江蘇省南京市、鹽城市2023-2024學年高考適應性考試生物試卷注意事項：1．答卷前，考生務必將自己的姓名、準考證號、考場號和座位號填寫在試題卷和答題卡上。用2B鉛筆將試卷類型（B）填涂在答題卡相應位置上。將條形碼粘貼在答題卡右上角"條形碼粘貼處"。2．作答選擇題時，選出每小題答案后，用2B鉛筆把答題卡上對應題目選項的答案信息點涂黑；如需改動，用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案。答案不能答在試題卷上。3．非選擇題必須用黑色字跡的鋼筆或簽字筆作答，答案必須寫在答題卡各題目指定區域內相應位置上；如需改動，先劃掉原來的答案，然后再寫上新答案；不準使用鉛筆和涂改液。不按以上要求作答無效。4．考生必須保證答題卡的整潔。考試結束后，請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．關于高中生物學實驗的基本原理，下列敘述錯誤的是（）A．紙層析法分離綠葉中色素是因為不同色素在層析液中溶解度不同B．蛋白質用雙縮脲試劑檢驗是因為蛋白質在堿性環境中與Cu2+顯色C．成熟植物細胞在高滲溶液中發生質壁分離是因為細胞壁具有選擇透過性D．土壤中小動物的采集是利用其具有避光、趨濕、避熱等特點2．科研人員測定某噬菌體單鏈DNA的序列，得到其編碼蛋白質的一些信息，如下圖所示。據此作出的分析，不正確的是A．谷氨酸（Glu）至少有兩種密碼子B．終止密碼子分別為TAA或TGAC．一個堿基對替換可能引起兩種蛋白發生改變D．基因重疊能經濟地利用DNA的遺傳信息量3．下列關于觀察植物細胞的質壁分離及質壁分離復原實驗的敘述，正確的是（）A．成熟的植物細胞在適宜濃度的蔗糖溶液中可發生質壁分離和質壁分離的自動復原B．高倍鏡下觀察洋蔥鱗片葉外表皮細胞，可觀察到質膜及其以內部分緊貼著細胞壁C．用黑藻葉片觀察質壁分離時，細胞質中葉綠體的存在會干擾實驗現象的觀察D．用龍膽紫染色后的洋蔥根尖成熟區的細胞可用于觀察細胞質壁分離現象4．下列發生在高等植物細胞內的化學反應，只能在細胞器中進行的是（）A．CO2的生成 B．肽鏈的形成C．RNA的合成 D．葡萄糖的分解5．下列關于免疫調節的敘述，正確的是（）A．抗體能通過胞吞方式進入細胞消滅寄生在其中的麻風桿菌B．人一旦感染HIV就會導致體內T細胞數量大量減少C．B細胞和T細胞分別是在胸腺和骨髓中由造血干細胞分裂分化產生的D．體液免疫和細胞免疫的二次免疫應答都與記憶細胞的迅速增殖有關6．如圖是某河流生態系統受到生活污水輕度污染后的凈化示意圖，該河流生態系統中植食性魚類大致的能量流動情況如表所示。下列相關敘述錯誤的是（）項目能量/kJ魚吃掉的浮游植物所含的能量468魚糞便中含有的能量228魚呼吸作用散失的能量163①77A．調查該河流周邊土壤中小動物的豐富度，計數時可采用取樣器取樣的方法B．圖中b點后，藻類大量增加的原因是有機物被分解后產生大量的無機鹽C．表中魚糞便中的能量屬于第一營養級的同化量，魚的同化量為240kJD．表中①表示儲存在魚的有機物中，用于生長、發育和繁殖等生命活動的能量7．下列關于遺傳物質的探索的敘述，正確的是（）A．將加熱殺死的S型菌與R型活菌混合后注射到小鼠體內，小鼠體內的S型菌都由R型菌轉化而來B．將S型菌的DNA、蛋白質、多糖等物質分別與R型活菌混合培養，培養基中均有R型菌C．赫爾希和蔡斯的實驗中，離心后細菌主要存在于沉淀物中，新形成的噬菌體都帶有35SD．用B型TMV（煙草花葉病毒）的RNA和A型TMV的蛋白質重組而成的病毒感染煙草，會得到2種子代病毒8．（10分）下表為“探究酶的專一性”活動的實驗記錄表。下列敘述錯誤的是（）試管1234561%淀粉溶液3mL—3mL—3mL—2%蔗糖溶液—3mL—3mL—3mL新鮮唾液——1mL1mL——蔗糖酶溶液————1mL1mL37℃溫度恒溫水浴保溫15分鐘本尼迪特試劑2mL2mL2mL2mL2mL2mL實驗結果A．若淀粉酶溶液濃度適當降低，為了保持3號顯色結果不變，則保溫時間應適當延長B．本實驗的自變量為酶的種類或底物的種類，新鮮唾液需經過稀釋一定倍數處理C．本實驗中須對底物溶液與酶溶液進行分別保溫后，再充分混合放入恒溫水浴中D．若試管1號無陽性反應而5號有陽性反應，造成這種差異的可能原因是淀粉不純二、非選擇題9．（10分）果蠅的腹部有斑與無斑由位于常染色體上的一對等位基因控制，有斑性狀由B基因控制，無斑性狀由b基因控制，雜合子在雌雄個體中的表現型不同。紅眼與白眼由另一對等位基因（A，a）控制。現用無斑紅眼（♀）與有斑紅眼（♂）進行雜交，子代的表現型及比例如下表：表現型性別無斑紅眼有斑紅眼無斑白眼有斑白眼雌果蠅6/162/1600雄果蠅1/163/161/163/16（1）控制眼色的一對等位基因A和a的本質區別是______________。（2）親代有斑紅眼（♂）的基因型為_______，若只考慮果蠅腹部斑紋性狀，則在雌果蠅中表現為無斑的基因型為____________。（3）若想確定F1中有斑果蠅的基因型，現從F1個體中選擇親本進行雜交實驗，且預測實驗結果為：①若雜交后代雌果蠅均為有斑，則F1中的有斑雄果蠅的基因型為BB；②若雜交后代雌果蠅出現了無斑，則F1中的有斑雄果蠅的基因型為Bb。請利用遺傳圖解表示上述判斷過程：____________________________________________。10．（14分）酵母菌的蛋白質可作為飼料蛋白的來源，有些酵母菌能以工業廢甲醇作為碳源，研究人員擬從土壤樣品中分離出可利用工業廢甲醇的酵母菌，這樣既能減少污染又可變廢為寶。下圖為主要操作流程示意圖。回答下列問題：（1）配制培養基時，按照培養基配方準確稱量各組分，將其溶解、定容后，調節培養基的____，及時對培養基進行分裝，并進行高壓蒸汽滅菌：在加熱排除高壓鍋內原有的____后，將高壓鍋密閉，繼續加熱，通常在____的條件下，維持15-30min，可達到良好的滅菌效果。（2）取步驟②中梯度稀釋后的適量液體加入無菌培養皿，然后將高壓蒸汽滅菌后的培養基冷卻至____（25℃/50℃/80℃）左右時倒入培養皿混勻（步驟⑧），冷凝后將培養皿倒置，在適宜的條件下培養一段時間。（3）挑取平板中長出的單菌落，按步驟④所示進行劃線純化，下列敘述合理的是____。a．為保證無菌操作，接種針、接種環使用前都必須滅菌b．挑取菌落時，應挑取多個菌落，分別測定酵母細胞中甲醇的含量c．劃線時不能劃破培養基表面，以確保能正常形成菌落d．第二區以后的劃線起始端要與上一區的劃線的末端相連接，最后一區的劃線末端不能與第一區的劃線相連（4）步驟⑤的培養中，應加入___作為碳源，并加入適量的氮源、無機鹽和水等成分。為監測發酵罐中酵母菌活細胞的密度，取2mL發酵液稀釋1000倍后，加入等體積臺盼藍染液染色，用如圖所示的計數室規格為25x16型的血細胞計數板計數，要達到每毫升4x109個活酵母菌細胞的預期密度，理論上，圖中標號①～⑤五個中格里的呈____色的酵母菌細胞總數應不少于____個。11．（14分）患者男，48歲，發熱伴寒戰，入院進行血液B超及CT檢查，疑似肝膿腫。其中細菌性肝膿腫的主要病原菌是：大腸埃希菌、克雷伯菌、鏈球菌、金黃色葡菊球菌、厭氧菌等。近年來，克雷伯桿菌感染導致的細菌性肝膿腫患者比例有增高的趨勢，為確定致病原因需要進行細菌的培養及藥敏實驗檢查病原體種類。請回答下列問題：（1）細菌培養一般在30~37℃，pH調至____________，進行無菌操作。對接種環等金屬用具，直接在灑精燈火焰的____________灼燒，可以迅速徹底地滅菌。（2）微生物接種的方法很多，最常用的方法有____________法。雖然這些技術的操作方法各不相同，但是，其核心都是防止雜菌的污染，保證____________________________________。（3）區分細菌種類可以通過多種途徑，如生化試驗IMVC試驗可用于腸道桿菌鑒定，其中大腸埃希菌、克雷伯菌鑒定結果分別是++--.--++；還可以通過菌落特征，如菌落的____________等的不同來區別。常用來統計樣品中活菌數目的方法是_____________，測定細菌數量的方法還有____________法，無論哪種方法得到的細菌數量都是____________值。12．二倍體生物（2n）體細胞中染色體多一條稱為三體（2n+1），染色體少一條稱為單體（2n–1）。三體在減數分裂時，三條同源染色體中的任意兩條移向一極，另一條移向另一極。單體在減數分裂時，未聯會的染色體隨機移向一極。野生煙草（2n=48）種群中普遍存在著各對染色體的相應三體與單體植株，常用來測定基因所在的染色體。現有若干純合綠株（G）、黃綠株（g）的二倍體、三體和單體植株，假設各種配子育性相同，各種基因型的個體均能成活。回答下列問題：（1）野生煙草中有___________種三體植株。若選用純合的三體與純合的二倍體雜交，能不能只用一代雜交實驗確定G/g基因所在的染色體?___________。（2）若選用單體與二倍體進行一代雜交實驗可以測定G/g基因所在的染色體，請簡要寫出實驗思路、預期實驗結果及結論___________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【解析】

色素分離原理：葉綠體中的色素在層析液中的溶解度不同，溶解度高的隨層析液在濾紙上擴散得快，溶解度低的隨層析液在濾紙上擴散得慢。根據這個原理就可以將葉綠體中不同的色素分離開來；雙縮脲試劑的使用，應先加1ml0.1g/mL的NaOH溶液，造成堿性環境，再滴加3-4滴0.01g/mL的CuSO4溶液。【詳解】A、紙層析法分離綠葉中色素是因為不同色素在層析液中溶解度不同，光合色素在層析液中溶解度高的隨層析液擴散得快，A正確；B、蛋白質用雙縮脲試劑檢驗，原理為蛋白質中的肽鍵在堿性環境中與Cu2+顯紫色，B正確；C、細胞壁屬于全透性的，成熟植物細胞在高滲溶液中發生質壁分離原因是原生質層具有選擇透過性，C錯誤；D、利用土壤小動物的避光避熱趨濕性，可用帶燈罩的熱光源裝置收集土樣中的小動物，D正確。故選C。【點睛】對于教材常見實驗的實驗原理、方法及步驟，應注意日常學習的積累總結。2、B【解析】

根據題意和圖示分析可知：不同的基因共用了相同的序列，這樣就增大了遺傳信息儲存的容量；基因突變就是指DNA分子中堿基對的增添、缺失或改變，基因突變后控制合成的蛋白質的分子量可能不變、可能減少、也可能增加。【詳解】A、90號和149號都編碼Glu，并且堿基不同，所以Glu至少有兩種密碼子，A正確；B、密碼子是mRNA編碼一個氨基酸的三個堿基，而這是DNA分子，沒有密碼子，B錯誤；C、由于兩個基因共用一個DNA分子片段，所以一個堿基對替換可能引起兩種蛋白發生改變，C正確；D、圖中基因D的堿基序列中包含了基因E的起始到基因E的終止，由此看出基因發生了重疊，這樣就增大了遺傳信息儲存的容量，也能經濟地利用DNA的遺傳信息量，D正確。故選B。【點睛】本題考查了噬菌體的遺傳物質特殊的特殊情況，分析清楚噬菌體的基因結構是解題的關鍵。3、B【解析】

成熟的植物細胞有一大液泡，液泡中有細胞液，當細胞液的濃度小于外界溶液的濃度時，細胞液中的水分就透過原生質層進入到外界溶液中，由于原生質層比細胞壁的伸縮性大，當細胞不斷失水時，液泡逐漸縮小，原生質層就會與細胞壁逐漸分離開來，既發生了質壁分離；當細胞液的濃度大于外界溶液的濃度時，外界溶液中的水分就透過原生質層進入到細胞液中，液泡逐漸變大，整個原生質層就會慢慢地恢復成原來的狀態，既發生了質壁分離復原。【詳解】A、成熟的植物細胞在適宜濃度的蔗糖溶液中可發生質壁分離，但是蔗糖分子不能進入植物細胞，因此其不能自動發生質壁分離復原，A錯誤；B、觀察洋蔥鱗片葉外表皮細胞時，可觀察到細胞中紫色的大液泡，同時還能觀察到質膜及其以內部分緊貼著細胞壁，B正確；C、用黑藻葉片觀察質壁分離時，細胞質中葉綠體的存在會使得原生質層具有一定的顏色，便于實驗現象的觀察，C錯誤；D、用龍膽紫染色后的洋蔥根尖成熟區的細胞已經死亡，不能發生質壁分離，D錯誤。故選B。4、B【解析】

各種細胞器的結構、功能：細胞器分布形態結構功能線粒體動植物細胞雙層膜結構有氧呼吸的主要場所，細胞的“動力車間”葉綠體植物葉肉細胞雙層膜結構植物細胞進行光合作用的場所；植物細胞的“養料制造車間”和“能量轉換站”。內質網動植物細胞單層膜形成的網狀結構細胞內蛋白質的合成和加工，以及脂質合成的“車間”高爾基體動植物細胞單層膜構成的囊狀結構對來自內質網的蛋白質進行加工、分類和包裝的“車間”及“發送站”（動物細胞高爾基體與分泌有關；植物則參與細胞壁形成）核糖體動植物細胞無膜結構，有的附著在內質網上，有的游離在細胞質中合成蛋白質的場所，“生產蛋白質的機器”溶酶體動植物細胞單層膜形成的泡狀結構“消化車間”，內含多種水解酶，能分解衰老、損傷的細胞器，吞噬并且殺死侵入細胞的病毒和細菌。液泡成熟植物細胞單層膜形成的泡狀結構；內含細胞液（有機酸、糖類、無機鹽、色素和蛋白質等）調節植物細胞內的環境，充盈的液泡使植物細胞保持堅挺中心體動物或某些低等植物細胞無膜結構；由兩個互相垂直的中心粒及其周圍物質組成與細胞的有絲分裂有關【詳解】A、CO2可以在植物細胞無氧呼吸過程中產生，場所是細胞質基質，A錯誤；B、肽鏈的形成在核糖體上完成，B正確；C、RNA的合成主要在細胞核中，C錯誤；D、葡萄糖的分解發生在細胞質基質中，D錯誤。故選B。【點睛】此題考查細胞中幾種重要代謝活動的場所，側重考查理解能力。5、D【解析】

人體的防衛功能（三道防線）：

第一道防線是由皮膚和黏膜構成的，他們不僅能夠阻擋病原體侵入人體，而且它們的分泌物（如乳酸、脂肪酸、胃酸和酶等）還有殺菌的作用。

第二道防線是體液中的殺菌物質——溶菌酶和吞噬細胞。第三道防線主要由免疫器官（扁桃體、淋巴結、胸腺、骨髓、和脾臟等）和免疫細胞（淋巴細胞、吞噬細胞等）借助血液循環和淋巴循環而組成的。【詳解】A、有一些致病細菌如麻風桿菌、結核桿菌等，是寄生在宿主細胞內的，而抗體不能進入宿主細胞，消滅這些病原體要靠細胞免疫，A錯誤；B、HIV最初侵入人體時，免疫系統可以摧毀大多數病毒，在一定時間內T細胞數量會增加，大約一年后，HIV濃度增加，T細胞數量減少，并伴隨一些癥狀出現如淋巴結腫大等，B錯誤；C、B細胞和T細胞都在骨髓中產生，前者在骨髓成熟，后者在胸腺中發育成熟，C錯誤；D、體液免疫和細胞免疫的二次免疫應答都是在特定抗原的刺激下，記憶細胞迅速增殖分化，形成大量的漿細胞或效應T細胞并起作用，D正確。故選D。【點睛】抗體在內環境中起作用，不能進入細胞內發揮作用。6、A【解析】

分析圖示：污水排放進入河流，在該河的ab段，溶解氧大量降低，此時細菌大量繁殖，分解污水中的有機物，溶解氧大量消耗；bc段，藻類大量繁殖，消耗有機物，通過光合作用釋放O2，細菌數量下降，因而對溶解氧的消耗量減少，水中溶解氧含量逐漸恢復。分析表格數據，魚攝入的能量（468KJ）=魚糞便里的能量（228KJ）+魚同化的能量（240KJ），魚同化的能量（240KJ）=魚呼吸作用散失的能量（163KJ）+魚用于生長、發育和繁殖的能量（77KJ），故①代表魚用于生長、發育和繁殖的能量。【詳解】A、調查土壤小動物豐富度的方法是取樣器取樣法，計數的方法是目測估計法或記名計算法，A錯誤；B、在該河的ab段，細菌大量繁殖，分解污水中的有機物產生大量無機鹽，有利于b點后藻類的大量繁殖，B正確；C、攝入量=同化量+糞便中能量，故魚的同化能量=魚攝入的能量（468KJ）-魚糞便里的能量（228KJ）=240KJ，C正確；D、據分析可知，表中①表示儲存在魚的有機物中用于生長、發育和繁殖等生命活動的能量，D正確。故選A。7、B【解析】

肺炎雙球菌體外轉化實驗與噬菌體侵染細菌實驗的比較：肺炎雙球菌體外轉化實驗噬菌體侵染細菌實驗不同點方法不同直接分離：分離S型細菌的DNA、多糖、蛋白質等，分別與R型菌混合培養同位素標記：分別用32P和35S標記DNA和蛋白質結論不同證明DNA是遺傳物質，蛋白質不是遺傳物質證明DNA是遺傳物質，不能證明蛋白質不是遺傳物質（因蛋白質沒有進入細菌體內）相同點①均使DNA和蛋白質區分開，單獨處理，觀察它們各自的作用；②都遵循了對照原則；③都能證明DNA是遺傳物質，但都不能證明DNA是主要的遺傳物質【詳解】A、將加熱殺死的S型細菌與R型活菌混合后注射到小鼠體內，小鼠體內的S型細菌一部分是由S型細菌轉化而來，一部分是由轉化后的R型細菌分裂而來，A錯誤；B、將S型細菌的DNA、蛋白質、多糖等物質分別與R型活菌混合培養，培養基中均有R型菌，B正確；C、赫爾希和蔡斯的實驗中，離心后細菌主要存在于沉淀物中，新形成的噬菌體都不含35S，C錯誤；D、用B型TMV（煙草花葉病毒）的RNA和A型TMV的蛋白質重組而成的病毒感染煙草，會得到B型TMV一種病毒，D錯誤。故選B。8、C【解析】

1、酶是由活細胞產生的具有催化活性的有機物，其中大部分是蛋白質、少量是RNA。2、酶的特性①高效性：酶的催化效率大約是無機催化劑的107～1013倍；②專一性：每一種酶只能催化一種或者一類化學反應；③酶的作用條件較溫和：在最適宜的溫度和pH條件下，酶的活性最高；溫度和pH偏高或偏低，酶的活性都會明顯降低。【詳解】A、淀粉酶溶液濃度適當降低，酶促反應的速率降低，因此需要延長反應時間，才能保持3號顯色結果不變，A正確；B、據表可知，該實驗的自變量為酶的種類和底物的種類，新鮮唾液淀粉酶濃度高，需要經過一定倍數的稀釋處理，B正確；C、本實驗研究的是酶的專一性特點，不是研究研究溫度對酶活性的影響，不需要分別對底物溶液與酶溶液進行保溫處理，C錯誤；D、蔗糖酶不能水解淀粉，1號試管和5號試管的結果應該相同，則若試管1號無陽性反應而5號有陽性反應，造成這種差異的可能原因是淀粉不純，D正確。故選C。【點睛】本題綜合考查實驗設計的基本技能，探究酶的專一性及影響酶活性因素時，應遵循對照性原則、科學性原則和單一變量原則，難度適中。二、非選擇題9、堿基對的排列順序不同BbXAYBb、bb【解析】

對有斑與無斑這一對相對性狀進行分析，由題意可知，基因型BB表現為有斑，基因型bb表現為無斑，基因型Bb在雌、雄果蠅中的表現型不同。有斑雌果蠅與有斑雄果蠅進行雜交，子代雌果蠅中無斑∶有斑=3∶1，子代雄果蠅中有斑無斑=3∶1，說明雜合子Bb在雌果蠅中表現為無斑，在雄果蠅中表現為有斑，親代無斑雌果蠅的基因型為Bb，親代有斑雄果蠅的基因型為Bb。對紅眼與白眼這一對相對性狀進行分析，紅眼雌果蠅與紅眼雄果蠅進行雜交，子代雌果蠅全為紅眼，子代雄果蠅中紅眼∶白眼=1∶1，說明紅眼為顯性性狀，白眼為隱性性狀，等位基因A、a位于X染色體上，親代紅眼雌果蠅的基因型為XAXa，親代紅眼雄果蠅的基因型為XAY。【詳解】（1）基因中堿基對的排列順序代表遺傳信息，因此等位基因A和a的本質區別是堿基對的排列順序不同。（2）由分析可知，控制腹部有斑與無斑B、b基因位于常染色體，基因型BB表現為有斑，基因型bb表現為無斑，基因型Bb在雌、雄果蠅中的表現型不同。雜合子Bb在雌果蠅中表現為無斑，在雄果蠅中表現為有斑，親代無斑雌果蠅的基因型為Bb，親代有斑雄果蠅的基因型為Bb，若只考慮果蠅腹部斑紋性狀，則在雌果蠅中表現為無斑的基因型為Bb和bb；控制眼色A、a基因位于X染色體上，紅眼為顯性性狀，白眼為隱性性狀，根據子代的表現型及比例可知，親代紅眼雄果蠅的基因型為XAY，故親代有斑紅眼（♂）的基因型為BbXAY。（3）根據題意，若想確定F1中有斑果蠅的基因型，現從F1個體中選擇有斑親本進行雜交實驗，根據以上分析可知，基因型BB表現為有斑，而基因型Bb在雌果蠅中表現為無斑，在雄果蠅中表現為有斑。①若F1中的有斑雄果蠅的基因型為BB，則雜交后代雌果蠅均為有斑（BB）；②若F1中的有斑雄果蠅的基因型為Bb，則雜交后代雌果蠅出現了無斑（Bb、bb）。故遺傳圖解分別為：【點睛】本題考查遺傳定律的知識點，要求學生掌握基因分離定律的實質和應用，把握伴性遺傳的特點和應用，能夠根據親代雜交的實驗的結果表格中的數據進行分析判斷，將每對性狀單獨分析，根據子代的表現型及比例判斷顯隱性及基因在染色體上的位置，進而推導相關個體的基因型，利用所學的基因分離定律和伴性遺傳的知識點解決問題，這是該題考查的重點。10、pH冷空氣（壓力為）100kPa、（溫度為）121℃50℃a、c、d工業廢甲醇無40【解析】

1、微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。2、分析題圖：①稱量土樣，里面含有需要分離的酵母菌；②表示梯度稀釋和涂布平板；③④表示平板劃線法，進行純化培養；⑤表示擴大培養，獲得更多的酵母菌。【詳解】（1）配制培養基時，按照培養基配方準確稱量、溶化，調節培養基的pH，及時對培養基進行分裝，高壓蒸汽滅菌。在加熱排除高壓鍋內原有的冷空氣后，將高壓鍋密閉，繼續加熱，通常在（壓力為）100kPa、（溫度為）121℃的條件下，維持15-30min，可達到良好的滅菌效果。（2）倒平板需要將培養基冷卻至50℃進行。（3）a、接種針、接種環使用前都必須滅菌，做到無菌操作，a正確；b、挑取菌落時，應挑取多個菌落，分別測定培養液中，而不是細胞內甲醇的含量，b錯誤；c、劃線時應避免劃破培養基表面，否則大量酵母菌聚集，不能形成正常菌落，c正確；d、第二區域以后的劃線區域的菌種來源于上一區域的末端，所以第二區以后的劃線起始端要與上一區的劃線的末端相連接，并且最后一區的劃線末端不能與第一區的劃線相連，d正確，以便于分離菌落。故選acd。（4）本實驗的目的是分離出可利用工業廢甲醇的酵母菌，所以應該以甲醇作為碳源，活細胞膜具有選擇透過性，經等體積臺盼藍染液染色，無色細胞才計數；為監測酵母的活細胞密度，將發酵液稀釋1000倍后，經等體積臺盼藍染液染色，用25×16型血細胞計數板計數5個中格中的細胞數，達到每毫升4×109個活細胞的預期密度，則n÷80×400÷（0.1×103）×2000=4×109，則5個中方格中無色酵母菌不少于40。【點睛】本題主要考查對食用菌菌種擴大培養并保存的過程中涉及的培養基配制、滅菌及菌種轉移和保藏的一些基礎知識，考生需注意歸納總結，才能減少犯錯。11、中性或微堿性充分燃燒層平板劃線法和稀釋涂布平板培養物的純度大小、形狀、顏色稀釋涂布平板法顯微鏡直接計數估計【解析】

統計細菌數量的方法有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計數，在統計菌落數目時，采用稀釋涂布平板法來培養細菌。當樣品的稀釋度足夠高時培養基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個細菌，但菌落數往往比活菌的試劑數目低，為了保證結果準確，一般選擇菌落數在30-300的平板進行計數。另一種方法是直接計數法，這種方法要借助顯微鏡，且統計的數目也包括死亡的細菌。【詳解】（1）微生物生命活動需要一定的條件，不同的微生物需要不同的培養溫度和pH，細菌生活的溫度一般在30~37℃，pH調至中性或微堿性，霉菌一般在25~28℃，pH調至酸性培養。接種時，對接種環等金屬用具通常用灼燒滅菌法