天然藥物化學(xué)黃酮類化合物的提取分離黃酮類化合物的提取分離一、提取溶劑提取法

游離黃酮苷元提取：采用極性小的溶劑提取，如乙酸乙酯、氯仿等。黃酮苷、極性大的苷元：采用親水性甲醇或混合溶劑甲醇-水（1：1）提??；多糖苷采用沸水提取?；ㄉ仡悾核峄蚣尤肷倭克崴崛　λ玫拇痔嵛镞M(jìn)行精制處理，常用方法有：系統(tǒng)溶劑分離法堿提取酸沉淀法炭粉吸附法黃酮類化合物的提取分離1.系統(tǒng)溶劑提取法藥材粉末95%乙醇提取，合并合并后的濾液回收，水溶水液依次以有機(jī)溶劑萃取石油醚乙醚乙酸乙酯正丁醇水層（脂溶性雜質(zhì)）（苷元）（單糖苷）（多糖苷）（水溶性雜質(zhì)）2.堿提取酸沉淀法常用堿性水溶液：稀氫氧化鈉溶液或石灰水。稀氫氧化鈉水溶液：浸出能力強(qiáng)，但雜質(zhì)也多。石灰水可使多羥基的雜質(zhì)生成鈣鹽沉淀，不被溶出，有利于純化。黃酮類化合物的提取分離

堿提酸沉法3.炭粉吸附法槐米MeOH提提取液活性炭，攪拌，HCl-Mg炭末依次洗脫沸水沸甲醇7%酚/水15%酚/醇黃酮苷類二、黃酮類化合物的分離主要方法及原理A、根據(jù)化合物酸性強(qiáng)弱不同，利用梯度pH萃取法進(jìn)行分離；B、根據(jù)分子大小不同，利用葡聚糖凝膠色譜進(jìn)行分離；C、依據(jù)化合物極性大小不同，利用各種吸附色譜或分配色譜進(jìn)行分離；D、根據(jù)化合物與聚酰胺形成氫鍵的特點(diǎn)，采用聚酰胺色譜法分離。1pH梯度萃取法總游離黃酮的乙醚液依次以5%NaHCO3

、5%NaCO3、0.2%NaOH、4%NaOH5%NaHCO3

5%NaCO30.2%NaOH4%NaOH7，4`-二OH7-或4`-OH一般酚OH5-OH酸化酸化酸化酸化2聚酰胺柱色譜（分離黃酮最理想的吸附劑）即黃酮化合物結(jié)構(gòu)中的酚羥基與聚酰胺形成分子氫鍵締合而產(chǎn)生吸附。吸附能力越強(qiáng)，越難洗脫。具體操作聚酰胺加水?dāng)嚢韬笱b柱——20%甲醇水樣品液上柱——洗脫——收集分離原理：氫鍵吸附黃酮類化合物在聚酰胺柱上的洗脫規(guī)律注：樣品盡量處理成水液上柱，且含水醇系統(tǒng)進(jìn)行洗脫，才符合該規(guī)律。1）形成氫鍵基團(tuán)的數(shù)目：

如果在母核上增加羥基，則使吸附力增強(qiáng)，洗脫速度相應(yīng)減慢。例：2）當(dāng)分子中羥基數(shù)目相同時，吸附力與形成氫鍵的位置有關(guān)。例：AB黃酮類化合物的提取分離3）分子內(nèi)芳香化程度越高，共軛雙鍵越多，則吸附越強(qiáng)。例：＞黃酮類化合物的提取分離4）不同類型的黃酮類化合物，先后出柱順序：異黃酮＞二氫黃酮醇＞黃酮＞黃酮醇5）各種溶劑在聚酰胺柱上的洗脫能力由弱至強(qiáng)的順序：

水＜甲醇或乙醇＜丙酮＜稀氫氧化鈉水溶液＜甲酰胺＜二甲基甲酰胺黃酮類化合物的提取分離聚酰胺色譜法總結(jié)吸附規(guī)律：與酚羥基的數(shù)目、位置及溶劑介質(zhì)有關(guān)。洗脫規(guī)律：與吸附規(guī)律正好相反，即吸附力越強(qiáng)，越難洗脫與溶劑介質(zhì)的關(guān)系：吸附力：水﹥甲醇乙醇（濃度由低到高）﹥堿性溶劑3葡聚糖凝膠色譜法分離黃酮時，主要靠吸附作用。吸附能力強(qiáng)弱取決于結(jié)構(gòu)中的酚羥基數(shù)目。

分離黃酮苷時，分子篩起主導(dǎo)作用，按分子量

大小順序出柱，即多糖苷、游離苷元。葡聚糖凝膠色譜，又稱分子篩濾過。常用凝膠為SephadexG、SephadexLH-20。機(jī)理堿性