小麥田抗藥性雜草監測鑒定防治技術規程1范圍本文件確立了小麥田抗藥性雜草監測、鑒定、防治技術要點以及注意事項。本文件適用于XX省小麥田雜草化學防除技術的需要。2規范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。NY/T1155.4農藥室內生物測定試驗標準除草劑第4部分：活性測定試驗莖葉噴霧法NY/T1859.1-2010農藥抗性風險評估第1部分：總則NY/T1859.4-2012農藥抗性風險評估第4部分：乙酰乳酸合成酶抑制劑類除草劑抗性風險評估NY/T1859.7-2014農藥抗性風險評估第7部分：抑制乙酰輔酶A羧化酶除草劑抗性風險評估3術語和定義NY/T1667-2008界定的以及下列術語和定義適用于本文件。敏感種：能被登記除草劑的推薦劑量殺死的雜草種類。敏感生物型：能被除草劑登記的推薦劑量殺死的雜草生物型?？剐陨镄停菏┧幖夹g正確的前提下，敏感種內不能被除草劑登記的推薦劑量殺死的雜草生物型。靶標抗藥性:主要是由靶標位點突變導致的靶標酶敏感度降低或是由靶標酶的過量表達引起的。非靶標抗藥性:靶標抗性之外的抗性統稱為非靶標抗性，主要包括雜草對除草劑的滲透、吸收和傳導減少，除草劑的解毒代謝作用增強以及對除草劑的屏蔽作用或隔離作用等。4小麥田抗藥性雜草監測4.1確定重點監測區域 根據除草劑田間用藥歷史以及種植戶藥效調查情況，對存在潛在除草劑抗藥性雜草進化的田塊進行定期，定位觀察定點、定位連續觀察（至少2-3年1次）。4.2取樣方法與樣本數量種子：（藥后）收集雜草成熟的種子，將每塊麥田隨機收集的5個取樣點雜草種子放入一個樣品袋（透氣不易發霉、容易晾干），不同雜草種子放入不同的樣品袋中。小粒種子（如播娘蒿、薺菜）約200－300g；大粒種子（如菵草、日本看麥娘）500－800g。草籽采集后，填寫記錄表格（見附表）；植株：（植株）藥后至少2周后采集存活植株，單株保存；填寫記錄表格（見附表）。4.3采集信息記錄記錄經緯度、疑似抗性雜草密度、其它雜草發生密度、用藥歷史（尤其是相同作用機制除草劑的使用情況，，包括除草劑種類，時間和用量）、作物種植密度（株行距）、耕作模式、前茬作物、施肥、排灌方式等農事操作。4.4樣本保存與運輸種子：37℃烘干至少2天，密封，干燥保存在4℃冰箱直至種子寄出到檢測點；植株：植株根部帶土，帶冰袋低溫寄出（從采集到寄出不超過兩天）。4.5抗性分區標準及普查間隔根據監測結果，分成無抗性區、低度抗性區、中度抗性區和高度抗性區。普查間隔:無抗性區4-5年一次；低、中抗性區提高監測頻度，至少2-3年普查一次；高抗性區每年普查，評估抗性損失，加強治理。4.6其他相關參數評價除草劑:作用靶標單一、持效期長、多年使用歷史、同類作用機制的藥劑抗性雜草發生頻度較高；靶標雜草:雜草世代周期短、繁殖系數高、種子壽命長、抗藥性突變起始頻率高和適合度高；農事操作:同一類除草劑每年施用次數多于2次、種植作物種類單一、面積大、連作或使用相同作用方式除草劑的作物輪作方式等，抗藥性產生以后對農業生產的危害等。5小麥田抗藥性雜草鑒定技術5.1抗性類別的確定首先對推薦劑量進行篩選，通過整株雜草生物量（或/和死亡率）對除草劑系列濃度的反應，建立劑量與生物量的關系，以地上部生物量受藥劑的抑制程度來評價其對除草劑抗性。5.2抗性程度的劃分抗性指數（RI）：同一除草劑對雜草抗性生物型GR50（ED50或IC50）與其敏感生物型GR50（ED50或IC50）的比值。通過室內生物測定試驗，以抗性指數評價抗性程度：無抗性（RI≤1），低抗性（3≥RI﹥1），中抗性（10﹥RI﹥3），高抗性（RI≥10）。5.3抗性機理的鑒定靶標基因位點突變：分別提取敏感和抗性植株DNA，根據靶標基因保守區序列設計引物，進行基因擴增和測序，對比分析靶標基因序列差異。靶標酶過量表達：根據不同除草劑的作用靶標酶，選擇測定不同靶標酶活性，主要包括過氧化物歧化酶（SOD）、乙酰乳酸合成酶（ALS）、乙酰輔酶A羧化酶（ACCase）和5-烯醇式丙酮酸莽草酸-3-磷酸合酶（EPSPS）等，分別在敏感和抗性植株內測定靶標酶活性差異。6小麥田抗藥性雜草防治技術6.1農藝措施管理方法利用輪作、機械除草、生物防治以及人工除草等措施防除雜草，注意田間管理，盡量減少化學防治措施的使用次數。采用深翻、雜草種子截留技術等，抑制雜草萌發或減少土壤雜草種子庫含量。6.2合理使用除草劑遵守除草劑的輪換使用規則：避免同一類型或結構相近的除草劑長期使用；輪換使用對雜草作用位點復雜的除草劑；輪換使用作用機制不同的除草劑或同一除草劑品種的不同類型