模塊綜合測評（一）一、單項選擇題(共15小題,每小題2分,共30分,每小題只有一個選項符合題目要求)1.[2023江蘇南通高三模擬]乳酸菌是一類利用碳水化合物產生大量乳酸的細菌的統稱,是人體腸道中必不可少且具有重要生理功能的菌群,常用于酸奶、泡菜的制作。下列有關酸奶發酵的敘述,正確的是()A.在牛奶中加入抗生素進行發酵可減少發酵過程中雜菌的滋生B.取環境中的天然乳酸菌菌種接種不利于產品質量的提高C.發酵過程可先通入無菌空氣讓乳酸菌大量繁殖再進行無氧發酵D.制作好的酸奶在表面形成一層由乳酸菌聚集形成的“奶蓋兒”2.落葉是綠化廢棄物的主要組成部分,可通過微生物降解得到腐熟的堆肥產品,作為土壤改良劑、有機肥和栽培基質利用。由于落葉中纖維素含量較高且難降解,導致堆肥周期一般較長。為提高以落葉為主的綠化廢棄物的堆肥效率,科研人員從污水廠剩余污泥、土壤、豬糞、雞糞等材料中分離菌種,比較不同環境中微生物對落葉的降解效果,實驗結果如圖。下列敘述正確的是()A.為防止雜菌污染,實驗所用綠化廢棄物和污泥、土壤等材料均需要先進行滅菌處理B.該實驗條件下分解纖維素效果較好的是土壤、雞糞、污泥組,可從中進一步分離菌種C.將菌種接種至纖維素剛果紅培養基,菌落直徑/透明圈直徑越大的菌種降解效果越好D.該研究成果的應用有助于加快生態系統的物質循環,并實現能量的循環利用3.下面為某文獻中分離異養硝化菌的步驟:①取河底泥沉積物接種于無菌水中,搖床培養3h,取出靜置;②將菌懸液接種至150mL滅菌后的異養硝化菌富集培養液中,相同條件下培養48h;③取富集菌液進行梯度稀釋并采用稀釋涂布平板法接種至異養硝化菌分離固體培養基中培養48h后,根據菌落形態,挑選典型菌落在平板上進行劃線分離,純化所篩菌株。下列相關敘述錯誤的是()A.②與③中培養基的營養成分基本相同,但用途不同B.異養硝化菌需在富含有機物、氧氣充足的條件下生存C.③中的兩種接種方法均既可分離微生物,又可計數D.可通過觀察菌落形態等特征初步判斷微生物的類型4.為篩選苯胺(C6H7N)高效降解菌,科研人員先通過增大苯胺濃度馴化培養苯胺降解菌,再從濃度1000mg/L的培養液中取1mL加入9mL無菌水中進行等濃度梯度稀釋(10-2、10-3、10-4、10-5和10-6),然后從每種濃度中取0.1mL稀釋液涂布在三個平板(含500mg/L苯胺的培養基),最后統計稀釋液10-5平板平均菌落數為62個。下列說法錯誤的是()A.選擇培養基應以苯胺作為唯一的碳源和氮源B.馴化培養的目的是篩選降解效率更高的菌株C.不選擇10-3稀釋度的平板進行菌落記數是由于它菌落數大于300D.1000mg/L濃度馴化培養液中1mL苯胺降解菌的數量為6.2×1065.下列關于植物細胞工程中生物材料選擇及理由的敘述,錯誤的是()A.選擇胰蛋白酶處理植物細胞后,再誘導原生質體融合B.選擇離體的植物組織材料培養新個體,與基因的選擇性表達有關C.選擇固體培養基進行植物組織培養,有利于組織和生物體的形成D.選擇植物莖尖進行組織培養可獲得脫毒苗,因為莖尖組織病毒極少6.細胞質雄性不育基因導致某些番茄(2N=24)品種不能產生可育花粉,這種特性是細胞核基因組和線粒體之間不相容的結果。細胞核中有多種控制優良性狀的核基因,通過植物體細胞雜交技術能培育番茄新品種,育種過程如圖所示。下列相關敘述錯誤的是()A.該技術能將不同種、屬植物甚至科間植物的原生質體通過人工誘導融合B.圖中①②過程利用的生物學原理有相關酶的專一性和細胞膜的流動性C.與普通番茄相比,品種丙為多倍體,具有莖稈粗壯,葉、花、果實、種子較大等優點D.雜種細胞在植物組織培養過程中需要添加一定量的生長素和細胞分裂素來調節發育7.在人工培育奶牛的過程中,主要用到了胚胎工程等生物技術。下列說法正確的是()A.體外受精時,最好從雄性供體牛的體內采集含Y染色體的精子B.精子入卵后,卵細胞膜外的透明帶迅速發生反應,阻止后來的精子進入C.可取囊胚或原腸胚階段的胚胎進行胚胎分割,得到若干份遺傳物質相同的子代胚胎D.可取樣滋養層細胞進行性別鑒定和DNA分析,取樣滋養層細胞基本不會影響胚胎發育8.科學家通過體外誘導小鼠成纖維細胞獲得了一種類似胚胎干細胞的細胞,并將其稱為誘導多功能干細胞(iPS細胞)。研究發現,iPS細胞可以來源于病人自身,這為某些疾病的治療提供了廣闊前景。下列說法不正確的是()A.iPS細胞的分化程度要低于成纖維細胞B.小鼠成纖維細胞和小鼠iPS細胞中的DNA相同,蛋白質完全不相同C.可通過誘導使iPS細胞定向分化成移植的目的器官D.不能利用白化病患者自身體細胞培養的iPS細胞治療自身疾病9.為解決大面積燒傷病人的植皮難題,科學家通過細胞培養制造出人造皮膚,人造皮膚制造過程中需要將人的皮膚細胞置于培養瓶中進行培養。配制培養液時,通常需要加入一些天然成分,細胞才能正常生長和增殖。下列有關敘述正確的是()A.只需在動物細胞培養液中加入抗生素即可為細胞培養提供無菌條件B.動物細胞培養的氣體環境是5%CO2和95%O2C.加入的天然成分可以是血清或血漿,用來補充細胞生長和增殖過程中所需的營養物質D.單細胞經細胞體外培養可得到由多層細胞構成的人造皮膚10.[2023江蘇泰州中學高二月考]下圖為不同限制性核酸內切酶識別的序列及切割位置(箭頭所指),下列敘述錯誤的是()A.圖示4種限制性內切核酸酶均不能夠識別和切割RNA分子內的核苷酸序列B.若DNA上的堿基隨機排列,NotI限制性內切核酸酶切割位點出現頻率較其他三種限制性核酸內切酶高C.酶切時使用兩種限制酶同時處理是為了防止質粒和含目的基因的外源DNA片段自身環化及質粒和目的基因的反向連接D.用酶BglII切出的目的基因與酶BamHI切割的質粒重組后,則不能再被這兩種酶切開11.[2023江蘇連云港高二學情檢測]白細胞介素-2(IL-2)參與移植排斥反應,是免疫調節因子,對機體的免疫應答和抗病毒感染等有重要作用。科研人員將含IL-2基因的DNA片段和質粒pPIC9K(部分結構如圖所示)構建成重組質粒,并導入酵母菌GS115(組氨酸缺陷菌株)中,篩選到了能分泌IL-2的工程菌株。下列敘述錯誤的是()A.組氨酸合成基因可作為標記基因篩選導入重組質粒的酵母菌細胞B.構建重組質粒時可選用AvrⅡ和NotⅠ切割目的基因和pPIC9K質粒C.重組質粒導入酵母菌GS115前,需要先用Ca2+處理酵母菌GS115細胞D.抑制IL-2基因的表達可在一定程度上減輕機體器官移植后的免疫排斥反應12.下圖為質粒pUC18,為生產出滿足需求的質粒載體,利用定點誘變技術,通過設計具有誘變位點的引物P1和引物P2進行PCR,來實現目標載體的單堿基突變,目的是使質粒pUC18不能被限制酶Eam1105Ⅰ識別,但依然具有氨芐青霉素抗性。下列相關敘述錯誤的是()A.誘變位點位于限制酶Eam1105Ⅰ識別序列中B.PCR反應體系由P1、P2兩種引物、脫氧核苷酸、TaqDNA聚合酶及含Mg2+的緩沖液組成C.誘變成功的質粒依然具有氨芐青霉素抗性,利用了密碼子具有簡并性的原理D.誘變成功的質粒pUC18經過EcoRⅠ、Eam1105Ⅰ雙酶切后進行電泳,只能產生1條條帶13.常見的啟動子可分為三類:組成型啟動子,驅動基因在所有細胞、組織和器官中持續表達;組織特異性啟動子,調控基因只在某些特定的部位中表達;誘導型啟動子,通常在光、鹽等信號作用下,使目的基因的轉錄水平有所提高。下列敘述錯誤的是()A.啟動子是一段有特殊序列結構的DNA片段,位于基因的上游B.細胞分化與組織特異性啟動子的調控有關,與組成型啟動子無關C.乳腺生物反應器的構建需要將組織特異性啟動子與目的基因連接D.鹽誘導型啟動子在高鹽環境中被激活,可增加農作物的抗逆性14.PCR技術是對體內DNA復制過程的模仿,在基因診斷等許多方面發揮重要作用。其機理模式如圖所示,①②③表示DNA上的相關區段,a、b、c、d分別為引物的兩端。現利用該技術擴增片段②,下列描述正確的是()A.圖中b、d端為5'端,a、c端為3'端B.設計相互容易發生互補配對的甲、乙兩種引物,可以提高擴增效率C.區段②中GC堿基對的比例大小會影響到退火過程,對變性和延伸影響不大D.若擴增得到m個含有區段②的DNA分子,需要消耗m-1個引物甲15.生物技術與工程實踐中常利用特殊的化學試劑或一定的物理刺激進行“激活”操作。下列敘述錯誤的是()A.將果酒用于果醋發酵時,提高溫度是“激活”醋酸菌的重要條件之一B.制備單克隆抗體時,應先利用抗原“激活”小鼠產生相應的B淋巴細胞C.克隆高產奶牛時,獲得的重構胚需要在胚胎移植后用Ca2+載體等試劑“激活”D.在PCR反應過程中,耐高溫的DNA聚合酶需要Mg2+“激活”二、不定項選擇題(共5小題,每小題3分,共15分,每小題有一個或多個選項符合題目要求,全部選對得3分,選對但不全的得1分,有選錯的得0分)16.為解決全球塑料污染問題,某研究團隊從食塑料蠟蟲腸道中分離細菌,用于降解聚乙烯(PE)。將分離的兩種細菌(YT1和YP1)在PE薄膜培養液中培養,培養液中細胞數量變化以及PE失重率變化如下圖所示。下列敘述正確的是()A.可用稀釋涂布平板法分離腸道細菌B.PE薄膜培養液中含有葡萄糖等碳源C.兩種細菌種群數量變化呈“S”形增長D.YT1細菌分解PE的能力強于YP1細菌17.小米具有豐富的營養價值,某工廠的技術人員欲利用乳酸菌和酵母菌進行發酵,開發一款特殊風味的飲品。下圖為不同溫度及不同乳酸菌與酵母菌比例下發酵實驗測得的相關結果。下列敘述正確的是()圖1圖2A.通過圖1測得的酒精含量變化,可推測發酵過程中酵母菌的種群數量先增加后減少B.將發酵溫度控制在34℃可縮短生產周期,乳酸菌和酵母菌在該溫度繁殖速度均較快C.生產上可將乳酸菌和酵母菌按照2∶1比例接種,可溶性固形物含量較低、口感較好D.兩種菌的細胞結構有較大差異,代謝類型也不同,發酵過程中需持續通入無菌空氣18.2008年,十二卷錦(一種多肉植物)的價格高達上萬元,而如今,通過植物組織培養,十二卷錦的價格大概在100元左右。同樣,許多其他名貴的花卉也通過植物組織培養的方式走入了尋常百姓家。下列關于植物組織培養的敘述,正確的是()A.因細胞分化程度低,易誘導產生愈傷組織,所以分生組織常被作為外植體B.用自然生長的莖段做外植體時,需使用酒精和次氯酸鈉的混合液消毒C.因MS培養基中含有蔗糖,所以在整個組織培養期間不需要進行光照D.經過組織培養,不僅實現了快速繁殖,還保持了優良品種的遺傳特性19.基因工程是一種DNA操作技術,其表達載體的構建和檢測篩選是兩個重要步驟。圖1為某種質粒簡圖。已知目的基因X的兩端分別有EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位點。圖2表示運用影印培養法(指在一系列平板培養基的相同位置上接種并培養出相同菌落的一種微生物培養方法)檢測表達載體是否導入大腸桿菌。下列敘述錯誤的是()限制酶識別序列及切割位點EcoRⅠ-G↓AATTC-BamHⅠ-G↓GATCC-圖1圖2A.同時使用EcoRⅠ和BamHⅠ切割質粒,可避免酶切后質粒的自身環化B.轉化方法是將質粒表達載體溶于緩沖液后與經Ca2+處理的大腸桿菌混合C.培養基A和培養基B分別含有四環素和青霉素D.從篩選結果分析,菌落1、2、3、5含目的基因X20.[2023江蘇泰州高二期中統考改編]人體內的t-PA蛋白能高效降解由纖維蛋白凝聚而成的血栓,但給心梗患者注射大劑量基因工程t-PA會誘發顱內出血。研究證實,將t-PA第84位的半胱氨酸換成絲氨酸,能顯著降低其出血副作用。對天然t-PA基因進行改造,并使其在大腸桿菌細胞內表達,可制造出改良t-PA蛋白。如圖pCLY11為質粒,新霉素為抗生素。下列有關敘述正確的是()A.制造出性能優異的改良t-PA蛋白的過程屬于蛋白質工程B.用XmaⅠ和BglⅡ切開pCLY11,才能使其與t-PA改良基因高效連接C.選擇藍色菌落進一步培養檢測和鑒定,以選育出能生產改良t-PA蛋白的工程菌株D.區分重組質粒和原有質粒的一個標志是可以觀察mlacZ基因的表達情況三、非選擇題(共5小題,共55分)21.(11分)奶啤是以鮮奶為原料,通過微生物二次發酵得到的一種集酸奶與啤酒風味為一體的乳飲料。下圖為制作奶啤的流程圖,回答下列問題。(1)奶啤制作過程中需要進行兩次發酵,不同階段發酵時所用的菌種不同,接種①、接種②所用的菌種依次為,兩菌種在結構上的主要區別是。

(2)對原料乳能否采用高壓蒸汽滅菌法進行殺菌,并請說明理由。。接種①后發酵制作酸奶的原理是(用化學反應簡式表示);圖中兩次加糖的目的是(答兩點)。

(3)接種②后,發酵前期需通入一定量的氧氣,目的是。第二次發酵過程中酒精含量的變化趨勢是。

22.(14分)鹽堿地中含有豐富的耐鹽堿自生固氮菌。固氮菌能固定氮氣,提高土壤的氮含量,為植物生長提供充足的氮元素。研究人員采用改良的無氮培養基,分別從氯堿土、鹽堿土和草灘土中分離篩選出具有一定耐鹽堿能力的自生固氮細菌,并研究了酸堿度對其生長情況的影響。回答下列問題。(1)自生固氮菌是(填“原核生物”或“真核生物”)。取土樣分離自生固氮菌時不宜取土太深,原因是。

(2)分離自生固氮菌所用的培養基為Ashby培養基,其配方為甘露醇(C6H14O4)10g、KH2PO40.2g,MgSO40.2g、NaCl0.2g,CaSO4·2H2O0.2g、蒸餾水1000mL、瓊脂5g。該培養基中的碳源為,從功能上看其屬于培養基,KH2PO4的作用是(答出兩點)。

(3)步驟③所用的接種方法是。對稀釋相同倍數的同一土壤懸浮液,需要涂布3個平板,再進行培養和計數,其目的是。若在接種后的平板上統計的菌落平均數為183個,則每克土壤中含有的固氮菌為個。

(4)對不同土壤樣品重復分離過程,得到HY-4、MZ-1、JB-2三個純化的自生固氮菌品種,利用這三個品種研究pH對其生長情況的影響,得到如下表所示結果(OD值表示吸光度,OD值越大表明菌株固氮能力越強)。樣品pH=6.5pH=7.5pH=8.5pH=9.5pH=10.5pH=11.5HY-40.2420.4190.6870.5700.4630.304MZ-10.2720.4240.7190.5850.4700.347JB-20.2830.4320.7390.5970.4950.433①本實驗中共設置了個實驗組。

②JB-2的OD值比HY-4、MZ-1的OD值都大,說明。

23.(9分)植物基因工程中常用到植物組織培養技術。為了獲得純合的轉K基因植株,實驗小組設計了一個實驗流程,其主要內容如圖所示。回答下列問題。(1)用農桿菌轉化法導入基因時,一般將目的基因嵌入Ti質粒的上。圖中A代表的是的農桿菌。

(2)由單核花粉粒培育出愈傷組織的過程稱為,其實質是。

(3)B過程可用處理愈傷組織的細胞,從而使染色體數目加倍。由含K基因的愈傷組織細胞(2n)培育出幼苗的過程中,(填“需要”或“不需要”)光照處理。

(4)經過培養、篩選最終得到的二倍體植株即為純合的轉K基因植株。K基因純合的原因是。

24.(9分)人乳頭瘤病毒(HPV)可誘發細胞癌變,抗HPV的單克隆抗體可作為宮頸癌的診斷試劑。科研人員以小鼠為實驗材料制備抗HPV的單克隆抗體,流程如圖所示。(1)圖中部位甲是小鼠的(器官),為使細胞懸液中一定含有能產生抗HPV抗體的B淋巴細胞、需進行的操作是。

(2)B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合所依據的原理是,圖中篩選1通過用進行篩選,篩選2要對雜交瘤細胞Ⅰ進行克隆化培養和抗體檢測,其目的是。

(3)為了得到大量的抗HPV單克隆抗體,可將雜交瘤細胞Ⅱ接種到適宜的動物細胞培養液中進行培養,但雜交瘤細胞Ⅱ的接種量會影響單克隆抗體的產量。科研人員為探究在培養液中雜交瘤細胞Ⅱ的最佳接種量而進行實驗,請寫出實驗思路:。

(4)抗HPV的單克隆抗體可作為宮頸癌診斷試劑的原因是。

25.(12分)人血清白蛋白(HSA)是血漿蛋白的主要成分,具有維持血漿滲透壓和進行物質運輸的功能。科學家利用轉基因技術獲得轉入HSA基因的大腸桿菌,通過發酵工程,實現HSA的大量生產,圖1表示HSA基因,圖2表示所用質粒的結構,回答下列問題。圖1圖2(1)已知DNA復制時,子鏈延伸的方向是從5'→3'。若要擴增出HSA基因并用于表達載體的構建,應選擇的引物是,其作用是。

(2)由圖2可知,在構建基因表達載體時,最好選用的限制酶是。可在圖1中所選兩種引物前的序列中添加相應酶切位點后進行PCR,至少復制次即可得到含所需酶切位點的HSA基因。

(3)將重組質粒導入大腸桿菌前,需用鈣離子處理大腸桿菌,使其處于一種的生理狀態,便于重組質粒的導入。

(4)將重組質粒導入大腸桿菌,在添加了氨芐青霉素的培養基中培養得到了4個大腸桿菌菌落,進行進一步檢測,檢測結果如表所示,1號、2號、3號菌落均需要舍棄,理由分別是。

菌落1234DNA—DNA分子雜交-+++RNA—DNA分子雜交-+-+抗原—抗體雜交---+注:“+”表示陽性,“-”表示陰性。(5)若利用轉基因動物通過分泌的乳汁來生產HSA,可將藥用蛋白基因與等調控組件重組在一起,通過的方法,導入哺乳動物的中,然后使其生長發育成轉基因動物。

模塊綜合測評(一)1.B加入抗生素會殺死乳酸菌,導致酸奶發酵失敗,A項錯誤;取環境中的天然乳酸菌菌種可能存在其他雜菌,不利于產品質量的提高,B項正確;乳酸菌是厭氧菌,不需要通入空氣,C項錯誤;泡菜表面會形成一層由酵母菌聚集形成的白膜,而酸奶表面不會有乳酸菌聚集,D項錯誤。2.B本實驗中綠化廢棄物作為培養基需要先進行滅菌處理,污泥、土壤等材料用于提供菌種不能滅菌處理,A項錯誤;由圖可知,發酵15d土壤、雞糞、污泥組纖維素含量較低,可從中進一步分離菌種,B項正確;剛果紅可與纖維素形成紅色復合物,當纖維素被分解后,紅色復合物不能形成,故將菌種接種至纖維素剛果紅培養基,菌落直徑/透明圈直徑越小的菌種降解效果越好,C項錯誤;該研究成果的應用有助于加快生態系統的物質循環,但是能量不能循環利用,D項錯誤。3.C②與③中培養基都為異養硝化菌富集培養液(培養基),營養成分基本相同,液體培養基可擴大培養微生物數量,固體培養基可分離、純化微生物,A項正確;異養硝化菌需要搖床培養,故為需氧型,B項正確;③中的稀釋涂布平板法、平板劃線法都可以分離微生物,但只有前者可以進行計數,C項錯誤;不同微生物的菌落在形態等方面有差異,故可通過觀察菌落形態等特征初步判斷微生物的類型,D項正確。4.D苯胺為有機物,含有碳和氮兩種元素,選擇培養基中應以苯胺作為唯一的碳源和氮源,可以用來篩選苯胺降解菌,A項正確;馴化培養的過程中苯胺的濃度逐漸增大,其目的是篩選降解效率更高的菌株,B項正確;結果顯示在10-5稀釋度所得的三個平板中的平均菌落數為62,此數值在30和300之間,符合要求,則10-3稀釋度下平板中的菌落數大于300,C項正確;1000mg/L濃度馴化培養液中1mL苯胺降解菌的數量,利用公式C÷V×M,可以計算為62÷0.1×105=6.2×107,D項錯誤。5.A植物體細胞雜交是首先用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁,獲得原生質體,再誘導原生質體融合,A項錯誤;將離體植物組織進行培養,脫分化形成愈傷組織,再通過再分化誘導出芽和根,并由此可再生出新的植株,離體的植物組織的脫分化和再分化與基因的選擇性表達有關,B項正確;固體培養基內的養分分布比較均勻,且能夠支撐外植體,因此,選擇固體培養基進行植物組織培養,有利于組織和生物體的形成,C項正確;植物莖尖的細胞分裂較快,病毒極少,甚至無毒,故選擇一定大小的植物莖尖進行組織培養可獲得脫毒苗,D項正確。6.C該技術為植物體細胞雜交技術,植物體細胞雜交技術能將不同種、屬植物甚至科間植物的原生質體通過人工誘導融合,A項正確;圖中①使用纖維素酶和果膠酶將細胞壁分解,利用的生物學原理為酶具有專一性,②過程為原生質體融合過程,利用的生物學原理為細胞膜的流動性,B項正確;與普通番茄相比,品種丙為異源多倍體,由于細胞質雄性不育基因導致某些番茄品種不能產生可育花粉,因此,品種丙無種子,C項錯誤;雜種細胞在植物組織培養過程中需要添加一定量的生長素和細胞分裂素來誘導愈傷組織、芽和根的生長等調節發育,D項正確。7.D在人工培育奶牛的過程中,體外受精時,最好從雄性供體牛的體內采集含X染色體的精子,若采集含Y染色體的精子,會發育成公牛,無法產奶,A項錯誤;精子入卵后,卵細胞膜會發生一種稱作卵細胞膜反應的生理反應,從而防止其他精子進入卵細胞,B項錯誤;進行胚胎分割時,應選擇發育良好、形態正常的桑葚胚或囊胚,C項錯誤;滋養層細胞將來發育為胎膜和胎盤,不會影響胚胎恢復和進一步發育,故可提取滋養層細胞進行DNA分析和性別鑒定,D項正確。8.BiPS細胞是一種類似胚胎干細胞的細胞,成纖維細胞是高度分化的細胞,所以iPS細胞的分化程度要低于成纖維細胞,A項正確;小鼠成纖維細胞和小鼠iPS細胞中的DNA相同,由于基因的選擇性表達,蛋白質不完全相同,B項錯誤;可通過誘導使iPS細胞定向分化成移植的目的器官,這為某些疾病的治療提供了廣闊前景,C項正確;白化病患者自身體細胞中含有白化病基因,無法進行正常的功能,則不能利用白化病患者自身體細胞培養的iPS細胞治療自身疾病,D項正確。9.C動物細胞培養時,需要對培養液和所用培養用具進行滅菌處理以及在無菌環境下操作,加入抗生素可防止培養過程中的污染,A項錯誤;動物細胞培養的氣體環境是5%CO2和95%空氣,B項錯誤;在進行動物細胞培養時,培養液中通常需加入血清、血漿等一些天然成分,主要目的是為細胞提供促生長因子,以補充細胞生長和增殖過程中所需的營養物質,C項正確;動物細胞培養過程中存在接觸抑制,故該方法得到的人造皮膚應是由單層細胞構成的,D項錯誤。10.B酶具有專一性,限制酶是專門切割DNA序列中一定部位的酶,所以圖示4種限制性內切核酸酶均不能夠識別和切割RNA分子內的核苷酸序列,A項正確;由于NotI限制性核酸內切酶識別的序列比其他三種酶的序列長,若DNA上的堿基隨機排列,NotI限制性核酸內切酶切割位點出現頻率較其他三種限制性核酸內切酶低,B項錯誤;兩種不同的限制酶可產生不同的黏性末端,所以使用兩種限制酶同時處理是為了防止質粒和含目的基因的外源DNA片段自身環化及質粒和目的基因的反向連接,C項正確;用酶BglⅡ切出的目的基因與酶BamHⅠ切割的質粒重組后,重組DNA分子序列為5’-AGATCC-3’3’-TCTAGG-5’,6個脫氧核苷酸對序列既不能被限制酶BglⅡ識別,也不能被BamHⅠ識別,所以不可能被這兩種酶切開,D項正確。11.B酵母菌GS115是組氨酸缺陷菌株,不能合成組氨酸,可以用不含組氨酸的培養基篩選導入重組質粒的酵母菌GS115,A項正確;據圖可知,為保證目的基因(AvrⅡ會破壞目的基因)和啟動子(SacⅠ會破壞啟動子)的完整性,可用EcoRⅠ和NotⅠ分別切割含有IL-2基因的DNA片段和pPIC9K質粒,B項錯誤;導入重組質粒前,需要先用Ca2+處理酵母菌GS115細胞,使細胞處于一種能吸收周圍環境中DNA分子的生理狀態,C項正確;IL-2參與移植排斥反應,抑制IL-2基因的表達可在一定程度上減輕器官移植后機體的免疫排斥反應,D項正確。12.B利用定點誘變使質粒pUC18不能被限制酶Eam1105Ⅰ識別,因此誘變位點位于限制酶Eam1105Ⅰ識別序列中,A項正確;PCR反應體系除由P1、P2兩種引物、脫氧核苷酸、TaqDNA聚合酶及含Mg2+的緩沖液之外,還需要有模板DNA,B項錯誤;由于密碼子的簡并性,該基因雖然發生了基因突變,但其控制的性狀不變,誘變成功的質粒依然具有氨芐青霉素抗性,C項正確;誘變成功的質粒pUC18只有限制酶EcoRⅠ識別序列,沒有限制酶Eam1105Ⅰ的識別序列,因此經過EcoRⅠ、Eam1105Ⅰ雙酶切后進行電泳,只能產生1條條帶,D項正確。13.B啟動子是基因上的RNA聚合酶結合位點,其本質是一段有特殊序列結構的DNA片段,位于基因的上游,A項正確;根據題干信息“組成型啟動子,驅動基因在所有細胞、組織和器官中持續表達”可知,在細胞分化過程中,與組成型啟動子有關,B項錯誤;組織特異性啟動子,調控基因只在某些特定的部位中表達,而乳腺生物反應器需要將組織特異性啟動子與目的基因連接,導入細胞中,保證基因在乳腺細胞中表達,C項正確;根據題干信息“誘導型啟動子,通常在光、鹽等信號作用下,使目的基因的轉錄水平有所提高”,而鹽誘導型啟動子在高鹽環境中被激活,可增加農作物的抗逆性,D項正確。14.DDNA聚合酶只能以5'端→3'端方向聚合子代DNA鏈,根據題意a、b、c、d分別為引物的兩端,現利用該技術擴增片段②,根據子鏈的延伸方向可知模板上的a、d端為3'端,b、c端為5'端,A項錯誤;兩種引物之間不能發生堿基互補配對,以防止引物之間結合形成雙鏈,以免影響引物與DNA模板鏈的結合,B項錯誤;區段②中GC堿基對的比例越大,熱穩定性越高,對變性和延伸都有影響,C項錯誤;每擴增一個DNA分子需要一對引物(即一個甲和一個乙),除去模板DNA分子,需要消耗m-1個引物甲,D項正確。15.C制作果酒的最適溫度為18~30℃,而醋酸菌的最適溫度為30~35℃,所以將果酒用于果醋發酵時,提高溫度是“激活”醋酸菌的重要條件之一,A項正確;單克隆抗體的制備過程中,需要用抗原“激活”小鼠產生相應的B淋巴細胞,再將該細胞與骨髓瘤細胞融合,B項正確;獲得的重構胚需要在胚胎移植前用Ca2+載體等試劑“激活”,C項錯誤;在PCR反應過程中,耐高溫的DNA聚合酶需要Mg2+“激活”,D項正確。16.AC稀釋涂布平板法可用于腸道細菌分離,A項正確;本實驗研究細菌對聚乙烯(PE)的降解作用,所以PE薄膜培養液為選擇培養基,僅由PE提供能量,不含葡萄糖等其他碳源,B項錯誤;分析細胞數量變化曲線可知,兩種細菌的細胞數目在PE薄膜培養液中都是先緩慢增加,后快速增加,最終保持不變,符合“S”形增長,C項正確;用YP1細菌處理PE失重率明顯高于YT1細菌,且其細菌數目少,因此,YP1細菌分解PE的能力強于YT1細菌,D項錯誤。17.BC圖1是在不同溫度下測得的酒精含量隨溫度的變化,因此不能推測出發酵過程中酵母菌的種群數量變化情況,A項錯誤;酒精含量的變化可反映酵母菌數量,pH大小可反映乳酸菌數量,圖1顯示乳酸菌和酵母菌在34℃繁殖速度均較快,因此將發酵溫度控制在該溫度可縮短生產周期,B項正確;圖2顯示乳酸菌和酵母菌按照2∶1比例接種,可溶性固形物含量較低、口感較好,生產上可按該比例接種,C項正確;乳酸菌為原核生物,酵母菌為真核生物,二者基本結構差異較大,乳酸菌為厭氧生物,酵母菌為兼性厭氧生物,二者代謝類型也不同,但發酵過程中需保持無氧環境,D項錯誤。18.AD幼嫩的莖尖、幼葉細胞分化程度低,細胞分裂旺盛,容易誘導產生愈傷組織,因此常被作為外植體,A項正確;用自然生長的莖進行組織培養時,先用體積分數為70%酒精消毒,用無菌水清洗后再用質量分數為5%的次氯酸鈉溶液處理,最后用無菌水清洗,B項錯誤;組織培養在誘導愈傷組織再分化過程需要光照,C項錯誤;經過組織培養,不僅可以高效、快速地實現種苗的大量繁殖,還可以保持優良品種的遺傳特性,D項正確。19.CD為避免酶切后質粒的自身環化,可同時使用EcoRⅠ和BamHⅠ切割質粒,A項正確;將質粒表達載體溶于緩沖液后與經Ca2+處理的大腸桿菌混合屬于轉化,B項正確;用EcoRⅠ和BamHⅠ兩種限制酶對質粒進行切割時,會破壞四環素抗性基因,但不會破壞青霉素抗性基因,因此導入重組質粒的大腸桿菌能在含有青霉素的培養基上生存,但不能在含有四環素的培養基上生存,所以培養基A和培養基B分別含有青霉素、四環素,含目的基因X的菌落是4和6,C、D兩項錯誤。20.ABD根據題干“對天然t-PA基因進行改造,并使其在大腸桿菌細胞內表達,可制造出改良t-PA蛋白”可知,制造出性能優異的改良t-PA蛋白的過程屬于蛋白質工程,A項正確;依據目的基因的黏性末端和各限制酶的識別序列可以判斷,所使用的限制酶為XmaⅠ和BglⅡ,要想把目的基因與質粒pCLY11拼接起來需要得到相同的黏性末端,因此質粒pCLY11也需要使用XmaⅠ和BglⅡ進行切割,B項正確;區分重組質粒和原有質粒的一個標志是可以觀察mlacZ基因的表達情況,由于重組質粒拼接了目的基因,破壞了mlacZ基因,因此在重組質粒中該基因不表達,菌落呈現白色,而原有質粒由于該基因保存完整,可以表達,所以菌落呈現藍色,選擇白色菌落進一步培養檢測和鑒定,以選育出能生產改良t-PA蛋白的工程菌株,C項錯誤,D項正確。21.答案(1)乳酸菌、酵母菌前者無成形的細胞核,后者有(2)不能,高溫會破壞原料乳中的營養成分C6H12O62C3H6O3+能量為菌種提供發酵原料和能量;改善風味;增加酸度和酒精度等(3)使酵母菌快速繁殖,獲得大量的酵母菌,使后期發酵有足夠酵母菌進行無氧呼吸,產生大量酒精先逐漸增加,后趨于穩定解析(1)奶啤制作過程需要乳酸發酵和酒精發酵兩個階段,接種①、接種②所用的菌種依次為乳酸菌、酵母菌,兩菌種在結構上的主要區別是前者(乳酸菌)無成形的細胞核,后者(酵母菌)有。(2)原料乳不能采用高壓蒸汽滅菌法進行殺菌,因為高溫會破壞原料乳中的營養成分。接種①后發酵制作酸奶的原理是C6H12O62C3H6O3+能量。圖中兩次加糖的目的是為菌種提供發酵原料和能量;改善風味;增加酸度和酒精度等。(3)接種酵母菌后發酵前期需通入一定量的氧氣,目的是使酵母菌快速繁殖,獲得大量的酵母菌,使后期發酵有足夠酵母菌進行無氧呼吸,產生大量酒精。第二次發酵過程中酒精含量的變化趨勢是先逐漸增加,后趨于穩定。22.答案(1)原核生物自生固氮菌一般為需氧型,生活在土壤表層(2)甘露醇(C6H14O4)選擇提供無機鹽、調節滲透壓、維持培養基的pH(3)稀釋涂布平板法通過三組實驗數據得出平均值,從而減少實驗誤差1.83×107(4)18在實驗pH條件下,JB-2菌株比HY-4和MZ-1菌株固氮能力更強解析(1)自生固氮菌是一種細菌,屬于原核生物;由于自生固氮菌一般為需氧型,生活在土壤表層,故取土樣分離自生固氮菌時不宜取土太深。(2)培養基中的碳源通常是提供碳元素的有機物,故該培養基的碳源是甘露醇;該培養基中不含氮源,能夠篩選自生固氮菌,故功能上屬于選擇培養基;KH2PO4含有多種無機鹽離子,可以提供無機鹽、調節滲透壓、維持培養基的pH。(3)據圖可知,步驟③是將稀釋后的菌液涂布到平板上,屬于稀釋涂布平板法;為減少實驗誤差,需要對稀釋相同倍數的同一土壤懸浮液,涂布3個平板,通過三組實驗數據得出平均值,從而減少實驗誤差;據圖可知,圖中的微生物稀釋了104倍,微生物計數時,選擇菌落數目在30~300之間的進行計數,若在接種后的平板上統計的菌落平均數為183個,則每克土壤中含有的固氮菌為183÷0.1×104=1.83×107個。(4)①結合表格可知,該實驗中共有6個pH梯度,每個梯度下都有三個HY-4、MZ-1、JB-2純化的自生固氮菌品種,故共有6×3=18個實驗組。②分析題意可知,OD值表示吸光度,OD值越大表明菌株固氮能力越強,表格數據顯示JB-2的OD值比HY-4、MZ-1的OD值都大,說明在實驗pH條件下,JB-2菌株比HY-4和MZ-1菌株固氮能力更強。23.答案(1)T-DNA已轉入含K基因表達載體的農桿菌(2)脫分化使分化的細胞恢復分裂和分化的能力(3)秋水仙素需要(4)單倍體轉K基因愈傷組織經染色體加倍后,位于染色體上的K基因隨之加倍解析(1)農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞,并且整合到受體細胞染色體的DNA上,故用農桿菌轉化法導入目的基因時,一般將目的基因嵌入Ti質粒的T-DNA上;圖中A代表的是已轉入含K基因表達載體的農桿菌,然后讓其去感染愈傷組織。(2)由單核花粉粒培育出愈傷組織的過程稱為脫分化;脫分化的實質是使分化的細胞恢復分裂和分化的能力。(3)使染色體數目加倍可用秋水仙素進行處理,其作用機理是通過抑制紡錘體形成而導致染色體數目加倍,故B過程可用秋水仙素處理愈傷組織的細胞,從而使染色體數目加倍。由含K基因的愈傷組織細胞(2n)培育出幼苗的過程屬于再分化過程,由于該過程芽發育成葉,葉肉細胞中的葉綠素的合成需要光照,故需要光照處理。(4)若不考慮培養過程中可能發生的染色體變異和基因突變,最