9.觀察根尖分生區組織細胞的有絲分裂在高等植物體內，有絲分裂常見于根尖、芽尖等分生區細胞。由于各個細胞的分裂是獨立進行的，因此在同一分生組織中可以看到處于不同分裂時期的細胞。通過在高倍顯微鏡下觀察各個時期細胞內染色體的存在狀態，就可以判斷這些細胞分別處于有絲分裂的哪個時期。染色體容易被堿性染料（如甲紫溶液，舊稱龍膽紫溶液）著色。目的要求1.制作洋蔥根尖細胞有絲分裂裝片。2.觀察植物細胞有絲分裂的過程，認識有絲分裂的不同時期，比較細胞周期中不同時期的時間長短。3.繪制植物細胞有絲分裂簡圖。材料用具洋蔥（可用蔥、蒜代表）顯微鏡，載玻片，蓋玻片，玻璃皿，剪刀，鑷子，滴管。質量濃度為0.01g/mL或0.02g/mL的甲紫溶液（將甲紫溶解在質量分數為2％的醋酸溶液中配制而成）或醋酸洋紅液，質量分數為15％的鹽酸，體積分數為95％的酒精，洋蔥根尖細胞有絲分裂固定裝片。方法步驟一、洋蔥根尖的培養在上實驗課之前的3~4d，取洋蔥一個，放在廣口瓶上。瓶內裝滿清水，讓洋蔥的底部接觸到瓶內的水面。把這個裝置放在溫暖的地方培養。待根長約5cm時，取生長健壯的根尖制成臨時裝片觀察。二、裝片的制作制片流程為：解離一漂洗一染色一制片。過程方法時間目的解離上午10時至下午2時（洋蔥根尖分生區有較多的細胞處于分裂期，這會因洋蔥品種、室溫等的差異而有所不同），剪取洋蔥根尖2~3mm，立即放入盛有鹽酸和酒精混合液（1：1）的玻璃皿中，在室溫下解離。3-5min用藥液使組織中的細胞相互分離開來。漂洗待根尖軟化后，用鑷子取出，放入盛有清水的玻璃皿中漂洗。約10min洗去藥液，防止解離過度。染色把根尖放入盛有質量濃度為0.01g/mL或0.02g/mL的甲紫溶液（或醋酸洋紅液）的玻璃皿中染色。3-5min甲紫溶液或醋酸洋紅液能使染色體著色。制片用鑷子將這段根尖取出來，放在載玻片上，加一滴清水，并用鑷子尖把根尖弄碎，蓋上蓋玻片。然后，用拇指輕輕地按壓蓋玻片。使細胞分散開來，有利于觀察。三、洋蔥根尖細胞有絲分裂的觀察1.把制成的裝片先放在低倍鏡下觀察，掃視整個裝片，找到分生區細胞：細胞呈正方形，排列緊密。再換成高倍鏡仔細觀察，首先找出分裂中期的細胞，然后再找前期、后期和末期的細胞，注意觀察各時期細胞內染色體形態和分布的特點。最后觀察分裂間期的細胞。2.如果自制裝片的效果不太理想，可以觀察洋蔥根尖有絲分裂固定裝片。3.調節顯微鏡的放大倍數，使你能夠在視野中同時看到約50個細胞，仔細統計視野中處于各時期的細胞數，記錄在記錄表“樣本1”中。把視野移動到分生區一個新的區域再統計，然后記錄在記錄表“樣本2”中。對數據進行整理，填入表中。細胞周期樣本1樣本2總數每一時期的細胞數/計數細胞的總數分裂間期分裂期前期中期后期末期計數細胞的總數四、繪圖繪出植物細胞有絲分裂中期簡圖。五、有條件的學校可以觀察馬蛔蟲受精卵的有絲分裂固定裝片。結論根據觀察結果，用自己的語言描述細胞周期各個時期的特點。間期：G1期（DNA合成前期）：染色體蛋白質和DNA解旋酶的合成S期（DNA合成期）：進行DNA的復制，DNA加倍。G2期（DNA合成后期）：主要是細胞分裂期有關酶與紡錘絲蛋白質的合成。前期：核膜、核仁消失；染色質螺旋纏繞，縮短變粗成為染色體。每條染色體包括兩條并列的姐妹染色單體，兩條染色單體由同一個著絲點連接。從細胞兩級發出紡錘絲，形成一個梭形的紡錘體；染色體排列無序。中期：每條染色體的著絲點都排列在赤道板上；染色體的形態比較穩定數目比較清晰，且排列有序，便于觀察。后期：著絲點一分為二，姐妹染色單體分開，成為兩條子染色體。并分別向兩極移動；染色單體消失，染色體數目加倍（細胞兩極各有一套染色體，形態、數目完全相同，與親代染色體也相同。）末期：核膜、核仁重現，形成兩個新的細胞核；染色體變成染色質，紡錘體消失；在赤道板位置出現細胞板，并逐漸擴展，形成新的細胞壁。討論：1.在你的觀察結果中，處于哪一時期的細胞最多？為什么？提示：處于分裂間期的細胞最多，因為細胞周期的大部分時間處于分裂間期。2.如何比較細胞周期中不同時期的時間長短？你可以數一數視野中5個不同時期的細胞數目。統計全班的結果，求每個時期細胞數目的平均值。（提示：洋蔥根尖細胞染色體數目為8對，一個細胞周期大約需要12h。）提示：某時期的細胞數占計數細胞總數的比例越大，該時期的細胞時間越長。3.取材時為什么只能剪2mm~3mm，而不能過長？提示：若剪得過長會包括伸長區，伸長區不進行細胞分裂，增加了尋找觀察細胞的難度。4.解離洋蔥根尖時，時間過長或過短對實驗的影響有哪些？提示：解離時間過短，細胞不易分離開；解離時間過長，根尖細胞會遭到破壞，無法進行染色和制片。5.實驗操作中漂洗和染色的順序能不能互換？并說明原因。提示：不能，漂洗的目的是洗去根尖組織細胞中的鹽酸，利于堿性染料的著色，若二者順序顛倒，解離液中的鹽酸會影響染色效果。6.在制片時兩次用到載玻片，作用分別是什么？提示：一次是放置根尖；另外一次是在蓋玻片上加一片載玻片看，目的是使細胞均勻分散，防止蓋玻片移動，同時，避免壓碎蓋玻片。7.在顯微鏡下持續觀察一個根尖