1根據國家標準化管理委員會《國家標準化管理委員會關于下達2021年第二素酸乙酯的測定高效液相色譜法》，項目主持單位為貴州省獸藥飼料檢測所。β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯又叫阿樸胡蘿卜素酸乙酯、天然橙7號或阿樸酯標組織中沉積率較高，著色效果顯著高于β-阿樸-8′-胡蘿卜素醛及萬壽菊提取物[2-5]。部分文獻表明，家禽日糧中添加一定量的β家禽機體免疫力，促進雛禽發育[6-9]。β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯廣泛存在于自然界中，主要是青草、紫花苜蓿、-8′-胡蘿卜素酸乙酯純品通常為紅紫色的結晶，分子式為C32H44O2，分子量比例會不同，自然界全反式比例為70%-90%），在正圖1β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯結構式2提高產品競爭力。我國《飼料添加劑品種目錄（2013）》（農業農村部公告第前期調研發現：β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯使用廣泛、添加混亂、檢測標準缺失、養殖者認知匱乏、不利監管等問題。一是禽飼料中使用廣泛。2019年至無飼料中β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯含量檢測推薦性國家標準或行業標準，各級準確測定飼料中β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯含量的標準方法，填補技術空白，有發布有農業農村部行業標準《飼料中斑蝥黃的測定高效液相色譜法》（NY/T劑）的國家推薦標準[18]，尚無飼料中β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯含量檢測的強制含量。楊梅等[21]采用固相萃取技術處理樣品，通過超高效液相色譜-串聯質譜法（UPLC-MS/MS）對禽蛋中的斑蝥黃和進行分離和檢測。章厲劼等[22]參照飼料中β-阿樸-8′-胡蘿卜素醛檢測方法，使用甲醇、正己烷和乙酸乙酯提取飼料中的3高效液相色譜法（HPLC）操作簡便、檢測準確、在實際檢測中的定性和定量要求。本研究擬制定《飼料中β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯的測定高效液相色譜法》，采用水分散試樣，再用無水乙醇和二氯甲烷提取飼料中的β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯，用固相萃取小柱對目標物進行凈化和富集，最后采用反相HPLC法進行分析，用外標法定量試樣中順、反式β-阿樸-8′-標準起草小組，對標準起草工作進行分工，明2021年9月，起草小組系統匯總分析了以前工作過程中廣泛查閱和搜集的國內外相關標準和技術資料，通過主要生產廠家的解β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯開展了標準技術要求中規定項目的實驗室試驗研究工作，制定了飼料中β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯含量測定方法。對試驗數據進行整理、分析，撰寫標準文本意見，共收到20名專家，99條意見。起草小組根據4術研究院、遼寧省農產品及獸藥飼料產品檢20001.4－2015《標準編寫規則第4部分：試驗方法標準》的要求編寫。在標2.2方法試驗條件研究β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯（純度≥99.8%）購自瑞士CaroteNature公司。mL）購自美國Agilent公司。分析純無水乙醇、二氯甲烷、三氯甲烷和光學純高效液相色譜儀配備二極管陣列檢測器（Ultimate3000，美國Thermo美國ThermoScientific公司）、超聲波清洗器（KQ-250D，昆山市超聲儀器有限公司）、超純水儀（Millipore，德國EMDMillipore公司）、萬分之一天平（AB104-S，瑞士MettlerToledo公司）、十萬分之一天平（XSR205DU，瑞士高效液相色譜儀在檢測β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯時，需分別檢測順、反式β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯的峰面積進行計算，參考歐洲飼料添加劑生產商協會5（FEFANA）標準《FEFANATaskForceAnalyticaβ-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯色譜峰面積為反式β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯峰面2.2.3色譜條件的選擇和優化離度符合要求，峰型較好，但后者成本較高，毒性相對較大，因此選用乙腈-甲流動相比例出峰時間（min）峰面積（mAU*min）峰高（mAU）分離度不對稱度理論塔板數來源（95：5）35.29372.871799.542.07飼料中斑蝥黃的測定高效液相色譜法（NY/T2896-2022）超高效液相色譜（90-10）未出峰/////法測定飼料中斑蝥黃和β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯含量方法的研究（95：5）（20：80）16.79313.33767.594383.5037218.74256.830.88飼料中角黃素的高效液相色譜法優化后方法67分別選用WatersSymmetry?C18色譜柱（250mm×4.6mm，粒徑5μm）、89的流速，通過檢測禽配合飼料陽性添加樣品（80mg/kg）色譜圖進行順反β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯分離效果相對較差，因此確定本方法色譜柱柱溫），2.2.4樣品提取條件的選擇和優化因此，試驗以10%β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯飼料添加樣品名稱吸光度質量分數（%）平均值（%）RSD值（%）添加劑10.10020.508添加劑10.10160.509添加劑10.09910.5020.82添加劑10.10040.506添加劑10.10180.5069.94β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯與斑蝥黃理化性質相似，試驗選取標準或文獻中與《超高效液相色譜法測定飼料中斑蝥黃和β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯含量方法β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯與斑蝥黃等常用著色劑在禽飼料中含量總計不能超過表3不同提取方法提取β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯的情況方法來源主要提取步驟回收率（%）結果分析10%β-阿樸GB/T21516-2008飼料中斑蝥黃的測定高效液相色譜法NY/T2896-2022土雞蛋中添加劑斑蝥黃的色譜質譜連用檢（參考文獻）超高效液相色譜法測定飼料中斑蝥黃和β-卜素酸乙酯含量方法的研究（參考文獻）飼料中角黃素的高效液相色譜法測定（參考文獻）準確稱取陽性添加樣品5g于250mL棕色容量瓶中，加入10mL預熱至60℃的水，水浴超聲處理20min。冷卻后，加入100mL無水乙醇和100mL三氯甲烷，搖勻后常溫水浴超聲處理5min，用三氯甲烷定容。準確稱取陽性添加樣品5g于100mL棕色容量水浴中超聲處理5min。冷卻后，加入50mL無水乙醇和30mL二氯甲烷，搖勻后常溫水浴超聲處理20min，用二氯甲烷定容。準確稱取陽性添加樣品5g于100mL棕色容量瓶中，加入50mL乙腈，超聲處理30min。冷卻后用乙腈定容。準確稱取陽性添加樣品2g于50mL離心管中，分別加入水8mL，飽和氯化鈉溶液4mL，0.05%乙酸溶液4ml，搖勻，加入提取劑（甲醇、乙酸乙酯、正己烷，體積比為1:1:1）10mL，渦旋2min，然后與5000r/min離心5分鐘，用滴管吸取上層萃取液于另一個離心管，再加入提取劑10mL進行萃取，重復3次，合并萃取液后，加入2mL無水乙醇，于40℃下氮氣吹干。用甲基叔丁基醚-乙腈(1+9)溶液5.0mL溶解殘余物。準確稱取陽性添加樣品5g于100mL具塞離心管中，加入30mL乙腈和20mL乙腈飽和的正移入分液漏斗中，收集乙腈層，重復1次，合并萃取液后40℃氮吹至2mL，甲醇定容至10mL。88.09.369.78提取試劑比例不適配合飼料，且試劑用量過大較好木質素磺酸鹽進行包被，純乙取。繁瑣較差，且操瑣用二氯甲烷作為主要提取試劑，但更多文獻表明：β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯易溶于三氯甲烷。使用三氯甲烷與二氯甲烷進行對比，分別提取β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯飼料陽性添加樣品（80mg/k），取試劑檢測結果接近，都能夠有效提取飼料中的β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯，但表4二氯甲烷與三氯甲烷提取β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯的情況提取試劑回收率（%）平均回收率（%）二氯甲烷三氯甲烷98.7（2）提取試劑比例優化參照《飼料中斑蝥黃的測定高效液相色譜法》（NY/T2896-2022）中提試驗調整不同提取試劑的比例，分別按步驟檢測β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯飼料），表5不同比例提取試劑提取β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯的情況提取試劑比例回收率（%）平均回收率（%）水-乙醇-二氯甲烷（15:50:35）乙醇-二氯甲烷（50:50）6.916.676.886.696.906.81水-二氯甲烷（15:85）提取溶液分層，無法定容/二氯甲烷（100）7.187.047.167.02結果表明，β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯表面往往進行包被，二氯甲烷直接提法，分別添加不同溫度的水并設置不同超聲溫度，對β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯飼料陽性添加樣品（80mg/kg）進行提取試驗，檢測結果表7不同超聲溫度提取β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯的情況提取溫度(℃)回收率（%）平均回收率（%）4095.795.8表8不同超聲時間提取β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯的情況超聲時間（min）回收率（%）平均回收率（%）082.286.292.686.0594.595.296.395.697.895.998.692.793.798.297.72096.6通過回收率比較不同稱樣質量對檢測結果的影響，檢測結果見表9，結果表明，表9不同稱樣質量提取β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯的情況稱樣質量（g）回收率（%）平均回收率（%）RSD（%）2.597.099.298.852.420.722.233.021.923.324.220.6樣品粉碎細度的選擇表10不同粉碎細度提取β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯的情況粉碎細度（mm）回收率（%）平均回收率（%）RSD（%）0.4252.40.25090.9104.097.8104.2103.05.7部分文獻表明，β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯對光和氧不穩定，為檢測提取條件下光照和氧對飼料中β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯是否存在影響，試驗配制20無明顯影響，不影響飼料中β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯的提取結果，因此無需針 表11β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯在光照和氧條件下穩定性的情況標準品濃度(μg/kg）檢測時間（h）峰面積（mAU*min）RSD（%）20088.290220188.859220288.707720388.767520488.827620588.655920688.68300.2320788.686320888.894820988.82562088.83342089.13822089.04702.2.6凈化方法的選擇和優化氣吹干，乙腈復溶后加水稀釋，過固相萃取柱，β-阿樸-8′-胡在固相萃取柱上，經50%乙腈水溶液淋洗去除雜質，再用乙腈洗脫β-阿樸-8′-胡表12不同填料固相萃取柱對回收率的影響凈化柱種類回收率（%）平均回收率（%）RSD（%）親水親脂平衡固相萃取柱2.4C18固相萃取柱87.094.493.998.592.692.34.5中性氧化鋁固相萃取柱46.461.643.656.647.051.1取柱進行試驗，結果見表13。結果表明，不同規格的凈化柱對回收率無較大影凈化柱種類回收率（%）平均回收率（%）RSD（%）BondElutPlexa60mg/3mL2.4BondElutPlexa200mg/6mL2.6黃凈化方法，試驗發現乙腈對β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯同樣具有較好的洗脫效表14不同洗脫體積對回收率的影響洗脫體積回收率（%）平均回收率（%）乙腈（3mL）89.287.393.494.498.692.6乙腈（5mL）乙腈（10mL）表15不同氮吹溫度對回收率的影響氮吹溫度(℃)回收率（%）平均回收率（%）40難以吹干/92.389.086.293.994.391.1復溶液種類回收率（%）平均回收率（%）腈（1:9）液相色譜法》（NY/T2896－2022）一化柱凈化，回收率測定結果見表17，結果表明，所選的凈化柱規格能夠滿足檢陽性樣品含量（mg/kg）回收率（%）平均回收率（%）添加劑預混合飼料試樣前處理優化保凈化柱不過載，試驗對比添加劑預混合飼料陽性添加樣品（5mg/kg）凈化前標準儲備溶液配制標準系列溶液配制將β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯標準儲備溶液用乙腈稀釋，配制成濃度為0.05標準工作曲線的繪制將β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯系列標準工作溶液依次注入液相色譜儀，以β-素酸乙酯和順式β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯峰面積之和為縱坐標，繪制標準工作配合飼料、濃縮飼料和精料補充料加入15mL水，混勻，常溫超聲5min。加入50mL無水乙醇和30mL二氯甲烷，取20mL上層提取液置于50mL離心管中，于8000r/min離心5min，準確吸取上清液5mL（V1）到10mL離心管中，于50℃氮氣吹干，用3mL乙腈復溶，再加添加劑預混合飼料和混合型飼料添加劑平行做兩份試驗。稱取試樣2.5g（精確至0.1g），置于100mL棕色容量瓶中，加入15mL水，常溫超聲5min。加入50mL無水乙醇和30mL二氯甲烷，混），取部分提取液至離心管中，于8000r/min離心5min，準確吸取上清液5mL高效液相色譜參考條件b）柱溫：30℃;（1）標準系列溶液和試樣溶液的測定以保留時間定性，試樣溶液中β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯保留時間應與標準系列中濃度相當的β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯標準溶液的保留時間一致，其相對以β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯標準系列溶液濃度為橫坐標，色譜峰面積為縱注：色譜峰面積為反式β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯峰面積與1.4倍順式β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯峰面積之和，1.4為順式β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯對反式β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯的校正因子。w=……（1）ρ——由標準工作曲線得到的試樣溶液中β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯的質量）；）；V1——用于凈化的提取液體積，單位為毫）；）；）；2.3方法主要技術指標驗證20.0μg/mL和40.0μg/mL標阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯標準系列溶液濃度為橫坐標，色譜峰面積為縱坐標，繪標準品濃度(μg/mL）（反式）峰面積（mAU*min）（順式）峰面積（mAU*min）順反式總峰面積（mAU*min）0.050.218700.21870.410200.41020.52.050302.050314.062604.0626520.6487020.64872082.3456082.345640162.37330162.3733開能力，試驗稱取0.5gβ-阿樸-8′-胡蘿），提取試劑—水-乙醇-二氯甲烷（15:50:35）超聲提取，稀釋后上機檢測，檢測結表610%β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯飼料添加劑檢測情況樣品名稱β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯含量（%）平均回收率（%）10%β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯飼料添加劑-8′-胡蘿卜素酸乙酯飼料添加劑的木質素磺酸鹽包被，有效提取飼料中的β-阿補充料檢出限為0.15mg/kg，定量限為0.5mg/kg；添加劑預混合飼料檢出限為為了驗證該方法能夠不受其他物質影響，準確的測定出飼料中β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯的含量。在空白樣品中分別添加β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯、斑蝥序號峰面積（反式mAU*min）平均峰面積（反式）（mAU*min）RSD（%）128.4965228.4190328.4257429.479928.7528.9531628.4965法進行前處理并上機檢測，查看β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯保留時間是否存在干圖27配合飼料（蛋雞）空白樣品色譜圖圖28配合飼料（小雞）空白樣品色譜圖圖29配合飼料（肉雞）空白樣品色譜圖圖30配合飼料（蛋鴨）空白樣品色譜圖圖31配合飼料（肉鴨）空白樣品色譜圖圖32復合預混合飼料（蛋雞）空白樣品色譜圖圖33復合預混合飼料（肉雞）空白樣品色譜圖圖34配合飼料（豬）空白樣品色譜圖圖35精料補充料（牛、羊）空白樣品色譜圖圖36濃縮飼料（豬）空白樣品色譜圖圖34配合飼料（魚）空白樣品色譜圖圖38濃縮飼料（蛋雞）空白樣品色譜圖圖39濃縮飼料（肉雞）空白樣品色譜圖圖40維生素預混合飼料空白樣品色譜圖平，確定β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯在配合飼料、濃縮飼料、精料補充料中的添加使用10%β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯飼料添加劑作圖41配合飼料（蛋雞）陽性添加（添加濃度0.5mg/kg）色譜圖圖42配合飼料（小雞）陽性添加（添加濃度0.5mg/kg）色譜圖圖43配合飼料（肉雞）陽性添加（添加濃度0.5mg/kg）色譜圖圖44配合飼料（蛋鴨）陽性添加（添加濃度0.5mg/kg）色譜圖圖45配合飼料（肉鴨）陽性添加（添加濃度0.5mg/kg）色譜圖圖46復合預混合飼料（蛋雞）陽性添加（添加濃度5mg/kg）色譜圖圖47復合預混合飼料（肉雞）陽性添加（添加濃度5mg/kg）色譜圖圖48配合飼料（豬）陽性添加（添加濃度0.5mg/kg）色譜圖圖49精料補充料（牛、羊）陽性添加（添加濃度0.5mg/kg）色譜圖圖50濃縮飼料（豬）陽性添加（添加濃度0.5mg/kg）色譜圖圖51配合飼料（魚）陽性添加（添加濃度0.5mg/kg）色譜圖圖52濃縮飼料（蛋雞）陽性添加（添加濃度0.5mg/kg）色譜圖圖53濃縮飼料（肉雞）陽性添加（添加濃度0.5mg/kg）色譜圖圖54維生素預混合飼料陽性添加（添加濃度0.5mg/kg）色譜圖添加回收率實驗結果上機液濃度在標準曲線的線性范圍內，試驗結果見表20-33。在0.5-8000mg/kg表20配合飼料（蛋雞）添加回收試驗結果添加濃度（mg/kg）回收率（%）批內平均回收率（%）批內變異系批間平均回收率（%）批間變異系數（n=3，%）5表21配合飼料（小雞）添加回收試驗結果添加濃度（mg/kg）回收率（%）批內平均回收率（%）批內變異系批間平均回收率（%）批間變異系數（n=3，%）5表22配合飼料（肉雞）添加回收試驗結果添加濃度（mg/kg）回收率（%）批內平均回收率（%）批內變異系批間平均回收率（%）批間變異系數（n=3，%）5表23配合飼料（蛋鴨）添加回收試驗結果添加濃度（mg/kg）回收率（%）批內平均回收率（%）批內變異系批間平均回收率（%）批間變異系數（n=3，%）5表24配合飼料（肉鴨）添加回收試驗結果添加濃度（mg/kg）回收率（%）批內平均回收率（%）批內變異系批間平均回收率（%）批間變異系數（n=3，%）5表25復合預混合飼料（蛋雞）添加回收試驗結果添加濃度（mg/kg）回收率（%）批內平均回收率（%）批內變異系批間平均回收率（%）批間變異系數（n=3，%）5表26復合預混合飼料（肉雞）添加回收試驗結果添加濃度（mg/kg）回收率（%）批內平均回收率（%）批內變異系批間平均回收率（%）批間變異系數（n=3，%）5表27配合飼料（豬）添加回收試驗結果添加濃度（mg/kg）回收率（%）批內平均回收率（%）批內變異系批間平均回收率（%）批間變異系數（n=3，%）5表28精料補充料（牛、羊）添加回收試驗結果添加濃度（mg/kg）回收率（%）批內平均回收率（%）批內變異系批間平均回收率（%）批間變異系數（n=3，%）5表29濃縮飼料（豬）添加回收試驗結果添加濃度（mg/kg）回收率（%）批內平均回收率（%）批內變異系批間平均回收率（%）批間變異系數（n=3，%）5表30配合飼料（魚）添加回收試驗結果（mg/kg）回收率（%）批內平均回收率（%）批內變異系數（n=5，%）批間平均回收率（%）批間變異系數（n=3，%）5表31濃縮飼料（蛋雞）添加回收試驗結果（mg/kg）回收率（%）批內平均回收率（%）批內變異系數（n=5，%）批間平均回收率（%）批間變異系數（n=3，%）5表32濃縮飼料（肉雞）添加回收試驗結果添加濃度（mg/kg）回收率（%）批內平均回收率（%）批內變異系批間平均回收率（%）批間變異系數（n=3，%）5表33維生素預混合飼料添加回收試驗結果添加濃度（mg/kg）回收率（%）批內平均回收率（%）批內變異系批間平均回收率（%）批間變異系數（n=3，%）5表34方法耐用性試驗結果添加含量（mg/kg）儀器型號檢測結果（mg/kg）算術平均值（mg/kg）允許偏差（mg/kg）實際偏差（mg/kg）0.50.4660.5044.710.485≤0.0480.01954.9840.34.845≤0.4840.1354037.882.439.05≤3.9086.784.55≤8.462.152.4標準儲備溶液有效期考察將β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯標準儲備溶液定量移取分裝一份定量分裝的儲備溶液用乙腈稀釋成40μg/mL，再用HPLC測定色譜峰純度和峰面積，以考察儲備溶液在－18℃保存條件下的穩定性。連續測定1個月，檢測方式7d檢測時間21d28d35d平均值RSD（n=7,%）吸光度0.4970.4960.4960.4960.4960.4970.4960.496mAU*min）169.852170.705169.339171.093169.522171.063170.8730.4相對峰面積（反式，%）99.92099.92099.92099.92099.92099.92099.93099.90.0峰面積（順式）（mAU*min）0.1290.1300.1360.1380.1360.1290.1390.1343.3相對峰面積（順式，%）0.0800.0800.0800.0800.0800.0800.0700.0794.8編號樣品名稱來源結果（mg/kg）1產蛋雞高峰期配合飼料湖南未檢出2小雞配合飼料貴州未檢出3肉用仔雞中期配合飼料安徽6.794肉中雞配合飼料II型貴州2.965快大肉大雞配合飼料貴州4.246肉大雞配合飼料云南6.707128肥雞配合飼料廣西13.48蛋鴨配合飼料安徽7.379產蛋鴨配合飼料安徽未檢出10肉大鴨配合飼料I型貴陽6.5611肥鴨配合飼料安徽未檢出12蛋鵪鶉產蛋期配合飼料貴州未檢出13蛋鴨自配料河北未檢出14肉雞自配料貴州未檢出15蛋雞產蛋期自配料貴州4.57165%蛋雞產蛋期復合預混合飼料湖北未檢出175%蛋雞產蛋期復合預混合飼料河南8618蛋雞產蛋后期復合預混料河北3.85191%肉用仔雞中期預混料廣西未檢出20生長育肥豬配合飼料貴州未檢出21牛、羊精料補充飼料貴州未檢出22乳豬濃縮飼料貴州未檢出23鱘魚配合飼料廣東未檢出24蛋雞濃縮飼料貴州未檢出25肉雞濃縮飼料貴州未檢出26維生素預混合飼料重慶未檢出27龍蝦配合飼料湖北未檢出28黃顙魚膨化配合飼料四川未檢出度范圍時，批內平均回收率為80.4%-間平均回收率為82.2%-108.9%各項技術指標均能滿足要求，方法重復性好，定量準確，果五、采標情況，以及是否合規引用或采用國際國外標準七、重大分歧意見的處理經過和依據無八、涉及專利的有關說明飼料中β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯的含量進行有效檢測，幫助飼料生產企業控制品,2013(06):440-442.[2]朱基美.β-阿樸-8′-胡蘿卜素酸乙酯及其研究進展[J].廣東飼料,2012,21(增刊1):84-86.[3]王海威,王麗輝,粟劍,等.加麗素紅、加麗素黃對黃羽肉雞生長性能及胴體著色的影響[J].飼料博覽,2014(01):1-3.[4]Casta?edaMP,HirschlerEM,SamsAR.Skinpigmentationevaluationinbroilersfednaturalandsyntheticpigments.Poultryscience.2005,84(1):PP143-