核生物：PolI：校讀、修復(fù)合成、切除引物、填補(bǔ)空隙，PolII：參與DNA損傷的應(yīng)急狀態(tài)修復(fù)，Pol

HI：催化DNA聚合。真核生物：聚合酣a：DNA復(fù)制，合成后隨鏈；聚合酶6：DNA復(fù)制，合成后導(dǎo)鏈；聚

合酶e：參與DNA的修補(bǔ)合成聚合酶B：DNA修復(fù)；聚合酶Y：線粒體DNA復(fù)制

9.簡述轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究方法

（1）基因芯片技術(shù)：芯片制備、樣品制備、雜交反應(yīng)、信號(hào)檢測和結(jié)果分析（2）基因表達(dá)系列分析（3）

大規(guī)模平行信號(hào)測序系統(tǒng)：MPSS與SAGE相比有兩個(gè)明顯的優(yōu)勢，第一，產(chǎn)生特征序列的長度不同，使

用目前的方法，MPSS技術(shù)可以產(chǎn)生17個(gè)核甘酸的信號(hào)序列；第二，一個(gè)典型的SAGE標(biāo)簽系統(tǒng)僅可使

20000~60000個(gè)mRNA分子的標(biāo)簽得到測序，這不能充分代表樣本中的全部基因（4）RNA測序技術(shù)

10.簡述反義寡核昔酸藥物的優(yōu)點(diǎn)

（I）特異性較強(qiáng)：一個(gè)15聚體反義寡核甘酸含有30-45個(gè)氫犍，低分子傳統(tǒng)藥物與靶點(diǎn)一般只形成1~4

個(gè)鍵（2）信息量較大：遺傳信息從DNA-RNA-Pro,用互補(bǔ)寡核甘酸阻斷某種蛋白的合成很準(zhǔn)確（3）

反義藥物以核酸為靶點(diǎn)，與Pro為靶點(diǎn)比較，更易合理設(shè)計(jì)新藥物（4）與傳統(tǒng)藥物比較反義藥物更具選擇

性及效率，也更高效低毒

11.簡述反義藥物與傳統(tǒng)藥物的性質(zhì)和作用對(duì)象的不同

（I）新的化學(xué)物質(zhì)：核酸（2）新的藥物受體：mRNA或DNA（3）新的受體結(jié)合方式：W-C雜交（4）

新的藥物受體結(jié)合后反應(yīng)

12.簡述藥物蛋白質(zhì)組學(xué)應(yīng)用

（I）構(gòu)建分子藥理篩選模型：整體動(dòng)物模型，組織、器官水平模型，分子水平模型（2）藥物靶點(diǎn)的發(fā)現(xiàn)、

驗(yàn)證和優(yōu)化（3）研究不同藥物具有相同藥物作用機(jī)制，為藥物作用機(jī)制研究提供有價(jià)值依據(jù)（4）藥物毒

理機(jī)制研究和毒力Pro組學(xué)（5）細(xì)菌和腫瘤耐藥機(jī)制的研究

13.簡述原核生物核糖體的功能部位

（1）容納mRNA部位（2）結(jié)合氨基酰rRNA氨基酰位（3）結(jié)合肽酰rRNA肽酰位（4）tRNA排出位（5）

肽基轉(zhuǎn)移酶所在部位（6）轉(zhuǎn)位酶位點(diǎn)

14.簡述蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的修飾

（1）肽鏈N端Met切除：在Pro合成過程中，真核生物N末端第一個(gè)aa總是甲硫氨酸，原核生物是a-

氨基甲酰化的甲硫氨酸（2）特定aa共價(jià)修飾：某些Pro肽鏈中存在共價(jià)修飾aa殘基，是肽鏈合成后特異

加工產(chǎn)生（3）二硫鍵形成：mRNA中沒有胱氨酸密碼子，多肽鏈合成后通過兩個(gè)半胱氨酸氧化作用生成（4）

多蛋白加工（5）前體蛋白加工：細(xì)胞內(nèi)許多Pro都是以前體蛋白方式合成，然后加工轉(zhuǎn)化為成熟蛋白

15.簡述信號(hào)肽的特點(diǎn)

（I）N端有幾個(gè)帶正電堿性aa殘基（2）中間為10~15個(gè)殘基構(gòu)成疏水核心區(qū)，主要含疏水中性aa（3）

C端多以側(cè)鏈較短的甘氨酸、丙氨酸結(jié)尾，緊接著是被信號(hào)肽酶裂解的位點(diǎn)

16.簡述轉(zhuǎn)錄組與基因組的關(guān)系

基因組表達(dá)坡初產(chǎn)物是轉(zhuǎn)錄組，包含細(xì)胞在特定時(shí)間所需生物信息和編碼Pro基因衍生而來RNA分子的集

合。以DNA為模板合成RNA轉(zhuǎn)錄過程是基因表達(dá)第一步，是基因表達(dá)調(diào)控關(guān)鍵環(huán)節(jié)。轉(zhuǎn)錄組與基因組不

同是轉(zhuǎn)錄組定義中包含了時(shí)間和空間的限定，轉(zhuǎn)錄組高度動(dòng)態(tài)，同一細(xì)胞在不同生長時(shí)期及生長環(huán)境下，

其基因表達(dá)情況是不完全相同的

17.簡述蛋白質(zhì)組學(xué)的分類

（1）表達(dá)：是研究差異樣品間Pro表達(dá)量變化（2）結(jié)構(gòu)：對(duì)某一特定細(xì)胞器中全部Pro或Pro復(fù)合體結(jié)

構(gòu)進(jìn)行分析，確定他們在細(xì)胞中定位，了解Pro之間相互關(guān)系（3）功能：研究執(zhí)行某種功能Pro復(fù)合體，

Pro-Pro相互作用，Pro-DNA相互作用和翻譯后修飾等

18.簡述質(zhì)粒的特點(diǎn)

（1）含有可利用宿主細(xì)胞復(fù)制系統(tǒng)復(fù)制起始的區(qū)域（2）含一個(gè)或多個(gè)抗性基因的表達(dá)區(qū)域（3）含用于插

入外源基因的DNA限制內(nèi)切酶作用位點(diǎn)，該位點(diǎn)可位于抗性基因區(qū)域內(nèi)或外

19.簡述PCR基本操作過程

（I）變性：將待擴(kuò)增模板DNA加熱到94。C,使雙鏈DNA完全變性解離成為單鏈DNA（2）退火：將

溫度下降到55。C左右，引物與變性模板DNA堿基互補(bǔ)配對(duì)（3）延伸：將體系溫度提高到DNA聚合酶

作用最適溫度72°C,DNA聚合酶在緩沖液中，以dNTP為底物，嚴(yán)格按照模板鏈堿基序列合成互補(bǔ)鏈

20.mRNA遺傳密碼的特點(diǎn)

（1）方向性：mRNA分子中遺傳密碼閱讀方向是從5'-3',遺傳信息在mRNA分子中這種方向性排列決

定多肽鏈合成方向是從氨基到竣基端（2）連續(xù)性：mRNA分子中編碼Pro.aa序列各三聯(lián)體密碼連續(xù)排列，

密碼間無標(biāo)點(diǎn)符號(hào)和間隔（3）兼并性：已知61個(gè)密碼子編碼20種aa,二者不是一對(duì)一關(guān)系（4）擺動(dòng)性:

翻譯過程，aa正確加入依賴于mRNA密碼子與tRNA反密碼子之間相互辨認(rèn)結(jié)合（5）通用性：人類、原

核和真核生物通用Pro.生物合成整套遺傳密碼

21.簡述蛋白質(zhì)組學(xué)的主要研究技術(shù)

（I）雙向凝膠電泳：雙向電泳第1向是等電聚焦，利用Pro等電點(diǎn)不同，在PH梯度膠內(nèi)進(jìn)行第1次分離,

第2向是12烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳，沿著第1向垂直方向通過Pro分子量大小進(jìn)行第2次分離

（2）生物質(zhì)譜：將復(fù)雜樣品分子離子化，利用不同離子在電場運(yùn)動(dòng)行為不同，把離子按質(zhì)荷比差異分離并

確定分子量（3）Pro芯片：利用Pro與Pro、酶與底物、Pro與其他小分子之間相互作用，檢測分析Pro一

種高通量、微型化和自動(dòng)化分析技術(shù)（4）酵母雙雜交：?種根據(jù)真核細(xì)胞轉(zhuǎn)錄調(diào)控特點(diǎn)建立的分析Pro相

互作用技術(shù)

22.為什么說只有在Pro水平進(jìn)行研究，才能更真實(shí)地反應(yīng)生物體的功能機(jī)制，更接近揭示生命活動(dòng)的本

質(zhì)？為什么說Pro組研究要比基因組研究困難得多？

基因是攜帶遺傳信息載體,Pro是生理功能執(zhí)行者和生命活動(dòng)直接體現(xiàn)者，基因所提供信息是一種靜止資源，

遺傳信息不直接參與生命活動(dòng)，間接由Pro體現(xiàn)出來。在個(gè)體發(fā)育不同階段基因組相對(duì)穩(wěn)定，Pro組變化。

這種變化表現(xiàn)在細(xì)胞表達(dá)Pro種類不同，同種Pro表達(dá)量也會(huì)存在很大差異，因此生物體內(nèi)基因組呈靜態(tài)，

Pro組呈動(dòng)態(tài)

23.簡述蛋白質(zhì)組與轉(zhuǎn)錄組的關(guān)系

轉(zhuǎn)錄組研究對(duì)象是細(xì)胞能轉(zhuǎn)錄出來的可直接參與Pro翻譯mRNA總和。轉(zhuǎn)錄組學(xué)核心工作是分析基因表達(dá)

譜，解析不同的物種、個(gè)體、細(xì)胞、發(fā)育階段及生理、病理狀態(tài)下基因差異表達(dá)信息，在整體水平上研究

細(xì)胞編碼基因轉(zhuǎn)錄狀況及轉(zhuǎn)錄調(diào)控規(guī)律，揭示特定調(diào)節(jié)基因作用機(jī)制。Pro組學(xué)研究對(duì)象是細(xì)胞、組織或機(jī)

體在特定時(shí)間和空間內(nèi)表達(dá)所有Pro。Pro組學(xué)核心工作是對(duì)Pro鑒定和功能確定（從“解析”開始參照轉(zhuǎn)

錄組研究對(duì)象，將“基因”改為“Pro”即可）轉(zhuǎn)錄組對(duì)揭示基因差異表達(dá)提供豐富信息，Pro組對(duì)全面深

入理解生命復(fù)雜活動(dòng)、疾病診斷、新藥研制等有意義

24.DNA復(fù)制的一般特征

（1）半保留復(fù)制：原核生物有一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)和一個(gè)復(fù)制子，真核生物有多個(gè)復(fù)制起點(diǎn)和多個(gè)復(fù)制子（2）

雙向復(fù)制：枯草桿菌DNA、真核生物線粒體DNA復(fù)制時(shí)不對(duì)稱（3）半不連續(xù)復(fù)制：一條鏈上DNA在DNA聚

合酶作用下從5'-3'方向連續(xù)合成一條長DNA鏈，另一條鏈DNA合成不連續(xù)，連續(xù)合成的鏈總領(lǐng)先于不連

續(xù)合成的鏈

25.DNA損傷類型

（-）內(nèi)源性損傷：DNA復(fù)制錯(cuò)誤、堿基本身存在互變異構(gòu)體、自發(fā)的化學(xué)變化、氧化作用損傷堿基（二）

外源性損傷：（1）物理因素：紫外線、X射線、Y射線及宇宙射線（2）化學(xué)因素：堿基類似物、脫氨劑、

烷代劑、大型加合物、插入劑、交聯(lián)劑

26.合成DNA和RNA的相同點(diǎn)

（1）以DNA為模板（2）原料為核甘酸（3）合成方向是3'-5'（4）依賴DNA聚合酶（5）遵守堿基互補(bǔ)

配對(duì)原則（6）產(chǎn)物為多聚核甘酸鏈

2.簡述基因工程主要內(nèi)容

（-）目的基因獲得：化學(xué)合成法、RT-PCR擴(kuò)增技術(shù)、PCR擴(kuò)增技術(shù)、各種雜交技術(shù)、篩淘技術(shù)（二）

目的基因與表達(dá)載體重組：（1）載體：克隆質(zhì)粒載體、表達(dá)質(zhì)粒載體、噬菌體和病毒載體（2）重組：DNA

限制性內(nèi)切酶、DNA連接酶、基因與載體重組（三）重組表達(dá)載體導(dǎo)入宿主細(xì)胞及其篩選與確認(rèn)：宿主細(xì)

胞，重組子導(dǎo)入宿主細(xì)胞，宿主細(xì)胞內(nèi)重組子篩選與確認(rèn)（四）目的基因表達(dá)：外源基因誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄、外源

基因翻譯

27.簡述分泌型蛋白翻譯同步運(yùn)轉(zhuǎn)的主要過程

（1）細(xì)胞質(zhì)游離核糖體組裝，翻譯起始，合成出N端包括信號(hào)肽在內(nèi)約70個(gè)aa殘基（2）SRP與信號(hào)肽、

GTP及核糖體結(jié)合，暫時(shí)中止肽鏈延伸（3）SRP引導(dǎo)核糖體-多肽-SRP復(fù)合物，識(shí)別結(jié)合ER膜上的SRP

受體，并通過水解GTP使SRP解離再循環(huán)利用，多肽鏈開始繼續(xù)延長（4）核糖體大亞基與核糖體受體結(jié)

合，錨定ER膜上，水解GTP供能，誘導(dǎo)肽轉(zhuǎn)位復(fù)合物開放形成踏ER膜通道，新生肽鏈N端信號(hào)肽即插

入此孔道，肽鏈邊合成邊進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔（5）內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜內(nèi)側(cè)面存在信號(hào)肽酶，通常在多肽鏈合成約80%以上

時(shí)，將信號(hào)肽段切下，肽鏈本身繼續(xù)增長，直至合成終止（6）多肽鏈合成完畢，全部進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中（7）

Pro合成結(jié)束，核糖體等各成分分解聚并恢復(fù)到翻譯起始前狀態(tài)，再循環(huán)利用

28.簡述分泌型蛋白的運(yùn)輸機(jī)制

（1）信號(hào)肽識(shí)別顆粒：信號(hào)肽識(shí)別顆粒由6個(gè)多肽亞基和1個(gè)7SRNA組成的11S復(fù)合體（2）SRP受體：

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上存在一種識(shí)別SRP的受體蛋白（3）核糖體受體：可結(jié)合核糖體大亞基使其與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜穩(wěn)定結(jié)

合（4）肽轉(zhuǎn)位復(fù)合物：可形成新生肽鏈跨ER膜蛋白通道

29.簡述限制性核酸內(nèi)切酶的應(yīng)用

（1）DNA重組與構(gòu)建新基因組文庫（2）組建DNA物理圖譜（3）DNA分子雜交（4）制備DNA放射性探針（5）

DNA序列分析

30.簡述基因工程中的工具酶

（1）限制性內(nèi)切酶：特異性切割DNA分子（2）DNA甲基化酶：用于DNA的甲基化（3）核酸酶：非特異性

切割DNA和RNA（4）核酸聚合酶：合成DNA和RNA（5）核酸鏈接酶：連接DNA和RNA（6）核酸末端修飾

酶：