乙型肝炎e抗原（HBeAg）1、原理：采用抗-HBe包被反應板，加入待測樣品，同時加入抗-HBe-HRP，如待測樣品中含有HBeAg時就與包被抗-HBe、抗-HBe-HRP結合形成復合物，加入底物產生顯色反應，反之就無顯色反應。2、標本采集與處理?2.1受檢者準備：對于體檢對象抽血前保持平時的飲食習慣，采血前應禁食4—6小時。2.2靜脈采血：除非是臥床病人，一般在采血時取坐位。體位影響水分在血管內外的分布，因此影響測定水平。故在采血前至少應靜坐５分鐘。一般從肘靜脈取血，使用止血帶的時間不超過１分鐘，穿刺成功后立即松開止血帶。2.3采血管：一般采用血清作檢驗，可以用一般潔凈的塑料管或玻璃試管作為容器。2.4標本處理：血清：采血后，室溫下自然放置1—2小時，待血液凝固、血塊收縮后，再于3000轉每分鐘離心15分鐘，吸出血清待用。血漿：采血后，樣本和抗凝劑輕輕顛倒混勻6—8次后，充分離心，將血漿與血細胞分離后，吸出血漿待用。2.5標本接收：接收標本時應檢查標本是否符合要求（要求密封、無溶血、無雜物）、所用試管是否正確、試管是否填寫完整、并問詢采血日期，對不合格標本應退回重采，并填寫記錄。2.6標本儲存：一般該標本應隨到隨做，血清和血漿標本在2-8℃保存。如需長期保存，可在-20℃保存，并避免反復凍融。3、試劑與儀器：3.1測定試劑：3.1.1生產廠商：珠海麗珠科技有限公司3.1.2批準文號：國藥準字2009第34007023.1.3包裝：48T×1、96T×13.1.3試劑配置：25倍濃縮稀釋液40ml×1瓶HBeAg包被板96孔HBeAg酶標記抗體6.21ml×1瓶HBeAg陽性對照1.0ml×1瓶HBeAg陰性對照1.0ml×1瓶底物液A、B液8.0ml×1瓶終止液7.0ml×1瓶封片2片說明書 1份4、操作步驟：4.1配液：濃縮洗滌液配置前充分混勻（如有結晶析出應充分溶解），將濃縮洗滌液（25*）用蒸餾水或去離子水按1：19稀釋后使用。4.2編號：將樣品對應微孔按序編號，每板應設陰陽性對照各2孔和空白對照1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑）4.3加樣：分別在相應孔中加入待測樣品50微升和陰，陽對照50微升及質控血清。4.4加酶標抗體：空白對照孔不加酶標試劑，每孔加入酶結合物50微升，輕輕振蕩混勻。4.5溫育：置37℃溫育30分鐘。4.6洗滌：將孔內液體甩干。選擇4次洗滌程序，洗板后在吸水紙上拍干。4.7顯色：每孔加入顯色劑A，B液各1滴（50微升），輕輕振蕩勻，37℃避光顯色15分鐘。4.8終止：每孔加終止液1滴（50微升），混勻。4.9測定：用酶標儀讀數，取波長450nm（建議使用雙波長的酶標儀比色，參考波長630nm）測定各孔OD值先用空白孔校零，然后讀取各孔OD值。5：結果判斷5.1目測：在白色背景下觀察各孔顯色情況，有明顯黃色者為乙型肝炎e抗原（HBeAg）陽性；無色者為乙型肝炎e抗原（HBeAg）陰性。5.2酶標儀檢測：5.2.1臨界值（CUT/OFF）計算：CUT/OFF=陰性對照孔OD均值N×2.1。（陰性對照孔OD值低于0.05者按0.05計算，高于0.05按實際OD值計算）5.2.2陽性判定：樣品OD值大于或等于COV值時，說明該樣品HBeAg陽性。5.2.3陰性判定：樣品OD值小于COV值時，說明該樣品HBeAg陰性。6：注意事項：6.1從冷藏環境中取出時試劑盒內全部瓶裝試劑亟待測標本所需微孔反應條應置37℃應室溫平衡30分鐘方可使用，余者應及時封存于冰箱中以備后用。在平衡試劑的同時，待測樣品需置室溫平衡30分鐘后再進行測試。6.2使用前試劑應搖勻，并棄去1-2滴后垂直滴加。6.3封片不能重復使用。6.4結果判斷須在反應終止后10分鐘內完成。6.