所采用技術的理論基礎

植物細胞工程通常采用的技術手段

植物組織培養

植物體細胞雜交植物細胞的全能性克隆羊“多利”動物細胞工程2.2常用的技術手段動物細胞培養(基礎）動物細胞核移植動物細胞融合生產單克隆抗體

2、概念從動物機體中取出相關的組織，將它分散成單個細胞，然后，放在適宜的培養基中，讓這些細胞生長和增殖。胚胎或幼齡動物的組織器官細胞懸浮液細胞株細胞懸浮液剪碎加培養液制成胰蛋白酶轉入培養液分瓶轉入培養液原代培養傳代培養3、動物細胞培養的過程胰蛋白酶4、動物細胞培養的條件無菌、無毒的環境：無菌處理、加抗生素、定期更換培養液營養：特別加入血清或血漿溫度和PH：36.5度左右\PH為7.2~7.4氣體環境：O2—細胞呼吸必需；C2O—維持PH值植物組織培養和動物細胞培養的比較比較項目原理培養基結果培養目的植物組織培養動物細胞培養植物細胞全能性細胞增殖固體營養物質植物激素液體營養物質動物血清培養成植株培養成細胞群快速繁殖培養無病毒植株獲得細胞或細胞產物二、動物體細胞核移植技術和克隆動物1997年英國生物學家首次用成年羊的（乳腺細胞）體細胞，成功地克隆出一只小母羊“多莉”。

克隆即無性繁殖系，是指從一個共同的祖先，通過無性繁殖的方法產生出來的一群遺傳特性相同的ＤＮＡ分子、細胞或個體。

克隆動物一般是指通過無性繁殖形成動物后代。克隆動物克隆動物是如何實現的呢?目前動物體細胞克隆是通過核移植技術實現的.

動物核移植：是將動物的一個細胞的細胞核，移入一個已經去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發育為動物個體。過程供體體細胞細胞培養體細胞卵巢卵母細胞MII期卵母細胞去核無核卵母細胞注入細胞融合重組細胞重組胚胎胚胎移植代孕母體生出與供體遺傳物質相同的個體多莉的誕生多莉羊的培育過程1、誰是“多莉”的母親？2、“多莉羊”是雄還是雌？

問題卵細胞C母綿羊子宮Ａ母綿羊Ｂ母綿羊乳腺細胞細胞質細胞核細胞核移植胚胎移植早期胚胎多莉羊分娩卵裂融合后的卵細胞妊娠2異種器官移植

可移植器官短缺豬的器官大小、結構和功能上與人體器官相近

急性免疫排斥反應基因敲除半乳糖基轉移酶核移植基因敲除SPF克隆豬器官移植三核移植技術的應用3、生產藥用蛋白三核移植技術的應用4保護瀕危物種細胞核去核卵母細胞核移植重構胚三核移植技術的應用展望

雖然核移植技術有著廣闊的應用前景，并且已取得了一些進展如體細胞核移植等，但也存在著一些問題。主要包括核移植效率低，動物畸形。這要求研究人員進一步了解核質作用機理，改進培養方式。目前存在的問題1、核移植效率低2、克隆動物異常

胎兒或新生兒死亡率極高,

極少數能全程發育的個體也表現為超重、呼吸系統疾病等異常表型,個別表型正常者也存在有免疫缺陷、關節炎或腎、腦畸形等問題,導致克隆動物后期死亡

細胞工程應用例1、多莉⑴寫出ａ、ｂ所指的細胞工程各稱：ａｂ。⑵實施細胞工程ａ時，所需的受體細胞大多采用動物卵細胞的原因是：。⑶多莉面部的毛色是

，判斷依據：

。⑷繼植物組織培養之后，克隆綿羊培育成功，證明動物細胞也具有

。⑸請舉例說明克隆綿羊培育成功的實際意義：。（1999上海高考）世界上第一只克隆綿羊“多莉”的培育等程序如圖所示。請仔細看圖后回答問題：黑面綿羊去核卵細胞白面綿羊卵腺細胞核重組細胞早期胚胎另一頭母綿羊子宮克隆綿羊多莉ab電脈沖處理妊娠、出生細胞工程應用例1、多莉羊答案1⑴細胞核移植、胚胎移植細胞工程應用例1、多莉羊答案2⑵有利于細胞融合；卵細胞體積大，易操作，最主要的是卵細胞中具有啟動核基因表達的信息蛋白質分子，能夠使已經高度分化的細胞核脫分化。細胞工程應用例1、多莉羊答案3⑶白色、多莉羊的全部核基因來自白色綿羊。細胞工程應用例1、多莉羊答案4⑷全能性細胞工程應用例1、多莉羊答案5⑸保護瀕危物種，繁育優育品種，醫學上克隆器官等。胚胎發育:指受精卵發育成為幼體.受精卵八細胞胚卵裂囊胚原腸胚幼體.原腸胚具有原腸腔具備三胚層外胚層內胚層中胚層表皮及其附屬結構神經系統和感覺器官脊索、真皮、肌肉內臟器官的外膜循環、排泄和生殖系統消化道上皮呼吸道上皮腺體（如肝和胰）生殖的類型無性生殖不經過生殖細胞的結合，由母體直接產生出新個體的生殖方式叫無性生殖。有性生殖由親本產生有性生殖細胞（也叫配子），經過兩性生殖細胞（如卵細胞和精子）的結合，成為合子（如受精卵），再由合子發育成為新個體的生殖方式，叫做有性生殖。草莓的營養生殖水螅的出芽生殖胚胎干細胞

當受精卵分裂發育成囊胚時，內層細胞團