2024屆山西省呂梁市柳林縣高考生物二模試卷注意事項:1．答題前，考生先將自己的姓名、準考證號碼填寫清楚，將條形碼準確粘貼在條形碼區域內。2．答題時請按要求用筆。3．請按照題號順序在答題卡各題目的答題區域內作答，超出答題區域書寫的答案無效；在草稿紙、試卷上答題無效。4．作圖可先使用鉛筆畫出，確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5．保持卡面清潔，不要折暴、不要弄破、弄皺，不準使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．蝗蟲繁殖快，對農作物危害大。我國實施“改治結合、根除蝗害”的戰略，取得了良好的效果，即一方面通過化學防治和生物防治降低成年飛蝗密度，一方面改造飛蝗發生地，如修筑堤壩、控制水位、耕墾湖灘荒地等。下列有關敘述正確的是（）A．降低成年飛蝗密度、改造發生地都有利于降低種群出生率B．生物防治飛蝗是指利用捕食動物的捕食性來控制飛蝗C．飛蝗遷移能力強，調查其幼蟲的密度宜用標志重捕法D．控制蝗災利于調整能量流動方向、提高能量傳遞效率2．2019年，澳大利亞的山火肆虐，過火面積大，對人類和森林生態系統帶來危害。下列敘述正確的是（）A．過火地區上的所有植物構成一個群落B．過火地區的群落演替過程中優勢物種被替代主要是植物之間競爭的結果C．森林能提供木材體現了生物多樣性的間接價值D．火災過后的森林發生的演替類型是初生演替3．下列有關顯微鏡的使用，敘述正確的是（）A．觀察有絲分裂時，應盡量在一個視野中找全分裂各時期的細胞B．制備細胞膜時，在高倍鏡下觀察到水中的紅細胞凹陷消失，細胞破裂C．以洋蔥鱗片葉內表皮為材料不能觀察到質壁分離現象D．黑藻葉肉細胞呈單層分布，可在高倍顯微鏡下觀察到葉綠體的雙層膜4．用平板劃線法或稀涂布平板法都可以純化大腸桿菌,二者的共同點是A．都可以用固體培養基或液體培養基B．都需要使用接種環進行接種C．接種時都需要在酒精燈的火焰旁進行D．都可以用來統計樣品中的活菌數5．下列關于生物變異的敘述，正確的是（）A．基因中個別堿基對缺失會使DNA變短、染色體片段缺失B．染色體易位改變基因的位置，不可能導致生物性狀的改變C．三倍體西瓜減數分裂時聯會紊亂不能產生種子，可通過組織培養繁殖后代D．花藥離體培養過程中可發生非同源染色體自由組合，導致基因重組6．下圖為“觀察蝗蟲精母細胞減數分裂固定裝片”實驗的相關照片，圖中MⅠ代表減數第一次分裂，MⅡ代表減數第二次分裂。下列敘述正確的是（）A．該實驗過程中要進行解離、漂洗、染色、制片等操作B．該實驗可直接用高倍鏡進行觀察C．可在顯微鏡視野下觀察到乙圖變化的連續過程D．可在圖乙的MⅠ①中找到圖甲的結構二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）人和動物體內，溫度、pH、血糖的含量、水和無機鹽含量等都處于相對穩定狀態，而這種相對穩定是通過復雜的調節實現的?；卮鹣铝袉栴}：（1）在炎熱的夏季，當人走進空調房間時，房間內的冷空氣會刺激冷覺感受器，受刺激部位的細胞膜對________________的通透性增加，使興奮部位膜內側陽離子濃度____________（填“高于”或“低于”）膜外側。所產生的興奮會沿傳入神經傳到_______________形成冷覺。（2）正常人飯后，胰靜脈血液中明顯增多的激素是____________________，該激素的分泌一方面是因血糖濃度升高直接刺激胰島B細胞的分泌活動，另一方面是下丘腦可通過神經系統分泌________________來控制胰島B細胞的分泌活動。（3）已知導致糖尿病的病因有多種，下圖表示糖尿病患者出現的一種機制，圖中R為抗體、T為靶細胞膜上S的受體。當T與S特異性結合時，能促進________，從而降低血糖濃度，而該患者體內的______產生的R也能與T結合，導致靶細胞膜上與S結合的T的數量大大減少，甚至沒有T與S結合，由此可推斷該種糖尿病還是一種____________病。8．（10分）已知果蠅有灰身（A）與黑身（a）、長翅（B）與殘翅（b）、剛毛（F）與截毛（f）、細眼（D）與粗眼（d）等相對性狀。如圖甲為某果蠅的四對等位基因與染色體的關系圖，圖乙為其中的兩對相對性狀的遺傳實驗。分析回答下列問題：（1）根據圖甲判斷果蠅灰身、黑身與長翅殘翅這兩對相對性狀是否遵循基因的自由組合定律_____________（填“是”或“否”），其原因是______________。（2）將圖甲果蠅與表現型為______________的果蠅雜交，即可根據子代果蠅的剛毛與截毛情況判斷性別。（3）將基因型為AaBb的雌雄果蠅相互交配，若不考慮交又互換，得到的子代中_____________（填“一定”或“不一定”）出現兩種表現型；若雌雄果蠅均發生交叉互換，子代出現____________種表現型。（4）將純合的細眼果蠅與粗眼果蠅雜交得F1，在F1雌雄果蠅雜交產生F2時，由于環境因素影響，含d的雄配子有1/3死亡，則F2中果蠅的表現型及其比例為_____________。（5）圖乙所示的實驗中，親本雌雄果蠅的基因型分別為_____________；F2雌性個體中雜合子所占的比例為______________。9．（10分）（果蠅在遺傳學各個層次的研究中積累了十分豐富的資料，摩爾根用果蠅做岀了重要的遺傳學發現，請回答下列題：（1）果蠅是一種小型蠅類，由于果蠅具有__________等特點（要求至少答岀三點），生物學家常用它作為遺傳學的實驗材料。（2）如圖所示為果蠅的染色體組成示意圖，果蠅的Ⅲ號染色體上有控制體色的基因?，F將黑檀體無眼果蠅與灰體有眼果蠅雜交，獲得的F1均為灰體有眼果蠅，說明_______________為顯性性狀；再將F1雌雄果蠅相互雜交，若F2表現型及比例為___________，則可推測控制無眼的基因不在Ⅲ號染色體上。（3）已知果蠅剛毛（B）和截毛（b）由一對等位基因控制，要確定控制果蠅剛毛性狀（完全顯性、不考慮交叉互換）的基因只位于性染色體同源區段的X染色體上，選擇基因型為______________的親本雜交，且子一代的表現型___________，則上述假設成立。10．（10分）科學家卡爾文將小球藻裝在一個密閉容器中，通入14C標記的14CO2，給予充足的光照，每隔一定時間取樣、分離、鑒定光合產物。實驗結果：若光照30s后檢測產物，檢測到了多種帶14C標記的化合物（C3、C4、C5、C6等）；若將光照時間逐漸縮短至幾分之一秒，90%的放射性出現在一種三碳化合物（C3）中；在5s的光照后，同時檢測到了含有放射性的五碳化合物（C5）和六碳糖（C6）。請根據材料分析下列問題：（1）卡爾文不斷縮短光照時間，是為了確定___________________，從而推理出CO2中C的轉移途徑為___________________________。（2）取樣時，卡爾文和同事每次將小球藻放入熱的乙醇中，從代謝的角度分析，這樣做的目的是____________________，然后用紙層析法分離出各種化合物，這種方法的原理是_____________。11．（15分）蘿卜的蛋白A具有廣泛的抗植物病菌作用，而且對人體沒有影響。我國科學家欲獲得高效表達蛋白A的轉基因大腸桿菌作為微生物農藥，做了相關研究。（1）研究者用相同的_________酶處理蛋白A基因和pET質粒，得到重組質粒，再將重組質粒置于經_________處理的大腸桿菌細胞懸液中，獲得轉基因大腸桿菌。（2）檢測發現，轉入的蛋白A基因在大腸桿菌細胞中表達效率很低，研究者推測不同生物對密碼子具有不同的偏好，因而設計了與蛋白A基因結合的兩對引物（引物B和C中都替換了一個堿基），并按圖2方式依次進行4次PCR擴增，以得到新的蛋白A基因。①這是一種定點的_________技術。②圖2所示的4次PCR應該分別如何選擇圖1中所示的引物？請填寫以下表格（若選用該引物劃“√”，若不選用該引物則劃“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者進一步將含有新蛋白A基因的重組質粒和_________分別導入大腸桿菌，提取培養液中的蛋白質，用_________方法檢測并比較三組受體菌蛋白A的表達產物，判斷新蛋白A基因表達效率是否提高。為檢測表達產物的生物活性，研究者將上述各組表達產物加入到長滿了植物病菌的培養基上，培養一段時間后，比較_________的大小，以確定表達產物的生物活性大小。（4）作為微生物農藥，使用時常噴灑蛋白A基因的發酵產物而不是轉蛋白A基因的大腸桿菌，其優點是_________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、A【解析】

生物防治是指利用一種生物對付另外一種生物的方法。生物防治大致可以分為以蟲治蟲、以鳥治蟲和以菌治蟲三大類。它是降低雜草和害蟲等有害生物種群密度的一種方法。它利用了生物物種間的相互關系，以一種或一類生物抑制另一種或另一類生物。它的最大優點是不污染環境，是農藥等非生物防治病蟲害方法所不能比的。用于生物防治的生物可分為三類：①捕食性生物，包括草蛉、瓢蟲、步行蟲、畸螯螨、鈍綏螨、蜘蛛、蛙、蟾蜍、食蚊魚、叉尾魚以及許多食蟲益鳥等；②寄生性生物，包括寄生蜂、寄生蠅等；③病原微生物，包括蘇云金桿菌、白僵菌等。在中國，利用大紅瓢蟲防治柑桔吹綿蚧，利用白僵菌防治大豆食心蟲和玉米螟，利用金小蜂防治越冬紅鈴蟲，利用赤小蜂防治蔗螟等都獲得成功?！驹斀狻緼、降低成年飛蝗密度、改造發生地，使蝗蟲的生存環境變的不適于其繁殖和生存，都有利于降低種群出生率，A正確；B、生物防治飛蝗不僅僅是指利用捕食動物的捕食性來控制飛蝗，如利用性外激素、利用寄生關系防治也屬于生物防治，B錯誤；C、飛蝗幼蟲活動能力差，調查飛蝗幼蟲的密度宜用樣方法，C錯誤；D、控制蝗災利于調整能量流動方向、但不能提高能量傳遞效率，D錯誤。故選A。2、B【解析】

初生演替：是指一個從來沒有被植物覆蓋的地面，或者是原來存在過植被，但是被徹底消滅了的地方發生的演替。次生演替：原來有的植被雖然已經不存在，但是原來有的土壤基本保留，甚至還保留有植物的種子和其他繁殖體的地方發生的演替?！驹斀狻緼、一定自然區域內相互間有直接或間接聯系的所有生物稱為群落，過火地區上的所有植物不能構成一個群落，A錯誤；B、演替過程中優勢物種被替代主要是植物之間競爭的結果，B正確；C、森林提供木材體現了生物多樣性的直接價值，C錯誤；D、火災后的森林因為保留土壤條件，或者保留了植物種子和其他繁殖體，所以是次生演替，D錯誤。故選B。3、B【解析】

正常的紅細胞為兩面凹型，將紅細胞放在清水中，細胞吸水膨脹，形成圓漲的紅細胞，直至細胞過度吸水而破裂。發生質壁分離的條件：具有細胞壁、大液泡；外界溶液濃度大于細胞液濃度。【詳解】A、由于細胞大多數位于細胞分裂的間期，所以一個視野里難以找全細胞周期中各時期的細胞，可通過移動裝片在不同視野中找到分裂各時期的細胞，A錯誤；B、紅細胞吸水后的動態變化過程為：凹陷消失→細胞體積增大→細胞破裂→內容物流出，B正確；C、洋蔥鱗片葉內表皮細胞為成熟的植物細胞，以洋蔥鱗片葉內表皮為材料能觀察到質壁分離，C錯誤；D、葉綠體的膜結構屬于亞顯微結構，而高倍顯微鏡看到的是顯微結構，故不能觀察到葉綠體的兩層膜結構，D錯誤。故選B。4、C【解析】試題分析：平板劃線法或稀釋涂布平板法都是在固體培養基上進行的，A錯誤；平板劃線法接種用接種針，稀釋涂布平板法接種要用涂布器，B錯誤；不論是平板劃線法還是稀釋涂布平板法都需要進行無菌操作，在酒精燈火焰旁進行，C正確；平板劃線法不能用于計數活菌，只能用于分離菌種；稀釋涂布平板法可以用來計數活菌，D錯誤。點睛：熟記微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。5、C【解析】

可遺傳的變異包括基因突變、基因重組和染色體變異：（1）基因突變是指基因中堿基對的增添、缺失或替換，這會導致基因結構的改變，進而產生新基因；（2）基因重組是指在生物體進行有性生殖的過程中，控制不同性狀的非等位基因重新組合，包括兩種類型：①自由組合型：減數第一次分裂后期，隨著非同源染色體自由組合，非同源染色體上的非等位基因也自由組合。②交叉互換型：減數第一次分裂前期（四分體），基因隨著同源染色體的非等位基因的交叉互換而發生重組。此外，某些細菌（如肺炎雙球菌轉化實驗）和在人為作用（基因工程）下也能產生基因重組。（3）染色體變異包括染色體結構變異（重復、缺失、易位、倒位）和染色體數目變異?！驹斀狻緼、基因中個別堿基對缺失會導致基因結構改變，即基因突變，不會導致染色體片段缺失，A錯誤；B、染色體易位改變基因的位置，會導致生物性狀的改變，B錯誤；C、三倍體西瓜聯會紊亂不能產生種子，可通過組織培養繁殖后代，C正確；D、花藥離體培養過程中進行的是有絲分裂，因此不會發生非同源染色體自由組合，即不會導致基因重組，D錯誤。故選C。6、D【解析】

實驗：觀察蝗蟲精母細胞減數分裂固定裝片一、實驗目的：通過觀察蝗蟲精母細胞減數分裂固定裝片，識別減數分裂不同階段的染色體的形態、位置和數目，加深對減數分裂過程的理解。二、實驗原理：蝗蟲的精母細胞進行減數分裂形成精細胞，再形成精子.此過程要經過兩次連續的細胞分裂：減數第一次分裂和減數第二次分裂.在此過程中，細胞中的染色體形態、位置和數目都在不斷地發生變化，因而可據此識別減數分裂的各個時期。三、選材和染色劑：蝗蟲的精細胞，材料易得，觀察方便，染色體數量少，各個時期的染色體形態都能觀察到.染色劑選擇：容易被堿性染料染色。四、方法步驟：1、在低倍鏡下觀察蝗蟲精母細胞減數分裂固定裝片，識別初級精母細胞、次級精母細胞和精細胞。2、先在低倍鏡下依次找到減數第一次分裂中期、后期和減數第二次分裂中期、后期的細胞，再在高倍鏡下仔細觀察染色體的形態、位置和數目。3、根據觀察結果，盡可能多地繪制減數分裂不同時期的細胞簡圖?！驹斀狻緼、該實驗是觀察蝗蟲精母細胞減數分裂固定裝片，所以不需要進行解離、漂洗、染色、制片等操作，A錯誤；B、該實驗先在低倍鏡下觀察找到目標，再換高倍鏡觀察，B錯誤；C、制作裝片后細胞已經死亡，因此不能觀察到乙圖變化的連續過程，C錯誤；D、減數第一次分裂中期有可能發生同源染色體的非姐妹染色單體交叉互換現象，故可在圖乙的MⅠ①中找到圖甲的結構，D正確。故選D。二、綜合題：本大題共4小題7、Na+高于大腦皮層胰島素神經遞質靶細胞對血糖的利用等漿細胞自身免疫【解析】

1、靜息時，K+外流，造成膜兩側的電位表現為內負外正；受刺激后，Na+內流，造成膜兩側的電位表現為內正外負。

2、寒冷時，下丘腦分泌促甲狀腺激素釋放激素促進垂體分泌促甲狀腺激素，促進甲狀腺分泌甲狀腺激素，促進代謝增加產熱。當甲狀腺激素含量過多時，會反過來抑制下丘腦和垂體的分泌活動，這叫做負反饋調節。

3、下丘腦中有滲透壓感受器，是體溫調節、水平衡調節、血糖調節的中樞，還與生物節律等的控制有關。大腦皮層是感覺中樞。

4、自身免疫?。鹤陨砻庖叻磻獙ψ陨淼慕M織和器官造成了損傷并出現了癥狀，例如風濕性心臟病、類風濕性關節炎、系統性紅斑狼瘡等。【詳解】（1）當低溫刺激體表的冷覺感受器時，受刺激部位的細胞膜對Na+的通透性增加，Na+內流，使興奮部位膜內側陽離子濃度高于膜外側。所產生的興奮會沿傳入神經傳到大腦皮層形成冷覺。（2）正常人飯后，血糖濃度升高，促進胰島B細胞分泌胰島素，進而降低血糖。對這一過程的調節通常有兩條途徑，由下丘腦通過傳出神經分泌神經遞質來促進胰島B細胞分泌胰島素是其中一條途徑。（3）根據圖示分析，S來自胰島B細胞，判斷其為胰島素，它能促進靶細胞加速利用血糖等?？贵w是由漿細胞合成和分泌的。由于抗體也可以與T結合，從而占據了S的結合部位，降低了靶細胞對血糖的利用，由此判斷該種糖尿病是一種自身免疫病。【點睛】本題主要考查體溫調節、血糖調節和神經調節的相關知識，意在考查考生的識記能力和理解所學知識要點，難度不大。8、否控制這兩對相對性狀的兩對等位基因位于同一對同源染色體上截毛不一定4細眼∶粗眼=4∶1BBXFXF、bbXfYf3/4【解析】

孟德爾在做兩對雜交實驗的時候，發現F2的分離比為9∶3∶3∶1。提出性狀是由基因控制的，并且兩對等位基因獨立遺傳。F1在形成配子時，等位基因分離，非等位基因自由組合，產生四種不同的配子，進而雌雄配子結合得到F2分離比9∶3∶3∶1?！驹斀狻浚?）已知果蠅有灰身（A）與黑身（a）、長翅（B）與殘翅（b），根據圖甲可知這兩對等位基因在一對同源染色體上，因此判斷果蠅灰身、黑身與長翅殘翅這兩對相對性狀不遵循基因的自由組合定律。（2）剛毛（F）與截毛（f），圖甲果蠅為剛毛雄性（XFY），與表現型為截毛的雌果蠅（XfXf）雜交，即可根據子代果蠅的剛毛與截毛情況判斷性別，后代雌性為剛毛（XFXf）、雄性為截毛（XfY）。（3）將基因型為AaBb的雌雄果蠅，若AB連鎖、ab連鎖，則產生的配子為AB∶ab=1∶1，得到的子代為AABB、AaBb、aabb，出現2種表現型，若Ab連鎖、aB連鎖，則產生的配子為Ab∶aB=1∶1，得到的子代為AAbb、AaBb、aaBB，出現3種表現型，因此不一定出現兩種表現型。若雌雄果蠅均發生交叉互換，能產生4種配子（AB、Ab、aB、ab），子代出現4種表現型。（4）將純合的細眼果蠅（DD）與粗眼果蠅雜交得F1（Dd），在F1雌雄果蠅雜交產生F2時，雌配子的比例為D∶d=1∶1，由于環境因素影響，含d的雄配子有1/3死亡，則雄配子的比例為D∶d=3∶2，因此F2中果蠅的基因型為3/10DD、5/10Dd、1/5dd，表現型及其比例為細眼（D_）∶粗眼（dd）=4∶1。（5）長翅（B）與殘翅（b）、剛毛（F）與截毛（f）在染色體上的位置如圖甲所示，圖乙所示的實驗中，F1全為長翅剛毛，因此親本雌雄果蠅的基因型分別為BBXFXF、bbXfYf。F2雌性個體中純合子（BBXFXF、bbXFXF）所占的比例為1/4×1/2+1/4×1/2=1/4，雜合子所占的比例為3/4?！军c睛】熟悉遺傳的基本規律是解答本題的關鍵。9、易培養、繁殖快、染色體數目少、突變性狀多灰體有眼灰體有眼∶灰體無眼∶黑檀體有眼∶黑檀體無眼=9∶3∶3∶1XbXb和XBYb子代雌性全為剛毛，雄性全為截毛【解析】

果蠅具有易培養、繁殖快、染色體數目少、突變性狀多等特點。黑檀體無眼果蠅與灰體有眼果蠅雜交，F1均為灰體有眼果蠅，說明灰體對黑檀體為顯性，有眼對無眼為顯性?！驹斀狻浚?）由于果蠅具有易培養、繁殖快、染色體數目少、突變性狀多等特點，生物學家常用它作為遺傳學的實驗材料。（2）黑檀體無眼果蠅與灰體有眼果蠅雜交，F1均為灰體有眼果蠅，說明灰體對黑檀體為顯性，有眼對無眼為顯性。Ⅲ號染色體上有黑檀體基因，若控制無眼的基因不在Ⅲ號染色體上，說明兩對基因位于非同源染色體，應遵循自由組合定律，F2表現型應為四種，且比例為9∶3∶3∶1。（3）剛毛和截毛為一對等位基因：其中剛毛（B）為顯性，截毛（b）為隱性，控制這對相對性狀的顯性基因（剛毛B、完全顯性、不考慮交叉互換）如果只位于性染色體同源區段的X染色體上，則Y染色體的同源段只有隱性b基因；XbXb和XBYb親本雜交，子代雌性全為剛毛，雄性全為截毛?！军c睛】本題考查果蠅作為遺傳材料的優點及伴性遺傳的應用等相關知識點，掌握相關知識結合題意答題。10、被14C標記的化合物出現的先后順序CO2→C3→（CH2O）使酶失活，反應停止不同化合物在層析液中的溶解度不同【解析】

光合作用包括光反應和暗反應兩個階段。光反應發生場所在葉綠體的類囊體薄膜上，色素吸收光照，吸收光能、傳遞光能，并將一部分光能用于水的光解生成[H]和氧氣，另一部分光能用于合成ATP，暗反應發生場所是葉綠體基質中，首先發生二氧化碳的固定，即二氧化碳和五碳化合物結合形成兩分子的三碳化合物，三碳化合物利用光反應產生的[H]和ATP被還原?！驹斀狻浚?）卡爾文用14C標記的CO2作為原料，探究暗反應的過程，所以不斷縮短光照時間，是為了確定被14C標記的化合物出現的先后順序，CO2中C的轉移途徑為CO2→C3→（CH2O）。（2）將小球藻放入熱的乙醇中可以使酶失活，反應停止；紙層析法分離化合物的原理是不同化合物在層析液中的溶解度不同?！军c睛】解答本題要注意熟記暗反應過程中的物質變化，理解放射性同位素標記法的原理及應用，結合教材實驗識記紙層析法的原理。11、限制酶和DNA連接CaCl2基因突變引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重組質粒、空質粒（pET質粒）抗原-抗體雜交抑菌圈對人、畜、農作物和自然環境安全；不會造成基因污染；有效成分純度較高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手術刀”——限制性核酸內切酶（限制酶）（1）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。（2）功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。（3）結果：經限制酶切割產生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。2、“分子縫合針”——DNA連接酶（1）兩種DNA連接酶（E?coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：①相同點：都縫合磷酸二酯鍵。②區別：E?coliDNA連接酶來源于大腸桿菌，只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶來源于T4噬菌體，可用于連接粘性末端和平末端，但連接效率較低。（2）與DNA聚合酶作用的異同：DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵．DNA連接酶是連接兩個DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵。3、“分子運輸車”——載體（1）載體具備的條件：①能在受體細胞中復制并穩定保存。②具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入。③具有標記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。（2）最常用的載體是質粒，它是一種裸露的、結構簡單的、獨立于細菌擬核DNA之外，并具有自我復制能力的雙鏈環狀DNA分子。（3）其它載體：噬菌體的衍生物、動植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲取1、目的基因是指：編碼蛋白質的結構基因。2、原核基因采取直接分離獲得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反轉錄法和化學合成法。3、PCR技術擴增目的基因（1）原理：DNA雙鏈復制（2）過程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃，引物結合到互補DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩定DNA聚合酶從引物起始互補鏈的合成。第二步：基因表達載體的構建1、目的：使目的基因在受體細胞中穩定存在，并且可以遺傳至下一代，使目的基因能夠表達和發揮作用。2、組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因（1）啟動子：是一段有特殊結構的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結合的部位，能驅動基因轉錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質。（2）終止子：也是一段有特殊結構的DNA片段，位于基因的尾端。（3）標記基因的作用：是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來．常用的標記基因是抗生素抗性基因。第三步：將目的基因導入受體細胞1、轉化的概念：是目的基因進入受體細胞內，并且在受體細胞內維持穩定和表達的過程。2、常用的轉化方法：將目的基因導入植物細胞：采用最多的方法是農桿菌轉化法，其次還有基因槍法和花粉管通道法等。將目的基因導