傳染病的實驗室檢查葉

英我國法定傳染病的種類分為甲類（2）、乙類(25)、丙類(10)乙類傳染病原有23種，新增2種傳染性非典型肺炎、人感染高致病性禽流感傳染病的診斷具備三要素:①

流行病學資料②

臨床資料③

實驗室資料：對傳染病診斷具有特殊意義疑似病例，確診病例有病原學方面資料可明確診斷實驗室檢查⒈

一般檢查：三大常規、生化檢查⒉

病原學方面資料：①病原體的檢出：直接檢出，分離培養②分子生物學檢測特異核酸：分子雜交

、聚合酶鏈反應（PCR）實驗室檢查③免疫學檢測：特異性抗體檢測特異性抗原檢測細胞免疫功能檢查免疫球蛋白測定3.其他：內鏡檢查、影像檢查、活檢1.一般檢查：(4項)①

血常規WBC↑：流腦、猩紅熱等細菌性傳染病出血熱、乙腦WBC↓：病毒感染、原蟲感染傷寒、布氏桿菌病嗜酸粒細胞↑：蠕蟲感染嗜酸粒細胞↓：傷寒、流腦異型淋巴細胞：見于出血熱、傳單1.一般檢查：(4項)②

尿常規蛋白尿、RBC、管型、少量WBC：鉤體病蛋白尿、膜狀物、管型、RBC、融合細胞：出血熱③

大便常規RBC+WBC:菌痢、腸阿米巴病（少量WBC）水樣便，粘液便：病毒性或大多數細菌性腸道感染④

生化病毒性肝炎等2.病原學檢查①病原體直接檢出

血液、骨髓涂片：檢瘧原蟲（顯微鏡、肉眼）

大便涂片：寄生蟲卵、阿米巴等②病原體分離培養檢材：血、尿、腦脊液、骨髓、皮疹吸取液等注意采集標本注意病程階段、是否應用抗生素點

本保存與運送標時間方法人工培養基分離培養：細菌、螺旋體、真菌動物接種、組織培養：立克次體、病毒3.分子生物學檢測①分子雜交：利用探針檢出特異性病毒核酸②聚合酶鏈反應（PCR）:可將DNA擴增100萬倍以上逆轉錄PCR（RT-PCR）：檢測RNA病毒核酸③原位聚合酶鏈反應：用于組織細胞中原位檢出低拷貝DNA、RNA序列。4.免疫學檢查用已知Ag/Ab檢測血清或體液中的相應Ag/Ab①特異性抗體檢測急性期、恢復期雙份血清4倍以上升高意義

4倍以下升高提示回憶反應近期感染：IgM型抗體陽性凝集反應（肥達氏反應）方法補體結合：病毒感染免疫熒光：快速診斷酶鏈免疫吸附測定：靈敏度高，操作簡便②特異性抗原檢測診斷意義較抗體可靠；方法多樣。③細胞免疫功能T細胞亞群檢測:CD4,CD8等：艾滋病④免疫球蛋白測定降低者見于先天性免疫缺損升高者見于慢性肝炎、黑熱病、艾滋病等5.其它檢查①

內鏡

:纖維支氣管鏡：艾滋病肺孢子蟲病結腸鏡：菌痢、阿米巴②

影像學檢查：X光、超聲、CT、MRI③

活檢病毒性肝炎病毒性肝炎在我國危害極大病毒性肝炎在我國各類傳染病中發病率最高我國乙肝病毒感染者逾1.3億

10%乙型肝炎患者近3千萬HAV感染率約80%HCV感染率約7％HDV感染率在HBV感染者中約10％HEV感染率約18％每年近30萬人死于肝炎或肝癌能引起肝功能損害的病毒有很多：它?

黃熱病毒（YFV）?

EB病毒（EBV）們均非嗜肝病毒?

巨細胞病毒（CMV）?

單純皰疹病毒（HSV）?

風疹病毒(RV)可通過特異的Ag/Ab來檢測病毒性肝炎特指由嗜肝病毒感染所引起的肝臟炎癥和壞死病變的一組傳染病。目前已知的嗜肝病毒有五種：HAV（甲）、HBV（乙）、HCV(丙）、HDV（丁）、HEV（戊）庚型肝炎病毒（HGV/GBV-C）輸血傳播病毒（TTV）SenV5種嗜肝病毒的病原學特點一、甲型病毒性肝炎甲

肝●

HAV為單股正鏈RNA病毒●病毒分型和抗原抗體系統：HAV僅有一個血清型和一個抗原抗體系統抗HAV-IgM：急性感染指標，一般持續8-12周，少數6月抗HAV-IgG：是保護性抗體，可長期存在二、乙型病毒性肝炎l

HBV屬嗜肝DNA病毒科1.HBV形態結構乙

肝A:大球形顆粒（Dane顆粒）B:絲狀顆粒C:小球形顆粒Dane顆粒-病毒復制的主體HBsAg（外膜蛋白）HBcAgHBVDNADNAP乙

肝2.HBV基因組結構編碼pre-S1pre-S1蛋白pre-S2蛋白HBsAgpre-S2Spre-CHBeAgCPHBcAgCDNAPXHBxAgHBsAgpre-S2pre-S1乙

肝3.HBV血清標志物及其臨床意義（1）HBsAg

曾用名：HAA、澳大利亞抗原●出現時間：HBV感染后1周～12周●持續時間：急性肝炎：1-6周，6個月內可消失慢性肝炎或HBsAg攜帶者：可持續陽性乙

肝●

HBsAg有抗原性而無傳染性HBsAgHBV整合肝細胞DNAS基因持續表達adradwayr●HBsAg

的亞型長江以北長江以南新疆、西藏、內蒙等ayw乙

肝（2）抗-HBs●

出現時間：急性感染后期或HBsAg消失后窗口期：

HBsAg已消失，抗-HBs未出現，只檢出抗HBc和抗HBe●

抗-HBs為保護性抗體其出現標志著HBV感染進入恢復期●

抗-HBs對相同HBsAg亞型的HBV再感染有免疫力，但對不同亞型的HBV保護力不完全。（3）HBeAg乙

肝從前C基因開始編碼的蛋白質經加工分泌到細胞外即為HBeAgHBVC基因C區表

達前C區前C/

C蛋白切割、加工HBcAgHBeAg分泌到細胞外HBeAg只存在于血清中乙

肝●

HBeAg是病毒復制和傳染性的標志●

在慢性乙肝中HBeAg是重要的免疫耐受因子l

血清HBeAg陽性者中，HBV-DNA陽性率為92%左右乙

肝（4）抗-HBe●

出現時間：

HBeAg消失后，常伴DNA陰轉，ALT正常●抗-HBe的出現標志著病毒復制減少、傳染性降低在部分抗-HBe陽性者中，DNA仍陽性，ALT異常，HBeAg陰性

---

前C基因變異(G1896A)易加重病情、易演變為肝硬化α-干擾素療效差HBeAg陰性的慢乙肝乙

肝（5）HBcAg一般血清學方法檢測不到HBcAg肝組織免疫組化技術:

可檢查肝細胞內HBcAg（6）抗-HBc抗HBc-IgM：是HBV急性或慢性感染者病毒活動標志抗HBc-IgG：凡“有過”HBV感染者均可陽性，高滴度亦提示病毒活動可終身陽性乙

肝（6）HBVDNA是病毒復制和傳染性的最直接證據檢測方法：斑點雜交法、PCR法（7）DNAP（DNA多聚酶）：是逆轉錄酶是直接反應病毒復制的指標之一（8）HBxAg：HBxAg具有反向激活作用，可調控病毒基因轉錄水平，并對宿主癌基因可能有激活作用。乙

肝●介紹三個概念：①

“兩對半”②

血清轉換：HBeAg消失，出現HBeAbHBsAg消失，出現HBsAb③

“轉陰”常用指標：HBsAg血清轉換----金牌HBeAg血清轉換----銀牌HBVDNA陰轉------銅牌丙

肝三、丙型病毒性肝炎丙肝是經濟發達國家病毒性肝炎的主要類型1.

HCV形態HCV為單股正鏈RNA病毒，1991年歸為黃病毒科丙型肝炎病毒屬2.HCV基因組結構

HCVRNA全長約10kbC

E1

E2/NS1

NS2

NS3

NS4

Ns55’NC3’NC兩側為5’和3’非編碼區，中間為ORF。ORF依次為：C（核心蛋白區，高度保守）-E1-E2∕NS1（包膜蛋白區，極易變異）-NS2-NS3-NS4-NS5（非結構蛋白區）l

NS3蛋白具有強免疫原性，可刺激機體產生抗體l

HCV基因型：>10個，我國以1b型為主丙

肝3.HCV的抗原抗體系統l

血清中HCVAg含量低，目前尚無法檢測。l

抗-HCV為非保護性抗體，陽性為病毒感染標志l

HCV-RNA：是病毒復制及傳染的直接標志，但體內病毒含量較低，需反復檢測丁

肝四、丁型病毒性肝炎HDV為缺陷病毒，必須依賴HBV的輔助才能復制。1.

HDV形態：l又稱δ因子，為單股負鏈RNA病毒。l在細胞核內HDVRNA無需HBV輔助而能自行復制，在血液中表面包裹HBsAg丁

肝2.

HDAg和抗-HDVl

HDV僅有一個血清型和一個抗原抗體系統l

HDAg最早出現，是HDV感染的直接標志l

HDV-Ab不是保護性抗體抗HDV-IgM：早期感染標志抗HDV-IgG：既往感染的標志l

HDVRNA是診斷HDV感染最直接依據戊

肝五、戊型病毒性肝炎●

HEV為單股正鏈

RNA病毒,有2個以上的基因型。l

HEVAg主要定位于細胞漿，血清中檢測不到。●

抗-HEV：抗HEV-IgM：是近期內HEV感染的標志，有早期診斷價值抗HEV-IgG：HEV感染后可長期存在，可用于流行病學調查l

HEVRNA是HEV感染最直接依據,但持續時間不長病毒性肝炎的實驗室檢查一、血象急性肝炎：WBC正常或稍低，淋巴細胞相對

慢性肝炎、肝硬化：WBC和BPC↓二、血清生化檢查1.血清酶測定（1）丙氨酸轉氨酶（ALT/GPT）●分布：肝>腎>心>肌肉●意義：反映肝功能的最常用指標●血清ALT升高程度與肝損傷程度不平行（2）門冬氨酸轉氨酶（AST/GOT）●

AST明顯升高者提示肝細胞損傷較嚴重ALT胞漿內AST

線粒體（80%）和胞漿（20%）內（3）γ-GT和ALP(AKP)●

兩者均是反應膽汁淤積的指標γ-GT

肝炎活動期，梗阻性黃疸時可顯著升高ALP同上，兒童亦可明顯升高。腫瘤時兩者亦可出現顯著升高2.血清膽紅素測定●血清總膽紅素升高水平可反應肝細胞損傷程度●直接膽紅素占總膽紅素的比例對判斷黃疸性質有一定幫助：肝細胞性黃疸：DB與IB同比例升高梗阻性黃疸或膽汁淤積時：DB

60%TB3.甲胎蛋白（AFP）●

慢性肝炎及肝硬化：可升高●

重型肝炎：可升高，病情好轉后降低●

診斷PHC：>500ng/ml，4周以上200～500ng/ml，8周以上4.白蛋白、球蛋白●

白蛋白下降多見于肝硬化和重型肝炎●

球蛋白升高多見于慢性肝炎病毒的感染5.凝血酶原時間（PT）和凝血酶原活動度（PTA）★PT和PTA可以敏感地反應肝臟損害的嚴重程度VitK依賴性凝血因子：Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ主要由肝臟合成的凝血因子：Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ、ⅩⅦ因子半衰期最短淤膽PT主要檢測外源性凝血系統中Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ等活性●正常值：PT

12～16秒維生素K糾正試驗303PTA＝×100%（80%～100%）PT—8.7PTA<20%時可自發性出血，<10%時預后惡劣與肝細胞壞死嚴重性相關的實驗室指標●血清膽紅素:升高程度與肝細胞壞死程度正相關●PTA:

降低程度與肝細胞壞死程度正相關●血清白蛋白:降低程度與壞死程度正相關慢性肝炎實驗室檢查異常程度參考指標項

目輕

度中

度重

度ALT或/或AST(IU/L)≤正常3倍

＞正常3倍

＞正常3倍膽紅素(Bil)(μmol/L)

≤34.2

34.3-85.5

＞85.5白蛋白(A)(g/L)A/G電泳r球蛋白(rEP)(%)

≤21凝血酶原活動度(PTA)(%)＞71≥35≥1.4＜35-＞32

≤32＜1.4-1.0

≤1.0＞21-＜26

≥26＜71-＞60

60-40*膽堿酯酶(CHE)(U/L〗

＞5400

≤5400-＞4500≤4500注：*有條件開展CHE檢測的單位，可參考本項指標。★三、病毒感染血清標志物的臨床檢測及意義（一）甲

肝●抗HAV-IgM是診斷急性甲肝最可靠方法。●抗HAV-IgG檢測：主要用于人群感染率的調查（二）乙

肝1.乙肝五項意義判定“兩對半”分析舉例HBsAg

抗-HBs

HBeAg

抗-HBe

抗-HBc＋＋＋＋＋＋大三陽小三陽＋＋＋＋＋＋＋＋＋“兩對半”分析舉例HBsAg

抗-HBs

HBeAg

抗-HBe

抗-HBc＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋急性肝炎早期，傳染性強“兩對半”分析舉例HBsAg

抗-HBs

HBeAg

抗-HBe

抗-HBc“大三陽”＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋傳

急染

性性

或強

慢性＋＋＋現癥＋＋感染“兩對半”分析舉例HBsAg

抗-HBs

HBeAg

抗-HBe

抗-HBc＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋有無傳染性應結合HBVDNA檢測結果“小三陽”“兩對半”分析舉例HBsAg

抗-HBs

HBeAg

抗-HBe

抗-HBc＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋有過HBV感染，目前有無傳染性應結合HBVDAN結果“兩對半”分析舉例HBsAg

抗-HBs

HBeAg

抗-HBe

抗-HBc＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋HBV感染的恢復期，有免疫力，無傳染性“兩對半”分析舉例HBsAg

抗-HBs

HBeAg

抗-HBe

抗-HBc＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋①注射疫苗后；②遙遠的過去有過HBV感染“兩對半”分析舉例HBsAg

抗-HBs

HBeAg

抗-HBe

抗-HBc＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋①窗口期，抗-HBs即將出現；②HBV感染已過乙肝血清標志物小結●

唯一的保護性抗體：

抗HBs●

HBsAg代表現癥感染，不代表傳染性●

空窗期及空窗期標志物（抗HBc/抗HBe）●

抗HBe的臨床意義(康復/前C變異/HBV-DNA整合）●

HBV感染的血清復制指標HBVDNA;

HBVDNAPHBeAg;

HBcAg(肝細胞或Dane顆粒內）高滴度IgG抗HBc；IgM抗HBc（三）丙

肝●

抗-HCV：不是保護性抗體，是感染標志●

HCV-RNA是HCV感染和治療的直接證據（四）丁

肝●

HDAg和HDV-RNA均是HDV感染的直接證據●抗HDV-IgM：既可用于早期診斷，也是診斷慢性HDV感染的敏感指標。（五）戊

肝●抗HEV-I