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第3-5節布魯氏菌病能力單元三多種動物共患病《動物疫病防治技術》2023/5/252概要布魯氏菌病是由布魯氏菌屬的細菌引起的一種人畜共患的慢性傳染病。在家畜中,牛、羊、豬最常發生,并可傳染于人和其他動物。臨診特征是生殖器官和胎膜發炎,導致流產、不育和各種組織的局部病灶。本病廣泛分布于世界各地。在我國人和動物中有牛、羊、豬和犬布魯氏菌病存在,特別是西北和東北地區流行較為嚴重。2023/5/253病原布魯氏菌屬有6個種,即馬耳他布魯氏菌、流產布魯氏菌、豬布魯氏菌、林鼠布魯氏菌、綿羊布魯氏菌和狗布魯氏菌。習慣上稱馬耳他布魯氏菌為羊布魯氏菌,流產布魯氏菌為牛布魯氏菌。各個種與生物型菌株之間,形態及染色特性等方面無明顯差別。2023/5/254豬布魯氏菌生物1型和3型易感宿主是豬,對人有強的致病性。本菌為球狀短桿菌,用病料涂片、染色、鏡檢時,常單個排列或密集成堆。成對,不形成莢膜和芽孢,無鞭毛,不能運動。革蘭氏染色陰性,姬姆薩染色呈紫色。由于本菌吸收染料過程較慢,較其他細菌難于著色,所以,常用科茲洛夫斯基染色法染色,布魯氏菌呈紅色,其他細菌呈綠色。染色的方法是:病料涂片干燥后,滴加2%沙黃液,加熱至蒸汽l~2min,水洗,再滴加1%孔雀綠溶液復染(不加熱)l~2min,水洗、干燥后鏡檢。2023/5/255布魯氏菌的抵抗力和其他不能產生芽胞的細菌相似。例如,巴氏滅菌法10~15min殺死,0.1%升汞數分鐘,1%來蘇兒或2%福爾馬林或5%生石灰乳15min,而直射日光需要0.5~4h。在布片上室溫干燥5d,在干燥土壤內37d死亡,在冷暗處,在胎兒體內可活6個月。2023/5/256流行病學

本病的傳染源是病畜及帶菌者(包括野生動物)。最危險的是受感染的妊娠母畜,它們在流產或分娩時將大量布魯氏菌隨著胎兒、胎水和胎衣排出。流產后的陰道分泌物以及乳汁中都含有布魯氏菌。布魯氏菌感染的睪丸炎精囊中也有布魯氏菌存在。人的傳染源主要是患病動物,一般不由人傳染于人。在我國,人布魯氏菌病最多的地區是羊布魯氏菌病嚴重流行的地區,從人體分離的布魯氏菌大多數是羊布魯氏菌。一般牧區人的感染率要高于農區。患者有明顯的職業特征。2023/5/257本病的主要傳播途徑是消化道。有實驗證明,通過無創傷的皮膚,使牛感染成功,如果皮膚有創傷,則更易為病原菌侵入。通過結膜、交配,也可感染。吸血昆蟲可以傳播本病。實驗證明,布魯氏菌在蜱體內存活時間較長,且保持對哺乳動物的致病力,通過蜱的叮咬,可以傳播此病。2023/5/258流產布魯氏菌主要宿主是牛,而羊、猴、豚鼠有一定易感性。馬耳他布魯氏菌,主要宿主是山羊和綿羊,可以由羊傳人牛群,也可由牛傳播于牛,而其他動物對它的易感性則與流產布魯氏菌相同。豬布魯氏菌主要宿主是豬,而對其他動物也同于流產布魯氏菌。綿羊布魯氏菌主要引起公綿羊附睪炎,也可侵犯孕母綿羊導致胎盤壞死,而對未孕母綿羊則常是一過性。狗是狗布魯氏菌的主要宿主,牛、羊、豬對狗布魯氏菌的感受性低。林鼠布魯氏菌對小鼠的病原性比對豚鼠強。易感動物2023/5/259發病機理布魯氏菌侵入牛體后,在幾日內到達侵入門戶附近的淋巴結內,由此再進入血液中發生菌血癥,菌血癥引起體溫升高,其時間長短不等,菌血癥消失,經過長短不等的間歇后,可再發生菌血癥。侵入血液中的布魯氏菌散布至各器官中,可在停留器官中引起病理變化同時可能有細菌由糞、尿中排出。布魯氏菌在胎盤、胎兒和胎衣組織中特別適宜生存繁殖,其次是乳腺組織、淋巴結(特別是乳腺組織相應的淋巴結)、骨骼、關節、腱鞘和滑液囊,以及睪丸、附睪、精囊等。

2023/5/2510布魯氏菌進入絨毛膜上皮細胞內增殖,產生胎盤炎,并在絨毛膜與子宮黏膜之間擴散,產生子宮內膜炎。在絨毛膜上皮細胞內增殖時,使絨毛發生漸進性壞死,同時產生一層纖維素性膿性分泌物,逐漸使胎兒胎盤與母體胎盤松離。布魯氏菌還可進入胎衣中,并隨羊水進入胎兒引起病變。由于胎兒胎盤與母體胎盤之間松離,及由此引起胎兒營養障礙和胎兒病變,使母畜可能發生流產。

2023/5/2511布魯氏菌可寄生在細胞內,能在宿主的巨噬細胞及上皮細胞內生存發育。有毒菌株菌體外有蛋白外衣,保護它在細胞內生存并產生全身傳染。這種能力可使細菌逃避宿主免疫結構而長期生存。赤蘚醇是布魯氏菌的有力生長刺激物。易感動物如牛、綿羊、山羊及豬胎盤內的赤蘚醇水平要比人、家兔、大鼠及豚鼠的高。雄性動物的生殖器也含有赤蘚醇,對睪丸內傳染局限化有了解釋。2023/5/2512牛感染的臨床癥狀潛伏期2周至6個月。母牛最顯著的癥狀是流產。流產可以發生在妊娠的任何時期,最常發生在第6至第8個月,流產時除在數日前表現分娩預兆象征,如陰唇乳房腫大,薦部與脅部下陷,以及乳汁呈初乳性質等外,還有生殖道的發炎癥狀,即陰道黏膜發生粟粒大紅色結節,由陰道流出灰白色或灰色黏性分泌液。2023/5/2513流產時,胎水多清朗,但有時混濁含有膿樣絮片。常見胎衣滯留,特別是妊娠晚期流產者。流產后常繼續排出污灰色或棕紅色分泌液,有時惡臭,分泌液遲至1-2周后消失。早期流產的胎兒,通常在產前已經死亡。發育比較完全的胎兒,產出時可能存活但衰弱,不久死亡。2023/5/2514木乃伊胎兒2023/5/2515公牛常見睪丸炎及附睪炎。急性病例則睪丸腫脹疼痛。還可能有中度發熱與食欲不振,以后疼痛逐漸減退,約3周后,通常只見睪丸和附睪腫大,觸之堅硬。臨診上常見的癥狀還有關節炎,甚至可以見于未曾流產的牛只,關節腫脹疼痛,有時持續躺臥。通常是個別關節患病,最常見于膝關節和腕關節。腱鞘炎比較少見,滑液囊炎特別是膝滑液囊炎則較常見。有時有乳房炎的輕微癥狀。2023/5/2516感染牛關節炎,關節腫脹疼痛2023/5/2517常不表現癥狀,而首先被注意到的癥狀也是流產。流產前,食欲減退,口渴,萎頓,陰道流出黃色黏液等。流產發生在妊娠后第3或第4個月。有的山羊流產2~3次,有的則不發生流產,但也有報道山羊群中流產40%~90%者。其他癥狀有乳房炎、支氣管炎、關節炎及滑液囊炎而引起跛行。公羊睪丸炎、乳山羊的乳房炎常較早出現,乳汁有結塊,乳量可能減少,乳腺組織有結節性變硬。綿羊布魯氏菌可引起綿羊附睪炎。

綿羊及山羊感染的臨床癥狀2023/5/2518感染羊陰囊腫大、水腫2023/5/2519最明顯的癥狀也是流產,多發生在妊娠第4~12周。有的在妊娠第2~3周即流產,有的接近妊娠期滿即早產。早期流產常不易發現,因母豬常將胎兒連同胎衣吃掉。流產的前兆癥狀常見沉郁,陰唇和乳房腫脹,有時陰道流出黏性或黏膿性分泌液。流產后胎衣滯留情況少見,子宮分泌液一般在8d內消失。少數情況因胎衣滯留,引起子宮炎和不育。公豬常見睪丸炎和附睪炎。有時在開始即表現全身發熱,局部疼痛不愿配種,但通常則是逐漸發生,即睪丸及附睪的不痛腫脹。較少見的癥狀還有皮下膿腫、關節炎、腱鞘炎等,如椎骨中有病變時,還可能發生后肢麻痹。豬布魯氏菌病臨床癥狀2023/5/2520公豬睪丸腫脹2023/5/2521皮下膿腫、關節炎、腱鞘炎2023/5/25222023/5/2523病理變化牛:孕牛子宮的病變以壞死性胎盤炎為特征。胎兒主要為敗血癥變化。流產之后常繼發子宮炎,輸卵管和卵巢也常出現病變,乳腺也常受害,表現為間質性乳腺炎,淋巴結、脾臟有程度不同的腫脹。公牛可發生化膿一壞死性睪丸炎和附睪炎。羊:胎兒與胎盤的病變與牛基本相同,但淋巴結、肝和脾的變化較牛明顯,表現為網狀內皮系統細胞增生,導致腫大,有時表現為大量的結節性肉芽腫,結節中心常出現壞死灶。病公羊也出現睪丸和附睪腫大、堅硬,并有多量壞死灶和膿腫。豬:豬流產后子宮黏膜很少發生化膿性病變,但常有許多灰黃色針頭大到芝麻大的小結節,結節中央有膿汁或干酪樣物質。胎盤布滿出血點,表面覆蓋黃色滲出物。淋巴結水腫,切面也可見小的結節。肝有時腫大、充血。關節的病變和公豬睪丸病變與牛的布魯氏菌病相似。2023/5/2524流產胎盤、水腫及子葉出血、壞死2023/5/25252023/5/25262023/5/25272023/5/25282023/5/25292023/5/25302023/5/25312023/5/2532診斷以流行病學、癥狀和病變為參考;以細菌學、血清學反應和變態反應為依據進行綜合判定。流行病學及臨診診斷大批孕畜流產,流產胎兒多為死胎或弱胎,流產后有胎衣滯留現象,流產母畜出現子宮內膜炎;公畜發生睪丸炎、附睪炎;有的病畜出現關節炎、腱鞘炎,馬騾在頸部常發生腫脹或瘺管等癥狀,就應考慮是否有布魯氏菌病發生。2023/5/2533細菌學診斷病料抹片、染色、鏡檢:

流產胎兒、胎衣、分泌物中常有大量細菌,采集胎衣分泌物、流產胎兒的胃內容物、脾、肝、淋巴結、子宮壞死部分等組織做抹片,用革蘭氏染色法染色見到革蘭氏陰性菌,用柯茲洛夫斯基染色法染色,常可見到被染成淡紅色的小球桿狀菌,其他細菌或組織呈綠色。分離培養:采取病料接種于10%馬血清的馬丁瓊脂斜面。如病料有雜菌污染時,可用選擇培養基培養。接種病料后,37℃培養,每3天觀察一次。如有細菌生長,挑選可疑的菌落做細菌鑒定,如抹片、染色、鏡檢。將疑似菌落進行純培養,進一步做布魯氏菌生物學特性檢驗,用抗血清做玻片凝集試驗等。動物接種:無菌取胎兒脾、肝、胃內容物,加生理鹽水磨碎,取兩只豚鼠,腹腔或皮下注射1~2mL。接種前采血做布魯氏菌凝集反應檢查,接種后從第2周開始,每隔7~10天采血一次,做布魯氏菌凝集反應,觀察凝集反應滴度是否升高,若接種后凝集反應血清滴度達到1:5~1:10或更高時,即為陽性。同時撲殺豚鼠,可見淋巴結腫大,肝、脾腫大,并有灰白色細小的壞死結節。取脾、肝和淋巴結做細菌分離培養,若分離培養有可疑菌落,則用已知布魯氏菌陽性血清做凝集反應,凝集反應為陽性,則可確定為布魯氏菌。2023/5/2534免疫學診斷用血清學反應和變態反應方法診斷布魯氏菌病。血清學反應方法較多,如凝集反應、補體結合反應和全乳環狀反應等,具有較高的特異性和敏感性,臨診上以凝集反應應用最為廣泛。鑒別診斷:本病的主要臨診癥狀是流產,須與發生相同癥狀的疾病鑒別,如彎桿菌病、滴蟲病、鉤端螺旋體病、乙型腦炎、沙門氏菌病、飼料中毒等都可能引起流產,必須做細菌學檢查和免疫學試驗才能最后確診。2023/5/2535防制本病目前尚無有效的治療方法,應以預防為主。在未感染的動物群中,控制本病傳入的最好方法是自繁自養,必須引進時,要嚴格進行檢疫,即先隔離飼養兩個月,同時進行布魯氏菌病的檢查,全群兩次免疫學檢查陰性者,方可與原有畜群接觸。清凈的動物群還應定期檢疫(至少一年1次),一經發現陽性者,應立即淘汰。在配種前要對種公畜進行檢疫,確認健康者方能應用。在本病常發地區每年都要進行定期預防接種。2023/5/2536技術人員為奶牛采血2023/5/2537動物群中如果發現流產,除隔離流產畜、消毒環境及處理流產胎兒、胎衣外,應盡快作出診斷。確診為布魯氏菌病或在動物群檢疫中發現本病,均應采取綜合防疫措施,檢疫、隔離、控制傳染源,切斷傳播途徑,培養健康動物群及主動免疫接種。免疫接種是控制本病的有效措施。已經證實,本病以細胞免疫為主,在目前情況下,只有免疫接種引起機體主動免疫,才是控制布病的較好措施。豬布魯氏菌2號弱毒活疫苗(簡稱豬型2號苗)可供防羊、豬、牛布魯氏菌病之用。該苗毒力穩定,使用安全,免疫力好,在生產中已經收到了良好效果。馬耳他布魯氏菌5號弱毒活疫苗(筒稱羊型5號苗),可用于綿羊、山羊和牛的免疫。2023/5/2538我國用于預防豬布魯氏菌病的是用豬種布魯氏菌弱毒S2株制成的活疫苗。該苗毒力穩定、使用安全、免疫力好,是我國選育的一種優良布魯氏菌菌苗。本疫苗適于口服免疫和肌肉注射。

①口服免疫:每頭豬200億菌,間隔1個月再口服一次。口服菌苗不受懷孕限制,可在配種前1~2個月進行,亦可在懷孕期使用。

②注射免疫:每頭豬200億菌,間隔1個月再注射一次。妊娠母豬不宜注射。所用菌應稀釋后當天用完。無論豬是口服還是注射,免疫期為1年。2023/5/2539公共

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