專題06土壤中分解尿素的細菌的分離與計數

知識梳理

i.土壤中分解尿素的細菌的分離與計數

（1）分離原理：土壤中的細菌之所以能分解尿素，是因為它們能合成胭酶,這種物質在把尿素分解成

無機物的過程中起到催化作用。

（2）統計菌落數目：統計樣品中的活菌一般用稀釋涂布平板法。

（3）實驗流程：土壤取樣T樣品的稀釋T微生物的培養與觀察T細菌的計數。

2、稀釋涂布平板法計數微生物的注意問題

用稀釋涂布平板法計數微生物時，要求選擇菌落數在30?300的平板進行計數。解題時易出現以下誤解：

（1）只得到1個菌落數在30?300的平板是錯誤的。錯誤的原因是不符合實驗的重復原則，易受到偶發因

素的影響。

（2）得到3個或3個以上菌落數在30?300的平板，也不一定正確，這可能有兩種情況：

①不同平板間差異較大，如得到3個平板，菌落數分別為230、34、240,雖然菌落數均在“30?300”

之間，這也是不正確的，因為“34”與“230”“240”差異太大，應重新實驗找出原因。

②不同平板之間差異不大，是符合要求的，用其平均值作為估算的最終結果。

可見，并不是只要得到3個“菌落數在30?300的平板”即可，而應該是涂布的同一稀釋度的平板均

符合“菌落數在30?300的平板”且無較大差異，說明實驗操作合格，才能按照計算公式進行計算。

實戰演練

一、選擇題

I.在“分離以尿素為氮源的微生物''實驗中，下列敘述正確的是（）

A.若要判斷選擇培養基是否起到了選擇作用，需設置未接種的LB培養基作對照

B.在尿素培養基上長出的菌落一定是尿素分解菌

C.尿素可以作細菌的碳源和氮源

D.如指示劑變紅就能準確地認定該菌能分解尿素

【答案】D

【分析】

1、培養基選擇分解尿素的微生物的原理：培養基的氮源為尿素，只有能合成胭酶的微生物才能分解尿素，

以尿素作為氮源。缺乏胭前的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生長發育繁殖，而受到抑制，所

以用此培養基就能夠選擇出分解尿素的微生物。

2、方法：能合成胭酶的細菌才能分解尿素。配制以尿素為唯一氮源的培養基，能夠生長的細菌就是能分解

尿素的細菌。

【詳解】

A、若要判斷選擇培養基是否起到了選擇作用，需設置接種了的牛肉膏蛋白陳培養基作對照，若牛肉膏蛋白

腺培養基培養基上的菌落種類數目多于選擇培養基上的菌落類型，則說明起到了選擇作用，A錯誤；

B、以尿素為唯一氮源的培養基上長出的不都是尿素分解菌，也有可能是自生固氮菌，B錯誤；

C、分離分解尿素的細菌用的培養基屬于固體培養基，除含碳源、氮源、水、無機鹽外，還應含有瓊脂，其

中尿素可以作細菌的氮源，C錯誤；

D、尿素分解菌可以產生胭酶將尿素分解分解為氨，使pH升高，培養基中進入酚紅指示劑后，氨可以使指

示劑呈紅色，據此可以用酚紅指示劑鑒別尿素分解菌，如指示劑變紅就能準確地認定該菌能分解尿素，D

正確。

故選D。

2.幽門螺桿菌（含有假酶）感染是急慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素。在患者體內采集樣本并制成

菌液后，進行分離培養。下列有關敘述不正確的是（）

A.分離純化幽門螺桿菌時應使用以尿素為唯一氮源的培養基

B.鑒別幽門螺桿菌時應在培養基中加入酚紅指示劑和緩沖物質

C.可用牛肉膏蛋白陳培養基做對照證明選擇培養基的選擇作用

D.可采用稀釋涂布平板法對幽門螺桿菌進行分離和計數

【答案】B

【分析】

1、胭酶可以將尿素分解成二氧化碳和氨氣。

2、分離純化細菌的方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。

【詳解】

A、幽門螺桿菌可以合成腺酶，可以利用尿素，所以分離純化幽門螺桿菌時應使用以尿素為唯一氮源的培養

基，A正確；

B、由于幽門螺桿菌在分解尿素的過程中會合成服酶，胭酶將尿素分解成氨，使培養基堿性增強，pH升高，

所以可以用檢測pH的變化的方法來判斷尿素是否被分解，即在培養基中加入酚紅指示劑，尿素被分解后產

生氨，pH升高，則該菌落周圍會出現紅色環帶，故鑒別幽門螺桿菌時應在培養基中加入酚紅指示劑，但不

能加緩沖物質，B錯誤；

C、為了證明選擇培養基的選擇作用，可用牛肉膏蛋白陳培養基做對照，牛肉膏蛋白陳培養基為普通培養基，

不具有選擇性，如果牛肉膏蛋白陳培養基的菌落數大于選擇培養基，說明選擇培養基有選擇作用，c正確;

D、稀釋涂布平板法可以用于微生物的分離和計數，因此對幽門螺桿菌進行分離和計數可才用稀釋涂布平板

法，D正確。

故選Bo

3.進行垃圾分類收集可以減少垃圾處理時間，降低處理成本。科研小組欲分離及培養若干種微生物用于對

濕垃圾（包括剩菜剩飯、骨頭、菜根菜葉、果皮等食品類廢物）的處理。下列有關敘述正確的是（）

A.在微生物培養操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養基和培養皿進行滅菌處理；對培養基和操作者的

雙手進行滅菌

B.培養過程需要向培養基通入無菌空氣并進行攪拌，目的是使菌體充分接觸營養物質和溶解氧，促進細菌

生長繁殖

C.科研小組若從生活垃圾中分離分解尿素的微生物，可在培養基中加入酚紅指示劑；如果有尿素分解菌存

在，則培養基中該菌落的周圍會出現黑色

D.衛生紙類垃圾可采用焚燒的方式處理，有效減少對環境的污染。

【答案】B

【分析】

無菌技術包括滅菌和消毒，滅菌使用強烈的物理、化學手段殺滅物理表面和內部的一切微生物及其芽抱，

消毒是用較溫和的手段消滅物體表面絕大多數的微生物。

【詳解】

A、在微生物培養操作過程中，對操作者的雙手應進行酒精消毒，A錯誤；

B、培養過程向培養基通入無菌空氣并進行攪拌，可使菌體充分接觸營養物質和溶解氧,促進細菌生長繁殖，

B正確：

C、從生活垃圾中分離分解尿素的微生物，在培養基中加入酚紅指示劑；如果有尿素分解菌存在，則培養基

中該菌落的周圍會出現紅色，C錯誤；

D、衛生紙類垃圾采用焚燒的方式處理，其中塑料類物質燃燒會增加大氣污染物，D錯誤。

故選B。

4.下列是關于“土壤中分解尿素的細菌的分離與計數''實驗操作的敘述，其中錯誤的是（）

A.利用稀釋涂布平板法準確估計菌落數目的關鍵是恰當的稀釋度

B.若要判斷選擇培養基是否起到了選擇作用需要設置未接種的牛肉膏蛋白陳培養基作為對照

C.在土壤中分解尿素的細菌的分離和計數實驗中，應采用稀釋涂布平板法

D.計數時應選擇菌落數為30-300之間的平板，取平均值進行計數

【答案】B

【分析】

1、土壤中分解尿素的細菌的分離與計數實驗中，需要使用以尿素為唯一氮源的選擇培養基，計數的關鍵是

經梯度稀釋后的學生倍數要合適，計數時通常選擇菌落數在30-300之間的實驗組平板進行計數。

2、培養基選擇分解尿素的微生物的原理：培養基的氮源為尿素，只有能合成胭酶的微生物才能分解尿素,

以尿素作為氮源。缺乏服酶的微生物山于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生長發育繁殖，而受到抑制，所

以用此培養基就能夠選擇出分解尿素的微生物。

【詳解】

A、利用稀釋涂布平板法準確估計菌落數目的關鍵是恰當的稀釋度，稀釋倍數太低，菌落太多會長在一起，

稀釋倍數太高，平板上菌落數目過少，都不易進行計數，A正確；

B、若要判斷選擇培養基是否起到了選擇作用，需設置接種了的沒有選擇作用的細菌通用的牛肉膏蛋白陳

培養基作對照，B錯誤；

C、在土壤中分解尿素的細菌的分離和計數實驗中，應采用稀釋涂布平板法，C正確；

D、計數時通常選擇菌落數在30-300之間的實驗組平板進行計數，D正確。

故選B.

5.以下有關生物技術實踐的敘述中，正確的是（）

A.用稀釋涂布平板法測定某土壤浸出液中活菌數目時，測定值可能比實際值大

B.以尿素為唯一氮源并加入酚紅指示劑的培養基可分離并鑒定土壤中分解尿素的細菌

C.啤酒是以大麥為主要原料經乳酸菌發酵制成的

D.市面上流行的“精釀”啤酒比工業啤酒品發酵時間長、品質高、更健康

【答案】B

【分析】

用稀釋涂布平板法計數結果常偏小，用顯微鏡直接計數結果常偏大。

分解尿素的細菌的鑒定原理：細菌合成的胭酶將尿素分解成氨，氨會使培養基的堿性增強.在以尿素為唯

一氮源的培養基中加入酚紅指示劑培養細菌，若指示劑變紅，可確定該種細菌能夠分解尿素。

【詳解】

A、用稀釋涂布平板法測定某土壤浸出液中活菌數目時，測定值可能比實際值小，A錯誤；

B、以尿素為唯一氮源并加入酚紅指示劑的培養基，可根據指示劑是否變紅，分離并鑒定土壤中分解尿素的

細菌，B正確；

C、啤酒是酵母菌發酵來的，C錯誤；

D、精釀啤酒保質期短，D錯誤。

故選Bo

6.某同學在稀釋倍數為105的培養基中測得平板上的平均菌落數為90,涂平板用的稀釋液的體積為0.1mL,

則每克樣品中的菌落數為（）

A.9xl（）8B.9xl07C.9xl05D.9xl06

【答案】B

【分析】

稀釋涂布平板法計數時，首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細胞分散開，成

單個細胞存在（否則一個菌落就不只是代表一個細胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，

使其均勻分布于平板中的培養基內。經培養后，由單個細胞生長繁殖形成菌落，統計菌落數目，即可計算

出樣品中的含菌數。計算公式：每克樣品中的菌株數=（c+V）xM,其中c代表某一稀釋度下平板上生長的

平均菌落數，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL）,M代表稀釋倍數。

【詳解】

由于平板上菌落數的平均值為90,稀釋倍數是105,所取稀釋液的體積為0.1mL,故每克樣品中的菌落數是

（90+0.1）xl05=9xl07,B正確。

故選B。

7.某興趣小組在校園土壤中取樣，進行“土壤中分解尿素的細菌的分離和計數”實驗。小明從稀釋倍數為106

培養基中篩選出約120個菌落，而其他同學只篩選出約40個菌落。下列有關敘述錯誤的是（）

A.小明出現這種結果的可能原因是和其他同學取樣的土壤不同

B.要證明培養基是否受到污染，可將小明配制的培養基不加土樣進行培養

C.當稀釋倍數太小時，可能由于菌落重疊而導致計數結果偏小

D.在牛肉膏蛋白腺培養基中加入酚紅指示劑可初步鑒定尿素分解菌

【答案】D

【分析】

1、微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在

恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形

成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可

形成單個菌落。

2、土壤中分解尿素的細菌的分離與計數：（1）實驗室中目的菌株的篩選：①原理：人為提供有利于目的菌

株生長的條件（包括營養、溫度、pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長。培養基選擇分解尿素的微生

物的原理：培養基的氮源為尿素，只有能合成胭酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源，缺乏胭酶的

微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生長發育繁殖，而受到抑制，所以用此培養基就能夠選擇出分

解尿素的微生物；②方法：能合成胭酶的細菌才能分解尿素，配制以尿素為唯一氮源的培養基，能夠生長

的細菌就是能分解尿素的細菌。

【詳解】

A、小明篩選出的菌落數明顯比其他同學多，出現這種結果的可能原因是和其他同學取樣的土壤不同，也有

可能是培養基混入其他氮源或培養基被污染，A正確；

B、要證明培養基是否受到污染，可將小明配制的培養基不加土樣進行培養，即進行空白對照，B正確；

C、當稀釋倍數太小時，兩個或兩個以上細菌連在一起時，培養基上看到的是一個菌落，可能會出現菌落重

疊而導致計數結果偏小，C正確；

D、在尿素為唯一氮源的培養基中加入酚紅指示劑，若培養基變紅色，可初步鑒定尿素分解菌，D錯誤。

故選D。

8.下列關于“分離以尿素為氮源的微生物”實驗的敘述，錯誤的是（）

A.土樣應從有哺乳動物排泄物的地方取

B.在尿素固體培養基上生長的細菌，都是以尿素為氮源的

C.將實驗組和對照組平板倒置，37。恒溫培養24-48h

D.取IO,、1。5的土壤稀釋液0.1ml,分別涂布于尿素固體培養基上

【答案】B

【分析】

“分離土壤中以尿素為氮源的微生物”實驗的原理：在以尿素為唯一氮源的培養基上，能分解尿素的微生物能

以尿素為氮源生長，其他不能利用尿素的微生物由于缺乏氮源無法生長。選擇培養基是否起到選擇作用，

要有對照，對照組是全營養的培養基。

【詳解】

A、哺乳動物排泄物中含有尿素，故土樣應從有哺乳動物排泄物的地方取，A正確；

B、在尿素固體培養基上生長的細菌，不一定都是以尿素為氮源的，可能利用空氣中的氮氣，B錯誤；

C、將實驗組和對照組平板倒置，37℃恒溫培養24~48h,C正確；

D、測定土壤中分解尿素的細菌總數，利用稀釋涂布平板法，即取10,if倍的土壤稀釋液各o」mL,分別

涂布于尿素固體培養基匕D正確。

故選B。

9.下表是某同學培養微生物時配制的培養基，關于此培養基的說法中，錯誤的是（）

葡萄糖尿素瓊脂

KH2Po4NaHPO4MgSO4-7H2O

1.4g2.lg0.2g10g1g15g

A.培養基中的KH2P04和Na2Hp04可作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩定

B.葡萄糖可被微生物分解丙酮酸，丙酮酸為該菌生長提供碳源和能源

C.此固體培養基可用于土壤中分解尿素細菌的分離與計數

D.培養基中加入酚紅指示劑后，生成的菌落周圍可能會變紅

【答案】B

【分析】

1、微生物培養基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養物質以

及氧氣的要求。

2、選擇培養基是在培養基中加入相應的特殊營養物質或化學物質，抑制不需要的微牛.物的生長，有利于所

需微生物的生長。

3、能分解尿素的細菌能合成胭酶，胭酶將尿素分解成氨，使培養基堿性增強，pH升高，所以可以用檢測

pH的變化的方法來判斷尿素是否被分解，可在培養基中加入酚紅指示劑，尿素被分解后產生氨，pH升高，

指示劑變紅。

【詳解】

A、無機鹽可以作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩定，所以培養基中KH2PCh和NazHPCh的作用之一是

作為緩沖劑保持pH穩定，A正確；

B、葡萄糖作為碳源，可被微生物分解成丙酮酸，丙酮酸可為該菌的生長提供能量和合成其他物質的原料，

B錯誤；

C、此固體培養基以尿素作唯一的氮源，可用于土壤中分解尿素細菌的分離與計數，C正確；

D、尿素分解菌將尿素分解成氨，使培養基pH升高，加入酚紅指示劑后，生成的菌落周圍可能會變紅，D

正確。

故選B。

10.實驗室從土壤中分離得到了能夠分解尿素的細菌M,并分別研究了培養液中Ni2+、MM+和尿素濃度對

細菌MIR能產量的影響（說明：研究某一項時其他條件相同且適宜），結果如下表。下列說法正確的是（）

Ni2+濃度（％）00.00050.00010.0050.010.05

第一組

腺酶產量（u/mL）0.020.0560.0670.280.360.08

M"+濃度(%)00.00050.0010.0050.010.05

第二組

版酶產量（u/mL）0.0310.210.280.310.370.085

尿素濃度（％）00.20.40.60.81.0

第三組

版酶產量（u/mL）01.151.601.731.450.28

A.分離出能夠分解尿素的細菌，應使用以尿素作為唯一碳源的培養基

B.實驗表明培養液中Ni2+和Mi?+對胭酶的影響為低濃度促進，高濃度抑制

C.細菌M合成胭酶需要尿素誘導，尿素的最適誘導濃度在0.4%-0.8%之間

D.本實驗遵循了對照性原則，但沒有遵循單一變量原則

【答案】C

【分析】

分析實驗結果可知，與對照組相比（離子濃度為0的一組），培養液中Ni?+和Mi?+對胭酶的影響都是促進生

成，只是低濃度促進作用顯著，高濃度促進作用減弱：表中數據中尿素濃度在尿素濃度為0.6%時版酶產量

最高，說明尿素的最適濃度在0.4%~0.8%之間。

【詳解】

A、要分離出能夠分解尿素的細菌，應該以尿素作為唯一氮源，A錯誤；

B、與對照組相比（離子濃度為0的一組），培養液中Ni2+和ME+對版酶產量都是促進作用，沒有體現抑制

作用，B錯誤；

C、尿素濃度為。時，版酸產量為0,說明細菌M合成麻酶需要尿素；表中數據中尿素濃度在尿素濃度為

0.6%時胭酶產量最高，說明尿素的最適濃度在0.4%~0.8%之間，C正確；

D、本實驗研究某一項時其他條件相同且適宜，遵循了對照性原則和單一變量原則，D錯誤。

故選C。

11.下列有關“土壤中分解尿素的細菌的分離與計數實驗''的敘述，正確的是（）

A.該培養基中應加入伊紅美藍，獲得的菌落呈現紅色

B.分解尿素的細菌能產生麻酶，將尿素分解產生氮氣

C.可以設置對照，以排除非測試因素對實驗結果的干擾，提高可信度

D.10mL樣品稀釋106倍后，取0.1mL進行涂布，測得菌落數分別為18、234、276,則10mL樣品中細

菌數為2.55x108個

【答案】C

【分析】

1＞分解尿素的細菌的鑒定原理：細菌合成的胭醐將尿素分解成氨，氨會使培養基的堿性增強.在以尿素為

唯一氮源的培養基中加入酚紅指示劑培養細菌，若指示劑變紅，可確定該種細菌能夠分解尿素。

2、統計菌落數目的方法

（1）顯微鏡直接計數法①原理：利用特定細菌計數板或血細胞計數板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品

中微生物數量；②方法：用計數板計數；③缺點：不能區分死菌與活菌。

（2）間接計數法（活菌計數法）①原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個菌落，來源

于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統計平板上的菌落數，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。③計算公

式：每克樣品中的菌株數=（C-V）XM,其中C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數，V代表涂布

平板時所用的稀釋液的體積（mL）,M代表稀釋倍數。

【詳解】

A、分解尿素的細菌產生的嘛酶能將尿素分解為氨，氨使培養基的堿性增強，pH升高.在該培養基中應加

入酚紅，獲得的菌落呈現紅色，A錯誤；

B、分解尿素的細菌能產生版酶，將尿素分解產生氨，B錯誤；

C、分離微生物時，需要設置不接種的培養基與實驗組一起培養做空白對照，以排除非測試因素對實驗結果

的干擾，提高可信度，C正確；

D、對10mL土樣稀釋1。6倍后，取0.1mL進行涂布，測得的菌落數分別為18、234、276,為了保證結果準

確，一般選擇菌落數在30?300的平板進行計數，則該10mL土樣中分解尿素的細菌數為（234+276）

4-2x106-?0.1x10mL=2.55x10'°^,D錯誤。

故選C。

12.尿素是一種重要的農業肥料，土壤中的某些細菌能合成胭酶，可以將尿素分解成氨和CO2,然后被植

物利用。下列有關土壤中尿素分解菌的分離和培養的敘述，正確的是（）

A.為了防止雜菌污染應將采集的土樣進行高壓蒸汽滅菌

B.若涂布的3個平板中的1組數據結果與另外兩組相差太遠，則需舍棄此數據

C.本實驗采用稀釋涂布平板法進行分離和計數，用酚紅試劑進行檢測鑒定

D.從反芻動物的瘤胃中與從土壤中分離尿素分解菌的實驗條件和培養方法相同

【答案】C

【分析】

常用的接種微生物的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀

釋，然后將不同稀釋度的菌液涂布到固體瓊脂培養基上，進行培養，在稀釋度足夠高的菌液里，將聚集在

一起的微生物分散成單個細胞，獲得由單個細胞繁殖而來的菌落。

【詳解】

A、采集的土樣中含有欲分離的尿素分解菌，不能進行高壓蒸汽滅菌，A錯誤；

B、若滿足有兩組數據在30~300之間，則可以取符合要求的數據求平均值，若不滿足有兩組數據處于30?

300之間，則需要重新實驗，B錯誤；

C、分離土壤中尿素分解菌實驗可以采用稀釋涂布平板法進行分離和計數，由于尿素分解產生氨，使培養基

pH升高，可用酚紅試劑進行檢測鑒定，C正確；

D、反芻動物的瘤胃中酸性較大，而土壤中尿素分解菌能使培養基呈堿性，因此兩組分離尿素分解菌的實驗

條件不同，D錯誤。

故選C。

【點睛】

本題以分離和培養尿素分解菌為情境材料，考查微生物培養中的滅菌、計數以及微生物的分離和檢測等知

識，考查知識獲取能力群和實踐操作能力群，涉及生物核心素養的生命觀念、科學思維和科學探究。

13.下列關于“分離以尿素為氮源的微生物”實驗的敘述，錯誤的是（）

A.從有哺乳動物排泄物的地方取土樣，分離到目的微生物的概率高

B.實驗中所用LB固體培養基，與分離大腸桿菌所用LB培養基成分有不同

C.對尿素固體培養基滅菌的方法是G6玻璃砂漏斗過濾

D.在尿素固體培養基生長的微生物不一定都能分泌胭酶

【答案】C

【分析】

1、微生物培養基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養物質以

及氧氣的要求。

2、微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在

恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形

成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可

形成單個菌落。

【詳解】

A、在含哺乳動物排泄物的土壤中有較多尿素且含腺酶的細菌數量更多，從有哺乳動物排泄物的地方取樣，

獲得目的菌種幾率很高，A正確；

B、”分離以尿素為氮源的微生物"中以尿素作為唯一氮源，含胭酶的微生物在該培養基上能生長，其它微生

物在該培養基上因缺乏氮源而不能生長，可用于分離含服酶的微生物，該實驗中需用全營養LB固體培養基

作對照，通過對照可以判斷選擇培養基的選擇作用，因此該培養基與分離大腸桿菌所用LB培養基成分有不

同，B正確；

C、在“分離以尿素為氮源的微生物”的實驗中，配制好的尿素固體培養基加上封口膜后用高壓蒸汽滅菌方法

滅菌，冷卻后加入用G6玻璃砂漏斗過濾的尿素溶液，C錯誤；

D、有的微生物可能可以利用目的菌的分解產物從而在該培養基上生存，故在尿素固體培養基生長的微生物

不一定都能分泌胭酶，還需進一步篩選，D正確。

故選C。

14.某興趣小組從校園土壤取樣，進行“土壤中分解尿素的細菌的分離和計數''實驗。小明從稀釋度為106培

養基中篩選出約120個菌落，而其他同學只篩選出約40個菌落。下列敘述錯誤的是（）

A.小明出現這種結果的可能原因是和其他同學取樣的土壤不同

B.要證明培養基是否受到污染，可將小明配制的培養基不接種進行培養

C.當稀釋倍數太小時，可能由于菌落重疊導致計數結果偏小

D.其他同學土樣的細菌懸液中分解尿素的細菌數量約為4x108個

【答案】D

【分析】

1、微生物常見的接種的方法（1）平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，

在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能

形成單個菌落。（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養

后可形成單個菌落。

2、土壤中分解尿素的細菌的分離與計數：（1）實驗室中目的菌株的篩選①原理：人為提供有利于目的菌株

生長的條件（包括營養、溫度、pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長。培養基選擇分解尿素的微生物

的原理：培養基的氮源為尿素，只有能合成服前的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源，缺乏胭酶的微

生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生長發育繁殖，而受到抑制，所以用此培養基就能夠選擇出分解

尿素的微生物②方法：能合成胭酶的細菌才能分解尿素，配制以尿素為唯一氮源的培養基，能夠生長的細

菌就是能分解尿素的細菌。

【詳解】

A、小明篩選出的菌落數明顯比其他同學多，出現這種結果的可能原因是和其他同學取樣的土壤不同，也有

可能是培養基混入其他氮源或培養基被污染，A正確；

B、要證明培養基是否受到污染，可將小明配制的培養基不加土樣進行培養，即進行空白對照，B正確；

C、當稀釋倍數太小時，兩個或兩個以上細菌連在一起時，培養基上看到的是一個菌落，可能會出現菌落重

疊而導致計數結果偏小，C正確；

D、其他同學選出約40個菌落，所以土樣的細菌懸液中分解尿素的細菌數量約為40x106=4xIO7個，口錯

誤。

故選D。

15.下圖所示為分離某種以尿素為氮源的細菌實驗過程，下列敘述錯誤的是（）

0.1mL?OOO一給

各盛有各種濃度做三個培養皿

4.5mL

無菌水OOO-0

0.1mL

A.土樣從有哺乳動物尿液的地方取，獲得目的菌種幾率很高

B.為驗證尿素固體培養基具有選擇作用，可用牛肉膏蛋白腺固體培養基做對照

C.將實驗組和對照組37c恒溫培養24至48h時，需將平板倒置

D.在尿素固體培養基上生長的細菌都是以尿素為氮源的細菌

【答案】D

【分析】

分離某種以尿素為氮源的細菌實驗過程：土壤取樣一樣品的稀釋一將稀釋液涂布到以尿素為唯一氮源的培

養基上一挑選能生長的菌落一鑒定。

【詳解】

A、在含哺乳動物排泄物的土壤中有較多含胭酶的細菌，因此土樣從有哺乳動物排泄物的地方取，獲得目的

菌種幾率很高，A正確；

B、取不同稀釋倍數的土壤稀釋液各0.1mL,分別涂布于牛肉膏蛋白陳固體培養基、尿素固體培養基上，其

中牛肉膏蛋白陳固體培養基是對照，B正確；

C、將實驗組和對照組37c恒溫培養24至48h時，需將平板倒置，C正確：

D、在尿素固體培養基上生長的細菌大多數是以尿素為氮源的細菌，還有一些利用空氣中氮的微生物等，D

錯誤。

故選D。

16.某些土壤細菌可將尿素（CH4N2O）分解為CO?和NH3供植物吸收和利用，但分解產物CO2不能為該

菌提供營養。若欲篩選出該種土壤細菌，僅考慮碳源和氮源，下列培養基設置合理的是（）

A.僅尿素B.尿素+葡萄糖

C.僅葡萄糖D.牛肉膏蛋白陳

【答案】B

【分析】

1、選擇培養基的概念是：在微生物學中，將允許特定微生物種類生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生

長的培養基，稱為選擇培養基，由于分解尿素的細菌都能合成胭酶，服酶能催化尿素水解，因此在以尿素

為唯一氮源的培養基上，分解尿素的菌能以尿素為氮源生長，而不能分解尿素的菌因缺乏氮源而無法生長。

2、常用的接種微生物的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度

稀釋，然后將不同稀釋度的菌液涂布到固體瓊脂培養基上，進行培養，在稀釋度足夠高的菌液里，將聚集

在一起的微生物分散成單個細胞，獲得由單個細胞繁殖而來的菌落。

3、尿素分解菌可以產生胭酶將尿素分解分解為氨，使pH升高，培養基中進入酚紅指示劑后，氨可以使指

示劑呈紅色，據此可以用酚紅指示劑鑒別尿素分解菌。

【詳解】

根據題意：“某些土壤細菌可將尿素（CH4N2O）分解為CO2和N%供植物吸收和利用，但分解產物CO2

不能為該菌提供營養”說明該土壤細菌是異養型，需要含碳有機物作為碳源，以尿素作為氮源，B正確。

故選B。

17.某些土壤細菌可將尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。下列關于土壤中分解尿素的細菌分離

和計數的敘述，正確的是（）

A.尿素為分解尿素的細菌提供碳源

B.配制培養基時，需要在酒精燈火焰旁操作

C.分離分解尿素的細菌使用的選擇培養基為固體培養基

D.涂布平板操作時，用接種環將菌夜均勻涂布在培養基表面

【答案】C

【分析】

配制以尿素為唯一氮源的培養基，能夠生長的細菌就是能分解尿素的細菌；分解尿素的細菌能合成胭酶將

尿素分解成氨，氨會使培養基的堿性增強，在以尿素為唯一氮源的培養基中加入酚紅指示劑，若指示劑變

紅，可確定該種細菌能夠分解尿素。

【詳解】

A、尿素為分解尿素的細菌提供碳源和氮源，A錯誤；

B、配制培養基時，不需要在酒精燈火焰旁操作，配制完成后再進行滅菌，B錯誤；

C、分離分解尿素的細菌時，使用的選擇培養基為固體培養基，可在培養基的表面得到單個菌落，C正確;

D、涂布平板操作時，用涂布器將菌夜均勻涂布在培養基表面，D錯誤。

故選C。

18.在農業生產中，為了提高農作物的產量，人們會向農田中施用大量的化學肥料。農田中化肥殘留過多

會影響土壤的理化性質。利用微生物分解殘留化肥的效果較好，為了篩選并保存高效分解尿素的微生物，

研究人員配制了兩份培養基如下表所示。下列相關敘述不正確的是（）

編號成分

甲KH2Po4、Na2HPO4.MgSCU、葡萄糖、尿素、瓊脂和蒸儲水

乙牛肉膏、蛋白陳、NaCl、瓊脂、蒸儲水

A.尿素分解菌可直接以尿素作為氮源

B.分離出尿素分解菌可用乙培養基進行長期保臧

C.可用稀釋涂布平板法來統計土壤樣品中分解尿素的活菌數量

D.平板劃線法時，滅菌后的接種環需每次在上次劃線的末端劃線

【答案】B

【分析】

土壤中的細菌之所以能分解尿素，是因為它們能合成胭酶，胭酶在把尿素分解成無機物的過程中起到催化

作用。篩選能分解尿素的細菌所利用的培養基中，尿素是唯一的氮源，尿素分解細菌在分解尿素時，可以

將尿素轉化為氨，使得培養基的酸堿度升高。統計菌數目一般用稀釋涂布平板法。

【詳解】

A、尿素分解菌能合成胭酶，把尿素分解成氨，可直接以尿素作為氮源，A正確；

B、頻繁使用的菌種，可以采用臨時保藏的方法，將菌種接種到試管的固體斜面培養基上，低溫保藏。需要

長期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法，B錯誤；

C、稀釋涂布平板法可對活菌進行計數，所以統計土壤樣品中分解尿素的活菌數量可用稀釋涂布平板法，C

正確；

D、平板劃線法時，滅菌后的接種環需每次在上次劃線的末端劃線，能使細菌的數目隨著劃線次數的增加而

逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落，D正確。

故選B。

19.分解尿素的微生物廣泛存在于農田等土壤中，下列關于對分解尿素的微生物進行分離和計數的操作正

確的是（）

A.分解尿素的微生物含有腺酶，因此配制培養基時應選擇包括尿素在內的多種物質作為氮源

B.培養基中添加酚紅作為指示劑，培養后，培養基PH會降低，可使指示劑變紅色

C.在接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先培養一段時間，目的是檢測培養基平板滅菌是否合格

D.計數時，在同一稀釋度下，任取3個平板對其中的菌落數進行統計，取其均值即可

【答案】C

【分析】

1、由于細菌分解在尿素的過程中合成胭醐，麻能將尿素分解成氨，會使培養基堿性增強，pH升高，所以

可以用檢測pH的變化的方法來判斷尿素是否被分解，可在培養基中加入酚紅指示劑，尿素被分解后產生氨,

pH升高，指示劑變紅。

2、檢測土壤中細菌總數，可以看出采用的計數方法是稀釋涂布平板法進行計數。用稀釋涂布平板法測定同

一土壤樣品中的細菌數時，在每一個梯度濃度內，至少要涂布3個平板，選擇菌落數在30?300的進行記

數，求起平均值，再通過計算得出土壤中細菌總數。

【詳解】

A、分解尿素的微生物含有胭酶，配制分解尿素的培養基時應以尿素作為唯一氮源，A錯誤：

B、培養基中添加酚紅作為指示劑，培養后，細菌合成的胭酶將尿素分解為氨，培養基的堿性增強，pH升

高，可使指示劑變紅色，B錯誤；

C、在接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先培養一段時間，目的是檢測培養基平板滅菌是否合格，若滅

菌后的空白平板培養一段時間后沒有菌落生長，說明培養基平板滅菌合格，C正確；

D、為了保證結果準確，一般選擇菌落數在30~300的平板進行計數，D錯誤。

故選C。

①制備土壤②在選擇培養③篩選、純化分④細菌分解尿索能

浸出液基中培養解尿素的細菌力的鑒定和比較

A.在配制培養基時，應注意防止雜菌污染

B.純化分解尿素的細菌的原理是獲得單細胞菌落

C.步驟③采用稀釋涂布平板法接種，并需向牛肉膏蛋白陳培養基中加入尿素

D.步驟④應挑取③中不同的菌落分別接種，比較細菌分解尿素的能力

【答案】C

【分析】

微生物常見的接種的方法

①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部

分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。

【詳解】

A、微生物培養的關鍵是防止雜菌污染，在配制培養基時，也要主要防止雜菌污染，A正確；

B、步驟③純化分解尿素的原理是將聚集的細菌分散，可以獲得單細胞菌落，B正確；

C、要篩選出能高效分解尿素細菌，所選用的培養基要以尿素為唯一氮源,但牛肉膏和蛋白陳中都含有氮源，

因此步驟③所用的培養基中不能含有牛肉膏蛋白陳，C錯誤；

D、步驟④挑取③中不同種的菌落分別接種，比較細菌分解尿素的能力，D正確。

故選C。

21.分離土壤中尿素分解菌的實驗操作中，無法分離得到尿素分解菌的原因最可能是（）

A.制備浸出液的土壤取自土壤的表層

B.涂布前涂布器未在酒精燈外焰上灼燒滅菌

C.使用牛肉膏蛋白腺培養基并在其中添加了尿素

D.未對土壤樣液進行稀釋就進行涂布培養

【答案】C

【分析】

從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養、梯度稀釋、涂布培養和篩選菌株，該過程中需

要用尿素作為唯一碳源制成培養基進行選擇培養。

【詳解】

A、制備浸出液的土壤取自土壤的表層與分離得到的尿素分解菌的單菌落有關，但影響不大，與題意不符，

A錯誤；

B、涂布器未在酒精燈外焰上灼燒滅菌可能會造成污染，與分離得到的尿素分解菌的單菌落有關，但影響不

大，與題意不符，B錯誤；

C、該培養基必須以尿素為唯一的氮源，不能使用牛肉膏蛋白陳培養基，該操作對實驗影響最大，與題意相

符，C正確；

D、未對土壤樣液進行稀釋就進行涂布培養與分離得到的尿素分解菌的單菌落有關，但影響不大，與題意不

符，D錯誤。

故選C。

22.某同學計劃用選擇培養基篩選尿素分解菌，關于實驗方案下列說法正確的是（）

A.進行梯度稀釋的時候每次吸取的菌液量是隨意的

B.從燒杯取出涂布器在火焰上灼燒后要放回燒杯中進行冷卻

C.選擇培養基能允許特定種類微生物生長并抑制其他種類微生物生長

D.涂布不同稀釋倍數菌液的平板的培養時間應隨菌液濃度的增大而增加

【答案】C

【分析】

1、篩選目的微生物時應該使用只有目的微生物能夠生存，而其他微生物不能生存的選擇培養基；

2、基礎培養基是用人工方法配制而成的，專供微生物生長繁殖的混合營養物制品。

【詳解】

A、進行梯度稀釋的時候每次吸取的菌液量是計算好的，A錯誤；

B、從燒杯取出涂布器在火焰上灼燒后不可放回燒杯中，避免引燃杯中酒精，B錯誤；

C、選擇培養基是指在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的

培養基，使用選擇培養基可以富集篩選目的微生物，c正確；

D、涂布不同稀釋倍數菌液的平板的培養時間應該一致，D錯誤。

故選C。

23.下列有關培養基和菌種鑒定的敘述正確的是（）

A.可利用固體培養基上菌落的特征來判斷和鑒別細菌的類型

B.利用剛果紅培養基上是否形成透明圈來篩選纖維素分解菌

C.在以尿素為唯一氮源的培養基中加入酚紅指示劑鑒定尿素分解菌

D.動植物細胞培養常用的都是液體培養基

【答案】ABC

【分析】

菌落是指山一個微生物細胞或一堆同種細胞在適宜固體培養基表面或內部生長繁殖到一定程度，形成肉眼

可見的子細胞群落。菌落形態包括菌落的大小、形狀、邊緣、光澤、質地、顏色和透明程度等，每一種細

菌在一定條件下形成固定的菌落特征。不同種或同種在不同的培養條件卜，菌落特征是不同的。這些特征

對菌種識別、鑒定有一定意義。

【詳解】

A、每一種細菌在固體培養基上形成固定的菌落特征，這些特征對菌種識別、鑒定有一定意義，A正確；

B、當纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復合物就無法形成，培養基中會出現以纖維素分解菌為

中心的透明圈，可通過是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌，B正確；

C、在以尿素為唯一氮源的培養基中加入酚紅指示劑可用來鑒定尿素分解菌，C正確；

D、動物細胞培養常用液體培養基，植物細胞培養常用固體培養基，可以為植物生長提供支撐作用，D錯誤。

故選ABC。

24.如圖表示研究者從土壤中篩選分解尿素的細菌并計數的實驗，據圖分析相關敘述正確的是（）

I號培養基

土壤樣品

II號培養基

A.①過程所用的培養基應以尿素為唯一氮源

B.配制培養基時，要先進行滅菌再調解pH

C.③操作過程需在酒精燈火焰旁進行

D.I號培養基和n號培養基均可用于尿素分解菌的計數

【答案】AC

【分析】

1.分離菌株的思路：（1）自然界中目的菌株的篩選①依據：根據它對生存環境的要求，到相應的環境中去尋

找。②實例：PCR技術過程中用到的耐高溫的TaqDNA聚合酶，就是從熱泉中篩選出來的Taq細菌中提取

出來的。（2）實驗室中目的菌株的篩選①原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養、溫度。

pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長。培養基選擇分解尿素的微生物的原理：培養基的氮源為尿素，

只有能合成服酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源。缺乏服酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮

源而不能牛.長發育繁殖，而受到抑制，所以用此培養基就能夠選擇出分解尿素的微牛.物②方法：能合成服

酶的細菌才能分解尿素。配制以尿素為唯一氮源的培養基，能夠生長的細菌就是能分解尿素的細菌。

2.統計菌落數目的方法：（1）稀釋涂布平板法（間接）①當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的'

個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。②通過統計平板上的菌落數來推測樣品中大約含有的活菌數。（2）

利用顯微鏡直接計數。

【詳解】

A、①過程表示富集培養分解尿素的細菌，所用的培養基應以尿素為唯一氮源，A正確；

B、配制培養基時，要先調pH再進行滅菌，B錯誤；

C、③操作是平板劃線法，需在酒精燈火焰旁進行，C正確；

D、I號培養基用稀釋涂布平板法，可用于尿素分解菌的計數，［1號培養基是平板劃線法，無法對尿素分解

菌進行計數，D錯誤。

故選AC,

25.如圖為“土壤中分解尿素的細菌的分離和計數''實驗中樣品稀釋示意圖。據圖分析正確的是（）

mLQml

有無菌"（＞168個菌落

。175個菌落

。167個菌落

A.用移液管吸取菌液進行梯度稀釋時，可用手指輕壓移液管上的橡皮頭，吹吸三次，使菌液與水充分混勻

B.對4號試管中的稀釋液進行平板培養得到的菌落平均數必然為5號試管的10倍

C.5號試管的結果表明每克土壤中的菌株數為1.7x109

D.該實驗方法統計得到的結果往往會比實際活菌數目要低

【答案】ACD

【分析】

從土壤中分離尿素分解菌的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養、梯度稀釋、涂布培養和篩選菌株。圖中5

支試管為梯度稀釋，最后經稀釋涂布平板法接種培養后進行計數。

【詳解】

A、用移液管稀釋菌液時，吹吸三次的目的是使菌液與水充分混勻，防止對后續的稀釋過程造成影響，A正

確；

B、4號中稀釋液進行平板培養，稀釋倍數比5號的低10倍，如果稀釋倍數適當，得到的菌落平均數可能是

5號的10倍，B錯誤；

C、分析圖解可知，菌液一共稀釋倍，每克土壤中的菌株數為（168+175+167）+3+0.1x106=17x109個，

C正確；

D、稀釋涂布平板得到的菌落可能存在兩個或多個細菌細胞長成一個菌落，使該實驗方法統計得到的結果往

往會比實際活菌數目要低，D正確。

故選ACD。

26.下列有關“土壤中分解尿素的細菌的分離與計數”實驗的敘述，不正確的是（）

A.實驗中采集的土樣經高溫滅菌后，可以用于制取土壤稀釋液

B.分離土壤中能分解尿素的細菌時，應選擇以尿素為唯一氮源的培養基

C.測定土壤樣品中的活菌數目，常用顯微鏡直接計數法

D.接種土壤微生物稀釋液時，平板劃線法通過連續劃線的操作使微生物均勻分布

【答案】ACD

【分析】

土壤中分解尿素的細菌的分離與計數：（1）分離原理：土壤中的尿素分解菌之所以能分解尿素，是因為它

們能合成腺酶，版醐能將尿素分解成二氧化碳和氨。（2）統計菌落數目：統計樣品中的活菌一般用稀釋涂

布平板法。（3）實驗流程：土壤取樣一樣品的稀釋T微生物的培養與觀察T細菌的計數。

【詳解】

A、在分離土壤中的尿素分解菌實驗中，采集的土樣經高溫滅菌后，土樣中的微生物被殺死，再制取土壤稀

釋液接種并培養，不會得到菌落，A錯誤；

B、尿素分解菌能分解尿素，篩選分解尿素的細菌時，應以尿素為唯一氮源的選擇培養基培養，B正確；

C、測定土壤樣品中的活菌數目，常用活菌計數法，即稀釋涂布平板法，C錯誤；

D、接種土壤微生物稀釋液時，稀釋涂布平板法是通過涂布器的操作使微生物均勻分布，D錯誤。

故選ACD。

28.尿素分解菌產生的服酶能夠把尿素分解為氨使pH升高，為自身生命活動提供能量，下列說法錯誤的是

()

A.培養尿素分解菌的關鍵是防止雜菌污染

B.培養基中加入尿素為唯一氮源的原因是只有尿素分解菌能分解尿素為生命活動供能

C.尿素分解菌的代謝類型是自養需氧型，所以實驗中需要振蕩培養，為其提供更多的氧氣

D.稀釋涂布平板法和平板劃線法都能分離尿素分解菌獲得單菌落

【答案】BC

【分析】

土壤中分解尿素的細菌的分離與計數實驗中，需要使用以尿素為唯一氮源的選擇培養基，計數的關鍵是經

梯度稀釋后的倍數要合適，計數時通常選擇菌落數在30-300之間的實驗組平板進行計數。

【詳解】

A、微生物培養的關鍵是防止菌污染，A正確；

B、培養基中加入尿素為唯一氮源的原因是只有尿素分解菌能分解尿素為生命活動提供N源，B錯誤：

C、尿素分解菌的代謝類型是異養需氧型，C錯誤：

D、稀釋涂布平板法和平板劃線法都能分離微生物獲得單菌落，D正確。

故選BCo

29.牛奶消毒及細菌檢測實驗的過程如下圖所示，下列相關敘述正確的是()

5mL生牛奶1mL1mL1mL1mL

培養

計數

牛肉音

無菌恒溫水浴鍋冷9mL9mL9mL翼旦暨

試管80ct15min為無菌水無菌水無菌水培養基

①②③

A.步驟①為巴氏消毒法，這種消毒法的特點是既能殺死牛奶中的微生物，又不破壞牛奶中的營養成分

B.實驗中對試管、培養皿的滅菌可采用的方法是干熱滅菌，這種方法適用的是能耐高溫且需要保持干燥的

物品

C.實驗中的培養基適宜的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌

D.實驗中采用稀釋涂布平板法計數，可能導致實驗結果偏高

【答案】ABC

【分析】

1、實驗室常用的滅菌方法：

①灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層

灼燒，可以迅速徹底地滅菌，止匕外，在接種過程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過火焰

灼燒來滅菌。

②干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養皿）和金屬用具等，可以采用

這種方法滅菌。

③高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內，為達到良好的滅菌效果，一般在壓

力為lOOkPa,溫度為1210c的條件下，維持15?30min。

2、分析題圖：圖中①為巴氏消毒的過程，②為梯度稀釋，③為涂布平板接種。

【詳解】

A、步驟①為巴氏消毒法，是指70-75℃煮30分鐘或80℃煮15分鐘，使用這種方法對生鮮牛奶進行消毒的

好處是牛奶的營養成分不被破壞，A正確；

B、能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養皿）和金屬用具等，可以采用干熱滅菌法，

B正確；

C、實驗中的培養基一般用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌，C正確；

D、實驗中采用稀釋涂布平板法計數，可能導致實驗結果偏低，原因是當兩個或多個細菌連在一起時計數的

是一個菌落，D錯誤。

故選ABCo

30.圓褐固氮菌和巨大芽抱桿菌組合可以將有機廚余垃圾迅速分解成水和二氧化碳，減輕環境污染。為制

備分解有機廚余垃圾的微生物菌劑，某科研小組對兩菌種進行了最佳接種量比的探究實驗，并得出下圖的

實驗結果。下面敘述正確的是（）

■硼褐固氮菌

□巨大芽抱桿菌

2:1兩種菌種

按種量比例

氮菌泡桿菌

A.巨大芽抱桿菌生長過程中需要氮源，圓褐固氮菌生長過程中不需要氮源

B.要統計活菌數量可采用平板劃線法和稀釋涂布平板法

C.可根據菌落形態特征區分圓褐固氮菌和巨大芽抱桿菌

D.該實驗無法確定處理該類廚余垃圾廢液時兩菌種的最佳接種量比例

【答案】CD

【分析】

1、各種微生物在一定條件下形成的菌落特征，如大小、形狀、邊緣、表面、質地、顏色等，具有一定的穩

定性，是衡量菌種純度、辨認和鑒定菌種的重要依據。

2、微生物常用接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。稀釋涂布平板法可用于活菌計數。

【詳解】

A、微生物的生長需要碳源、氮源、無機鹽等物質，圓褐固氮菌生長過程中也需要氮源，但是因為其具有固

氮能力，可以利用空氣中的氮氣作為氮源，不需要在培養基中添加氮源，A錯誤；

B、要統計活菌數量可采用稀釋涂布平板法。劃線法不能用于計數只能用于分離純化，B錯誤；

C