第三次實驗血清總脂含量測定演示文稿當前1頁，總共29頁。優選第三次實驗血清總脂含量測定當前2頁，總共29頁。溫度對酶活力的影響0℃37℃100℃0℃37℃100℃0℃37℃100℃100℃37℃0℃100℃37℃0℃100℃0℃37℃作用時間、酶的活性高低、量多少對結果的影響100℃0℃37℃當前3頁，總共29頁。激活劑和抑制劑對酶活性的影響酶的高效性3.86.88.00℃37℃100℃0.9%1%H2ONaClCuSO40.9%1%H2ONaClCuSO4Fe熟馬鈴生馬鈴空白薯糜

薯糜對照當前4頁，總共29頁。6、高溫對結果的影響淀粉的結構：天然的淀粉有直鏈淀粉和支鏈淀粉，直鏈淀粉的二級結構（指多糖鏈的折疊方式）是一個左手螺旋，每圈螺旋含6個殘基，螺距0.8nm，直徑1.4nm。淀粉的螺旋結構并不十分穩定。當不與其他分子如碘相互作用時，直鏈淀粉很可能是以無規卷曲形式存在。碘分子正好能嵌入螺旋中心空道，每圈可容納一個碘分子（I2），通過朝向圈內的羥基氧（提供未共享電子對）和碘（提供空軌道）之間的相互作用形成穩定的深藍色淀粉和碘絡合物。產生特征性的藍色需要約36個即6圈的葡萄糖殘基。(見書81頁)

支鏈淀粉螺旋（約25-30個殘基）中的短串碘分子比直鏈淀粉螺旋中的長串碘分子吸收更短波長的光，因此支鏈淀粉遇碘呈紫色到紫紅色。當前5頁，總共29頁。當前6頁，總共29頁。7、酶實驗必須控制哪些條件？

酶的化學本質是蛋白質，它極易受外界條件的影響而改變它的構象及性質，因而也必然會影響到它的催化活性。酶對溫度、pH、酶濃度及某些離子濃度等變化很敏感。(1)pH值對酶活性的影響酶的活性受環境pH的影響極為顯著，通常各種酶只有在一定的pH范圍內才能表現出它的活性。一種酶表現其最高活性時的pH值稱為該酶的最適pH。高于或低于最適pH值時，酶的活性降低。酶的最適pH值受酶的純度、底物的種類和濃度、緩沖液的種類和濃度以及環境溫度等條件影響。

(2)溫度對酶活性的影響每種酶都有其最適溫度，高于或低于此溫度酶的活性都降低。一般而言，若酶處于過高的溫度環境中，會使酶活性永久地喪失；而若處于極低溫度的環境中只會使酶活性受到抑制，一旦溫度適宜，酶又會全部或部分地恢復其活性。(3)酶濃度對酶促反應速度的影響在其它條件不變的情況下，若反應物濃度大大高于酶濃度時，則反應速度隨酶濃度增加而增加，兩者間成正比關系，即：V=k[E]。但若反應底物濃度較低，而且酶的濃度足夠高時，增加酶濃度，反應速度基本不變。

(4)離子對酶活性的影響就唾液淀粉酶而言，低濃度Cl一可以增加酶活性，高濃度的Cl一或者低濃度的Cu2+則會抑制酶的活性，而低濃度的Na+、SO42-等對酶活性沒有影響。不同的酶對不同的離子具有不同的效應。當前7頁，總共29頁。二、血糖的測定1、實際用量減半2、結果分析（兩個樣本值的比較，與健康家兔的比較80-120mg/100mL，結果偏高與氧化的關系判斷錯誤）3、測定管顏色深淺的處理（稀釋?。?、定性實驗儀器型號的記錄5、實驗改進：標準曲線的制作當前8頁，總共29頁。實驗過程中的問題：

1、協作實驗、合理分工

2、損壞物品登記及處理

3、移液器使用：用完后調到量程的最大值，按組放好。

4、試管、試劑瓶清洗

5、實驗結束后：檢查移液器數量、裝配槍頭、整理桌面及試劑，試管、三角瓶等洗凈后按規格分裝及白瓷盤中烘干，擦凈桌面及試劑架，老師或研究生檢查后才能離開。

6、值日生按值日表執行，負責打掃及協助試劑的分裝等工作。

7、預習報告抽檢：老師隨機抽查并記分。

8、實驗報告寫明姓名、班級、學號，學委按序排列后在實驗結束后的第三天上交。當前9頁，總共29頁。實驗五血清總脂含量測定

（香草醛法）

當前10頁，總共29頁。一、實驗目的掌握香草醛法測定總脂的原理和方法。當前11頁，總共29頁。二、實驗原理血清中的脂類，尤其是不飽和脂類與濃硫酸共熱作用，經水解后生成碳正離子，試劑中的香草醛與濃磷酸的羥基作用生成芳香族的磷酸酯，由于改變了香草醛分子中的電子分配，使醛基變成活潑的羰基。此羰基即可與碳正離子起反應，生成紅色的醌化合物，其強度與碳正離子成正比。當前12頁，總共29頁。紅色的醌化合物碳正離子磷酸酯羰基當前13頁，總共29頁。香草醛法

優點：（1）采用膽固醇（或橄欖油）作標準的測定法，結果比較接近實際情況。（2）方法簡易，常用方法。缺點：不能準確測定總脂含量。（不飽和脂類比飽和脂類呈色強。血清中飽和脂類與不飽和脂類的比例約為3：7。要測定血清的標準總脂含量最好選用稱量法。）當前14頁，總共29頁。三、儀器、材料和試劑（一）實驗儀器可見光分光光度計，恒溫水浴鍋，移液槍等（二）實驗試劑（1）膽固醇標準液（6mg/mL）（2）香草醛顯色劑（3）濃硫酸（AP）（4）濃磷酸（AP）（5）生理鹽水（三）實驗材料

兔血清（未稀釋）當前15頁，總共29頁。四、操作步驟管號空白管標準管測定管1測定管2血清——0.020.02標準液—0.02——濃硫酸1.01.01.01.0充分混合，放置沸水浴10min，使脂類水解，冷水冷卻向各管中均勻加入顯色劑4.0mL，用玻璃棒充分攪勻。放置20min（或者37℃保溫15min）后，以空白管調零，測各管A525nm吸光值1、血清脂類的顏色反應當前16頁，總共29頁。2、計算

測定管吸光度血清總脂含量=×膽固醇標準液濃度×稀釋倍數標準管吸光度（mg/mL）（6mg/mL）（1）當前17頁，總共29頁。五、注意事項（1）注意濃酸使用及安全：黏稠度大，取量時吸管內試劑要盡量慢放，避免因放過快而使試劑附于管壁過多而造成誤差。不要將吸硫酸的槍頭放在實驗臺上。（2）血清中脂類含量過多時，可用生理鹽水稀釋后再進行測定，并將結果乘以稀釋倍數。（3）用玻璃棒攪拌時，應從下往上攪拌，以免捅破試管底部。（4）戴手套操作，待測液裝入高度為比色血的2/3，嚴禁裝滿！當前18頁，總共29頁。六、思考題1.何謂總脂？測定總脂含量有何意義？2.顯色后為什么要放置20min？放置的目的是什么？當前19頁，總共29頁。實驗七維生素C的提取和定量測定

——2,6-二氯酚靛酚法當前20頁，總共29頁。一、實驗目的1.學習維生素C定量測定法的原理和方法。2.進一步熟悉、掌握微量滴定法的基本操作技能。當前21頁，總共29頁。（一）維生素C簡介1、維生素C的物理性質六碳多羥基酸性化合物白色針狀結晶有酸味,可溶于水二、實驗原理當前22頁，總共29頁。2、維生素C對人體健康的重要作用組成膠原蛋白的重要成份,加速術后傷口愈合增加免疫力,防感冒及病毒和細菌的感染預防癌癥抗過敏促進鈣和鐵的吸收降低有害的膽固醇，預防動脈硬化減少靜脈中血栓的形成天然的抗氧化劑天然的退燒劑當前23頁，總共29頁。3、維生素C的化學性質烯醇式己糖酸內酯,有L型和D型的兩種異構體只有L型有生理功效具有酯鍵,應具備酯的化學性質在酸性環境中穩定存在測定時pH值以保持在3-5為宜一般用冰醋酸或偏磷酸-醋酸溶液作介質進行測定當前24頁，總共29頁。又具有烯醇式結構,還原性強水溶液中可解離成氧化型抗壞血酸3、維生素C的化學性質當前25頁，總共29頁。（二）2，6-二氯酚靛酚（DCIP）滴定法

天然的抗壞血酸有還原型和脫氫型兩種，還原型抗壞血酸分子結構中有烯醇（COH=COH）存在，為一種極敏感的還原劑，它可失去兩原子氫而氧化為脫氫型抗壞血酸。染料2.6―二氯靛酚鈉鹽（C12H6O2NCl2Na）作為氧化劑，可以氧化抗壞血酸，自身還原成無色的衍生物。滴定終點鑒別：

2.6―二氯靛酚鈉鹽易溶于水，其堿性或中性水溶液呈藍色，在酸性溶液中成桃紅色。

當前26頁，總共29頁。

如無其他雜質干擾，樣品提取液所還原的標準染料量與樣品中所含的還原型抗壞血酸量成正比。本實驗A、B瓶的目的在于去除非維生素C的還原性物質的干擾當前27頁，總共29頁。利用碘酸鉀做氧化劑。即在一定量的鹽酸酸性試液中加碘化鉀—淀粉指示劑，用已知濃度的碘酸鉀滴定。當碘酸鉀滴入后即釋放出游離的碘，此碘被維生素C還原，直至維生素C完全氧化后，再滴以碘酸鉀液時，釋放出的碘因無維生素C的作用，可使淀粉指示劑呈藍色，即為中點，其反應如下：

KIO3+5KI+6HCl→6KCl+3H2O+3I2（三）碘滴定法（標準維生素C溶液標定方法

1毫升0.001mol/L碘酸鉀溶液相當的維生素C的量為0.088mg

當前28頁，總共