藥品微生物限度與無菌檢查編輯ppt風險管理風險調查/評估微生物實驗室技術能力藥品微生物控制風險管理、風險調查/評估編輯ppt藥品微生物檢驗的過程控制編輯ppt環境保證培養基保證無菌性檢查靈敏度檢查有效的方法方法驗證SOP操作有效的結果可靠的結論結果判斷過程控制LuzhouInstitutesforFoodandDrugControlUSP35部分章節《中國藥典》2015年版<51>AntimicrobialEffectivenessTesting抑菌效力檢查法<55>BiologicalIndicators-ResistancePerformanceTests生物指示劑抗性檢查法<61>MicrobiologicalExaminationofNonsterileProducts:MicrobialEnumerationTests非無菌產品微生物檢查：微生物計數法<62>MicrobiologicalExaminationofNonsterileProducts:TestsforSpecifiedMicroorganisms非無菌產品微生物檢查：控制菌檢查法<1111>MicrobiologicalAttributesofNonsterilePharmaceuticalProduct非無菌藥品微生物限度標準<63>MycoplasmaTests支原體檢查法<71>SterilityTests無菌檢查法<1035>BiologicalIndicatorsforSterilization滅菌用生物指示劑指導原則<1112>AplicationofWaterActivityDeterminationtoNonsterilePharmaceuticalProducts水活度檢查法用于非無菌藥品微生物評價<1113>MicrobialCharacterization,Identification,andStrainTyping微生物鑒定指導原則<1116>MicrobiologicalEvalutionofCleanRoomsandOtherControlledEnvironments藥品潔凈實驗室微生物監測和控制指導原則<1117>MicrobiologicalBestLaboratoryPractices藥品微生物實驗室質量管理指導原則<1208>SterilityTesting-ValidationofIsolatorSystems無菌檢查用隔離器系統驗證指導原則<1211>SterilizationandSterilityAssuranceofCompendialArticles滅菌法<1223>ValidationofAlternativeMicrobiologicalMethods藥品微生物檢驗替代方法驗證指導原則/非無菌藥品微生物限度檢測指導原則/（日本藥典收載）中藥飲片微生物限度檢查法？編輯ppt藥品微生物檢驗的過程控制環境保證培養基保證無菌性檢查靈敏度檢查有效的方法方法驗證SOP操作有效的結果可靠的結論結果判斷無菌檢查用隔離系統驗證指導原那么藥品微生物實驗室質量管理指導原那么藥品潔凈實驗室微生物檢測和控制指導原那么微生物鑒定指導原那么藥品微生物檢驗替代方法驗證指導原那么對照培養基編輯pptal

Institutes

forFood

andDrug

Control案例陽性結果與玻璃安瓿外表采樣菌高度相似Nation編輯pptLuzhouInstitutesforFoodandDr無菌檢查過程微生物控制

空氣微生物浮游菌沉降菌外表微生物樣品包裝外表操作人員手部編輯ppt④易折方式影響折斷力色環：通過在瓶頸噴涂與玻璃膨脹系數不同的色釉產生應力，從而使斷面平整⑤灌裝工藝落后造成折斷力差為防止灌裝中安瓿斷頭安瓿折斷后，斷面應平整LuzhouInstitutesforFoodandDrugControl國家藥用包裝容器〔材料〕標準YBB00332002點刻痕易折玻璃安瓿點刻痕易折安瓿的色點應標記在刻痕的上方中心與中心線的偏差不得過±1.0mm①刻痕工藝控制不好深淺、長短、上下位置不一色點和刻痕位置偏離②規格尺寸不標準瓶身外徑精度不夠刻痕不易控制瓶頸壁厚不均勻折斷后斷面不平整③玻璃材質不佳低硼硅玻璃：48.6%中性硼硅玻璃：7.7%我國90%以上低硼硅玻璃編輯ppt玻璃安瓿外表消毒方案比較編輯ppt? 殺孢子劑〔過氧乙酸〕噴灑后立即〔3min、5min、10min〕用75%乙醇鈍化，再用濕棉簽擦拭取樣? 酒精燈過火1秒鐘〔3秒鐘、5秒鐘、10秒鐘〕后直接用濕棉簽擦拭取樣表面消毒方案作用時間殘留菌落數菌屬類型殺孢子劑立即2cfuBacillus3min0cfu/5min0cfu/10min0cfu/棉簽擦拭&過火1秒鐘4cfuBacillus、Brevibacillus3秒鐘10cfuBacillus、Paenibacillus、Brevibacillus5秒鐘0cfu/10秒鐘0cfu/微生物檢驗的過程控制編輯ppt環境保證培養基保證無菌性檢查靈敏度檢查有效的方法方法驗證SOP操作有效的結果可靠的結論結果判斷過程控制微生物實驗室工作流程編輯ppt環境保障編輯pptWHOGPML各區域等級微生物限度&無菌檢查環境要求編輯ppt無菌檢查：

環境潔凈度B級背景下的局部A級潔凈度的單向流空氣區域內或隔離系統中

B+A or 隔離系統?中國藥典2021版?萬級下的百級?中國藥典2021版?藥品潔凈實驗室微生物監測和控制指導原那么無菌檢查用隔離系統驗證指導原那么92059206微生物限度檢查：受控潔凈環境下的局部潔凈度不低于B級的單向流空氣區域內D+BSCⅡ生物平安柜潔凈室/臺工作原理編輯ppt層流Laminarflow混流Conventional(mixedflow)cleanroomLuzhouInstitutesforFoodandDrugControl相關潔凈標準比較ISO14644討論了潔凈室和受控環境的設計與建設按ISO14644的分類是建立在環境中每單位體積的總體粒子數的根底上分類不區分非生物粒子或生物粒子編輯ppt相關潔凈標準比較編輯ppt2021版GMP潔凈度級別標準“靜態〞百級，“動態〞萬級相關潔凈標準比較編輯ppt2021版建議的潔凈實驗室環境監測頻次及工程按ISO14644的定級是建立在環境中每單位體積的總體粒子數的根底上定級不區分非生物粒子或生物粒子受控區域潔凈級別采樣頻次檢測項目粒子相鄰外部每半年粒子、浮游菌、沉降菌、表面菌粒子B級每周粒子、浮游菌、沉降菌、表面菌粒子D級每半年粒子、浮游菌、沉降菌、表面菌LuzhouInstitutesforFoodandDrugC“B級〞與“C級〞的異同ontrol編輯ppt懸浮粒子與環境微生物編輯ppt非生物粒子數量和活的微生物濃度之間的關系在科學上未達成絕對的一致當操作人員是粒子的來源時，以下的結論是成立的，即潔凈室中的粒子越少，空氣中微生物存在的可能性就越小。實驗設備運行時大量產生的粒子污染和人員產生的粒子污染之間是無法明確區分的大量的藥物除了微生物以外還有粒子限度的要求幾乎肯定的是，局部懸浮粒子與微生物有關因此，潔凈室監測應包括微生物與粒子數兩方面潔凈室使用次數與浮游菌數關系編輯ppt416#浮游菌數201月 2月 3月 4月 5月 6月 7月 8月 9月 10月11月12月681016141213#使用次數13#浮游菌數16#使用次數近8年無菌室C級浮游菌高限圖編輯ppt9080706050403020100200720212021202120212021202120217月8月9月硬件差異軟件差異潔凈區微生物監測水平編輯pptUSP35＜15cfu信息性，非標準性監控基于風險評估編輯ppt120100806040200法規標準OOT行動限OOE警戒限常規波動WHOgood

practices

for

pharmaceutical

microbiology

laboratoriesAppendix

4Examples

ofequipment

qualification

and

monitoring環境微生物歸屬編輯pptLuzhouInstitutes

forFood

andDrug

Control欣弗事件欣弗培養物潔凈環境常見菌：頭狀葡萄球菌〔Staphylococcuscapitis〕溶血葡萄球菌〔Staphylococcushaemolyticus〕緩癥鏈球菌〔Streptococcusmitis〕科氏葡萄球菌〔Staphylococcuscohnii〕藤黃微球菌〔Micrococcusluteus〕山羊葡萄球菌〔Staphylococcuscaprae〕肺炎克雷伯巨大芽孢桿菌粘質沙雷菌×奪命的欣弗編號鑒定結果0206L1、肺炎克雷伯（K.pneumoniae

）；2、粘質沙雷菌（S.marcescens）0206G1、肺炎克雷伯（K.pneumoniae

）；2、粘質沙雷菌（S.marcescens）298L；298G1、肺炎克雷伯（K.

pneumoniae

）；2、粘質沙雷菌（S.marcescens）303L；303G1、肺炎克雷伯（K.pneumoniae

）；2、陰溝腸桿菌（Enter.

cloacae）305L；305G1、肺炎克雷伯（K.

pneumoniae

）；2、粘質沙雷菌（S.marcescens）306L/6G肺炎克雷伯（K.pneumoniae

）307G肺炎克雷伯（K.pneumoniae

）308L糞產堿桿菌（Al.faecalis）309L糞產堿桿菌（Al.faecalis）304G嗜麥芽寡養單胞菌（S.maltophilia）編輯ppt不同生物平安水平對設施的要求編輯ppt不同保護類型及生物平安柜的選擇編輯pptI級平安柜適用于一級，二級和三級平安實驗室，II級和III級平安柜那么適用于所有級別平安實驗室。保護類型生物安全柜的選擇個體防護，針對生物危險等級1～3級微生物Ⅰ級、Ⅱ級生物安全柜個體防護，針對生物危險等級4級微生物，手套箱型實驗室Ⅲ級生物安全柜個體防護，針對生物危險等級4級微生物，防護服型實驗室Ⅰ級、Ⅱ級生物安全柜實驗對象保護Ⅱ級生物安全柜，柜內氣流是層流的Ⅲ級生物安全柜少量揮發性放射性核素∕化學品的防護Ⅱ級B1型生物安全柜，外排風式Ⅱ級A2型生物安全柜揮發性放射性核素∕化學品的防護Ⅰ級、Ⅱ級B2型、Ⅲ級生物安全柜LuzhouInstitutesforFoodandDrugControlClassI生物平安柜適用于樣品不需保護的工作1、從前窗口吸入的負壓氣流，用以保護人員的平安；2、排出的氣流經HEPA過濾器過濾，用以保護環境，不受污染；3、對受試樣本，不能提供切實可靠的保護。編輯ppt無外接風道 有外接風道ContaminatedairundernegativepressureContaminatedairunderpositivepressureHEPA-filteredairRoomairLuzhouInstitutesforFoodandDrugControlII級A2型生物平安柜 前窗進風氣流平均流速≥0.50m/s生物平安柜排風管道接口與建筑物排風系統相連接可以從事少量的的揮發性有毒化學物質或放射性的工作。編輯pptLuzhouInstitutesforFoodandDrugControl編輯ppt在生物平安柜上工作編輯ppt干凈的物品工作臺擺放被污染的區域廢棄物托盤垃圾袋無菌隔離系統與傳統潔凈技術的比照編輯ppt項目消毒/滅菌方法潔凈環境的控制對操作人員的防護物料傳送方式人員進出運行所需能耗誤操作導致的無菌環境污染的風險傳統潔凈技術消毒劑擦拭/熏蒸/紫外線照射等方法受空間等諸多因素影響效果難以驗證易受人員、物料等諸多因素影響，易受污染，難以控制；取決于操作人員自身技術和熟練程度；傳統的傳遞窗，易導致無菌室環境破壞和物料的污染；需復雜的換鞋/工作服更換等步驟帶來額外工作量；高，誤操作可能性大，與操作人員有較大相關性無菌隔離器技術自動氣體滅菌省時省力，氣體分布均勻效果較好，容易驗證；，與外界完全隔離，僅通，過HEPA進行空氣交換并可恒定艙內壓力以阻絕外界污染；安全系數高雙門快速傳遞系統保證在無菌環境中傳遞，無菌保證程度高；僅通穿戴手套/半身工作服即可；低可能性極小Na隔離器2x3-glove

IsotestH2O2溶液被泵入蒸發器液態H2O2→氣態H2O210SAL外表殺滅效率-6tional

Institutes

forFood

andDrug

Control編輯ppt隔離器9206無菌檢查用隔離系統驗證指導原那么1.操作驗證3.滅菌驗證4.滅菌循環驗證2.完整性驗證5.內部潔凈度驗證6.儀器儀表驗證編輯pptLuzhouInstitutesforFood

andDrug

Control三種主要設備比較生物安全柜層流柜無菌隔離器人員保護☆☆☆☆☆☆環境要求☆☆☆☆☆☆樣品保護☆☆☆☆☆☆☆處理樣品靈活性☆☆☆☆☆☆操作難度☆☆☆☆☆☆運行維護難度☆☆☆☆☆☆編輯ppt微生物檢驗的過程控制編輯ppt環境保證培養基保證無菌性檢查靈敏度檢查有效的方法方法驗證SOP操作有效的結果可靠的結論結果判斷過程控制ChP無菌檢查培養基與USP、BP的比較編輯ppt硫乙醇酸鹽流體培養基〔FluidThioglycollateMedium〕藥典USPBP中國藥典-2015名稱FluidThioglycollateMedium硫乙醇酸鹽流體培養基FluidThioglycollateMedium硫乙醇酸鹽流體培養基FluidThioglycollateMedium硫乙醇酸鹽流體培養基目的培養需氧、厭氧和微需氧微生物（主要是厭氧菌）培養需氧、厭氧和微需氧微生物（主要是厭氧菌）培養需氧、厭氧微生物培養條件14天于30-35°C及20-25°C配方PancreaticDigestofCasein(胰酪蛋白胨)....................15.0gYeastExtract(酵母浸出粉)..................................5.0gDextrose(葡萄糖)............................................5.5gSodiumChloride(氯化鈉).....................................2.5gL-Cystine(L-胱氨酸).......................................0.5gSodiumThioglycollate(硫乙醇酸鈉)..........................0.5gAgar(瓊脂).................................................0.75gResazurin(刃天青).........................................1.0mgChP無菌檢查培養基與USP、BP的比較編輯ppt大豆胰酪胨培養基(TSB)&改進馬丁培養基藥典USP36BP-2013中國藥典2010版中國藥典2015版名稱TrypticSoyBroth(Soybeancaseindigestmedium)大豆－胰酪胨培養基改良馬丁培養基胰酪大豆胨液體培養基配方胰酪蛋白胨..…………….…..7.0g大豆木瓜蛋白酶消化物………………….3.0g氯化鈉…..…………….…….…5.0g磷酸氫二鉀…....2.5g一水葡萄糖……………….……2.5g蛋白胨……………..5.0g酵母浸出粉…….…2.0g葡萄糖…………....20.0g磷酸氫二鉀………..1.0g硫酸鎂(MgSO4.7H2O)….0.5g胰酪胨?????17.0g大豆木瓜蛋白酶水解物?????????3.0g氯化鈉??????5.0g磷酸氫二鉀?????2.5g葡萄糖/無水葡萄糖???????2.5g/2.3g目的支持廣泛微生物的生長,包括需氧菌專性和兼性厭氧菌、真菌（主要是需氧菌）、用于培養真菌支持廣泛微生物的生長,包括需氧菌、專性和兼性厭氧菌、真菌（主要是需氧菌）培養條件14天于30-35°C及20-25°C14天于20-25°C14天于30-35°C及20-25°C微生物實驗室常用菌株編輯ppt銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)[CMCC(B)10104]大腸埃希菌〔Escherichiacoli〕[CMCC(B)44102]金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)[CMCC(B)26003]生孢梭菌(Clostridiumsporogenes)[CMCC(B)64941]枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis) G+芽孢桿菌[CMCC(B)63501]G-桿菌G+球菌酵母菌霉菌兼性需氧菌專性厭氧菌專性需氧菌白色念珠菌(Candidaalbicans)[CMCC(F)98001]黑曲霉(Aspergillusniger)[CMCC(F)98003]LuzhouInstitutesforFoodandDrugControl在硫乙中生長差異僅在厭氧層生長需氧層厭氧層均生長

銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)僅在需氧層生長[CMCC(B)10104]大腸埃希菌〔Escherichiacoli〕[CMCC(B)44102]

金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)[CMCC(B)26003]

生孢梭菌(Clostridiumsporogenes)[CMCC(B)64941]

枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)[CMCC(B)63501]編輯ppt方法適用性內容修訂編輯ppt微生物計數定義變化編輯ppt修訂前修訂后內容細菌數—營養瓊脂霉菌和酵母菌數—玫瑰紅鈉瓊脂（1）需氧菌總數（TAMC）。（2）霉菌和酵母菌總數（TYMC）。（3）需氧菌總數：生長在胰酪大豆胨瓊脂（TSA）上所有菌落(包括霉菌和酵母菌)。（4）霉菌和酵母菌總數：一般指生長在沙氏葡萄糖瓊脂（SDA）上的所有菌落(包括細菌)。如果由于細菌的生長而使霉菌和酵母菌的計數結果不符合微生物限度要求，可使用含有抗生素的SDA重新計數。對照培養基編輯ppt培養基質量控制：USP—之前驗證過的中國藥典—對照培養基單劑量免稱量獨立包裝專利號：ZL202120218836.8回收率待測培養基平均菌落數〔cfu〕*100%對照培養基平均菌落數〔cfu〕50%~200%LuzhouInstitutesforFoodandDrugControl培養基適用性檢查范圍液體、固體培養基加菌量不大于100cfu培養溫度胰酪大豆胨瓊脂：30~35℃培養；胰酪大豆胨肉湯：30~35℃培養；沙氏葡萄糖瓊脂：20~25℃培養。培養時間細菌不大于72h，真菌不大于5天?？山邮軜藴使腆w培養基：50％~200％（0.5~2）液體培養基：生長良好。編輯pptLuzhouInstitutesforFoodandDrugControl培養基適用性檢查培養基名稱胰酪大豆胨肉湯（TSB）無菌性檢查取已滅菌的TSB，于30-35℃培養不少于3天，培養基應澄清。試驗用菌株枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌接種方法分別接種各試驗用菌懸液于該培養基中，接種量不大于100cfu，搖勻，培養。適用性檢查接種試驗用菌株后，30-35℃培養不超過72小時，與對照培養基比較，試驗菌應生長良好。（建議：培養基呈混濁的液體，或劃線于相應的分離平板上，培養后呈現典型菌落）備注：該培養基同時用于稀釋液的制備和控制菌檢查時，需要考慮同時滿足計數和控制菌檢查培養基適用性檢查控制要求。編輯pptLuzhouInstitutesforFoodandDrugControl培養基適用性檢查培養基名稱胰酪大豆胨瓊脂（TSA）無菌性檢查取已滅菌TSA注皿，于30-35℃培養3~5天，應無菌落生長。試驗用菌種枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌、黑曲霉接種方法涂布法：表面接種不大于100cfu試驗用菌懸液于TSA平板表面；傾注法：接種不大于100cfu試驗用菌懸液于無菌平皿，傾注該培養基，輕輕搖勻。適用性檢查枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌于30-35℃培養不超過3天；白色念珠菌、黑曲霉于30-35℃培養不超過5天。與對照培養基比較，恢復率在50％~200％之間。編輯pptLuzhouInstitutesforFoodandDrugControl培養基適用性檢查培養基名稱沙氏葡萄糖瓊脂（SDA）無菌性檢查取已滅菌的SDA注皿，于20-25℃培養5~7天，應無菌落生長。試驗用菌種白色念珠菌、黑曲霉接種方法涂布法：表面接種不大于100cfu試驗用菌懸液于SDA平板表面。傾注法：接種不大于100cfu試驗用菌懸液于無菌平皿中,傾注該培養基，輕輕搖勻。適用性檢查白色念珠菌、黑曲霉于20-25℃培養不大于5天。與對照培養基比較，恢復率在50％~200％之間。備注：如該培養基用于控制菌白色念珠菌的檢查時，同時需要滿足控制菌項下培養基適用性檢查要求。編輯pptLuzhouInstitutesforFoodandDrugControl培養基適用性檢查培養基名稱沙氏葡萄糖瓊脂+抗生素（當細菌超標引起霉菌和酵母菌總數超標用）無菌性檢查取已滅菌的SDA注皿，于20-25℃培養5~7天，應無菌落生長。試驗用菌種抑菌性檢查：枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌促生長能力：白色念珠菌、黑曲霉常用抗生素1、慶大霉素：廣譜。對G-，G+菌有較好的抗菌作用。2、氯霉素：廣譜。對G-菌作用強；對G+菌作用不及青霉素與四環素。接種方法抑菌性：接種不少于100cfu試驗用菌。促生長能力：接種不大于100cfu試驗用菌。適用性檢查白色念珠菌、黑曲霉于20-25℃培養不大于5天。與對照培養基比較，恢復率在50％~200％之間。枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌應不得生長。編輯pptLuzhouInstitutesforFoodandDrugControl樣品：烏雞白鳳丸烏雞白鳳丸胰酪大豆胨瓊脂培養基玫瑰紅鈉瓊脂培養基疑似菌落做革蘭染色革蘭陽性桿菌不屬于霉菌或酵母菌。將無菌硫酸慶大霉素〔相當于20mg慶大霉素〕胰酪胨大豆瓊脂培養基玫瑰紅鈉瓊脂培養基。編輯pptLuzhouInstitutesforFoodandDrug

Control選擇性培養基適用性控制菌檢查培養基特性試驗菌株大腸菌群乳糖膽鹽發酵培養基促生長能力E.coli乳糖發酵培養基抑制能力S.aureus促生長能力+指示能力E.coliEMB或麥康凱瓊脂促生長能力+指示能力E.coli大腸埃希菌膽鹽乳糖培養基促生長能力E.coliMUG、EMB或麥康凱瓊脂抑制能力S.aureus促生長能力+指示能力E.coli沙門菌營養肉湯培養基促生長能力S

paratyphi

B四硫磺酸鹽亮綠培養基促生長能力S

paratyphi

BDHL或SS瓊脂、EMB或麥康凱瓊脂抑制能力S.aureus促生長能力+指示能力S

paratyphi

B三糖鐵瓊脂指示能力S

paratyphi

B編輯pptLuzhouInstitutesforFoodandDrug

Control選擇性培養基適用性控制菌檢查培養基特性試驗菌株銅綠假單胞菌膽鹽乳糖培養基促生長能力P.aeruginosa溴化十六烷基三甲銨瓊脂抑制能力S.aureus促生長能力P.aeruginosa綠膿菌素測定用培養基抑制能力E.coli促生長能力+指示能力P.aeruginosa金黃色葡萄球菌亞碲酸鹽肉湯培養基促生長能力S.aureus甘露醇高鹽瓊脂或卵黃氯化鈉瓊脂抑制能力E.coli促生長能力+指示能力S.aureus抑制能力E.coli梭菌梭菌增菌培養基促生長能力Cl.

sporogenes哥倫比亞瓊脂促生長能力Cl.

sporogenes白色念珠菌沙氏葡萄糖肉湯促生長能力C.albicans沙氏葡萄糖瓊脂促生長能力+指示能力C.albicans念珠菌顯色培養基促生長能力+指示能力C.albicans1%聚山梨酯80-玉米瓊脂培養基抑制能力E.coli促生長能力+指示能力C.albicans編輯ppt微生物檢驗的過程控制編輯ppt環境保證培養基保證無菌性檢查靈敏度檢查有效的方法方法驗證SOP操作有效的結果可靠的結論結果判斷過程控制檢測方法驗證編輯ppt標準〔藥典〕檢測方法實驗室在進行常規檢測前應證明該實驗室可以滿足標準檢測方法中的某些性能指標〔即方法確認〕，并證明某一方法適用于某產品的檢測〔方法適用性包括陽性對照和陰性對照〕。新建方法 方法驗證與方法適用性藥典方法〔其他成熟方法〕方法轉移與方法確認〔局部菌株的驗證〕有案可查、溯源性；建立實驗室自身的方法依據體系其他準確度、精密度、專屬性、檢測限、定量限、線性、粗放性驗證的一般程序與環節編輯ppt需前處理不需前處理無抑菌作用樣品檢查①驗證前處理方法對污染菌生長、檢出的影響。③驗證抑菌活性去除的有效性，以及去除方法對污染菌生長、檢出的影響。②可以通過驗證實驗判斷藥品微生物檢查方法驗證的一般程序與環節利用供試品與微生物的差異，降低或消除供試品的影響通過模擬實驗對降低或消除效果加以檢驗。有抑菌作用去除抑菌作用吐溫80結構編輯ppt乳化劑降低了混合體系中各組分的界面張力，并在微滴外表形成較鞏固的薄膜由于乳化劑給出的電荷而在微滴外表形成雙電層，阻止微滴彼此聚集，而保持均勻的乳狀液。分裝5份9.9ml供試液+

0.1ml金黃色葡萄球菌液+

0.1ml金黃色葡萄球菌液+

0.1ml金黃色葡萄球菌液+

0.1ml銅綠假單胞菌液+

0.1ml枯草芽孢桿菌液+

0.1ml白色念珠菌液+0+.01m.1lm黑l黑曲曲霉霉菌菌液液+

0.1ml銅綠假單胞菌液+

0.1ml金黃色葡萄球菌液+

0.1ml銅綠假單胞菌液+

0.1ml枯草芽孢桿菌液+

0.1ml金黃色葡萄球菌液+

0.1ml銅綠假單胞菌液++00.1.1mml白l白色色念念珠珠菌菌液液++00..11mmll枯枯草草芽芽孢孢桿桿菌菌液液++00.1.m1mll金金黃黃色色葡葡萄萄球球菌菌液液++00..11mmll銅銅綠綠假假單單胞胞菌菌液液根據供試品的理化特性與生物學特性，采取適宜的方法制備適宜的供試液。稀釋度依據樣品特性，質量標準制定計數方法適用性試驗編輯ppt保證平皿中的菌數不大于100cfu微生物檢驗的過程控制編輯ppt環境保證培養基保證無菌性檢查靈敏度檢查有效的方法方法驗證SOP操作有效的結果可靠的結論結果判斷過程控制微生物限度案例編輯ppt某板藍根沖劑，標準為細菌數不得過1000cfu/g，某藥檢所細菌數結論1200cfu/g，送中檢院仲裁。(1)方法適用性合格不合格LuzhouInstituteDrug

Control菌種傳代保藏流程1BioBall3推薦方式2自動稀釋s

forFood

and編輯pptLuzhouInstitutesforFoodandDrugControl試驗用菌株的傳代次數不得超過5代〔從菌種保存中心獲得的冷凍枯燥菌種為第0代〕。代的定義：每接種一次即為一代〔有在新鮮的培養基上生長過程)傳代示意圖：枯燥菌種〔0代〕QCCV1 CV2 CV3液體培養基復蘇〔1代〕工作菌株傳代保藏規程編輯ppt菌種傳代流程S1

S2

S3QCS1S2S3

第二代工作菌懸液冷藏〔零下20℃〕cv1CVcv2

cv3cv4QCCycle1第一代儲藏管凍存〔零下30或70℃〕凍干菌種第二代工作菌斜面冷藏〔2~8℃〕

鑒別cv11cv2cv3cv36Cycle2第二代儲藏管凍存〔零下30或70℃〕QCTSBQC工作菌株傳代保藏流程示意圖編輯ppt。微生物檢驗的過程控制編輯ppt環境保證培養基保證無菌性檢查靈敏度檢查有效的方法方法驗證SOP操作有效的結果可靠的結論結果判斷過程控制實驗操作——物料進場編輯ppt消毒液搽拭物品外外表潔凈傳遞〔風淋、紫外照射〕核心區外圍消毒劑清潔外外表雙層無菌包裝外圍實驗操作——人員進場編輯ppt一更二更LuzhouInstitutesforFood

andDrug

Control硫乙陰性090423馬丁陰性090423馬丁××樣品090423硫乙××樣品090423馬丁××陽性090423硫乙××陽性090423監控平板樣品 沉降菌 手指無菌檢驗框架示意圖編輯pptLuzhouInstitutesfor無菌三針單聯管Food

andDrug

Control編輯ppt實驗過程監控編輯ppt外表監控手部監控環境菌監控無菌程序保障編輯ppt? 無菌檢查樣品前處理分批消毒、實驗〔混合〕→統一消毒，統一實驗? 嚴格遵守外外表消毒程序一般環境酚類〔phenylphenol/tertiaryamylphenol〕→潔凈環境過氧乙酸+75%乙醇〔無菌級〕〔苯式苯酚/三級戊基苯酚〕? 增加過程監控力度外表菌采樣、手部采樣〔每批〕、動態浮游菌采樣〔下風口〕LuzhouInstitutesforFood

andDrug

Control明確標識Paperlabels

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pens.編輯ppt原始記錄編輯ppt樣品信息&方法信息儀器信息&狀態檢驗結論前置方便核驗校對&復核信息前置原始記錄編輯ppt樣品信息一致材料信息&試劑信息檢驗方法描述檢驗結果記錄原始記錄編輯ppt樣品信息一致過程監控信息包括監控方案培養條件培養結果及培養基信息是否啟動偏差調查記錄原始記錄編輯ppt樣品信息環境保障調查儀器運轉環境監控檢驗操作調查培養基、檢驗用具陰性、陽性對照操作細節結果判斷調查微生物檢驗的過程控制編輯ppt環境保證培養基保證無菌性檢查靈敏度檢查有效的方法方法驗證SOP操作有效的結果可靠的結論結果判斷過程控制結果判斷編輯ppt? 陽性〔+〕陰性〔-〕供試品管渾濁，即判不合格除非能充分證明試驗結果無效，即生長的微生物非供試品所含設備，環境的微生物監控結果超標回憶實驗過程，發現污染因素鑒定微生物，確認是操作引入的? 無菌試驗經確認無效，可重試藥品無菌檢驗的溯源性分析編輯ppt藥品微生物實驗室環境/過程微生物的監測藥品的微生物檢測環境/過程細菌與藥品細菌的比較結論產品污染實驗污染污染源排除重試溯源分析整改藥品微生物實驗環境微生物的監測藥品的微生物檢測環境微生物與陽性結果的比較結論保證藥品微生物檢驗結果可靠的有效途徑編輯ppt過程微生物信息的全面性微生物鑒定結果的準確性LuzhouInstitutesforFoodandDrugControl各類常見微生物的菌落特征微生物類別菌落特征單細胞微生物菌絲狀微生物細菌酵母菌放線菌霉菌主要特征細胞形態特征小而均勻、個別有芽孢大而分化細而均勻粗而分化相互關系單個分散或按一定方式排列單個分散或假絲狀絲狀交織絲狀交織菌落含水情況很濕或較濕