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文檔簡介
動物機能學實驗2編者:陳小軍實驗內容實驗一影響藥物作用的因素實驗二藥物代謝動力學實驗實驗三處方與藥物的配伍禁忌實驗四中毒與解救試驗實驗五藥物對離體腸的影響實驗六抗微生物藥物的體外抑菌實驗實驗七生物堿的提取及其藥敏實驗實驗八藥物對離體心臟的影響實驗六、抗菌藥物的體外抑菌實驗
【實驗目的】
掌握藥敏試驗的方法,了解藥物對常見菌的作用。下一張
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耐藥性抗菌作用防治作用與不良反應藥動學過程抗病力致病力【實驗原理】下一張
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【基本原理】抗菌活性:是指抗菌藥抑制或殺滅病原微生物的能力。兩種測定方法:體外與體內(化學治療實驗);評價指標:
(1)最低抑菌濃度(MIC):
能夠抑制培養基中細菌生長的最低濃度。
(2)最低殺菌濃度(MBC):能夠殺滅培養基中細菌的最低濃度。意義:體外抗菌試驗對臨床用藥具有參考價值。鑒定新藥是否具有抗菌活性。下一張
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0.500.50.50.50.50.50.50.50.5葡萄球菌液(ml)棄1111111111青霉素(ml)1111111111牛肉膏湯(ml)10987654321
試管號下一張
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1-8,10管各加入培養18h并用牛肉膏湯稀釋至5X107~108cfu/ml的金黃色葡萄球菌菌液0.5ml。放入37℃培養箱內培養24h后,取出觀察細菌生長情況。以能抑制細菌生長的最小濃度為青霉素對該細菌的最低抑制濃度(MIC)。結果記錄于下表:下一張
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管號12345678910稀釋倍數11/21/41/81/161/321/641/1281/2560稀釋濃度(u/ml)12864321684210.5-金色葡萄球菌
記錄實驗結果下一張
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二、紙片法
以滅菌小棉簽取金黃色葡萄球菌液(每ml約含3億個細菌),注意不宜蘸取過多,以剛浸濕整個棉簽為度,輕輕地從四個不同方向平行交叉劃線,使菌液均勻涂布于整個瓊脂平板上。同樣方法,也可制作大腸桿菌平板備用。
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二、紙片法
取已經制備好的6種藥敏片:青霉素20000μ/ml、鏈霉素、多西環素、10%磺胺二甲嘧啶鈉,10%恩諾沙星,碘酒2.5%,放置在已接種細菌的瓊脂平板表面的不同區域。為了位置間隔準確,最好事先在平皿底用蠟筆作上記號。
將培養皿置37℃培養24h,觀察紙片周圍有無抑菌環,并測量抑菌圈的直徑,比較各藥的抗菌效力。樣例如下圖:下一張
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細菌青霉素鏈霉素磺氨嘧啶鈉四環素金葡菌鏈球菌大腸桿菌
實驗結果記錄:抑菌直徑(mm)下一張
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藥物沙門氏桿菌【注意事項】1.接種細菌時要在無菌條件下均勻涂抹;2.用試管二倍稀釋法測MIC值,稀釋時注意稀釋的順序;3.藥敏片之間要間隔適當距離,以免抑菌圈出現交叉。4.四人一組,紙片法每人一個平皿,作四種藥物對一種菌的作用,同組每人所接菌種不同,結果記錄時將本組結果綜合。
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【思考題】
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