苦參堿促C6膠質瘤細胞凋亡研究中Bad蛋白的檢測的開題報告開題報告題目：苦參堿促C6膠質瘤細胞凋亡研究中Bad蛋白的檢測一、研究背景腦膠質瘤是一種惡性腫瘤，常見于中老年人，其病因尚不明確。近年來，隨著分子生物學和細胞生物學的不斷發展，細胞凋亡作為一種重要的腫瘤治療方法備受關注。Bad蛋白作為Bcl-2家族的一員，在細胞凋亡過程中發揮著重要作用。因此，研究苦參堿能否促進C6膠質瘤細胞凋亡，并探究Bad蛋白的變化情況，對于深入了解C6膠質瘤的發生機制以及開發治療新策略具有重要意義。二、研究目的本研究旨在探究苦參堿能否促進C6膠質瘤細胞凋亡以及Bad蛋白在該過程中的表達情況。三、研究內容1.制備苦參堿采用HPLC法制備苦參堿，并對其純度進行檢測。2.細胞實驗將苦參堿加入C6膠質瘤細胞培養基中，通過MTT法檢測細胞增殖情況；利用AnnexinV-FITC/PI染色方法檢測苦參堿是否能夠促進C6膠質瘤細胞凋亡；通過Westernblotting檢測Bad蛋白在該過程中的變化情況。四、研究意義本研究有助于深入了解C6膠質瘤發生機制，并且為該腫瘤的治療提供了新策略。此外，該研究對于探究苦參堿的生物學效應、構建更為完整的Bcl-2家族凋亡調節網絡以及發掘更多治療腫瘤新靶點具有重要意義。五、研究方法1.制備苦參堿采用HPLC法從苦參中提取苦參堿，并通過HPLC檢測其純度。2.細胞實驗2.1培養C6膠質瘤細胞采用細胞培養法培養C6膠質瘤細胞，并使用MTT法檢測細胞增殖情況。2.2檢測細胞凋亡利用AnnexinV-FITC/PI染色方法檢測C6膠質瘤細胞凋亡情況。2.3Westernblotting使用Westernblotting檢測Bad蛋白在細胞凋亡過程中的表達情況。六、研究預期結果1.成功制備純度較高的苦參堿；2.發現苦參堿能夠促進C6膠質瘤細胞凋亡；3.發現Bad蛋白在C6膠質瘤細胞凋亡過程中發生變化。七、研究進度安排預計在10個月內完成以下進度1.前期調研：1個月2.制備苦參堿并檢測其純度：1個月3.細胞培養和MTT檢測：2個月4.檢測細胞凋亡：3個月5.Westernblotting檢測Bad蛋白：3個月八、參考文獻1.Chen,X.etal.(2016)SophocarpineInducesApoptosisandPromotesCellCycleArrestinHumanGastricCancerCells.PLoSONE,11(10),e0165581.2.Campanella,C.etal.(2009)ThehistonedeacetylaseinhibitorsodiumbutyratemodulatestheresistanceofglioblastomacellstoBCNUandtemozolomide.JournalofNeuro-Oncology,94(2),231-242.3.Zou,W.etal.(2015)Sophocarpineinducesapoptosisinhumanosteosarcomacellsviacaspase-dependentandcaspase-independentapoptoticpathways.JournalofBiomedicalScience,22(1),11.4.Wang,Z.etal.(2015)Sensitizationofgliomacellstotamoxifen-inducedapoptosisbyPl3KinhibitorthroughtheGSK