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文檔簡介
旋光度測定
實驗目的1
了解手性化合物的旋光性及其測定原理2
掌握旋光儀的使用方法
實驗原理平面偏振光光是一種電磁波,光波可以在垂直于光前進方向的各個不同的平面上振動。一束單色光通過尼科爾棱鏡時,棱鏡只允許在平行于棱軸的平面上振動的光線通過。因此,通過棱鏡的光線只在一個平面上振動,這種光叫做平面偏振光。普通光尼科爾棱鏡平面偏振光2手性化合物的旋光性
手性化合物使平面偏振光偏振面旋轉的性質稱為旋光性偏振面被旋轉的角度叫旋光度()若手性化合物能使偏振面右旋(順時針)右旋體(+)若手性化合物能使偏振面左旋(逆時針)左旋體(-)3旋光度與比旋光度[α]tD
手性化合物旋光度與溶液濃度、溶劑、測定溫度、光源波長、測定管長度有關旋光儀測定的旋光度并非特征物理常數,應采用比旋光度[α]tD作為手性化合物的特物理常數:旋光儀測定的度數t:測定時的溫度D:旋光儀光源鈉光的D線波長,=589nml:測定管長度(dm)c:溶液濃度(g·ml-1),純液體可用密度[α]tD=αl×c
旋光儀a兩分視場b三分視場半蔭片
三分視場單一視場(暗)三分視場單一視場(亮)β>β’β=900β=β’
β=β’
POP’AAPAP’PPPP’P’P’OOOAAPAPAPAP’AP’AP’β2θβ’β’β2θ2θ2θβββ’β’β’>β
β’=900單一視場(暗)零點被測物質旋光度旋光方向判斷:是否出現單一視場(亮)左讀數:7.61右讀數:7.65平均值:7.63左讀數:-16.93右讀數:-16.97平均值:-16.95儀器采用光學游標跳線對準的讀數裝置度盤分720格,每格讀數值為0.5°,游標分25格,每格讀數值為0.02°1接通電源,開啟開關,儀器預熱5-10分鐘使鈉光燈發光穩定2
旋光儀的零點校正
實驗步驟
空氣作空白校正關閉鏡筒,轉動刻度盤手輪,從目鏡中尋找兩三分視場之間的單一視場(零度視場),記錄刻度讀數(注意有效數字),重復三次,取其平均值得零點校正讀數。
雙游標讀數法讀取平均值樣品旋光度的測定
α樣品
=α實測值–α零點校
取裝有待測樣品溶液的旋光管,放入鏡筒(讓氣泡留在旋光管膨大端),關閉鏡筒。
轉動刻度盤手輪至兩個三分視場之間的單一視場,記錄刻度讀數(注意有效數字),重復三次,取其平均值得樣品旋光度實測值。樣品1:0.1gml-1葡萄糖水溶液(2dm)樣品2:0.1gml-1果糖水溶液(1dm)葡萄糖果糖4
實驗完畢
關閉電源,交回旋光管5
計算比旋光度[α]tD=αl×c
待測溶液中不能含有懸浮的塵埃或污物的顆粒,它們可能會分散入射的偏振光旋光管放置時,管的膨大端向上,輕輕叩擊直至氣泡全部被捕集在膨大的環內。確保光通路中無氣泡存在勿在旋光管兩端的玻璃尾板上沾上手印保持光路清潔、暢通:
實驗數據
編號123均值[α]tD
α零點
α葡萄糖
α果糖
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