海洋來(lái)源的龍須菜硫酸寡糖和Butyrolactone-Ⅰ的抗食物過(guò)敏活性研究食物過(guò)敏性疾病癥狀嚴(yán)重且多樣化,發(fā)病率不斷攀升,然而至今還未有確切有效的食物過(guò)敏根治手段。海洋資源中含有豐富的具有多種生物活性的天然成分,前期研究發(fā)現(xiàn)來(lái)自淺海區(qū)的龍須菜硫酸多糖能夠抑制原肌球蛋白誘導(dǎo)的食物過(guò)敏反應(yīng),但其分子量大且作用濃度較高;深海來(lái)源微生物種類繁多,代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)新穎,擁有多種生物活性,目前關(guān)于深海化合物抑制食物過(guò)敏作用研究少見報(bào)道。因此,以龍須菜和深海微生物為對(duì)象,篩選抗食物過(guò)敏活性物質(zhì),并探索其可能的抗食物過(guò)敏反應(yīng)的作用機(jī)制,對(duì)于開發(fā)抗過(guò)敏功能食品及新型抗過(guò)敏藥物具有重要的意義。本研究利用六種降解方法處理龍須菜硫酸多糖,發(fā)現(xiàn)高溫壓力結(jié)合維生素C處理能夠?qū)堩毑肆蛩岫嗵墙到獬蔀辇堩毑肆蛩峁烟牵℅racilarialemaneiformissulfatedoligosaccharide,GLSO）,GLSO的平均分子量為2031Da,硫酸根含量為13.03%,粘度為0.002dL/g,還原糖含量是46.52%,主要由二糖、四糖、六糖和八糖四種寡糖組成,含量分別為64.57%、15.74%、9.21%和7.23%。降解得到的GLSO能夠抑制大鼠嗜堿性粒細(xì)胞（Ratbasophils,RBL）-2H3和小鼠骨髓來(lái)源肥大細(xì)胞（Bonemarrow-derivedmastcells,BMMCs）的脫顆粒及組胺釋放,抑制率顯著高于龍須菜硫酸多糖;GLSO能夠降低小鼠骨髓來(lái)源樹突狀細(xì)胞對(duì)卵清蛋白（Ovalbumin,OVA）的吞噬,并影響其表面CD80的表達(dá)。通過(guò)OVA誘導(dǎo)的食物過(guò)敏小鼠模型發(fā)現(xiàn),100mg/kg的GLSO能夠顯著緩解食物過(guò)敏反應(yīng),減弱小鼠腸道炎癥,其抑制活性顯著高于龍須菜硫酸多糖。GLSO能夠影響過(guò)敏小鼠腸道菌群的結(jié)構(gòu)及豐度,促使其趨向正常。此外,GLSO能夠抑制IgE、組胺、肥大細(xì)胞蛋白酶（mousemastcellprotease,mMCP-1）、白細(xì)胞介素（interleukin,IL）-4、IL-6、IL-13、以及腫瘤壞死因子-α的水平,對(duì)IL-10與轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β的產(chǎn)生有顯著促進(jìn)效果。脾臟淋巴細(xì)胞檢測(cè)發(fā)現(xiàn)GLSO影響輔助性T（Thelper,TH）細(xì)胞和B細(xì)胞的數(shù)量,抑制TH2細(xì)胞的極化。GLSO抗食物過(guò)敏的作用機(jī)制是通過(guò)促進(jìn)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的分化,抑制效應(yīng)T細(xì)胞的增殖和肥大細(xì)胞的激活,發(fā)揮免疫抑制作用。本研究利用RBL-2H3細(xì)胞脫顆粒模型,從941個(gè)海洋微生物來(lái)源次級(jí)代謝產(chǎn)物中篩選得到12個(gè)抑制率大于50%的單體化合物,綜合考慮抑制活性及產(chǎn)量因素,選擇了其中Butyrolactone-Ⅰ（BTL-Ⅰ）進(jìn)行抗食物過(guò)敏活性探究。BTL-Ⅰ是一種來(lái)源于深海真菌Aspergillussp.的丁烯酸內(nèi)酯類化合物,其分子式是C₂₄H₂₄O₇,相對(duì)分子質(zhì)量為424,能夠顯著抑制RBL-2H3細(xì)胞的脫顆粒,IC₅₀值為8.09μg/mL,也可降低RBL-2H3細(xì)胞釋放組胺;此外,BTL-Ⅰ也可顯著抑制BMMCs的激活。體內(nèi)食物過(guò)敏小鼠模型結(jié)果表明,BTL-Ⅰ能夠緩解OVA誘導(dǎo)的食物過(guò)敏反應(yīng)癥狀、降低小鼠腹瀉率、引發(fā)過(guò)敏小鼠體溫回升,減弱腸道炎癥;BTL-Ⅰ對(duì)OVA特異性IgE、組胺及mMCP-1有著明顯的抑制作用;能夠降低過(guò)敏小鼠脾臟和腸系膜淋巴細(xì)胞中B細(xì)胞及肥大細(xì)胞的數(shù)量;此外,BTL-Ⅰ能夠減弱肥大細(xì)胞介導(dǎo)的小鼠被動(dòng)皮膚過(guò)敏反應(yīng),影響肥大細(xì)胞表面c-KIT的表達(dá)。最終明確了BTL-Ⅰ發(fā)揮抗食物過(guò)敏活性的機(jī)制是與抑制性受體FcγRIIB發(fā)生相互作用,進(jìn)而抑制肥大細(xì)胞的激活,緩解過(guò)敏反應(yīng)。綜上,本研究通過(guò)降解龍須菜硫酸多糖得到了低分子量的寡糖混合物,從941個(gè)化合物中篩選得到對(duì)肥大細(xì)胞脫顆粒具有高抑制活性的深海化合物BTL-Ⅰ。通過(guò)RBL-2H3和BMMCs模型確定GLSO與BTL-Ⅰ的體外抗過(guò)敏活性。利用OVA誘導(dǎo)的食物過(guò)敏小鼠模型,驗(yàn)證GLSO及BTL-Ⅰ機(jī)體內(nèi)對(duì)食物過(guò)敏反應(yīng)的抑制作用;通過(guò)檢測(cè)過(guò)敏相關(guān)免疫細(xì)胞的增殖情況,發(fā)現(xiàn)GLSO在機(jī)體內(nèi)作用的主要靶向細(xì)胞是Treg細(xì)胞,Treg細(xì)胞進(jìn)一步抑制效應(yīng)T細(xì)胞的增殖和肥大細(xì)胞的激活,從而發(fā)揮抗食物過(guò)敏作用;而BTL-Ⅰ在機(jī)體內(nèi)作用的主要靶向細(xì)胞是肥大細(xì)胞,通過(guò)與抑制性受體