植物細胞工程的基本設備和無菌操作第1頁，課件共25頁，創作于2023年2月一、基本設備1、植物細胞工程實驗室的組成洗滌室滅菌室配制室無菌操作室培養室鑒定室馴化移植室第2頁，課件共25頁，創作于2023年2月2、基本設備玻璃器皿和器械無菌操作設備培養設備其它設備第3頁，課件共25頁，創作于2023年2月第4頁，課件共25頁，創作于2023年2月第5頁，課件共25頁，創作于2023年2月第6頁，課件共25頁，創作于2023年2月第7頁，課件共25頁，創作于2023年2月第8頁，課件共25頁，創作于2023年2月第9頁，課件共25頁，創作于2023年2月第10頁，課件共25頁，創作于2023年2月二、無菌操作1、各種滅菌方法及其適用范圍A干熱滅菌法B濕熱滅菌法C熏蒸滅菌法D過濾滅菌法E藥劑滅菌法F灼燒滅菌法G照射滅菌法第11頁，課件共25頁，創作于2023年2月2、無菌操作過程A清洗玻璃器皿的清洗實驗材料的清洗B滅菌※培養材料的滅菌以藥劑滅菌法為主主要考慮：藥劑的滅菌效果、材料對藥劑的耐受力第12頁，課件共25頁，創作于2023年2月第13頁，課件共25頁，創作于2023年2月第14頁，課件共25頁，創作于2023年2月※培養基滅菌高壓蒸汽滅菌過濾滅菌C接種經過表面滅菌的材料，按不同的要求，經過剪切、整理后，移植到培養基上培養的過程。接種室（無菌操作室）的滅菌接種臺的滅菌工作人員注意事項第15頁，課件共25頁，創作于2023年2月三、培養基的組成及母液的配制1、培養基的組成

無機營養：大量元素：N、P、K、S、Ca、Mg

微量元素：Fe、Mn、Cu等有機營養：碳源：蔗糖、葡萄糖、果糖氮源：氨基酸類、酰胺類活性物質：煙酸、肌醇、生物素等植物激素：生長素類：IAA、NAA、IBA等細胞分裂素類：激動素、玉米素等其它類：赤霉素、脫落酸、乙烯附加物類：瓊脂、椰乳、水解蛋白等第16頁，課件共25頁，創作于2023年2月2、培養基母液配制配制培養基前，為了使用方便和用量準確，常將大量元素、微量元素、鐵鹽、有機物類和激素類分別配制成比培養基濃度大若干倍的母液。當配制培養基時，只需按預先計算好的量吸取母液稀釋即可。母液應保存在冰箱中備用，保存時間不可過長，當母液出現沉淀或霉菌團時，則不能使用。第17頁，課件共25頁，創作于2023年2月實驗一

培養基母液的配制

1、實驗目的：掌握培養基母液的配制方法。2、實驗內容：（1）培養基母液配制的各種準備工作；（2）以常用基本培養基MS母液的配制以及各種附加成分母液的配制為例，學習培養基母液的配制方法.3、實驗儀器：主要包括電子天平、烘干箱、蒸餾水器、冰箱、各類常用玻璃器皿和容器等。第18頁，課件共25頁，創作于2023年2月4、實驗操作方法：玻璃器皿的清洗與干燥藥品用量計算稱取藥品大量元素母液的配制微量元素母液的配制鈣鹽和鐵鹽母液的配制激素及其它有機物母液的配制.第19頁，課件共25頁，創作于2023年2月5、作業：1）按MS培養基配方需要量計算配制100ml母液所需藥品量、母液濃度及配制500ml培養基各種母液吸取量

2）為什么在配制培養基之前要先配制母液？

第20頁，課件共25頁，創作于2023年2月實驗二：MS培養基的配制與滅菌

1、實驗目的:學習培養基的配制與滅菌操作方法.2、實驗內容：培養基的配制,培養基的滅菌.3、實驗儀器：主要為臺秤,高壓滅菌鍋,各種玻璃器皿和容器等。

第21頁，課件共25頁，創作于2023年2月4、實驗操作方法：量取大量元素量取微量元素量取鈣鹽、鐵鹽和其它有機物稱取蔗糖和瓊脂配制MS培養基調PH值分裝培養基培養基滅菌.

第22頁，課件共25頁，創作于2023年2月5、作業：1）高壓蒸汽滅菌注意事項有哪些？

2）列表計算配制300ml下列培養基（pH＝5.8）所需的各種母液及其它成分用量。

AMS基本培養基附加瓊脂10g/LBMS基本培養基附加IAA1mg/L、BA2mg/L、瓊脂10g/L、蔗糖30g/L第23頁，課件共25頁，創作于2023年2月實驗三：無菌操作技術

1、實驗目的：掌握細胞工程中的無菌操作技術。學習植物外植體的消毒技術、離體培養的無菌操作技術。2、實驗內容：以柑桔種子為例，完成從外植體表面消毒到接種整個過程的操作。每人均獨立操作完成。3、實驗儀器：主要為超凈工作臺等。

第24頁，課件共25頁，創