代替GB/T32718—2016棉花纖維中脫葉劑殘留量的測定2024-03-15發(fā)布2024-10-01實施I本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件代替GB/T32718—2016《棉花噻苯隆殘留量測定方法》,與GB/T32718—2016相比，除結(jié)構(gòu)調(diào)整和編輯性改動外，主要技術(shù)變化如下：a)更改了范圍，補(bǔ)充了噻節(jié)因、敵草隆、脫葉磷、乙烯利、環(huán)丙酸酰胺5種落葉劑殘留量的測定(見第1章，2016年版的第1章);b)增加了樣品的取樣要求(見7.1);c)更改了樣品的前處理方法(見7.2,2016年版的7.1、7.2、7.3);d)刪除了HPLC/DAD的分析方法(見2016年版的7.4);e)增加了HPLC-MS/MS的分析方法(見7.3、7.4);f)增加了脫葉劑物質(zhì)的種類(見附錄A);g)增加了取樣要求(見附錄B)。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由全國纖維標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(SAC/TC513)提出并歸口。本文件起草單位：中國纖維質(zhì)量監(jiān)測中心、上海質(zhì)量監(jiān)督檢驗技術(shù)研究院、四川省纖維檢驗局、北京亞分科技有限公司、蘇州華浩紡織品有限公司、阿克蘇地區(qū)檢驗檢測中心纖維檢驗所、博州纖維檢驗所。本文件及其所代替文件的歷次版本發(fā)布情況為：——2016年首次發(fā)布為GB/T32718—2016;——本次為第一次修訂。1棉花纖維中脫葉劑殘留量的測定警示——使用本文件的人員應(yīng)有化學(xué)實驗室工作經(jīng)驗。本文件并未指出所有可能的安全問題。使用者有責(zé)任采取適當(dāng)?shù)陌踩徒】荡胧⒈ＷC符合國家有關(guān)法規(guī)規(guī)定的條件。本文件描述了采用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀(HPLC-MS/MS)測定棉花纖維中噻苯隆、噻節(jié)因、敵草隆、脫葉磷、乙烯利、環(huán)丙酸酰胺等脫葉劑殘留量的試驗方法。本文件適用于棉花纖維中脫葉劑殘留量的測定。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。脫葉劑defoliant采棉前噴灑使棉花葉片脫落的藥劑。4原理采用乙腈和水的混合溶劑超聲萃取試樣中的脫葉劑，提取液經(jīng)濾膜過濾后，使用HPLC-MS/MS進(jìn)5試劑除非另有說明，在分析中所用試劑均為分析純和GB/T6682規(guī)定的二級水。5.2乙腈-水混合溶液：體積比1:1配制。5.3氨水：0.1%。5.4甲酸：0.1%5.5脫葉劑標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備。5.5.1單組分標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液：6種脫葉劑的純度≥95%,符合附錄A的規(guī)定。2用乙腈(5.1)配制有效濃度為500mg/L的噻苯隆、噻節(jié)因、敵草隆、環(huán)丙酸酰胺、脫葉磷的單組分標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液，有效期為一年。用乙腈-水混合溶液(5.2)配制有效濃度為200mg/L的乙烯利的單組分標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液，有效期為一5.5.2A組標(biāo)準(zhǔn)混合工作溶液：從乙烯利、環(huán)丙酸酰胺、噻節(jié)因的單組分標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液中各移取500μL置于同一容量瓶中，用乙腈-水混合溶液(5.2)定容至10mL,配得質(zhì)量濃度為0.5mg/L的A組混合工作溶液。也可配制其他合適濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。A組標(biāo)準(zhǔn)混合工作溶液用于HPLC-MS/MS負(fù)離子掃描模式分析。注：此溶液保存在棕色瓶中，置于0℃~4℃的冰箱中，現(xiàn)配現(xiàn)用。5.5.3B組標(biāo)準(zhǔn)混合工作溶液：從噻苯隆、敵草隆、脫葉磷的單組分標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液中各移取500μL置于同一容量瓶中，用乙腈-水混合溶液(5.2)定容至10mL,配得質(zhì)量濃度為0.5mg/L的B組混合工作溶液。也可配制其他合適濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。B組混合工作溶液用于HPLC-MS/MS正離子掃描模式分析。注：此溶液保存在棕色瓶中，置于0℃~4℃的冰箱中，現(xiàn)配現(xiàn)用。6設(shè)備和儀器6.1高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀(HPLC-MS/MS):配電噴霧離子源(ESI)。6.2超聲波水浴發(fā)生器：工作頻率(40±5)kHz,水浴溫度可控制在(30±3)℃。6.3天平：分度值為0.01g。6.4玻璃容器：40mL～80mL,由硬質(zhì)玻璃制成，配密封蓋。6.5微孔有機(jī)相濾膜：孔徑為0.22μm。7分析步驟7.1取樣將充分混合后的實驗室樣品平鋪在工作臺上，實驗室樣品按照附錄B的取樣要求進(jìn)行多點取樣。7.2試樣萃取取(0.50±0.1)g試樣，精確至0.01g,置于玻璃容器(6.4)中，加入20mL乙腈-水混合溶液(5.2),蓋緊密封蓋，振搖玻璃容器(6.4),使試樣充分潤濕。將試樣置于(30±3)℃超聲波水浴發(fā)生器(6.2)中超聲萃取(30±1)min,取出玻璃容器(6.4)冷卻至室溫，取部分萃取液經(jīng)微孔有機(jī)相濾膜(6.5)過濾，濾液7.3HPLC-MS/MS分析條件由于測試結(jié)果取決于所使用的儀器，因此不可能給出色譜分析的普遍參數(shù)。采用下列參數(shù)已被證明對測試是合適的。a)色譜柱：C?(2.1mm×100e)負(fù)離子模式流動相：流動相A為0.1%氨水溶液(5.3),流動相B為乙腈(5.1);f)正離子模式流動相：流動相A為0.1%甲酸溶液(5.4),流動相B為乙腈(5.1);3g)梯度洗脫條件按表1的要求；時間min%%555555o)多反應(yīng)監(jiān)測分析條件按表2的要求。表2多反應(yīng)監(jiān)測分析條件化合物母離子m/z子離子m/z傳輸電壓V碰撞能量駐留時間乙烯利4環(huán)丙酸酰胺8噻節(jié)因48噻苯降敵草隆脫葉磷“定量離子。47.4定性定量分析分別取測試液(7.2)和混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液(5.5.2、5.5.3),參照HPLC-MS/MS分析條件進(jìn)行分析，比較測試液(7.2)和混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液(5.5.2、5.5.3)質(zhì)量色譜峰的保留時間。如果測試液中目標(biāo)分析物色譜峰保留時間與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的保留時間相對偏差在±2.5%范圍內(nèi)，且各定性離子的相對豐度與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)一致，相對偏差不超過表3規(guī)定范圍，則可判斷檢出目標(biāo)分析物。在7.3給出的HPLC-MS/MS分析條件下，每種脫葉劑的多反應(yīng)監(jiān)測選擇離子流色譜圖見附錄C。表3定性驗證時相對離子豐度的相對偏差允許范圍%>20～50>10～20以混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液(5.5.2、5.5.3)目標(biāo)分析物的響應(yīng)峰面積為縱坐標(biāo)，以目標(biāo)分析物的濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，按照外標(biāo)法進(jìn)行定量計算。混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液(5.5.2、5.5.3)和測試液(7.2)中目標(biāo)分析物的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器線性響應(yīng)范圍內(nèi)，如果含量超過標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍，用乙腈-水混合溶液稀釋至合適濃度后測定。7.5空白試驗在不加試樣的情況下，均按步驟7.2～7.4進(jìn)行操作。8結(jié)果計算和表示按照公式(1)計算試樣中每種脫葉劑的含量。 (1)式中：X;——試樣中每種脫葉劑的含量，單位為毫克每千克(mg/kg);C;——標(biāo)準(zhǔn)工作曲線上讀取的測試液中每種脫葉劑的質(zhì)量濃度，單位為毫克每升(mg/L);C。——標(biāo)準(zhǔn)工作曲線上讀取的空白溶液中每種脫葉劑的質(zhì)量濃度，單位為毫克每升(mg/L);V——測試液的萃取體積，單位為毫升(mL);f稀釋因子；m——試樣的質(zhì)量，單位為克(g)。計算結(jié)果保留到小數(shù)點后一位。9定量限和精密度9.1定量限乙烯利、噻節(jié)因、脫葉磷的定量限為1.0mg/kg,環(huán)丙酸酰胺、噻苯隆、敵草隆的定量限為0.5mg/kg。9.2精密度在95%的置信水平下，在同一實驗室，由同一操作者使用相同的設(shè)備，按相同的測試方法，并在短時間內(nèi)對同一被測對象相互獨立進(jìn)行的測試，獲得的兩次測試結(jié)果的絕對差值不大于這兩個測定值的5算術(shù)平均值的10%。試驗報告至少應(yīng)給出下述內(nèi)容：a)樣品來源及描述；b)本文件編號；c)每種脫葉劑的測試結(jié)果；d)任何偏離本文件的細(xì)節(jié)；e)試驗日期。6(規(guī)范性)6種脫葉劑標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的化學(xué)信息6種脫葉劑標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的化學(xué)信息如表A.1所示。表A.16種脫葉劑標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的化學(xué)信息表序號中文名稱英文名稱化學(xué)文摘編號(CAS號)分子結(jié)構(gòu)式1乙烯利Ethephon16672-87-0Cl'2環(huán)丙酸酰胺Cyclanilide113136-77-93噻節(jié)因Dimethipin55290-64-7OO04噻苯隆Thidiazuron51707-55-2號號,5敵草隆Diuron330-54-1O6脫葉磷Tribufos78-48-8))7(規(guī)范性)取樣方法分別混合均勻。留一半；第3個樣品與第4個樣品合并混合，同樣分成兩半，丟棄一半，保留一半……第7個樣品與第8個樣品合并混合，再分成兩半，丟棄一半，保留一半。組成第二組的4個混合樣品(見圖B.2中9、10、B.3將B.2混和樣品中9和10兩個樣品合并混合，分成兩半，丟棄一半，保留一半；11與12兩個樣品合并混合同樣操作。組成第三組的兩個混合樣品(見圖B.2中13、14)。測試樣品，每份0.50g,作為試驗樣品使用。8強(qiáng)度/cps強(qiáng)度/cps(資料性)6種脫葉劑的多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)離子色譜圖6種脫葉劑的多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)離子色譜圖見圖C.1～圖C.6。MRM(143.0->107.0)乙烯利多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)離子色譜圖圖C.2環(huán)丙酸酰胺多