基本要求一、掌握一般雜質檢查的原理、方法和計算。二、熟悉特殊雜質檢查的方法和原理。三、了解熱分析在藥物分析中的應用。第一頁，共62頁。第三章藥物的雜質檢查

Testforpurity概述一般雜質檢查特殊雜質檢查第二頁，共62頁。雜質的概念藥物中存在的無治療作用，影響藥物的療效和穩定性，甚至對人體健康有害的物質，稱為藥物的雜質。第三頁，共62頁。有效性針對某些藥效進行檢查的項目如Al(OH)3的制酸力，反映主要質量；明膠的凝凍度，控制物理性能；利福平的結晶度，影響生物利用度均一性含量均一性如“含量均勻度”試驗

一、概述第四頁，共62頁。安全性

進行異常毒性、熱原、降壓物質和無菌等項目純度要求

對雜質限量進行檢查

一、概述第五頁，共62頁。例：純度要求PethidineHydrochloride

鹽酸哌替啶無效異構體I無效異構體II第六頁，共62頁。二、雜質來源與種類

sourceandsortsofimpurities

酸度：水解試劑帶入乙醇中不溶物：水解中間體(糊精)SO32-：產品用H2SO3漂白可溶性淀粉：水解不完全1.制備過程中產生第七頁，共62頁。2.貯藏過程中產生

外界條件影響：日光、空氣、溫度、濕度、微生物等引起藥物產生

例如：麻醉乙醚醛及有毒的過氧化物第八頁，共62頁。

雜質的種類(1)一般雜質：在多種藥物中普遍存在的雜質。

(Cl-SO42-PbAsFe)

有害雜質(PbAs)

信號雜質（Cl-SO42-）：考察生產工藝，反映藥物的純度水平

(2)特殊雜質：個別藥物的生產及貯藏中引入的雜質。

第九頁，共62頁。雜質的限量：藥物中所含雜質的最大允許量。限量表示(g/g)：百分之幾（%）百萬分之幾（10-6）ppm限量檢查：檢查所含雜質是否超過雜質限量的規定，通常不要求測定其準確含量。

3、雜質的限量檢查（limittest）第十頁，共62頁。雜質限量檢查方法

取一定量(C·V)與被檢雜質相同的純品或對照品配成對照品溶液，與一定量(S)藥物供試溶液在相同條件下處理后，比較反應結果，以確定雜質含量是否超過規定。第十一頁，共62頁。NaCl對照液葡萄糖稀硝酸10ml硝酸銀1ml稀硝酸10ml硝酸銀1ml對照液濁度>供試液濁度第十二頁，共62頁。雜質限量的計算：式中：

L雜質的限度（%）

C對照液濃度（g/ml）

V對照液的加入體積（ml)

S供試品的量(g)注意:單位統一第十三頁，共62頁。例1：對乙酰氨基酚中氯化物的檢查：樣2.0g溶于100ml水中，取25ml檢查Cl-，與標準NaCl溶液(10μg/ml)5ml對照液相比，不得更深。

C=10μg/mlV=5.0mlS=252.0100=0.5g第十四頁，共62頁。一般雜質檢查方法條件：硝酸酸性條件（稀硝酸10ml）反應試劑：硝酸銀試液1.0ml雜質對照：NaCl(10μg/ml)靈敏度范圍：50~80g/50ml討論：選擇稀硝酸反應條件的意義。一、氯化物（Chloride）檢查原理：第十五頁，共62頁。比濁方法：同置于黑色背景上，自上向下觀察。平行操作原則。3.若供試品有色，需經處理后方可檢查。

注意：第十六頁，共62頁。干擾的排除

（1）供試品液混濁：

可用含硝酸的蒸餾水洗凈氯紙中氯化物后過濾來消除混濁對氯化物檢查的干擾。

第十七頁，共62頁。

（2）供試品有色：可采用內消色法，按中國藥典附錄規定的方法處理。供試品+AgNO3放置10min澄清溶液+標準NaCl+水對照溶液供試品+AgNO3+水供試品溶液暗處放置5min后比較第十八頁，共62頁。二、硫酸鹽檢查法

1．原理

是利用SO42-在鹽酸酸性溶液中與氯化鋇試液作用，生成硫酸鋇的白色渾濁液，與一定量標準硫酸鉀溶液在相同條件下生成的硫酸鋇渾濁液比較，以判斷供試品中硫酸鹽是否超過限量。

第十九頁，共62頁。

2．條件：[SO42-]0.1mg～0.5mg/50ml,即相當于標準硫酸鉀溶液1～5ml。

酸度稀鹽酸2ml/50ml。3．干擾的排除供試品有色：可采用內消色法。第二十頁，共62頁。

三、鐵鹽檢查法（一）硫氰酸鹽法1．原理

Fe3++6SCN-{Fe(SCN)6-]3-

紅色2．條件：[Fe3+]0.01mg～0.05mg/50ml,即相當于標準鐵溶液1～5ml。酸度稀鹽酸4ml/50ml。

HCl第二十一頁，共62頁。

3．干擾的排除（1）當有Fe2+存在時，加氧化劑過硫酸銨氧化Fe2+成Fe3+。（2）當供試液管與對照溶液管色調不一致，或所呈硫氰酸鐵的顏色較淺不便比較時，可分別移入分液漏斗中，加正丁醇或異戊醇提取，分別取提取液比色。第二十二頁，共62頁。(二）巰基醋酸法1.原理巰基醋酸還原Fe3+為Fe2+，在氨堿性試液中與Fe2

+

作用生成紅色配位離子。2Fe3++2HSCH2COOH2Fe2++SCH2COOH+2H+

SCH2COOHFe2++2HSCH2COOHFe(SCH2COOH)2+H+Fe(SCH2COOH)2[Fe(SCH2COOH)2]2-+2H2O

2OH-第二十三頁，共62頁。2.說明

在加巰基醋酸溶液前，先加枸櫞酸溶液，使其與鐵離形成配位離子，以免在氨堿性溶液中產生氫氧化鐵沉淀。（此法靈敏度比較高，但試劑較貴）第二十四頁，共62頁。四、重金屬（HeavyMetals）的檢查1、第一法硫代乙酰胺法

適用對象：溶于水、稀酸和乙醇的藥物

原理：

Pb2++醋酸鹽緩沖液

+硫代乙酰胺(CH3CSNH2)PbS(黃~棕黑)條件：介質：醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml試劑：硫代乙酰胺(CH3CSNH2)2ml雜質對照液：PbNO3(10μg/ml)靈敏度范圍：10~20g/27ml第二十五頁，共62頁。葡萄糖中重金屬的檢查：樣4.0g溶于23ml水，加入2ml緩沖鹽，依法檢查，其重金屬不得超過百萬分之五，取標準鉛（10μg/ml），v=?C=10μg/mlL=510-6S=4.0g

V=2.0ml

例2：第二十六頁，共62頁。

注意：供試品如有色，需經處理后方可檢查。

1.外消色法：在對照管中加稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液。2.內消色法。3.改用第四法，微孔濾膜過濾法。第二十七頁，共62頁。第二法：含芳環或雜環的有機藥物如苯佐卡因、甲硝唑第三法:

溶于堿的藥物或在稀酸產生沉淀的藥物如磺胺類、巴比妥類第四法：鉛斑法第二十八頁，共62頁。C墊圈(外徑10mm,內徑6mm)

D濾膜(直徑10mm,孔徑3.0μm)E輔助濾板CDABFE濾器下部濾器上蓋連接頭

微孔濾膜過濾法檢查重金屬裝置第二十九頁，共62頁。五、砷鹽

(arsenic)第一法古蔡氏法Gutzeit第二法二乙基二硫代氨基甲酸銀法Ag-DDC法第三法白田道夫法Bettendorff國內外常用方法：第三十頁，共62頁。古蔡氏法：SbH3+HgBr2→SbH2(HgBr)+HBr銻斑Zn+HCl第三十一頁，共62頁。干擾的排除（1）供試品為S2-,SO32-,S2O32-等:因在酸中生成H2S,SO2,與HgBr作用生成HgS或Hg，干擾砷斑檢查。用硝酸氧化成硫酸鹽可消除。（2）供試品為Fe3+能消耗KI，SnCl2

應測定條件，先可加足量KI。第三十二頁，共62頁。

（3）含銻藥物

銻鹽被還原為SbH3與HgBr2試紙作用，產生灰色銻斑，干擾砷斑的檢查，可改用Betterdorff法。第三十三頁，共62頁。白田道夫法第三十四頁，共62頁。

檢查砷鹽儀器裝置8cm18cm有孔玻璃旋塞導氣管AsH3發生瓶第三十五頁，共62頁。二乙基二硫代氨基甲酸銀法Ag-diethyldithiocarbamateAg-DDC法原理：是利用砷化氫與Ag-DDC吡啶溶液作用，使Ag-DDC中的銀還原為紅色膠態銀，以Ag-DDC溶液為空白，于510nm的波長處，測定吸收度，供試品溶液的吸收度不得大于標準砷溶液的吸收度。第三十六頁，共62頁。六、干燥失重（lossondrying）恒溫干燥干燥劑干燥減壓干燥熱分析法thermalanalysis,TA干燥失重物主要指水分(結晶水或吸附水)或揮發性物質第三十七頁，共62頁。在程序控制溫度下,測量物質的質量與溫度關系的方法熱重分析法

thermalgravimetricanalysis,TGA:差示熱分析法在程序控制溫度下,測定供試品與參比物質之間的溫差(ΔT)隨溫度變化的函數關系differentialthermalanalysis,DTA:第三十八頁，共62頁。草酸鈣(CaC2O4·H2O)的熱重曲線ΔG1ΔG2ΔG310008006004002000WT1T2T3398838635478134226T(℃)在溫度T1時CaC2O4·H2OCaC2O4+H2O在溫度T2時CaC2O4CaCO3+CO在溫度T3時CaCO3CaO+CO2第三十九頁，共62頁。有機溶劑殘留量測定法

有機溶劑限度,%限度,%苯0.010.0002

氯仿0.0050.006

二氧六環0.010.038

二氯甲烷0.010.06

吡啶0.010.02

甲苯0.010.089

環氧乙烷0.0010.001Ch.P(95)

Ch.P(2000)第四十頁，共62頁。七、有機溶劑殘留量測定色譜系統與系統適用性試驗SystemSuitabilityTests;SSTs以直徑為0.25~0.18mm的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球作為固定相，柱溫為80~170℃；并符合下列條件：⑴用待測物的色譜峰計算的N應大于1000；⑵內標物與待測物的兩個色譜峰的R≥1.5；⑶每個標準溶液進樣5次，所得待測物與內標物峰面積之比的RSD≤5%；若以外標法測定，所得待測物峰面積的RSD≤10%第四十一頁，共62頁。嗅味及揮發性的差異

顏色的差異

溶解行為的差異

旋光性質的差異

吸附或分配性質的差異

對光選擇吸收性質的差異特殊雜質檢查物理性質上差異：第四十二頁，共62頁。化學性質上差異：

酸、堿性質的差異

氧化還原性的差異

雜質與一定試劑產生沉淀

雜質與一定試劑產生顏色反應

雜質與一定試劑反應產生氣體第四十三頁，共62頁。旋光性質的差異Ch.P規定黃體酮在乙醇中的比旋度為：＋186°～198°黃體酮及其中間體的比旋度（溶劑：乙醇）

化合物

濃度%

溫度℃

[а]D

黃體酮1～1.4

20～25

+193°±4°

醋酸雙烯醇酮0.920-31°±2°

醋酸妊娠烯醇酮～1常溫+20°±2°第四十四頁，共62頁。220260300nm腎上腺酮及腎上腺素的紫外吸收曲線λmax310nm第四十五頁，共62頁。紅外分光光度法：

主要用于藥物中無效或低效晶型檢查，如甲苯咪唑中A晶型檢查第四十六頁，共62頁。

A晶型C晶型在640cm-1有強吸收吸收很弱在662cm-1吸收很弱有強吸收662cm-1640cm-1662cm-1640cm-1供試品+10%A晶型D2D1

供試品D2D1＜10%

R=D1/D2＞R’=D’1/D’2第四十七頁，共62頁。第四十八頁，共62頁。吸附或分配性質的差異

薄層色譜法TLC一般要求：顆粒直徑10~40μm薄層涂布：無粘合劑含粘合劑：常加入

10~15%煅石膏

(CaSO4·2H2O,180℃烘4h)

或0.5~0.7%羧甲基纖維素鈉水溶液比移值第四十九頁，共62頁。

常用方法：雜質對照品法供試品自身對照法對照藥物法第五十頁，共62頁。供試品10μl

N-甲基哌嗪10μl

50mg/ml

50μg/ml

枸櫞酸乙胺嗪I2蒸氣顯色第五十一頁，共62頁。

規定：如顯雜質斑點，不得多于2個，其顏色與對照品主斑點相比較，不得更深。地塞米松磷酸鈉

地塞米松

20mg/ml

0.20mg/ml

第五十二頁，共62頁。如有1~2個雜質點超過時，應不得深于0.01%對照液的主斑點。其中有1個雜質點應不深于0.002%供試品的主斑點。氨苯砜中檢查“有關物質”規定：0.01%供試品100μg/ml1%供試品10mg/ml0.002%供試品20μg/ml第五十三頁，共62頁。

分類柱填充劑流動相正相色譜硅膠極性小的有機溶劑極性化學鍵合硅膠正己烷,氯仿,二氧六環等反相色譜十八烷基硅烷鍵合硅膠甲醇/水乙腈/水四氫呋喃/水離子對色譜ODSRP流動相中加離子對試劑離子交換色譜離子交換填料電解質水溶液排阻色譜

凝膠滲透有機凝膠有機溶劑

凝膠過濾玻璃微孔球水溶液高效液相色譜法

HPLC第五十四頁，共62頁。主要方法：峰面積歸一化法不加校正因子的主成分自身對照法

加校正因子的主成分自身對照法：用于有雜質對照品時，雜質的含量測定。內標法加校正