高二生物導學案第二章第三節動物細胞工程及其應用第3課時動物細胞融合技術及其應用【學習目標】以細胞結構與功能為基礎，理解動物細胞融合的內涵。(生命觀念)通過問題探究掌握單克隆抗體制備的過程，培養分析問題、解決問題的能力。(科學思維)以流程圖的形式表示單克隆抗體的制備過程，培養建模能力。(科學思維)說明單克隆抗體的特點及應用，體會科學技術的進步，并能將所學知識應用于社會生產生活實踐，參與社會事件的探討。(社會責任)【新課研學】新冠抗原試劑盒檢測的原理是什么？其生產為何運用動物細胞融合技術？探究一動物細胞融合技術自主閱讀課本(P66-67)，回答下列問題：什么是動物細胞融合技術？結合植物體細胞雜交技術說出誘導動物細胞融合的物理、化學方法具體有哪些？3.科學家在肺結核、天花、麻疹等病人含病毒的組織中觀察到多核現象，為什么出現此現象，說明誘導動物細胞融合還可以用什么方法？可用活病毒誘導嗎？為什么？4.從細胞質膜的結構考慮，為什么病毒能夠作用于動物細胞膜？【資料】滅活病毒誘導的原理是動物病毒能同時與不同動物細胞膜上受體結合，使細胞發生融合。推測：為什么植物體細胞雜交技術不用此方法呢？【任務一】討論：結合病毒作用的機制和精卵結合的過程，說出下圖滅活病毒誘導細胞融合的過程。融合完成的標志、原理是什么？通過20世紀70年代不同種間融合的成功例子，說出意義。【檢測一】判斷：植物體細胞雜交技術與動物細胞融合技術的誘導原理、方法相同。（）二倍體動物細胞融合后的雜種細胞仍是二倍體細胞。（）植物體細胞雜交技術與動物細胞融合技術的結果不同。（）探究二單克隆抗體的制備【傳統制備抗體的方法】過程：向小鼠反復注射某種抗原小鼠產生抗體從血清中分離相應抗體結合下列資料，思考此方法的缺點是什么？從血清中獲得相應抗體，需要大量小鼠血液。動物在生存環境中會接觸多種抗原，產生數百萬種以上抗體。【思考】怎樣獲得產量高、純度高、特異性強的單一抗體呢？【知識回顧】抗體由細胞產生。多種不同的抗原刺激B細胞分化為種（個）漿細胞，1個漿細胞只產生種特異性抗體。【設計方案】結合動物細胞培養技術，如何獲得純度高的單一抗體？二、【單克隆抗體制備過程】（一）免疫小鼠：【任務二】根據圖中操作，完成下列填空：對小鼠免疫處理的目的是；多次免疫刺激的目的是獲得；從小鼠的部位獲得漿細胞；取出的脾臟組織可剪碎后用處理制備單細胞懸液。（二）培養細胞并誘導融合：思考：產生多少種細胞（若融合，只考慮兩兩融合）？第一次篩選：【任務三】討論配制什么樣的培養基，各種細胞生存情況及原因是什么？（1min）【給出資料】①細胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基喋呤阻斷。②漿細胞有這兩種DNA的合成途徑。③骨髓瘤細胞只有D途徑，沒有S途徑。第二次篩選：思考：所得到的雜交瘤細胞都只分泌同一種抗體嗎？背景資料：往往1種抗原上有不同種抗原表位，每一種抗原表位都可刺激產生相應的抗體。思考：下一步做什么？目的是什么？【任務四】小組活動，討論下列問題1和2：結合稀釋涂布平板法和單個菌落的來源，填寫下列問題：可將含混合雜交瘤細胞的培養液經處理加到多孔板中（盡量每個孔最多含個細胞）思考：為何要做此處理？資料：被熒光素標記的抗原與相應抗體結合后，用紫外線照射，在熒光顯微鏡下可呈現出熒光（黃綠色等）反應，且產生的抗體濃度越高，現象越明顯。思考：(1)哪一培養孔中產生的是所需的抗體？如何判斷？(2)為什么發生反應的培養孔中是我們所需要的抗體，而不是針對其它抗原的抗體？此方法的原理是什么？(3)應用了什么技術？此技術的目的是什么？大規模生產：思考：與傳統制備抗體的方法相比，單克隆抗體的優點是什么？【任務五】小組活動：構建概念模型每個小組根據所給卡片和箭頭構建制備單克隆抗體的流程（用膠帶黏貼）;標出過程中進行篩選的環節；思考應用了哪些細胞工程技術。【檢測二】1．下列關于雜交瘤細胞和單克隆抗體制備的說法，正確的是()A．雜交瘤細胞的特點是特異性強、靈敏度高、可大量制備B．將漿細胞在體外培養時可分泌單克隆抗體C．誘導B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后，發生融合的細胞均為雜交瘤細胞D．篩選出雜交瘤細胞后，需利用特定抗原再次篩選能夠分泌單克隆抗體的細胞2.（多選）下圖是單克隆抗體制備過程圖，下列說法不正確的是（）過程1的目的是獲得相應抗體經第一次篩選可獲得產生單一抗體的雜交瘤細胞過程4的原理是抗原與抗體反應具有特異性以上過程運用的原理是細胞全能性三