病毒疫苗制造2021/5/91疫苗？疫苗是指為了預防、控制傳染病的發生、流行，用于人體預防接種的疫苗類預防性生物制品。2021/5/92吸附柱添加500ul的BL疫苗的制造一、細菌性滅活疫苗的制造二、細菌性活疫苗的制造三、病毒疫苗的制造2021/5/93病毒疫苗的制造

病毒性禽胚培養疫苗制造病毒性細胞培養疫苗制造病毒性動物組織疫苗制造2021/5/94病毒性禽胚培養疫苗制造雞胚選擇

痘病毒、正粘病毒、副粘病毒和皰疹病毒等一類生物制品，目前仍然利用禽胚特別是雞胚制備，如雞新城疫苗、禽流感疫苗、犬瘟熱雞胚弱毒疫苗等。禽胚疫苗生產的原材料來源方便、質量比較容易控制，制造程序簡單，不需要過高的設備條件，生產的疫苗質量可靠。2021/5/95（一）雞胚選擇

受精卵應來自SPF雞群，至少源于未用抗生素藥物的非免疫雞群，以免受母源抗體的干擾和殘留抗生素的影響。從受精卵入孵開始至培養全過程都應保持無菌，要求一定的溫度和濕度，且需不斷翻動，然后選擇。選擇一定日齡、發育正常的胚用于接毒培養。2021/5/96（二）種毒與毒種繼代

目前適應于雞胚的種毒多系弱毒，包括自然弱毒與人工培育的弱毒兩類。各種制苗用的種毒多數由國家菌毒種保藏部門或指定單位保存，保存的種毒多為凍干毒。凍干毒種需按規定要求在雞胚繼代復壯，通常繼代3代以上，經檢定符合標準后方可作力生產疫苗的毒種，毒種檢定內容包括無菌檢驗、毒價測定和其他項目的檢定等。2021/5/97（三）接毒與收獲1.接毒

雞胚接毒涉及接毒途徑和接毒量兩方面。根據不同的病毒與不同疫苗生產程序，選擇最佳接種途徑和接種量。接種途徑：絨毛尿囊膜接種11~12日齡胚尿囊腔接種9~11日齡胚羊膜腔接種10~12日齡胚卵黃囊接種5~8日齡胚如雞新城疫I系和II系毒采取尿囊腔接毒，前者接種10-3稀釋毒種0.1ml，后者接種10-4稀釋毒種0.1ml。鴨瘟雞胚化弱毒疫苗采用絨毛尿囊膜接種50-100倍稀釋毒0.2ml。2021/5/982.培養收獲

雞胚接毒后培養增殖的時間和溫度、濕度以及收獲的標準與內容物依不同的病毒和不同的疫苗而異。如雞新城疫I系疫苗，接毒后于38.5~39

C、相對濕度60%~70%條件培養增殖，收集接毒后24~48h內死亡胚，置0~10C冷卻4~24h，收獲胚液，進行無菌檢驗，供制備濕苗用。

2021/5/99（四）配苗

按規定收獲的胚液、胎兒和絨毛尿囊膜乳劑經無菌檢驗合格后即可進行配苗。

1.濕苗通常于雞胚液內，按每毫升加入青霉素和鏈霉素500~1000U，放置0~10

C冷暗處處理后分裝。

2.凍干苗經無菌檢驗后合格的胚液或胚液、胎兒、絨毛尿囊膜乳劑，按比例加入保護劑，充分混合后濾過，于濾液內按每毫升加入青、鏈霉素500~1000U，混合后分裝凍干。

3.滅活苗

收獲雞胚液經無菌檢驗及毒價測定合格后，按規定比例加入平衡液，按不同病毒的滅活溫度、時間進行滅活，加入相應的佐劑，制備成滅活疫苗，放置4-10

C保存。2021/5/910流程圖2021/5/9112021/5/9122021/5/9132021/5/9142021/5/9152021/5/916流程圖——病毒性禽胚疫苗制造工藝流程受精卵禽胚毒株種毒滅活病毒液鑒定培育檢驗檢驗配制原料佐劑配苗、乳化滅活疫苗含病毒尿囊液或禽胚組織含病毒懸液配苗活疫苗保護劑分裝、凍干分裝滅活原料種子擴增收獲配制純化病毒懸液接種2021/5/9172021/5/918影響疫苗質量的因素毒種：毒種的優劣不僅影響疫苗的產量，而且也影響疫苗的質量，毒種不純會產生相互干擾，減毒活疫苗毒種若毒力回升易造成事故，因此毒種的選擇應挑選那些致病性低，免疫效價高而持久，抗原譜廣的，易增殖，便于生產，可在傳代細胞上傳代的毒種。培養病毒的細胞：細胞若有潛在的致癌性病毒或慢病毒，以及有支原體污染均不能用作疫苗生產。對此因素應嚴格檢查。此外若細胞本身發生轉化后，不宜于制備活疫苗，只能制備一些滅活疫苗或亞單位疫苗。培養液：培養細胞的營養液中多少含有一定量的血清蛋白，在疫苗使用中常會出現某種程度的過敏反應，為此