前情回顧

1、簡述HLA基因復合體結構和HLA分子的結構、分布和功能特點；2、簡述MHCⅠ類和Ⅱ類分子的區別。第九章B淋巴細胞

Blymphocytes主要內容第一節B細胞的分化發育

第二節B細胞的表面分子及其作用第三節B細胞的分類第四節

B細胞的功能B細胞：由哺乳動物骨髓（Bonemarrow）或禽類法氏囊（Bursaoffabricius）中的淋巴干細胞分化發育。B淋巴細胞成熟B細胞定居于外周淋巴器官的淋巴濾泡內。約占外周淋巴細胞總數的20%。功能：產生抗體一、BCR的基因結構及其重排二、抗原識別受體多樣性產生的機制三、B細胞在中樞免疫器官中的分化發育四、B細胞中樞免疫耐受的形成

——B細胞發育過程中的陰性選擇

第一節B細胞的分化發育B細胞表面抗原識別受體（BCR）的表達自身耐受的形成（陰性選擇）。B淋巴細胞的分化發育主要事件BCR（Bcellreceptor）：B細胞表面的mIg，輔助B細胞識別抗原，啟動機體體液免疫應答（B細胞特有標記）。一、B細胞在中樞免疫器官中的分化發育1.祖B細胞（pro-Bcell）2.前B細胞（pre-Bcell）3.未成熟B細胞4.成熟B細胞（初始B細胞）B細胞的發育階段成熟B細胞表達μ,δ鏈表達輕鏈mIgMmIgD輸向外周B細胞庫未成熟B細胞表達μ鏈表達輕鏈mIgM結合自身抗原克隆清除中樞免疫耐受B淋巴細胞在骨髓中的發育過程前B細胞表達μ鏈表達Pre-B受體祖B細胞重鏈基因重排Ig/Ig二、BCR的基因結構及其重排1.BCR的胚系基因結構2.BCR的基因重排及其機制3.等位排斥（allelicexclusion）

同種型排斥（isotypeexclusion）編碼BCR的基因群在胚系階段是分隔的；B細胞的發育過程中，數量眾多的基因片段發生重排和組合1.BCR的胚系基因結構Ig的基本結構四肽鏈結構，二硫鍵連接兩條相同的重鏈（H鏈）兩條相同的輕鏈（L鏈）氨基端（N端）和羧基端（C端）可變區和恒定區抗原膜型分泌型BCRB細胞漿細胞抗體知識回顧重鏈基因：14號染色體長臂由V、D、J（編碼可變區）基因片段和C（編碼恒定區）基因片段構成。輕鏈基因（無D基因片段）

①κ鏈：2號染色體長臂，由V、J、C基因片段構成。②λ鏈：22號染色體短臂，由V、J、C基因片段構成。(48)(25)1.BCR的胚系基因結構V、D、J基因片段之間由內含子隔開，在淋巴細胞發育的過程中，通過基因片段的重排，形成VDJ重排后的DNA，轉錄為RNA，翻譯為新生多肽，再經過加工、糖基化，產生Ig的重鏈或輕鏈。重鏈的基因重排：D基因和J基因—DJ+V基因—VDJ+C基因--VDJC輕鏈的基因重排：V基因和J基因—VJ+C基因—VJC2.BCR的基因重排及其機制(48)等位排斥(allelicexclusion)：指B細胞中一條染色體上的重鏈或輕鏈基因重排成功后，抑制另一條同源染色體上等位基因的重排。保證了一個B細胞克隆只表達單一特異性的BCR。3、等位排斥和同型排斥2號22號κκ肽同種型排斥

λNO同型排斥(isotypeexclusion)：指κ輕鏈和λ輕鏈之間的排斥，κ鏈基因的表達成功即抑制λ鏈基因的表達

。保證了一個Ig分子中只含有一種輕鏈。胚系階段分隔的基因片段，在細胞發育過程中通過多種機制發生重排，產生數量巨大的特異性抗原受體，以識別不同的抗原。組合多樣性；連接多樣性；受體編輯（receptorediting）；體細胞高頻突變（somatichypermutation）。三、抗原識別受體多樣性產生的機制1、組合多樣性眾多V區基因片段的組合。在V、（D）、J基因片段重排時，只取用眾多V、（D）、J基因片段中的1個。人VH排列組合的種類可達：48（VH）×23（VD）×6（VJ）=6624種Vκ和Vλ的組合種類分別達200和120種。理論上IgV區基因片段的多樣性約為2.12×106。(48)4866242、連接多樣性重排過程中V、D、J片段之間的連接并不準確，可以插入、替換或缺失核苷酸，從而產生新的序列，顯著增加BCR和Ig的多樣性。密碼子錯位，后序列不變；框架移位，后序列完全改變；N序列插入：N-核苷酸插入待接DNA斷端。一些完成基因重排并成功表達BCR（mIgM）的B細胞識別自身抗原后未被克隆清除，而是發生RAG基因重新活化，導致輕鏈VJ基因再次重排，合成新的輕鏈，替代自身反應性輕鏈，從而使BCR獲得新的特異性。若受體編輯失敗，則細胞凋亡。3.受體編輯（receptorediting）4、體細胞高頻突變（somatichypermutation）在已完成基因重排的基礎上，成熟B細胞在外周淋巴器官的生發中心接受抗原刺激后，編碼V區CDR部位的基因序列發生堿基的點突變。可導致抗體的親和力成熟。前B細胞發育至未成熟B細胞，膜表面開始表達mIgM，接受自身抗原刺激，形成免疫耐受。

①克隆清除（clonedeletion）；②受體編輯③失能四、B細胞中樞免疫耐受的形成

——B細胞發育過程中的陰性選擇

只表達mIgM的未成熟B細胞若與骨髓中基質細胞表面的多價自身抗原結合，導致細胞凋亡，形成克隆清除，這是B細胞發生自身耐受的主要機制。克隆清除敵我不分------克隆清除未成熟B細胞與單價的可溶性自身抗原結合引起mIgM表達下調，這類細胞雖然可以進入外周淋巴器官，但對抗原刺激不產生應答，稱為失能。失能第二節B細胞的表面分子及其作用一、B細胞抗原受體（BCR）復合物二、B細胞共受體三、共刺激分子四、其他表面分子BCR復合物：mIg+Igα（CD79a）/Igβ（CD79b）。1個mIg分子與2個Igα/Igβ二聚體組成一個BCR復合物。組成：BCR和Igα/Igβ一、B細胞抗原受體（BCR）復合物B細胞表面最重要的分子具有識別、結合抗原及傳遞信號的作用1.B細胞特征性表面標記2.能特異性結合抗原3.不能直接傳遞信號到胞內，需要其他分子輔助完成信號傳遞4.分化為漿細胞后不表達（一）膜表面免疫球蛋白（mIg）不成熟B細胞表達mIgM，成熟B細胞表達mIgM和mIgD，漿細胞不表達mIg。1.均屬免疫球蛋白超家族2.有胞外區、跨膜區和胞質區3.胞質區含有免疫受體酪氨酸激活基序（二）Igα/Igβ（CD79a/CD79b）轉導信號B細胞表面的CD19與CD21及CD81非共價相聯，形成B細胞的多分子共受體，能增強BCR與抗原結合的穩定性并與Igα/Igβ共同傳遞B細胞活化的第一信號。二、B細胞共受體（CD19/CD21/CD81）CD21表達于成熟的B細胞，可結合C3d，形成CD21-C3d-抗原-BCR復合物。CD21也是EB病毒（EBV）受體，與病毒選擇性感染相關增強B細胞對抗原刺激信號的敏感性：至少提高1000倍。CD19：傳遞活化信號CD21-C3d-抗原-BCR復合物B細胞活化的第一信號：BCR復合物+共受體1.CD40

表達于成熟B細胞。配體為CD40L（CD154），表達于活化T細胞。兩者結合是B細胞活化的第二信號，調節B細胞分化成熟和抗體產生。三、共刺激分子（多種）僅有第一信號不足以讓B細胞活化，還需要第二信號（共刺激信號）。第二信號主要由Th細胞和B細胞表面的共刺激分子相互作用產生。三、共刺激分子2.CD80（B7-1）和CD86（B7-2）

活化的B細胞高表達B7分子，其相應配體是T細胞上的CD28和CTLA4。T細胞是否能激活，取決于APC能否向T細胞提供協同刺激信號（第二信號）。活化B細胞是抗原提呈細胞（APC），通過表達CD80和CD86，為T細胞提供協同刺激信號。CD28提供活化第二信號CTLA-4抑制T細胞活化信號3.黏附分子ICAM-1（CD54）LFA-1（CD11a/CD18）四、其他表面分子2.CD20B特異性標記表達于漿細胞外所有B細胞調控鈣離子跨膜流動，從而調控增殖分化，是治療性單抗識別的靶分子。1.CD19B細胞特異性標志；是BCR識別抗原中關鍵的信號傳遞分子。4.CD32有a、b兩個亞型CD32b即FcγRⅡB，負反饋調節B細胞活化及抗體的分泌3.CD22特異表達于B細胞胞內含有ITAMB細胞抑制性受體，負調控CD19/CD21/CD81共受體四、其他表面分子與B細胞活化雙信號刺激有關的CD分子1.BCR-CD792.CD19CD21CD81

3.CD404.CD80（B7-1）

CD86（B7-2）(B7.1/B7.2)一、BCR復合物+共受體

二、共刺激分子第三節B細胞的分類一、根據所處的活化階段分類二、根據反應特異性分類三、根據BCR類型分類一、根據所處的活化階段分類指從未接受過抗原刺激的B細胞。初始B細胞接受抗原刺激分化而成，介導再次免疫應答。是抗體的主要來源，并介導體液免疫的發生。注：抗體不能直接殺死靶細胞，調理作用，激活補體等方式1.初始B細胞2.記憶B細胞3.效應B細胞（漿細胞）根據是否表達CD5分子，分為CD5+B1

細胞和CD5-B2細胞兩個亞群。B1細胞表面表達CD5，由于發育中出現較早，故稱為B1細胞，主要產生低親和力的IgM，為多反應性抗體，發揮固有免疫功能。B2細胞即為通常所指的B細胞，個體發育中出現較晚，產生特異性抗體，發揮適應性免疫功能（體液免疫）。二、根據反應特異性分類B1細胞和B2細胞亞群的比較三、根據BCR類型分類2.mIgG+/mIgA+/mIgE+B細胞已活化并已分別發生過類別轉換的B細胞。未成熟B細胞與初始B細胞都是mIgM+B細胞。1.mIgM+B細胞43Ig的類別轉換（Igclassswitching）Ig分子的可變區不變，但其重鏈恒定區發生改變，即結合抗原的特異性相同，而Ig類別發生變化的過程，稱為Ig的類別轉換。IgM→→IgG、IgA、IgE，抗體的V區不發生改變。第四節B細胞的功能1.產生抗體