免疫分型用于68例急性白血病的分型【摘要】為了評(píng)價(jià)免疫分型在急性白血病分型中的科學(xué)意義，應(yīng)用形態(tài)學(xué)分型、直接免疫熒光標(biāo)記流式細(xì)胞儀檢測免疫分型對(duì)68例AL進(jìn)行了分析。結(jié)果表明：形態(tài)學(xué)與免疫學(xué)檢查符合率為%，有4例形態(tài)學(xué)誤診被免疫分型糾正；髓系中較特異抗原為CD13、CD33，AML-M3多為CD34低表達(dá)，HLA-DR陰性，AML-M4、M5易有CD14表達(dá)，髓系中易見淋系相關(guān)抗原表達(dá)，常見為CD7；淋系中亦可合并髓系抗原表達(dá)。結(jié)論：免疫分型可提高AL的診斷分型準(zhǔn)確性，特殊類型AL如急性未分化性白血病、AML-M0等的診斷必須依賴免疫分型。

【關(guān)鍵詞】急性白血病

ImmunologicClassificationUsedintypingof68CasesofAcuteLeukemias

AbstractToevaluatethesignificanceofimmunologicclassificationfortypingofacuteleukemia.68casesofALwereclassifiedmorphologicandimmunologictypings.Theresultsshowedthattheconsistencyratewas%betweenmorphologyandimmunology，and4morphologicmisdiagnosedcaseswerecorrectedbyimmunology；CD13andCD33werespecialmyeloidlineage-associatedantigens；AML-M3wasoftenCD34low-expressedandHLA-DR-negative；CD14wasoftenexpressedinAML-M4andM5；lymphoidlineage-associatedantigens(CD7)wereeasilyfoundinANLL，andmyeloidlineage-associatedantigenswerealsofoundinALL.Inconclusion，immunologicclassificationcanimprovetheaccuracyinacuteleukemiadiagnosis.ThediagnosisofsomespecialAL，suchasacuteunidentifiedleukemia(AUL)，AML-M0andsoon，mustrelyonimmunologicclassification.

Keywordsacuteleukemia；morphologicclassification；immunologicclassification；immunologicphenotype

JExpHematol2006；14(1):39-41

急性白血病屬高度異質(zhì)性疾病，其腫瘤細(xì)胞存在多變性，分化差異性等，傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)分型法僅能使70％左右的AL得以準(zhǔn)確分型。近年來，結(jié)合白血病發(fā)病過程中免疫表型(immunologicphenotype)的變化對(duì)AL進(jìn)行分型，加深了對(duì)各類AL本質(zhì)的認(rèn)識(shí)，對(duì)各類AL的診斷、治療和預(yù)后判斷有重要的臨床意義。本研究對(duì)68例AL的免疫分型研究報(bào)告如下。

材料和方法

研究對(duì)象

四級(jí)標(biāo)題68例AL患者，男性36例，女性32例，年齡14-78歲，中位年齡44歲。51例急性髓系白血病中M01例，M224例，M310例，M44例，M512例，16例急性淋巴細(xì)胞白血病中L15例，L210例，L31例，急性未分化型白血病1例。

形態(tài)學(xué)檢查

骨髓及血涂片經(jīng)瑞氏染色及相關(guān)細(xì)胞化學(xué)染色檢查，按FAB標(biāo)準(zhǔn)確定AL的類型。

免疫學(xué)檢查

檢測指標(biāo)包括T系的CD2、CD3、CD7，B系的CD19、CD20、CD79a，髓系的CD13、CD14、CD33、CD117、CD41a及CD34、HLA-DR等，均采用流式細(xì)胞儀測定，儀器與試劑由美國BectonDickinson公司提供。結(jié)果判斷：陽性細(xì)胞≥20％為陽性。

結(jié)果

68例AL的免疫分型特征見表1，2。Table1.MajorantigensexpressedinAMLcellsTable2.MajorantigensexpressedinALLcells

68例AL中，其中4例經(jīng)結(jié)合免疫學(xué)分型才確定，其中1例M0患者形態(tài)學(xué)示：原始細(xì)胞為29％，POX染色陰性；細(xì)胞形態(tài)學(xué)符合急性淋巴細(xì)胞白血病，形態(tài)學(xué)診斷ALL，但免疫分型示：CD3447%、CD11753%、HLA-DR54%表達(dá)，CD1316%、CD3313%及CMPO24%表達(dá)，診斷為M0型白血病。1例形態(tài)學(xué)似ALL(L2)患者，原幼淋巴細(xì)胞97％；免疫分型示：CD747%、CD3863%、HLA-DR54%、CD3458%均陽性，CD11718%表達(dá)；染色體示：46，XX〖14］/46，XX，csb(1q)〖1］，予DOCP2療程化療未達(dá)緩解，后改予DOAP1療程達(dá)完全緩解(CR)，此后予以DOAP方案為主的化療持續(xù)完全緩解，診斷為AUL。1例形態(tài)學(xué)L2患者免疫學(xué)分型示：CD3436%、CD3342%、CD1345%、CD11791％、HLA-DR82％及CD737％表達(dá)，考慮為ly+ANLL。1例形態(tài)學(xué)L1患者免疫學(xué)分型示：CD1977％、CD2078%、CD79a65％和CD222％、CD320％、CD729％表達(dá)，考慮為雙表型白血病。余病例形態(tài)學(xué)、免疫學(xué)分型相符合。

分析上述結(jié)果發(fā)現(xiàn)，髓系中CD13表達(dá)率最高，為96％，其次為CD33表達(dá)率為％；CD14為單核細(xì)胞特異性抗原，但陽性率較低，在AML中為%，在M4、M5中表達(dá)率為%。M3中HLA-DR為陰性，CD34表達(dá)率(10%)明顯低于其他亞型。髓系中部分合并淋系抗原的表達(dá)，常見CD7、CD19等。本研究51例AML中12例合并淋系抗原表達(dá)，陽性率%，其中T系表達(dá)占9例，主要為CD7表達(dá)，1例合并CD2表達(dá)，B系表達(dá)占3例，為CD19表達(dá)。

淋系中也有合并髓系抗原表達(dá)，如CD13和CD33，陽性率為20％。B淋巴細(xì)胞中抗原陽性率依次為CD19＞CD20＞CD79a，T淋巴細(xì)胞中抗原陽性率依次為CD7＞CD3＞CD2。

討論

白血病是一組克隆性的惡性疾病，具有高度異質(zhì)性，傳統(tǒng)的FAB形態(tài)學(xué)分型可使70％左右的AL得以分型，結(jié)合免疫分型可以較精確的識(shí)別表達(dá)不同分化抗原的細(xì)胞，從而明確劃分出細(xì)胞的發(fā)育階段和類型，對(duì)于區(qū)分T、B淋巴細(xì)胞及形態(tài)學(xué)難以辨認(rèn)的細(xì)胞，特別是其在AML與ALL的鑒別、ALL亞型區(qū)分及AUL、M0、M6、M7等的診斷中尤為重要。本研究中形態(tài)學(xué)診斷與免疫分型符合率為%。1例M0患者形態(tài)學(xué)為淋巴細(xì)胞，免疫分型示髓系抗原表達(dá)，完全符合M0；1例形態(tài)學(xué)似L2，免疫分型示高度表達(dá)干/祖細(xì)胞標(biāo)志，無特異淋系、髓系抗原表達(dá)，診斷為AUL；1例形態(tài)學(xué)L2，免疫分型表達(dá)髓系CD13、CD33為主，同時(shí)表達(dá)CD7，考慮為ly+AML。

髓系中較特異的抗原為CD13、CD33、CD14，其陽性率依次為CD13＞CD33＞CD14，CD34為造血干、祖細(xì)胞相關(guān)抗原，隨著細(xì)胞的成熟其抗原表達(dá)會(huì)逐漸減弱［1］。M0、M1常主要表達(dá)CD34這類造血干/祖細(xì)胞標(biāo)志，也可表達(dá)髓系相關(guān)標(biāo)志，如CD13、CD33，本研究1例M0患者部分表達(dá)髓系抗原CD13、CD33，強(qiáng)烈表達(dá)干/祖細(xì)胞標(biāo)志。M3型白血病較特異的免疫表型為CD13、CD33陽性，CD34低表達(dá)，HLA-DR多陰性［2，3］，本研究與此相一致。研究證實(shí)CD14為單核細(xì)胞的特異性標(biāo)記抗原［4］，本研究中發(fā)現(xiàn)，CD14主要在M4、M5中表達(dá)，陽性率為%，在AML中為%，與國內(nèi)的湯美華等［5］研究相比，陽性率略低。髓系中可合并有淋系表達(dá)，常見為CD7，其次為CD10、CD19和CD20等［6］，本研究中發(fā)現(xiàn)51例AML中，12例合并淋系表達(dá)，其中T系表達(dá)9例，主要為CD7表達(dá)，1例同時(shí)合并CD2表達(dá)；B系表達(dá)3例，主要為CD19表達(dá)。淋系中，B淋巴細(xì)胞抗原陽性率依次為CD19＞CD20＞CD79a，T淋巴細(xì)胞中抗原陽性率依次為CD7＞CD3＞CD2，淋系中可合并髓系CD13、CD33表達(dá)，其中1例淋系同時(shí)表達(dá)B系抗原及T系抗原(CD2、CD3、CD7)，診斷為雙表型白血病，考慮細(xì)胞惡變部位在多能干細(xì)胞或以上階段［7］。

綜上所述，在形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)上結(jié)合免疫學(xué)分析，可更精確地了解待檢測細(xì)胞的不同分化階段和類型，提高白血病的分型準(zhǔn)確性，具有補(bǔ)充和糾正診斷的臨床意義。

【參考文獻(xiàn)】

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6翟志敏，何曉東，戴海明等